替考拉宁血药浓度测定方法学初步方案

RP-HPLC法测定人血浆中替考拉宁的浓度江泓颖;曹薇;陈永刚;吴金虎;王雄【期刊名称】《广东药学院学报》【年(卷),期】2011(27)5【摘要】目的建立测定人血浆替考拉宁的HPLC法,供血药浓度监测用,指导临床安全合理用药.方法色谱柱为Wondasil C18柱(4.6 mm ×250 mm,5μm)；流动相为乙腈-0.05 mol/L KH2 PO4溶液(体积比28∶72,pH=3.2),检测波长为240 nm,流速为1.0 mL/min；柱温为25℃.结果替考拉宁在4～48 μg/mL质量浓度范围内线性关系良好,检测限为2 μg/mL,方法回收率平均值为91.43％,提取回收率平均值为88.40％,日内、日间RSD值均小于6％.结论该方法操作简单快速,准确度高,适用于替考拉宁的血药浓度测定.%Objective To establish an HPLC method for determination of teicoplanin in serum, providing the basis for monitoring clinical plasma concentrations and rational administration. Methods HPLC was performed on a C18 column (Wondasil,4. 6 mm × 250 mm,5μm) with acetonitrile-0.05 mol/L monobasic potassium phosphate 28:72 as mobile phase. The wavelength was 240 run, and the flow rate was 1. 0 mL/min, colu mn temperature was 25℃. Results It showed good linearity in the concentration range of 4 -48 μg/mL,and the limit of quantitation was 2 μg/mL, The average method recovery was 91. 43% and the average extraction recovery was 88.40%. The inter-day RSD and intra-day RSD were both less than 6%. Conclusion The method was simple,quick and accurate,which could be used for the assay of teicoplanin in serum.【总页数】3页(P496-498)【作者】江泓颖;曹薇;陈永刚;吴金虎;王雄【作者单位】武汉市第三医院,湖北武汉430060;武汉市第三医院,湖北武汉430060;武汉市第三医院,湖北武汉430060;武汉市第三医院,湖北武汉430060;武汉市第三医院,湖北武汉430060【正文语种】中文【中图分类】R927.2【相关文献】1.RP-HPLC法测定人血浆中氯氮平浓度 [J], 于海燕;何粤红;胡冬竹;胥小叶2.RP-HPLC法测定人血浆中卡马西平浓度 [J], 王丽霞;陈清霞;杨红梅;梁小丽;刘伟忠3.RP-HPLC法测定人血浆中拉米夫定的浓度 [J], 朱旭;孙亚欣;邱枫;何晓静;赵明明;肇丽梅4.离心超滤结合超高效液相色谱串联质谱法测定人血浆中替考拉宁游离浓度 [J], 付文倩;张敏新;姚囡囡;张丽丽;宋洪涛5.HPLC-UV法测定人血浆中替考拉宁药物浓度的方法学研究及其临床应用 [J], 王彦改;沈芊;苏甦;王雪梅;姜德春;闫素英因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

人凝血因子Ⅷ效价测定一步法1 试剂1.1样品稀释液：取1容积的3.8%枸橼酸钠液加入5容积咪唑缓冲液。

1.1.1 咪唑缓冲液称0.68g咪唑和1.17g氯化钠溶于100ml蒸馏水中，加入42.2ml 0.1mol/L盐酸，然后被加入蒸馏水至200ml,pH为7.3。

1.1.23.8%枸橼酸钠溶液称9.5g枸橼酸钠溶解于250ml蒸馏水中。

1.2 血小板代用品“兔（人）脑组织的氯仿抽提液”。

用前用生理盐水稀释至适当倍数。

1.3白陶土生理盐水混悬液称0.5g白陶土加生理盐水至100ml即可使用。

1.4 基质血浆取人凝血因子Ⅷ含量低于2%的血友病病人血浆或人工基质血浆，然后分装于5ml安瓿，冻干或-30℃保存。

1.50.05mol/L氯化钙溶液称111g氯化钙溶于1000ml蒸馏水中，配制成1mol/L氯化钙贮存液，用前进行20倍稀释，配成0.05mol/L氯化钙溶液。

1.6 人凝血因子Ⅷ标准品及标准血浆人凝血因子Ⅷ国家标准品或经国家标准品标化的工作标准（定量分装冻干，置-30℃保存，一般2IU/ml左右），用前取样品稀释液溶解成1IU/ml。

标准血浆系取30份新鲜正常人血浆等量混合后，分装于小瓶内，置-30℃保存。

自采血后至分浆冻结整个过程不得超过4小时。

1.7待测样品按标示量加入注射用水溶解，测定时稀释成1IU/ml。

2 测定2.1取2支试管，每管加入0.1ml基质血浆和0.1ml样品稀释液，混匀，再加0.1ml血小板代用品和0.1ml白陶土悬液，混匀，将试管置37℃水浴保温一定时间（一般2～6分钟），然后加入0.1ml0.05mol/L氯化钙溶液，记录凝固时间，2管平均值为基质血浆的“空白”值（一般应大于3分钟）。

2.2 标准品或标准血浆用样品稀释液分别进行10倍、20倍、40倍、100倍和200倍稀释，用不同稀释浓度标准品代替2.1项试验中样品稀释液，按上述方法分别测定凝固时间。

2.3 待测样品稀释成约0.02～0.04IU/ml，代替2.1项试验中样品稀释液，同时分别测定凝固时间。

血凝试验是一种常见的临床实验室检测方法，用于评估凝血功能和诊断凝血相关疾病。

下面我将为您详细介绍血凝试验的操作步骤。

一、试验前准备1. 准备所需材料：试验用血清管、试验管架、试验管塞、试管标签、离心机、凝血试剂盒等。

2. 检查仪器是否正常工作并校准，确保试剂未过期。

3. 打开试剂盒，按照说明书要求进行储存条件和试剂稳定性的确认。

二、标本采集和处理1. 无菌操作，使用无菌针头和注射器采集静脉血标本。

2. 将采集的静脉血标本放入无抗凝试管中，并轻轻倒置数次，使其与抗凝剂充分混合。

3. 离心采集的血液标本，以分离血浆和红细胞，将血浆转移到干净的试验管中。

4. 将试验管中的血浆再次离心，以去除悬浮的红细胞和其他杂质。

三、试验操作1. 取出准备好的试验管架，并按照试验方案标注试验管标签。

2. 将血浆样本平均分配到不同的试管中，每个试管的血浆量应保持一致。

3. 在试管中加入预先配置好的试剂。

根据实验要求和试剂盒的说明书，在不同试管中加入不同的试剂。

4. 轻轻摇晃试管，使血浆和试剂充分混合，确保试剂与血浆反应顺利进行。

5. 根据试剂盒的说明书，在适当的温度下孵育一段时间，以促进血浆的凝固过程。

6. 在孵育结束后，观察试管内血浆的凝固状态。

可以通过目视观察或使用特定仪器来进行血凝结果的判断。

7. 记录血凝试验的结果，包括凝血时间、凝血酶原时间等指标，并按照实验室标准进行解读和报告。

四、结果分析与报告1. 根据试验结果，判断血浆的凝固功能是否正常。

根据实验室的参考范围，对结果进行解读，判断是否存在凝血功能障碍或异常。

2. 根据实验结果，提供凝血功能的定量指标，如凝血时间、凝血酶原时间等，以便医生进行临床诊断和治疗方案的制定。

3. 撰写实验报告，包括样本信息、试验方法、结果解读等内容，并及时提交给相关医疗专业人员。

血凝试验是一项复杂的实验室检测技术，需要严格的操作和仪器校准。

只有正确地执行每个步骤，才能确保试验结果的准确性和可靠性。

20例重症患者测定替考拉宁血药浓度的临床意义目的：探讨重症患者进行替考拉宁血药浓度监测的临床意义。

方法：对我院2012.5-2013.5间使用替考拉宁治疗并有测定谷浓度的患者情况进行回顾性分析。

结果：20例患者在起始时均给予负荷剂量，其中18例达到有效浓度>10mg/l，血浆白蛋白对血药浓度无明显影响，CRRT患者血药浓度水平低于未进行CRRT 治疗者。

行CRRT治疗者，在使用负荷剂量后400mg、qd更佳，但需进行血药浓度监测。

结论：替考拉宁血药浓度监测可以更好地提高用药的有效性，实现个体化给药。

标签：替考拉宁；血药浓度监测；CRRT替考拉宁是继万古霉素后研制的治疗格兰阳性球菌的糖肽类抗生素，由于化学结构上增加了脂肪酸侧链，而且相对分子质量增大，所以在药物代谢动力学方面显示了良好的特性。

替考拉宁组织穿透力强，能在细胞内浓集，半衰期显著延长。

替考拉宁通过抑制细菌细胞壁合成而抑制细菌生长，适用于治疗耐甲氧西林葡萄球菌（methicilin resistant staphylococcus aureus，MRSA）感染。

[1]MacGowan 等研究表明，治疗中重度感染，替考拉宁血药谷浓度（Cmin）应大于10mg/L。

[2]Matsumoto等进一步研究认为治疗MRSA感染，替考拉宁Cmin应大于13mg/L，[3]因为病人体质各异、肝肾功能不全等疾病的特殊性，药物的分布、代谢、排泄等也会发生很大变化，因此，我们需要对特殊人群进行治疗药物浓度监测（TDM），以明确替考拉宁是否达到有效治疗浓度。

[4-5]目前国内尚未对替考拉宁血药浓度开展常规监测，而且目前报道的文献也大部分为科研型，对临床实际用药后进行监测并对结果进行分析的资料很少。

本文通过对我院使用替考拉宁过程中有测定血药浓度的患者情况进行回顾性分析，更贴近临床实际，以期对临床用药提供参考。

1 资料与方法1.1 资料来源：2012.5～2013.5在温州医科大学附属第一医院因重症感染住院使用替考拉宁治疗的患者。

Strait Phannaceaticgt Jouviat Vol33Nog2021菇多糖的临床抗肿瘤应用提供了一定的循证证据，然而由于研究存在一定的发表偏倚和文献质量不高的情况，本研究的结果还有待更大样本量和更高质量的RCT试验来验证。

参考文献51〕唐伏秋，涂颖，赵勇•TP与GP方案治疗老年国人晚期非小细胞肺癌疗效Mem分析〔〕•现代中西医结合杂志901592(22)：2314-24179-2〕汲晨锋,岳磊•香菇多糖的化学结构及抗肿瘤作用研究进展5〕；中国药学杂志,4015,48(18)：；39Q539.5〕陈建强•香菇多糖联合化疗对非小细胞肺癌的疗效观察〔〕•苏州大学学报(医学版)900898(2)266027.〔4〕代东•香菇多糖联合GP方案治疗非小细胞肺癌的近远期疗效及毒副反应〔J〕；现代中西医结合杂志，263,(15)：3270228, 336.5〕丁宁,黄治虎S长群，等；香菇多糖联合NP方案治疗中晚期非小细胞肺癌疗效观察5〕安徽医学961295(9)281085.-9〕蒋荣芳，谭晓明，刘卫，等.香菇多糖联合吉西他滨与顺铂治疗非小细胞肺癌效果5〕齐鲁医学杂志,4016,45(2)：；2A34.〔7〕马云,赵贤宝•香菇多糖在结直肠癌患者术后辅助化疗中的应用5〕中华中医药学刊,401591(65)：691-094.5〕石星，丁乾，杨勤•香姑多糖联合化疗在治疗晚期非小细胞肺癌的作用〔〕中国肿瘤,4067,16(11)：947048.5〕王加瑛，张元生,赵和平.香菇多糖联合化疗对非小细胞肺癌患者免疫功能的影响及疗效研究〔〕•中国医疗前沿,471069(4)：1507.〔3〕王钦，舒建波,李达君.香菇多糖联合化疗治疗晚期胃癌37例5〕当代医学907995(3)：；9A47.〔3王小红，余新民,沈祝苹，等.香菇多糖联合化疗对晚期结肠癌患者的临床疗效5〕中国医药导报,4014917)：95O9.〔2〕王小龙，徐彬•香菇多糖联合化疗治疗胃癌临床观察〔〕〕•现代中西医结合杂志,4016,16(9)：384A085.〔3〕汲晨锋，岳磊.香菇多糖的化学结构及抗肿瘤作用研究进展〔〕•中国药学杂志,20；98(；)：15370537.〔14〕吴雷元•香菇多糖联合长春瑞滨、顺铂治疗老年晚期非小细胞肺癌临床观察〔〕中外医疗,4079,48(35)：77O7.〔3〕翟艳.晚期结肠癌患者应用香菇多糖与化疗治疗的临床效果观察〔〕•中国实用医药,4015,(8):20-27.〔3〕张才友，谢传华,康昭洵，等•香菇多糖联合GP方案治疗中晚期非小细胞肺癌临床观察〔J〕.齐齐哈尔医学院学报,2014,35(2)：164Q95.-3〕香菇多糖联合化疗治疗晚期非小细胞肺癌5〕；中国肿瘤生物治疗杂志,4079,16(5)225025.〔3〕张华.香菇多糖联合化疗治疗中晚期老年NSCLC患者临床分析〔〕•深圳中西医结合杂志,473,40(4)2405.〔19〕张金江.香菇多糖联合化疗对结直肠癌术后患者的疗效观察〔〕•中外医学研究,4015,(27)2205.-27〕赵璐.香菇多糖联合化疗治疗中晚期非小细胞肺癌临床观察〔〕•安徽医药S712S9(3)：399A497.〔2；赵伟.香菇多糖联合化疗治疗晚期胃癌78例疗效分析5〕医药论坛杂志,4014,55(74)：O8A3.〔22〕赵文英，陈冬云,陈景华•香菇多糖联合吉西他滨+顺铂方案一线治疗晚期非小细胞肺癌近期疗效与不良反应观察〔〕中国临床药理学与治疗学S7；,；(；2107.〔25〕周娜伟，焦建辉.联用香菇多糖与XELOX化疗方案治疗晚期胃癌的效果探析〔〕•当代医药论丛,4016,14(8)：34046.〔24〕申杰，苏秀兰,徐桂华，等.香菇多糖对晚期胃癌患者免疫功能的影响及临床疗效与安全性评估5〕；中国循证医学杂志,4077, 7(1)：18-P9.〔25〕赵伟.香菇多糖联合化疗治疗晚期胃癌78例疗效分析5〕医药论坛杂志,263,35(24)：O8A3.高效液相色谱法测定人血清中替考拉宁的血药浓度及其应用王石健，夏修远*(台州市立医院，浙江台州315002)摘要：目的建立高效液相色谱法测定人血清中替考拉宁血药浓度，用于临床血药浓度监测，指导临床合理用药。

微生物比浊法测定注射用替考拉宁的效价含量张文杰【期刊名称】《中国医院用药评价与分析》【年(卷),期】2016(016)003【摘要】目的：建立比浊法测定注射用替考拉宁效价含量的方法，以用于其质量控制。

方法：分别采用微生物比浊法和管碟法对注射用替考拉宁的效价进行检定，比较2种方法的效果。

结果：替考拉宁线性范围为5.0～15.0 u／ml，浓度的对数与吸光度成良好的线性关系，线性方程为A＝1.372－0.7926l gC（r＝0.997），平均回收率为100.46％，RSD为0.85％。

结论：比浊法和管碟法测定注射用替考拉宁效价含量的结果无显著差异。

微生物比浊法灵敏、准确、可靠、重现性好，可用于注射用替考拉宁的质量控制。

%OBJECTIVE:To establish a microbiological turbidimetri method for the determination of content of teicoplanin for injection , so as to control its quality .METHODS: Microbiological turbidimetri method and cup-plate method were respectively adopted to detect and compare the the potency of teicoplanin for injection , and the effects of two methods were compared .RESULTS:The calibration curve was linear with the logarithm of concentration range of 5.0-15.0 (μ/ml) of teicoplanins, the linear equation was A=1.372-0.792 6l gC(r=0.997), the average recovery was 100.46%, RSD was 0.85%.CONCLUSIONS:There was no significant difference in the determination of content of teicoplanin for injection between turbidimetric method and cup-platemethod .Microbiological turbidimetri method is sensitive , accurate ,reliable and reproducible , suitable for quality control of teicoplanin for injection .【总页数】2页(P364-365)【作者】张文杰【作者单位】沈阳医学院附属第二医院药剂科，辽宁沈阳 110002【正文语种】中文【中图分类】R927【相关文献】1.微生物比浊法测定妥布霉素地塞米松眼膏的效价 [J], 王洪家;郭福庆2.微生物比浊法测定妥布霉素、硫酸妥布霉素注射液及妥布霉素滴眼液的效价 [J], 郭福庆;王洪家3.比浊法测定注射用磺苄西林钠效价含量 [J], 郭盈杉;刘映倩;张利敏4.微生物比浊法测定硫酸庆大霉素颗粒效价 [J], 张胜波;屈胜环5.微生物比浊法测定硫酸安普霉素效价的研究 [J], 刘远声;种利红;周志霞;李玉平;张永旺因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

血药浓度测定步骤方法全文共四篇示例，供读者参考第一篇示例：血药浓度测定是临床药理学中非常重要的一项实验方法，通过测定患者体内药物的血药浓度，可以评估药物的性质、药效和毒性等指标，为临床用药提供科学依据。

本文将介绍血药浓度测定的一般步骤和方法。

一、前期准备在进行血药浓度测定实验之前，需要做一些必要的准备工作。

选择合适的实验动物或受试者。

通常情况下，实验动物选取小白鼠、大鼠或猪等动物较为常见，受试者则是进行药物治疗的病人。

准备药物样品和试剂。

需要准备好待测药物的纯度标准品或药物浓度标准品，以及实验所需的溶剂和其他试剂。

准备实验设备，例如高效液相色谱仪（HPLC）、质谱仪、离心机、离心管等。

二、样本采集在进行血药浓度测定实验时，需要采集动物或受试者的血样。

对于动物实验，一般会选择尾静脉、颈静脉或颌下静脉进行血样采集。

而对于临床试验，通常采用患者的肘窝静脉进行血样采集。

在采集血样时，应使用无菌注射器或采血针将血样抽取至离心管中，避免血样受到污染。

采集的血样需要尽快离心分离，获取血浆样品。

三、血样处理采集到的血浆样品需要进行处理，以获取适合的实验样品。

将采集到的血浆样品进行离心，以去除血细胞和固体杂质。

离心条件通常为3000 rpm、10分钟。

然后，将离心后的血浆样品转移到干净的离心管中，分装成适量的样品，一部分用于直接测定血药浓度，另一部分可以保存于-20℃冰箱中，以备后续实验使用。

四、测定血药浓度测定血药浓度是血药浓度测定实验的核心步骤。

一般情况下，可以采用高效液相色谱法（HPLC）、气相色谱法（GC）、质谱法（MS）等方法测定血药浓度。

HPLC方法是比较常用的方法。

具体操作步骤为：将处理后的血浆样品注入HPLC系统，设定好检测条件和程序，经过色谱柱分离后，通过检测器检测出药物的吸光度信号，并利用标准曲线计算出血药浓度值。

五、数据分析与结果表达测定完血药浓度后，需要对实验数据进行统计和分析，得出结论并表达结果。

一步检测血浆中的各种抗凝药物每种抗凝药的药物浓度检测指标均不一致。

2016年5月，发表在《J Thromb Haemost》的一项研究显示，使用一种TP 稀释浓度的dFiix-PT可以同时评估华法林、达比加群、利伐沙班、阿哌沙班、肝素和依诺肝素的抗凝作用。

背景：紧急情况下或术前检测抗凝药物浓度很有帮助。

具体需要进行哪种检测取决于抗凝药物。

目的：研究者假设使用高度稀释凝血活酶（TP），可以通过稀释凝血酶原时间（dPT）和稀释Fiix-PT （dFiix-PT）测得华法林、达比加群、利伐沙班、阿哌沙班和肝素的浓度。

后者检测间仅受活性因子II和X水平降低的影响，但校正了其他血浆检测的缺陷。

方法：用增加的TP稀释液来确定合适的稀释液浓度来测量达比加群、利伐沙班、阿哌沙班、普通肝素（UFH）与依诺肝素的浓度。

用含有已知直接口服抗凝剂的（DOACs）标准品制作进行标准曲线。

标准血样来源于服用华法林或DOACs 且通过具体检测药物浓度已知的患者。

方法：在dFiix-PT的TP稀释为1:1156时可以用来衡量除磺达肝癸之外所有药物的治疗浓度。

DPT达到相同的效果但需要两个TP稀释度（1:750和1:300）。

使用dFiix-PT在1:1156可以检测华法林效果，PT比率与国际标准化比值相同。

6种不同的TPs产生了相同的结果，但其中2个敏感性稍差。

使用两种稀释PT检验检测的患者样本可以准确测量达比加群，利伐沙班和阿哌沙班，可以使用稀PT检测患者样本的，但更好的相关性持续观察thedfiix和具体的检测之间的比与DPT，但观察到dFiix-PT与具体检测比dPT相关性更好。

结论：使用一种TP稀释浓度的dFiix-PT可以评估华法林、达比加群、利伐沙班、阿哌沙班、肝素和依诺肝素的抗凝作用。

•实验研究-HPLC-UV法测定人血浆中替考拉宁药物浓度的方法学研究及其临床应用王彦改，沈芋，苏甦，王雪梅，姜德春，闫素英(首都医科大学宣武医院药学部，北京］00053)［摘要］目的：建立测定人血浆中替考拉宁浓度的高效液相色谱-紫外检测(HPLC-UV)法，为临床个体化给药提供依据。

方法：以哌拉西林钠为内标，将400“L血浆样本采用600“L乙睛沉淀蛋白后，再用二氯甲烷萃取，采用HPLC测定，色谱柱为1{1011^［1柱(150mm x4.6mm,5|xm),流动相为水(含0.01mol-L'1磷酸二氢钾，用磷酸调pH至2.84)-乙睛(75:25,v/v),流速1.0mL-min1,柱温359,进样量20pL,检测波长为240nm。

结果：替考拉宁在3.12~100.00ng-mL-1范围内线性关系良好(疋=0.9999),定量下限为3.12ng-mL-1；日内、日间精密度的RSD为0.39%~&54%,相对偏差为-7.19%~7.00%。

血浆样岛在经历3次冻融(-209到室温)循环、49放置6d和冷冻(-409)放置21d等条件下均稳定，处理后样晶在自动进样器中(49)放置24h均稳定(RSD<15%)。

测定9例应用替考拉宁患者的血药浓度，仅有2例在有效血药浓度范围。

结论：该法操作简便、灵敏、准确，适用于替考拉宁血药浓度的测定。

［关键词］替考拉宁；HPLC-UV;方法学评价；血药浓度监测；临床应用［中图分类号］R969.4;R978.1［文献标识码］A［文章编号］1672-8157(2020)04-0226-05Validation and clinical application of HPLC-UV method for the determination of teicoplanin in human plasmaWANG Yan-gai,SHEN Qian,SU Su,WANG Xue-mei,JIANG De-chun,YAN Sxi-ymg(pepartment of P harmacy,Xuanwu Hospital,Capital Medical University,Beijing100053,China)[ABSTRACT]Objective：To establish a high performance liquid chromatography-ultraviolet(HPLC-UV)method for the determination of teicoplanin in human plasma,and provide evidence for individual therapy.Methods：The internal standard substance was piperacillin sodium.The pretreatment of plasma sample(400yL)included protein precipitation by600pL acetonitrile and extraction by dichloromethane(CH2C12).A kromasil column(150mm x4.6mm,5pm)was used.The mobile phase consisted of a mixture of0.01mol-L"1KH2PO4(pH was adjusted to2.84with H3PO4)-acetonitrile(75:25,v/v).The flow rate was1.0 mL-min1.The column temperature was set at35°C and the sample size was20pL,the detection wavelength was240nm.Results: The concentration of teicoplanin had good linear relation in the range of3.12-100.00p^g-mL'1(i?2=0.9999).The low limit of quantitation was3.12p-g-mL_1.RSD of the intra-day and inter-day precision was0.39%〜8.54%.The relative deviation was-7.19%〜7.00%.Plasma samples were stable after3freeze-thaw cycles(-20°C to room temperature),being laid at4for6days and—40七for21days.The pretreated samples were stable in the autosampler(4°C)for24h(RSD<15%).Among9patients who monitored the concentration of teicoplanin,only2of them had the concentration of teicoplanin within the effective range.Conclusion:This method was simple,sensitive and accurate,which was suitable for clinical therapeutic drug monitoring(TDM)of teicoplanin. [KEY WORDS]Teicoplanin;HPLC-UV;Method validation;Therapeutic drug monitoring;Clinical application替考拉宁对革兰阳性菌，特别是对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant staphylococcus aureus,MRSA)it成的感染有很好的疗效⑴。

替考拉宁血药浓度测定方法学初步方案
1．色谱条件：流动相二水合磷酸二氢钠：乙腈=72:28，pH=2.05流速1ml/min
柱温30度
监测波长240nm
2. 标准品配置：替考拉宁标准溶液2.2mg/L
3.血浆样本前处理：精密吸取血清样品0.20ml，加入300μl乙腈，混悬20s，离心（10000r/min,5min）,取上清液300μl，加入氯仿200μl，混漩20s，离心（10000r/min,5min），取上清液20μl进样
4.专属性实验：分别取空白血清，患者血清+内标，替考拉宁标准品+内标+空白血浆三类样本，考察血清内杂质峰对替考拉宁的干扰
5.建立标准曲线
按样品预处理的方法，加入不同浓度的替考拉宁溶液_______，使其血清浓度为5，10,20,40,80,100mg/L，加入空白血清______μl，加内标（）,总体积____-μl
6.提取回收率
取高、中、低3个浓度标准品，分别加入空白血浆+内标，稀释溶剂+内标，配置成终浓度__________________样品，每个浓度各5份，进行记录峰面积，计算回收率
回收率=
7.精密度实验
取高、中、低3个浓度标准品，分别加入空白血浆+内标配置成终浓度_______________样品，重复测定5次，连续3天，进行日内及日间精密度计算
8.稳定性实验将浓度为5,20,80的替考拉宁血清样品若干份，分别置于室温放置稳定性（12H），长期冷冻稳定性（-20度保存15,30天），
冻融稳定性（反复冻融3次），9,。

检测限和定量限。

•188.现代生物医学进展 Progress in Modern Biomedicine VoL21 NO.l JAN«2021doi: 10.13241 /j xnki.pmb.2021.01.042替考拉宁在感染的血液病患者中血药浓度的监测与应用价值分析*胡雪莹1李坦1昂韦2鲍扬漪1李斌1(1安徽医科大学第三附属医院/合肥市第一人民医院血液肿瘤科安徽合肥230000;2安徽医科大学第三附属医院/合肥市第一人民医院药学部安徽合肥230000)摘要目的:探讨替考拉宁在感染的血液病患者中血药浓度的监测与应用价值。

方法：回顾分析2017年12月-2019年12月来我 院治疗的42例革兰氏阳性球菌引起感染的血液病患者临床资料，按照临床替考拉宁的给药剂量分A组和B组，每组21例。

利用 高效液相色谱法(H P L C)检测患者第5天用药前30 m i n的血药浓度，利用酶联免疫荧光法检测患者降钙素原(P C T)水平。

比较两 组血药浓度，临床疗效及P C T水平的差异，并记录不良反应:、结果:B组患者血药浓度（15.12±4.68)m g/L高于A组的（11.76±5.31) m g/L,且B组患者P C T水平（0.86±1.21)n g/m L低于A组的（2.23±1.63)n g/m L，差异均有统计学意义(P<0.05)。

B组患者临床有效 率为95.24%(20/21)，A组临床有效率为71.43%(丨5/21)，两组临床有效率比较差异有统计学意义(户；0.05)。

A组发生不良反应发 生率为23.81%(5/21)，B组不良反应发生率为19.05%(4/21),两组患者不良反应发生率比较差异无统计学意义(P>0.05)。

有效组 患者血药浓度（17.21±6.64)m g/L高于无效组的（10.14±5.48)m g/L;且有效组患者P C T水平（0.65±1.31)n g/m L低于无效组的 (2.63±1.87)n g/m L，差异均有统计学意义(P<0.05)。

替考拉宁治疗药物监测实施细则替考拉宁临床用于不能用青霉素类及头抱菌素类抗生素治疗或用上述抗生素治疗失败的严重葡萄球菌感染，或对其他抗生素耐药的葡萄球菌感染。

临床问题1：替考拉宁推荐的PK/PD参数是什么？实施概要：AUC/MIC是替考拉宁主要的PK/PD参数。

由于许多机构没有AUC 估算软件，因此临床实践中推荐使用替考拉宁谷浓度作为替代指标。

(II)模型信息精确投药(MIPD)可以提供抗生素的个体化合理剂量，是一种很有前景的工具。

但与万古霉素相比，替考拉宁采用MIPD指导治疗的证据较少。

临床问题2：替考拉宁TDM适用于哪些人群？实施概要：替考拉宁实施TDM的主要目的是提高其临床疗效，另外目的是防止使用较大负荷剂量替考拉宁产生的不良反应。

由于替考拉宁血药浓度预测不佳，对于存在严重感染、急/慢性肾功能不全、肥胖/低体质量、烧伤感染以及低白蛋白血症的患者应实施TDM。

(I)对于使用替考拉宁治疗疗效不佳或产生不良反应，应进行TDM来评估剂量调整。

(III-A)临床问题3：什么时候开始实施TDM?实施概要：一般情况下血液样本是在稳定状态下获得。

由于替考拉宁有较长的半衰期（IooT70h）,因此需要较长时间才能达到稳态浓度。

推荐替考拉宁在第4天实施谷浓度监测，并作为目标谷浓度。

任何原因需要在第3天进行TDM的患者，应当在每天2次连续给药2天后，监测前一剂量给药18h后取样。

第4天的TDM用来评估最初3天的负荷剂量，接下来（后续）的TDM用来评估维持给药剂量。

对于肾功能不全,严重感染较高谷浓度（20mg∕L）的患者后续TDM应在初次TDM后的7天内实施。

临床问题4：对于非复杂MRSA感染，替考拉宁目标谷浓度是多少？实施概要：肾功能正常或损伤的非复杂MRSA感染患者推荐的目标谷浓度为15-30mg∕L o临床问题5：对于难治的复杂性MRSA感染的目标谷浓度是多少？实施概要：尽管临床证据不足，但对于严重和（或）复杂性MRSA感染（如心内膜炎、骨髓炎）的患者，替考拉宁的推荐目标谷浓度为20-40mg∕L o 临床问题6：为了达到目标谷浓度，替考拉宁应如何优化给药方案？实施概要：最初3天以体重给予的负荷剂量和后续的维持剂量给药建议按照下表方案进行。

高效液相色谱法测定血浆中替考拉宁的血药浓度王钦;姚燕【期刊名称】《中国当代医药》【年(卷),期】2022(29)20【摘要】目的建立一种检测血浆中替考拉宁血药浓度的方法。

方法血浆样品经乙腈沉淀蛋白,二氯甲烷萃取等步骤进行前处理,以哌拉西林钠为内标;采用Diamonsil C_(18)色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm);以乙腈-0.01 mol/L磷酸二氢钾溶液(25∶75)(用磷酸溶液调整pH值为2.8)为流动相;柱温为30℃;流速为1.2 ml/min;检测波长为215 nm;进样量为20μl。

结果替考拉宁和内标的峰形良好,保留时间分别约7.3 min和12.5 min;线性回归方程:Y=11.295386X-0.048985(r=0.9987),线性范围:3.125~100.000μg/ml。

批内及批间准确度均在85%~115%范围内;批内及批间相对标准差均小于15%;替考拉宁和内标的提取回收率均在85%~115%范围内。

结论采用高效液相色谱法测定血浆中替考拉宁的血药浓度,方法简便可行,专属性强,重现性好,方法学指标符合《中华人民共和国药典》要求。

【总页数】4页(P10-13)【作者】王钦;姚燕【作者单位】南通大学附属医院药学部;上药控股南通有限公司【正文语种】中文【中图分类】R927【相关文献】1.超高效液相色谱法测定替考拉宁血药浓度2.高效液相色谱法测定替考拉宁血药浓度3.高效液相色谱法测定替考拉宁血药浓度及其在重症感染患者中的应用4.高效液相色谱法测定人血清中替考拉宁的血药浓度及其应用5.反相高效液相色谱法测定人血清中替考拉宁血药浓度因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。