环孢素A血药浓度监测方法比较分析

肾移植术后环孢素A血药浓度监测及分析发表时间：2011-05-12T14:27:43.910Z 来源：《中外健康文摘》2011年第5期作者：梁增杰邓增潮丁勇泉[导读] 目的分析肾移植患者术后环孢素A（CsA）的使用及其血药浓度监测情况。

梁增杰邓增潮丁勇泉（广东高州市人民医院广东高州 525200）【中图分类号】R446.1 【文献标识码】A 【文章编号】1672-5085 (2011)5-0028-03 【摘要】目的分析肾移植患者术后环孢素A（CsA）的使用及其血药浓度监测情况。

方法采用荧光偏振免疫法（FPIA）测定56例肾移植患者术后CsA谷浓度，分析各种因素对CsA血药浓度的影响。

结果在56例肾移植术后患者583次CsA血药浓度监测中，418例次达到有效血药浓度(100～450ng/ml)，127例次小于有效血药浓度(100ng/ml)，38例次高于有效血药浓度(450ng/ml)。

CsA血药浓度和服药剂量随术后时间的延长呈现下降趋势，且个体差异较大。

结论 CsA不良反应大，治疗窗范围窄，应定期监测CsA血药浓度并及时调整给药方案，对于提高肾移植患者的长期存活率，降低其毒性和不良反应具有重要的临床意义。

【关键词】肾移植环孢素A 血药浓度监测Plasma concentration of CsA after renal transplantation monitoring and analysis 【Abstract】 Objective：Analysis of renal transplant patients postoperative Cyclosporine A (CsA) use and the situation monitoring on plasma concentration.Methods：Using Fluorescence polarization immunoassay method (FPIA) to assay CsA valley concentration of 56 cases of renal transplant patients postoperative.Through the results to analyze the various factors on the influence of CsA blood drug concentration.Results：In 583 times monitoring on plasma concentration of CsA to 56 cases of renal transplantation patients, 418 cases of times achieve the effective plasma concentration (from 100 to 450ng/ml), 127 cases of times lower than effective plasma concentration (100ng/ml), 38 cases of times higher than effective plasma concentration (100ng/ml). The plasma concentration and drug dose of CsA is following with postoperative of prolonged downward trend, and that the individual difference is bigger.Conclusion：Badness reaction of CsA is big. Therapeutic window is narrow, so should monitoring the therapeutic drug and adjust medication. It is an important clinical significance to improve renal transplant long-term survival of patients and reduce its toxicity and adverse reaction. 【Key words】 Renal transplant Cyclosporine A Plasma concentration monitoring 肾移植手术是末期肾衰竭患者的最好选择，肾移植手术后必须服用免疫抑制剂环孢素A（CsA）来预防肾移植后的排异反应。

免疫抑制药的药物浓度检测原理及方法目前常用的免疫抑制药包括环孢素A和他克莫司等，具有免疫抑制作用，广泛用于器官移植后排斥反应和某些自身免疫性疾病的治疗。

由于该类药物有效浓度和中毒浓度接近，且生物利用度和药动学的个体差异大，药物的吸收和代谢速率在不同的疾病状态、器官移植类型及年龄上存在很大个体差异。

因此，应监测免疫抑制药物血药浓度，以便及时调整给药剂量，保证用药安全和有效。

一、环孢素A高效液相色谱法测定环孢素A血药浓度如下：1.原理全血破碎红细胞后用乙醚将环孢素A（cyclosporin A）提出，蒸干提取液，用流动相及正己烷重溶解后，进行高效液相色谱（HPLC）分析测定。

2.试剂与仪器（1）仪器：Hp1090M高效液相色谱仪。

（2）试剂：标准品环孢素A，内标环孢素D，乙醚，乙腈，甲醇，异丙醇，氟化钠及正己烷等。

环孢素A标准贮存液（1mg/ml）的配制：称取环孢素A 0.1g溶于100ml甲醇中。

内标贮存液（1mg/ml）配制：取环孢素D 0.1g溶于100ml甲醇。

内标应用液用甲醇稀释内标贮存液为10μg/ml。

（3）色谱条件：分析柱Spherisorb C18 4.6mm×200mm （7μm）不锈钢层析柱，流动相：乙腈∶水∶甲醇∶异丙醇按57∶18∶25∶1.5的比例配成。

进样量20μl，柱温65℃，流速1.4ml/min，检测波长为208nm。

3.操作取全血2ml加入16μl环孢素D内标液（10μg/ ml）及约1g氟化钠，漩涡混合30秒后加入乙醚5ml，振荡2.5分钟，离心（4000r/min），移取有机层4ml于另一试管，50℃空气流中吹干。

残渣中加入流动相150μl及正己烷400μl重溶解，取20μl进样。

环孢素A与环孢素D保留时间分别约为4.6分钟及5.5分钟。

4.计算以标准管环孢素A和环孢素D（内标）面积比及相应环孢素A浓度，建立回归方程。

根据待测标本的面积比，用上述方程求出标本中环孢素A浓度。

高效液相色谱法监测环孢素A的全血浓度
杨光
【期刊名称】《实用医技杂志》
【年(卷),期】2007(014)011
【摘要】目的:建立高效液相色谱法测定环孢素A全血浓度的方法.方法:采用Spherisorb C 8(150 mm×4.6 mm,5 μm)分析柱,流动相为甲醇∶水(75∶25,V/V),检测波长214 nm,流速1 ml/min,柱温为60 ℃.结果:环孢素A浓度在50 ng/ml～2 000 ng/ml范围内线性良好(r=0.999 8),平均方法回收率为99.7%,日内及日间精密度＜6% (n=5).结论:本方法简便、准确、可靠,能较好的满足临床血药浓度监测的需要.
【总页数】3页(P1380-1382)
【作者】杨光
【作者单位】大连市友谊医院,辽宁,大连,116001
【正文语种】中文
【中图分类】R446.11+2
【相关文献】
1.高效液相色谱法测定环孢素A的全血浓度 [J], 钱薇;肖大伟;刘羽
2.单克隆荧光偏振免疫法和高效液相色谱法测定环孢素A全血浓度的相关性 [J], 戴志凌;帅莉;苏琴
3.高效液相色谱法监测肾移植患者环孢素A的全血浓度 [J], 刘滔滔;钟小斌;唐平
4.再生障碍性贫血患者监测环孢素A全血浓度的临床意义 [J], 夏运岳;郑晓娴;姜
开余;邵景章
5.反相高效液相色谱法监测肾移植病人口服环孢素A的全血浓度及药代动力学 [J], 刘定勇;梁茂植;邹远高;余勤;秦永平;曾经泽
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环孢素A血药浓度的监测与药动学研究
张平
【期刊名称】《天津药学》
【年(卷),期】1996(008)003
【摘要】环孢素（Ａ（ＣｙｃｌｏｓｐｏｒｉｎＡ，ＣｓＡ）是目前用于器官移植中预防排斥反应和治疗自身免疫性疾病的最好的免疫抑制药物。

可用于骨髓、肝脏、心脏和肾脏移植的排异反应，对于预防胰、角膜、心、移植后的排异反应也获成功。

对某些生疾病也有效，在我国已膛渐开始使用。

由于它具有较大的肾生，药动学参数个体差异较大，因此世界多数器官移植中心认为在环孢素Ａ治疗中血药浓度的监测和药动学研究，对预防移植器排异反应和减少
【总页数】3页(P24-26)
【作者】张平
【作者单位】无
【正文语种】中文
【中图分类】R978.1
【相关文献】
1.LC-MS/MS和荧光偏振法监测环孢素A血药浓度的相关性研究 [J], 王波;李鹏飞;马萍;王燕;刘丽宏
2.环孢素A血药浓度监测方法的研究进展 [J], 沈景芬
3.环孢素A血药浓度监测相关实验室检测研究进展 [J], 王磊;孙文利;陈佳琦;刘红星
4.环孢素A血药浓度监测相关实验室检测研究进展 [J], 王磊; 孙文利; 陈佳琦; 刘红星
5.环孢素A血药浓度监测研究进展 [J], 刘叶玲
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荧光偏振免疫法监测环孢素A血药浓度观察与分析【摘要】目的观察荧光偏振免疫（FPIA）法测定环孢素A（CsA）血药浓度的可行性以及CsA监测质量控制的必要性。

方法对20例环孢素A服用患者的血液样本使用荧光偏振免疫法检测血药浓度，观察日内差、日间差、回收率及相对百分偏差等数据。

结果测得的低、中、高质控样本的回收率均高于100%，所测定质控样本RSD＜6%，符合中国药典要求。

结论FPIA法在测定环孢素A血药浓度具有良好的准确度和精密度，符合临床检测要求，适合在建立合理质控体系下开展治疗药物监测。

【关键词】环孢素A；血药浓度；质控1资料与方法1.1一般资料临床采集20例口服环孢素A的肾病综合征患者的静脉血液，所有患者服药时间均大于1年。

年龄36～68岁，平均年龄44.1岁。

1.2研究方法所有患者均于服药后12h进行静脉取血，每份血液样本采集量均大于2ml。

血液样本放于6℃的冰箱中保存。

1.3样本测定将采有血液样本的试管倒置用力晃动5～10s，以便样本混合均匀。

吸取已经混合均匀血液样本150μl，并放置于离心管内，加入细胞溶解剂50μl，使用振荡器振荡2min后加入30μl的蛋白沉淀剂，继续振荡2min，之后放置在高速离心机内，进行5min共60000转的离心。

待离心结束，将样本的上层清液倒入样本杯中，以防挥发，样本杯中的样本容积最少150ul，使用荧光偏振免疫分析仪进行检测。

1.4标准曲线分别吸取CsA各浓度（100，250，500，1000，1500ng/ml）中的标准样本，操作同1.3中所述，取得上层清液倒入样本杯中，放入荧光偏振免疫分析仪内，制作标准曲线。

其合格的判定标准：①均方差根≤1。

②各标准浓度点极差在2.0至+2.0范围内。

只有同时满足上述两个条件的标准曲线才可用作血液样品的检测。

如果有结果不在要求范围内的，则需要重新制订标准曲线。

1.5精密度实验每次检测L、M、H质控样本各一份，根据检测数据算出平均值以及相对标准偏差（RSD），分析CsA血药浓度检测的日内误差。

环孢素A血药浓度的HPLC测定方法目的：建立环孢素A血药浓度的HPLC测定方法。

方法：采用反相HPLC 的方法，血样经乙醚萃取，正己烷洗脱等处理后测定。

采用DiamonsilTM C18色谱柱，流动相为乙腈-水（74：26，V/V），流速为1 ml/min，柱温为70 ℃，检测波长为210 nm。

结果：环孢素A血药浓度在50～1000 ng/ml范围内线性关系良好，R2=0.9997，低中高三种浓度的提取回收率为70.01%～75.00%，方法回收率为98.93%～103.08%，日内精密度RSD为0.84%～4.76%，日间精密度RSD 为5.38%～9.87%。

结论：该方法快速灵敏准确，可用于环孢素A血药浓度的监测。

标签：环孢素A；高效液相色谱；血药浓度监测环孢素A（Cyclosporine A，CsA）是一种强效免疫抑制剂，目前广泛用于器官和组织移植术后的预防和治疗[1]。

然而CsA治疗的有效血药浓度范围为100～450 μg/L，600 μg/L以上即有中毒危险[2]，特别是肝肾毒性明显[3]。

CsA治疗窗窄，个体差异大，因此，临床应用必须监测其血药浓度。

本实验建立了一种简单准确的HPLC测定CsA血药浓度的方法，现报告如下。

1 材料与方法1.1 仪器与试剂CsA 标准品，乙醚，正己烷，甲醇（色谱纯），乙腈（色谱纯），Agilent 1200型高效液相色谱仪，DiamonsilTM C18色谱柱，GENIUS 6K-D 离心机，XW-80A漩涡混合仪。

1.2 标准溶液的配制精密称取CsA标准品10.006 mg置于100 ml容量瓶中，用甲醇溶解定容，作为CsA标准品储备（100 μg/mL）。

用甲醇稀释，分别配成2.5、5、10、25、50 μg/ml的CsA标准品溶液。

1.3 样品的处理1.3.1 空白血样取人全血1～10 ml均塞离心管中，加入1 ml0.1 mol/L的NaOH溶液，涡旋2 min，加入5 ml乙醚，涡旋5 min，3500 r/min 离心10 min，取上清液4.5 ml，40 ℃水浴吹干，加入100 μl甲醇-0.05 mol/ml 盐酸（1：1，V：V）的混合液[4]，涡旋30 s，加入250 μl正己烷，涡旋2 min，3500 r/min离心5 min，弃去正己烷，取下层溶液进样。

环孢素A血药浓度监测方法比较分析
刘文豹;刘增;牛德森
【期刊名称】《标记免疫分析与临床》
【年(卷),期】2006(013)003
【摘要】环孢素A（CSA）是一种强效免疫抑制剂，可有效抑制异体排斥反应，已被广泛应用于肝、肾和心脏等移植术后患者，大大降低了移植患者的死亡率。

但由于CSA有效阈值窄，用量过少，不足以抑制排斥反应，用量过多，又会产生严重的肝肾毒性反应，因此移植术后监测CSA血药浓度至关重要。

目前，CSA血药浓度监测方法主要有三种：RIA，FPIA以及HPLC。

我科于2005年对服用CSA 的肾移植术后患者118例，同时应用这三种方法进行检测，现报告如下。

【总页数】2页(P188-189)
【作者】刘文豹;刘增;牛德森
【作者单位】内蒙古医学院第三附属医院包钢医院核医学科,内蒙古,包头,014010;内蒙古医学院第三附属医院包钢医院核医学科,内蒙古,包头,014010;内蒙古医学院第三附属医院包钢医院核医学科,内蒙古,包头,014010
【正文语种】中文
【中图分类】R9
【相关文献】
1.环孢素A血药浓度监测方法的研究进展 [J], 沈景芬
2.环孢素A血药浓度检测方法比较分析 [J], 王磊;孙文利;李培余;田萌苏;陈雪;张阳;
刘红星
3.环孢素血药浓度监测方法评价 [J], 赵秋玲;黄显
4.环孢素血药浓度监测方法比较 [J], 宋丽丽;陈东生;吕永宁
5.环孢素A和他克莫司血药浓度检测方法比较分析 [J], 陈惠芳; 刘锋; 吴丽荣; 苏丽婷
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