下载文档原格式
法医学中的法医细胞生物学技术与细胞解剖学在法医学领域中，法医细胞生物学技术和细胞解剖学是两项非常重要的技术和学科。
它们通过对细胞的研究和分析，为刑事调查和司法鉴定提供了必要的科学依据。
本文将对这两个方面进行探讨，并介绍其在法医学中的应用。
一、法医细胞生物学技术法医细胞生物学技术是法医学领域中的一门重要学科，主要是通过对人体组织和细胞进行分析和鉴定，帮助解决刑事案件和其他相关法律事务。
这项技术主要包括以下几个方面：1. 细胞遗传学分析：细胞遗传学是研究细胞染色体和遗传物质（如DNA）的学科。
在法医学中，通过对犯罪现场的细胞样本、受害者和嫌疑人的细胞样本进行DNA分析，可以确定是否存在犯罪嫌疑人。
这项技术在破解犯罪案件中发挥着重要的作用。
2. 细胞毒理学分析：细胞毒理学是研究细胞对外界有害物质的反应和损伤程度的学科。
在法医学中，通过对受害者的细胞样本进行毒理学分析，可以确定是否存在中毒现象，以及中毒的类型和原因。
这项技术对于判断涉案物质的危害性和作用机制具有重要意义。
3. 细胞免疫学分析：细胞免疫学是研究免疫系统和免疫细胞的学科。
在法医学中，通过对受害者或嫌疑人的免疫细胞进行免疫学分析，可以确定是否存在某种特定的免疫反应或免疫疾病。
这项技术在判断是否存在某种特定的疾病或病理变化上非常有用。
二、细胞解剖学细胞解剖学是研究细胞结构和组织构造的学科。
在法医学中，细胞解剖学技术被广泛应用于以下几个方面：1. 细胞病理学分析：细胞病理学是研究细胞和组织病变的学科。
在法医学中，通过对受害者或嫌疑人的组织样本进行细胞病理学分析，可以确定是否存在某种特定的疾病或损伤。
这项技术对于法医学的鉴定和诊断具有重要价值。
2. 细胞形态学分析：细胞形态学是研究细胞外观和形态特征的学科。
在法医学中，通过对受害者或嫌疑人的细胞样本进行形态学分析，可以确定是否存在某种特定的细胞异常或变化。
这项技术对于法医鉴定和研究细胞损伤机制具有重要意义。
毒理学研究方法毒理学研究方法是指应用于研究化学物质对生物体产生毒性效应的方法。
毒理学研究方法主要分为体外实验和体内实验两种。
体外实验是指在离体条件下进行的实验研究。
常用的体外实验方法包括荧光标记法、细胞毒性实验和酶活性测定等。
荧光标记法是利用荧光染料将物质与细胞或分子结合，通过观察荧光信号的强弱来判断物质对生物体的毒性。
细胞毒性实验是将物质直接加入细胞培养基中，观察细胞形态和数量的变化来评估物质的毒性。
酶活性测定是通过测定酶的活性来判断物质对生物体酶系统的影响，常用的测定指标包括丙二醛含量、超氧化物歧化酶活性和谷胱甘肽过氧化物酶活性等。
体内实验是指在整个生物体内进行的实验研究。
常用的体内实验方法包括农药和药物的急性毒性实验、慢性毒性实验和基因毒性实验等。
急性毒性实验主要是通过给实验动物灌胃或皮下注射等方式给予一定剂量的物质，观察动物的死亡率来评估物质的急性毒性。
慢性毒性实验是将一定剂量的物质连续给予实验动物一定时间，观察动物的生长、繁殖和行为等指标的变化来评估物质的慢性毒性。
基因毒性实验是通过观察物质对动物或细胞的遗传物质的影响来评估物质的遗传毒性，常用的方法包括微核实验和突变基因检测等。
除了以上常用的体外和体内实验方法，还有一些辅助的研究方法用于辅助毒理学研究。
比如，系统毒理学研究方法是通过系统化的研究物质在生物体内的吸收、分布、代谢和排泄等过程来评估物质的毒性。
组织工程学是利用体外培养技术建立人工组织模型，通过观察物质对人工组织的影响来评估物质的毒性。
计算毒理学是利用计算机模拟和统计分析等方法对毒理学数据进行处理和分析，评估物质的毒性。
总之，毒理学研究方法可以在体外和体内条件下开展实验研究，通过观察实验结果来评估化学物质的毒性。
不同的实验方法可以相互印证，全面评估物质的毒性效应。
细胞生物学与毒理学中的代谢毒物机制细胞是构成生物体的基本单位，毒物作用于细胞，常常会导致细胞功能受损或者死亡。
了解毒物影响细胞的代谢过程，是深入理解毒物对人体健康影响的重要途径。
代谢毒物代谢是生物体对物质的一系列化学过程，包括从摄取食物到将其转化为需要的分子或产生能量的过程。
代谢毒物是指那些能在代谢过程中被转化或产生代谢产物，对细胞功能或者结构造成损害的物质。
代谢毒物多数是物质代谢的副产物，包括酸、碱、重金属、自由基等。
这些化学物质与细胞代谢内的一些元素结合，导致代谢产物的异常，从而对细胞产生不良影响。
代谢毒物的生成代谢毒物的生成，常常涉及到氧化还原、羧化、酯化、硫化、磷酸化等化学反应。
其中，氧化还原反应是代谢毒物中最为常见的过程。
许多代谢毒物，比如脂质过氧化物、硫酸盐、过氧化物等，都是由氧化酶系统所合成的。
氧化酶系统是细胞内最主要的氧化还原酶群，他们通过将电子转移给氧分子，从而产生酸化产物和电子传输链的能量。
但是，当这些酶反应异常或者被过度激活，就会产生大量的代谢毒物。
这些毒物通常是一些高活性的自由基物质，比如羟基自由基、Peroxynitrite自由基等。
与氧化反应类似，酯化反应也是代谢毒物生成的一个重要过程。
酯化是将羧酸与醇分子结合产生酯分子的化学反应。
在细胞中，酯化会生成许多的代谢毒物，比如甲基汞、三乙锡等，这些毒物有着非常强的生物毒性。
磷酸基的代谢是细胞代谢过程中不可或缺的一部分。
磷酸含量的不平衡与调控不当，往往会产生代谢毒物。
比如，过多的无机磷酸就会导致细胞内储存磷酸盐的粒子体结晶，影响细胞功能。
代谢毒物的作用机制代谢毒物作用机制包括直接作用与间接作用两种方式。
直接作用，是指代谢毒物直接与细胞内的某种分子物质结合，产生不良影响。
比如，铅可以直接结合钝化胞质分泌出的酶活性，抑制这些酶的活性，从而干扰细胞代谢过程。
间接作用，则是指代谢毒物从外表现象入手，影响内部物质的结构或功能，从而产生不良影响。
细胞生物学研究的应用与进展细胞是构成生命的基本单位，其研究对于认识生命本质具有重要意义。
细胞生物学是研究细胞结构、功能及其在结构与功能上的关联等方面的学科。
细胞生物学得到了广泛的应用，在医学、生物技术、环境保护等领域起到了重要作用。
本文就细胞生物学研究的应用和进展进行讨论：一、医学领域1. 细胞诊断：临床医学中常用的细胞学检查包括切片、染色、涂片等方法，可以检测细胞并确认疾病的类型和程度。
2. 细胞治疗：细胞治疗是指使用细胞进行治疗，常见的包括干细胞治疗、T细胞治疗和CAR-T细胞治疗等。
干细胞治疗可以用来修复损伤的组织和器官，T细胞治疗和CAR-T细胞治疗可以用于癌症等疾病的治疗。
3. 细胞毒理学：细胞毒理学是研究物质对细胞的毒性影响和作用机理的学科，可以用于毒物的评价和筛选新药物。
二、生物技术领域1. 基因工程：基因工程是通过修改生物基因来实现特定功能的技术，如转基因技术、CRISPR基因编辑等。
细胞生物学研究可以帮助基因工程技术的发展，推动其在农业、医药等方面的应用。
2. 蛋白质表达：蛋白质表达是指在细胞内合成和表达所需要的蛋白质，可以用于合成基因工程药物、生产酶和工业酸碱性蛋白等。
三、环境保护领域1. 污染物控制：细胞生物学研究可以用于检测和研究污染物对生物细胞的毒性影响，评估和筛选新的污染物控制方法。
2. 生物种植技术：生物种植技术是指利用细胞培养和组织培养技术来进行植物育种和种植的技术，可以大大提高农业生产效率和增加作物产量。
细胞生物学研究的进展细胞生物学的研究不断深入，并取得了许多重要成果，主要有以下几个方面：一、单细胞转录组学技术的发展传统的基因表达研究是通过整个组织或细胞的平均值来确定基因表达差异，无法获得单个细胞的基因表达信息。
单细胞转录组学技术可以实现细胞层面的高通量分析，解析单细胞间基因表达异质性，对发育生物和疾病研究非常重要。
二、基因编辑技术的发展基因编辑技术包括ZFN、TALEN和CRISPR等技术。
细胞毒理学在食品领域中的应用细胞毒理学是研究有害物质对细胞的作用和机制的学科，其在食品领域中的应用越来越受到关注。
食品中存在着多种有害物质，例如致癌物、重金属等，这些物质会对人体健康造成严重威胁。
利用细胞毒理学方法对食品进行安全性评价和监测已成为食品安全领域中不可或缺的手段。
细胞毒理学可以用于评价食品添加剂的毒性。
食品添加剂是为了改善食品品质而添加到食品中的物质。
一些食品添加剂可能会对人体健康造成危害，例如某些人造甜味剂、人造色素等。
为了评价这些添加剂对人体健康的影响，可以使用细胞毒理学方法进行实验研究。
研究人员可以利用细胞培养技术将添加剂添加到细胞培养基中，然后观察细胞的形态、增殖情况等指标，以此评价添加剂的毒性。
细胞毒理学还可以用于检测食品中的毒素。
在食品加工和储存过程中，可能会产生一些毒素，例如霉菌毒素、金属离子等。
这些毒素会对人体健康造成危害。
利用细胞毒理学方法可以检测食品中的毒素。
研究人员可以利用细胞培养技术将食品中提取的物质添加到细胞培养基中，然后观察细胞的形态、增殖情况等指标，以此检测毒素的存在与否及毒性大小。
细胞毒理学还可以用于评价以及监测食品中的致癌物质。
食品中可能存在着多种致癌物质，例如亚硝酸盐、丙烯酰胺等。
这些物质潜在地危害着人们的健康，因此要对其进行评价和监测。
研究人员可以通过细胞毒理学方法对食品样品进行实验研究，通过观察细胞的形态、代谢水平等指标，评价食品中的致癌物质对人体健康的影响，并及时进行监测。
细胞毒理学在食品领域中的应用十分广泛。
通过细胞毒理学方法对食品进行安全性评价和监测，可以有效识别有害物质对人体健康的影响，并提供科学依据支持食品安全监督与管理工作。
在确保食品安全的道路上，细胞毒理学将继续扮演着重要的角色。
除了上述应用外，细胞毒理学在食品领域中还有其他的应用。
以下是一些例子：1. 检测基因改造食品的风险：基因改造食品是指对食品进行基因改造，在其中加入具有特定功能的基因。
新药开发中的细胞毒理学评估前言随着医学科技的不断发展，新药的研发越来越受到人们的关注。
在新药研发的过程中，细胞毒理学评估是十分重要的一环。
本文将围绕这一话题进行探讨。
一、细胞毒理学评估简介所谓细胞毒理学评估，就是研究化学物质、药物等对细胞的毒性效应及机制的一种科学方法。
细胞毒理学评估是新药研发的关键和基础，其主要目的是评估药物对人体健康的风险。
因此，细胞毒理学评估对于新药的研制和临床应用至关重要。
二、细胞毒理学评估的内容1、细胞生存率与增殖率评估药物的细胞毒性首先需要观察细胞的生存率与增殖率。
可以通过细胞计数、MTT法、放射性同位素掺入、荧光标记等方法来确定。
2、细胞形态与结构观察细胞形态与结构的改变，可以判断药物对细胞器官、骨架、细胞膜等的影响。
3、DNA损伤通过测定DNA的损伤程度，来判断药物引起的基因突变和遗传毒性。
可以运用单细胞凝胶电泳法、复旦预测分类法等方法评估。
4、细胞周期测定细胞周期，有助于评估药物对不同细胞周期阶段细胞的毒性效应及其作用机制。
5、细胞凋亡细胞毒性的最终结果是细胞凋亡。
因此，评估细胞凋亡的发生与变化，可以了解药物对细胞的毒性效应。
三、细胞毒理学评估的方法1、原代细胞毒性评估原代细胞是从动物和人体组织中分离出来的基础细胞，它们与体外培养的细胞相比，更能反映真实生态系统中的复杂性。
这种评估方法可以通过多种途径进行，例如动物体内培养、3D细胞培养等。
2、细胞株毒性评估细胞株毒性评估就是在实验室中培养人造的细胞株且对其进行毒性评估。
这种方法简单、快速、方便，但是在动物和人的真实生态系统中的代表性不如原代细胞毒性评估。
3、皮肤刺激试验皮肤刺激试验是评估某些物质对皮肤的直接损伤能力的方法。
可以检测出皮肤是否发红、发痒、水肿等现象。
四、细胞毒理学评估的未来趋势随着科技的不断进步，新药研究的方法也在不断地改善。
针对目前细胞毒理学评估中的一些问题，有一些新的评估方法逐渐流行起来。
1、微流控技术微流控技术可以利用微型流道控制细胞和药物的流动，形成小规模的动态反应环境，模拟人体更真实的体内环境。
毒理学中新型检测技术的研究和应用毒理学是一门研究毒物及其对生物体产生的有害作用的学科。
在现代化和工业化发展的浪潮中，毒理学成为了一门越来越重要的学科，毒物对人们身体健康的危害越来越多地引起了人们的重视。
因此，毒理学中的检测技术也越来越成为研究的热点。
随着科技的不停发展，新型检测技术在毒理学研究中应用得越来越广泛。
1、基于生物信息学的新型生物传感器技术新型的基于生物信息学的生物传感器技术已经在毒理学研究中得到了广泛应用。
这些生物传感器能够通过分析生物标志物来检测毒物的存在以及对它们的反应。
其中特别重要的技术是DNA芯片和蛋白质分析技术。
DNA芯片能够同时检测几百万个DNA序列，进而检测目标物质的存在；而蛋白质分析技术则通过对毒物与蛋白质的介入反应以及在细胞或血液中的表达水平变化等，从而检测和识别毒物。
2、化学分析技术化学分析技术一直是毒理学研究中的重要工具。
随着化学分析技术的进步，新型的化学分析技术越来越多地被应用在毒理学的研究中。
例如，气相色谱质谱联用技术（GC-MS）和液相色谱质谱联用技术（LC-MS）已经被广泛地用于毒物的检测和定量分析。
这些技术能够快速准确地检测出含有有害化学物质的样品，并且提供定量分析结果。
3、细胞毒理学技术细胞毒理学技术也是毒理学研究中非常重要的一部分。
细胞毒理学技术是一种对细胞的活性和死亡进行评估的技术，在毒理学研究中得到了广泛的应用。
现在，随着细胞分子生物学以及形态解析技术的不断进步，新型细胞毒理学技术也在不断发展。
例如，细胞色素c释放、DNA片段化和双链断裂是常见的细胞死亡标志，这些技术能够用于对毒物的评估。
4、生物成像技术生物成像技术是一种用于对生物组织进行图像化处理的技术。
这种技术在毒理学研究中被广泛地应用。
美国NIH成像和成像科学协调中心的研究人员利用近红外自发辐射成像术（SERS）开发出了一种高灵敏度的图像化技术，能够非常快速地检测生物物质中的毒物。
此外，核磁共振成像（MRI）也被广泛地用于毒物的评估和检测，它给予了毒理学研究一种新的切入角度。
毒理学血液学指标解读毒理学是研究毒物对生物体的危害作用的科学，而血液学是研究血液和造血系统的科学。
在评估毒物对生物体的危害作用时，血液学指标可以提供一些重要的信息。
本文将从不同方面解读毒理学血液学指标，并探讨它们在毒物暴露评估中的意义。
一、红细胞指标：1.红细胞计数（RBC）：红细胞是血液中负责携带氧气的细胞，红细胞计数可以反映造血功能的状况。
某些毒物如苯、铅等可以抑制骨髓的造血功能，导致红细胞计数减少。
2.血红蛋白（Hb）：血红蛋白是红细胞中的重要成分，它负责将吸入的氧气从肺部输送到全身组织。
某些毒物如一氧化碳可以与血红蛋白结合，形成一氧化碳血红蛋白，从而导致供氧不足。
3.红细胞压积（Hct）：红细胞压积是血液中红细胞的比例，可以反映血液的粘稠度和流动性。
高剂量的毒物如有机磷农药可以引起红细胞聚集，导致红细胞压积的增加。
二、白细胞指标：1.白细胞计数（WBC）：白细胞是免疫系统中的主要细胞，它们负责抵御病原体和维持免疫平衡。
某些毒物如放射性物质、化学药物等可以抑制骨髓中的白细胞生成，导致白细胞计数减少。
2.中性粒细胞比例（%Neut）：中性粒细胞是白细胞中的主要细胞类型，它们在炎症和感染中起到重要的作用。
某些毒物如细菌毒素、病毒感染等可以导致中性粒细胞比例的增加，反映炎症或感染的存在。
3.淋巴细胞比例（%Lym）：淋巴细胞是免疫系统中的重要细胞类型，它们负责调节免疫反应和产生抗体。
某些毒物如重金属、化学药物等可以抑制淋巴细胞的功能，导致淋巴细胞比例的减少。
三、血小板指标：1.血小板计数（PLT）：血小板是血液中的细小细胞片，它们负责血液的凝结功能。
某些毒物如抗凝药物、放射性物质等可以抑制骨髓中的血小板生成，导致血小板计数减少，增加出血风险。
2.凝血酶原时间（PT）：凝血酶原时间是评估凝血功能的指标，它可以反映凝血因子的功能状态。
某些毒物如抗凝药物、维生素K拮抗剂等可以干扰凝血因子的合成和活性，导致凝血酶原时间延长。
细胞毒理学及其研究方法公共卫生学院劳动卫生教研室金亚平定义:毒理学(Toxicology)是研究外源性物质对生命有机体损伤作用规律及其机制的一门学科。
细胞毒理学(Cytotoxicology):是研究外源性物质对生命细胞损伤作用规律及其机制的一门毒理学分支学科。
研究内容细胞毒理学是以培养细胞为研究对象进行毒理学研究的一门科学，它主要是应用体外模型对外界环境中有害因子(物理、化学和生物)进行监测，评价其对人体可能产生的危害。
研究有害因子的一般毒性作用判断外源性有害因子对细胞的一般毒性及评价可能引起的潜在毒性作用。
可通过光学显微镜/电镜及其他方法，直接观察体外培养细胞受损的性质与程度，如细胞的形态学改变、贴壁性差、生长速度减弱、细胞退化、死亡及完整性受损等。
已知对人类有毒性作用的大多数药物或毒物，在体内与体外的毒性效应是一致的。
研究有害因子的特异毒性作用从哺乳动物或人体的不同组织器官分离出不同类型的细胞。
用以筛检不同毒物对不同细胞的毒性。
有害因子诱变作用及致癌作用: 体外培养细胞，特别是哺乳动物的离体细胞已广泛应用于体外测试诱变和致癌的试验中，其包括基因点突变、染色体畸变、姊妹染色单体互换、染色体显带、DNA 损伤、程序外DNA合成和细胞恶性转化等。
如砷的致癌作用。
研究有害因子在细胞内的代谢体外培养细胞可能是研究毒物代谢最合适的体外试验模型。
体外细胞培养避免了体内复杂因素(如神经-内分泌、营养物质等)的干扰，可以按研究者预先设计的需要，来严格控制有害因子的剂量及与细胞接触的时间。
可以直接检测、分析细胞内代谢的改变，容易了解毒物代谢与毒性之间的量-效关系。
如砷体内代谢等。
研究有害因子的毒作用机制也是研究有害因子毒性作用机制的最合适的材料。
如用已建立的体外细胞转化系统研究辐射及化学致癌物诱发细胞癌变的机制，用血管上皮细胞和星形胶质细胞的体外培养系统研究毒物对血脑屏障的损伤，用巨噬细胞和成纤维细胞组成的体外培养系统，研究二氧化硅致矽肺纤维发生、发展过程及其作用机制。
用于药物的筛选、进行药效学评价可用于研究药物的作用、毒副反应及其作用机制，为选择疗效好、毒副反应小的药物提供资料，在此研究基础上，对疗效好、毒性小的初筛药物，再用动物实验模型加以验证。
细胞毒理学发展简史细胞毒理学作为毒理学的一个分支学科出现是近10多年的事。
因此，它是一门较新的学科。
其优点:(1) 可以按实验要求控制实验条件，把整个实验安排在体外进行，在体外直接观察到细胞形态发生的改变，便于了解毒物与毒性作用之间的关系。
(2) 实验条件易于控制，可严格控制作用物的剂量和作用时间，排除体内复杂的神经-内分泌因素的干扰，实验结果稳定，重复性好。
(3) 操作简便，不需要复杂的大型仪器设备，实验经济。
(4) 可同时提供大量的生物学性状相同的细胞系(株)作为研究对象，避免了动物间的个体差异，实验易重复。
局限性：因为细胞是在离开机体整体环境下，独立生长在体外环境中，其生物学性状多少会发生某些改变，所获得的结果可能与人体或动物体的整体实验结果存在某些差异。
因此，细胞毒理学实验结果存在着由体外实验结果推论体内实验结果的问题。
细胞毒理学研究的实验条件无菌间：(1) 超净工作台：应有照明和紫外线消毒装置。
(2) CO2培养箱：维持恒定的5％CO2浓度，温度在37.0±0.5℃。
(3) 紫外线灯：无菌间天花板上应安装1-2个紫外线灯，每天操作前30min进行空气消毒。
(4) 空调器：尤其在炎热的夏季。
倒置显微镜：用于活体培养细胞观察，最好有显微摄像装置，可对活体细胞进行拍摄。
普通显微镜：用于细胞计数，固定标本的检测。
显微摄像：可对培养细胞的生长、分裂或对作用物的反应情况进行动态拍摄观察。
高压蒸气消毒器在体外细胞培养过程中所需的许多物品和液体都需要高压蒸汽消毒。
消毒所需的压力和时间，根据不同消毒对象而异。
消毒条件：玻璃器皿为15磅压力(121 ℃)，15min；液体溶液为10磅压力(115 ℃)，10min。
冰箱、冰柜各种培养用的液体、试剂、药品溶液、血清都需要冷藏，一般常用已配好的培养液可在4℃冰箱或冰柜保存；血清、胰蛋白酶等需要保存在-20℃或更低温度的冰箱内；某些特殊用途的生化试剂，如各种工具酶等则需保存在低温(-80℃)冰箱内。
过滤器由滤器、滤膜组成。
滤膜是除茵的主要材料，一般孔径为0.22µm，去除细菌，但对于小于0.2µm 的支原体或小于0.1µm的病毒无去除作用。
过滤除茵操作应在无菌间超净台内进行。
微量滤器当滤过的溶液较少时，可选用微量薄膜滤器，其结构与蔡氏滤器一样，小间夹着一层纤维素酯薄膜，以0.22µm的薄膜除菌效果最好。
培养瓶、培养皿和培养板有玻璃材料或塑料材料制成。
用玻璃培养瓶或皿比较经济，可反复清洗使用。
玻璃器皿的清洗新玻璃器皿：先用清水冲洗，再浸入洗衣粉或洗洁精水溶液中煮沸半小时。
然后用毛刷刷洗，流水冲至肥皂沫除尽为让。
瓶壁上沾有肥皂液会影响细胞贴壁生长，即使1:100万的肥皂痕迹也会有影响。
清水冲洗干净后、浸入清洁液中过夜。
取出，流水冲洗，冲洗时用力震摇，最后用蒸馏水冲洗2-3次，烘干。
使用过的玻璃器皿用后立即浸入清水中，防止蛋白质粘附于瓶、皿壁表面难以洗脱，然后浸入洗洁精水溶液中，用毛刷刷洗，其余清洗步骤同上。
浸泡于清洁液中是玻璃器皿清洗过程中关键的一步。
要求将整个器皿完全浸入清洁液中，不要有气泡。
清洁液：用浓硫酸、重铬酸钾和蒸馏水配制而成，有很强的氧化作用，去污效果十分好。
塑料器皿的清洗由于塑料器皿耐腐蚀性不强，且质地较软，其清洗方法与玻璃器皿有所不同。
不能用清洁液浸泡。
常规清洗方法：用清水浸泡24h，再用2％NaOH溶液浸泡过夜。
取出、清水冲洗后，用5％稀盐酸溶液浸泡30min，蒸馏水冲洗或蒸馏水浸泡24h后，取出，冲洗、凉干、备用。
金属器材的清洗新金属器材表面常涂有防锈油，因此，在清洗前，须先用纱布蘸汽油擦去防锈油。
再用洗洁精水溶液刷洗，流水冲洗，最后用蒸馏水冲洗3次，晾干、消毒备用。
使用过的金属器材先用清水冲洗，再浸入洗洁精水溶液中刷洗，清水冲洗、蒸馏水浸泡或冲洗后，擦干、备用。
橡胶制品的清洗新橡胶制品带有大量滑石粉，先用清水将滑石粉冲净，再用2％NaOH溶液煮沸20min，清水冲洗，再用1%稀盐酸浸泡30分钟，蒸馏水浸泡24h后，取出，蒸馏水冲洗，烘干备用（温度不宜过高）。
使用过的橡胶制品浸人清水中，用洗洁精水溶液煮30min，清水冲洗20min，蒸馏水中浸泡24h后，取出，蒸馏水冲洗，烘干备用。
消毒紫外线: 消毒效果与照射距离成反比。
一般照射30min即可。
优点：是消毒效果好、消毒面积大、使用方便。
缺点：是产生臭氧，对末直接照射的物品无消毒效果。
干热消毒: 消毒时温度为160 ℃，时间90-120min。
优点：使用简便，消毒后物品干燥。
缺点：是热传导慢，消毒时间长。
湿热消毒即高压蒸气消毒。
溶液消毒时，瓶口不可塞死，以免瓶内压力过大破裂。
消毒结束后，先排气，待压力自然下降后，打开锅盖，以免溶液喷出。
消毒好的物品，置70 ℃温箱内烘干后，备用。
优点：是消毒效果好，时间短；缺点：是需专人监管，随时注意压力变化。
过滤除菌用于液体消毒玻璃滤器：常用G-6型滤器，不适于血清等高蛋白液体过滤，因滤板孔径易被堵塞而失去作用。
蔡氏滤器：由金属制成，中间夹有纤维滤膜。
适用于血清及一般液体的过滤。
可用正、负压抽滤。
微型滤器：过滤时可将溶液的损失减少到最小程度。
其过滤效率高，使用方便。
消毒剂消毒：常用乙醇、来苏尔、新洁尔灭、过氧乙酸等，用于消毒超净台、桌椅、墙壁、天花板、地板及操作者的手等。
常用：0.1%新沽尔灭溶液和70%乙醇溶液。
平衡盐溶液(Balanced Salty Solution, BSS)Hanks液缓冲能力较弱，Earle液缓冲能力较强。
在配制消化液宜采用Ca、Mg含量较低的PBS 液或无Ca、Mg离子的D-Hanks液。
天然培养基--血清除特殊适应的细胞或因特殊实验目的而选择无血清培养基外，一般的细胞培养都必须加入血清。
血清加入的原则是既可维持细胞良好地生长，又不浪费血清。
一般为5-40％，通常为10-20％。
常用血清有：新生小牛血清、胎牛血清和马血清等。
肿瘤细胞或恶性转化细胞对血清浓度要求较低，一般5％血清即可满足其细胞生长的需要。
较理想的血清是胎牛血清原因是：血清中胎球蛋白和无机盐离子含量较高，不含有抗体，对细胞生长较有利。
年幼动物血清的质量高于年长动物。
由于不同地区和批次的血清质量差别较大，一个实验用同一批血清为宜。
作免疫或激素试验时，因血清可能引入不必要的免疫因素的干扰。
血清使用前须经彻底的补体灭活（水浴中56℃，灭活30min）。
合成培养基一般地讲，合成培养基只能维持细胞不死，不能促进细胞增殖或生长，尚需添加血清等。
合成培养基的选择：根据实验要求、实验室条件、细胞种类及研究者本人的经验。
实际应用中发现，一种培养基可适用于多种细胞的培养，常用的有：RPMI-1640、F12、199、MEM，可适用于多种细胞系(株)的培养。
合成培养基的优点1. 使培养条件标准化，易于控制培养的条件；2. 使细胞生长条件稳定，便于体外观察；3. 可规范细胞培养操作程序，简化操作步骤；4. 可准确测定培养体系中物质成分的变化，以评价细胞生长与代谢状况；5. 不含对细胞生长有害的物质，利于细胞生长；6. 可人工合成，来源方便，质量有保证。
细胞分离液(消化液)其作用为1. 在制备原代细胞时消化组织、分散细胞；2. 在细胞传代时使细胞脱离生长表面(瓶壁)和使细胞团离散成单个细胞。
可以单独使用，也可按一定比例混合使用，主要取决于所培养细胞的要求。
胰蛋白酶水解细胞间的蛋白质，使细胞离散。
不同种类的组织或细胞对胰酶的浓度，作用温度和时间的要求不同。
浓度大、温度高和作用时间长对细胞的离散作用就大，但超过一定限度会损伤细胞。
Ca2+、Mg2+和血清会降低其活性。
所以，胰酶要用无Ca2+、Mg2+的溶液配制，在终止消化作用时，可加入血清或含血清的培养液。
胰蛋白酶溶液的常用浓度是0.25 - 1％。
乙二胺四乙酸钠(EDT A)EDTA是螯合剂，其毒性小、价格低廉。
使用浓度为0.02%。
用无钙、镁溶液溶解后，高压灭菌，分装小瓶，于室温或冷藏保存。
胰酶-EDT A消化液胰酶和EDTA联合使用时离散细胞的能力会更高，其终浓度分别为0.25％和0.02％。
滤过除菌，分装小瓶于-20℃保存。
一瓶最好一次用完，不宜反复冻融。
胶原酶胶原蛋白富含甘氨酸、羟脯氨酸，普通的蛋白酶对其水解力弱，因此对甘氨酸、羟脯氨酸丰富的组织细胞的分散需用胶原酶。
胶原酶种类较多，不同生化试剂公司产品的种类、纯度、酶活性都有一定差异，使用时应根据所消化组织的特点，并参考文献及产品说明来确定。
