微生物实验室洁净等级要求

生物安全实验室洁净等级划分二、洁净室（区）微生物洁净室（区）微生物可检测沉降菌或者浮游菌。

沉降菌检测是通过自然沉降原理，收集空气中的生物粒子于培养基平皿中，经若干时间，在适宜的条件下让其繁殖到可见的菌落进行计数，以平板培养皿中的菌落数来判定洁净环境内的活微生物数，并以此来评定洁净室（区）的洁净度。

浮游菌的检测是使用计数浓度法，即通过收集悬浮在空气中生物粒子于专门的培养基，经若干时间，在适宜的生长条件下其繁殖到可见的菌落进行计数，从而判定洁净环境内单位体积空气中的活微生物数，以此来评定洁净室（区）的洁净度。

实际检测浮游菌与沉降菌时，先确认洁净室（区）的检测条件能否达到级别要求。

达到要求后，测试人员与检测仪器等按洁净室（区）的进出规定（如穿戴符合环境级别的工作服、紫外照射、仪器外体消三、洁净室（区）风速与换气次数风速与换气次数检测根据为JGJ71-90。

风速、换气次数务必首先进行检测，洁净室的各项效果务必是在设计的风速风量条件下获得的。

以风口截面平均风速乘以风口净截面面积确定风量。

洁净室（区）换气次数以送风量除以洁净室（区）的体积来确定，从而判定洁净室（区）是否符合级别规定，百级洁净室（区）只需以最低风速进行判定。

检测要点见表10。

检测四、洁净室（区）压差、照度、噪声、温度与湿度这些参数指标要紧以JGJ71—90为检测根据，以各检测仪的原理进行检测。

检测要点见表11~14。

检测需注意：1.噪声检测时，检验人员不得发出任何又碍于结果测定的声音（如摩擦声，说话声等）。

2.照度检测时，仪器的采样探头不能有杂物污染，采样时应在照明亮处，不能在物体的阴影处采样，且洁净室（区）照度只测定除特殊局部照明之外的通常照明。

万级微生物洁净室设计生物安全实验室生物安全实验室定义•1生物安全至关重要，生物安全实验室建设更是重中之重，病毒从实验室流出不是没有的，国内外病毒流出实验室的例子数不胜数，有关单位的领导与个人都受到过处理。

微生物无菌操作和无菌室无菌环境检测标准号
一、微生物无菌操作标准
1. 微生物学实验室基本技术准则
该标准规定了微生物学实验室的基本操作技术要求，包括实验器材的清洗、灭菌、操作步骤等方面的要求，是微生物无菌操作的基础标准。

2. 临床微生物实验室安全标准
该标准主要针对临床微生物实验室的安全管理制定，其中包含了微生物样本的采集、运输、处理等方面的安全操作规范，以确保实验人员的安全和实验结果的准确性。

二、无菌室无菌环境检测标准
1. 消毒灭菌效果评价方法总则
该标准规定了消毒灭菌效果的评价方法，包括灭菌效果的检测指标、检测方法、评价标准等方面的要求，是无菌室无菌环境检测的重要依据。

2. 医药工业洁净室（区）悬浮粒子、浮游菌和沉降菌的测试方法
该标准规定了医药工业洁净室（区）中悬浮粒子、浮游菌和沉降菌的测试方法，包括测试仪器、测试环境、测试步骤等方面的要求，是无菌室无菌环境检测的重要标准之一。

3. 医药工业洁净室（区）洁净度级别要求
该标准规定了医药工业洁净室（区）的洁净度级别要求，包括空气洁净度、表面洁净度等方面的要求，是无菌室无菌环境检测的重要标准之一。

4. 医药工业洁净室（区）空气洁净度检测规范
该标准规定了医药工业洁净室（区）中空气洁净度的检测规范，包括检测仪器、检测环境、检测步骤等方面的要求，是无菌室无菌环境检测的重要标准之一。

生物安全实验室洁净等级划分组。

微生物洁净室设计说明洁净度（万级）≥0.5um ≤350000粒/m3 微生物洁净室设计说明微生物浮游菌　万级≤100/m3微生物洁净室设计说明沉降菌　万级≤3个/皿微生物洁净室设计说明照明：实验台300LX，其它生产区域为150LX。

微生物洁净室设计说明室内相邻房间相对静压差≥5pa，相对室外静压≥10pa。

微生物洁净室设计说明室内温度18-26°C，室内相对湿度为45-60%。

微生物洁净室设计说明室内噪音≤60db(A)。

微生物洁净室设计说明电源：AC220V/380V-50HZ B、微生物洁净室设计说明排风口装有高效过滤器，送风口装有高效过滤静压箱，以实现进气洁净，另外更换高效过滤器比较方便。

C、一般室内送排风采用上送下排方式，室内排风口应设在室内被污染风险最高的区域，单侧布置，不得有障碍。

D、回风口以余压阀自动调节室内压力，保持正压洁净状态。

二、微生物洁净室设计说明设计说明：实验室设计基本思路为经济、实用。

净化要求级别为万级。

实验室设计有一更、二更、风淋和缓冲等实验前的准备工作。

采用人流、物流分开原则，以减少实验污染，保证安全。

A、本布置紧凑、合理，满足了实验室操作和空气洁净度等级要求，同时力求科学性与经济性的原则，考虑实验室要求和发展及运行费用最优。

B、洁净室入口处设置风淋室，能有效清除人体所带灰尘，减少洁净室的灰尘量，同时风淋室也起到了气闸的作用，防止不洁净空气由门进入洁净区。

C、洁净室需向室内供给一定比例的新鲜空气，净化过滤后进入各实验室以补偿排风，保证正压及工作人员需要。

D、风量回风次数采用风量调节阀对不同要求洁净级别的区域进行控制，以及压强梯度的调节，保证气流同“清洁”区域流向“污染”区域，洁净室不同级别之间压差为≥5pa，洁净室与室外压差为≥10pa。

E、洁净室设紫处灯杀菌装置。

　F、传递窗为全不锈钢材质，机械联锁控制，内带灭菌装置。

G、观察窗为密闭洁净窗，门为气密洁净门。

分发部门及份数：质量管理部1份目的：规范微生物实验室管理,确保微生物检验结果的准确性。

范围：适用于微生物实验室。

职责：微生物检测人员及检验室负责人对此规程执行负责.内容：1.微生物实验室包括微生物限度检查室、阳性菌接种室及抗生素微生物检定室。

1.1 微生物实验室结构应坚固、严密、防尘、光线明亮,地面应光滑，并应有缓冲间,设双层传递窗传递物件。

1.2 室内温度18～26℃，相对湿度为45～65％，室内必须保持整洁.2.微生物实验室洁净度要求：2.1微生物实验室洁净度应符合相应的医药洁净室设计规范和验收要求。

2.1.1 操作室洁净度应符合洁净度C级要求。

2。

1。

2 操作台洁净度应符合洁净度A级要求。

3.微生物实验室的使用：3。

1 微生物实验室由微生物检验员管理及使用,其他人员须经主管人员批准后方可进入和使用。

3.2 微生物实验室的人员需经过相关的岗位培训,必要时定期进行再培训。

3。

3 微生物实验室操作人员应严格遵守洁净工作区域净化控制规定。

3.3.1 保持个人卫生，不得佩带饰物，不得涂抹化妆品。

3.3。

2 室内应穿戴专用衣帽、口罩及鞋子。

3.3.3 手部应进行2次消毒,宜带无菌手套.3.3。

4 在操作中，操作台面应垫上消毒布巾，以防操作中有滴落液污染台面。

3.3.5 人员进入微生物限度检查室、阳性对照室或抗生素微生物检定室前，在一更脱外衣、换鞋后，进入一更缓冲间洗手，并消毒后，进入二更自上而下依次换上洁净帽、口罩、洁净服、洁净鞋后，进入二更缓冲间，手经再次用消毒液消毒后方可进入微生物限度检查室或阳性对照室，实验操作前须带上无菌手套。

3.4 微生物实验室使用前应确保操作室的洁净程度。

3.4.1 微生物实验室的清洁分为一般清洁及彻底清洁，其具体的清洁部位、方式方法、频率见下表所示:3。

4。

2 微生物实验室常用消毒剂及其配制3.4。

3 使用前30分钟应先开启操作台及操作室的净化和消毒系统，关闭消毒系统后10～15分钟再进入操作室；操作结束后,开启消毒系统30分钟后再关闭消毒系统和净化系统。

国家级实验室资质等级及要求实验室一般分两类有分等级一、洁净实验室。

（就是我们能接触到的一般性实验室多用于食品、药品等行业）按照空气洁净度分为100级、1000级、10000级3个等级。

实验室CNAS认证七个必备要求1 实验室具有明确的法律地位，其活动要符合国家法律法规的要求：( 1) 实验室具有明确的法律地位指的是: 实验室是独立法人实体或者是独立法人实体的一部分且经法人批准成立，法人实体能为实验室开展的活动承担相关的法律责任。

( 2) 其活动要符合国家法律法规的要求指的是: 实验室要在其法人执照许可经营的范围内开展工作。

2 建立了符合认可要求的管理体系，且正式、有效运行6 个月以上( 1) 符合要求指的是实验室的管理体系要满足基本认可准则的要求比如CNAS-CL01，同时还要满足认可规则类文件比如: CNAS-RL02，要求类文件及基本认可准则在专业应用领域的说明的要求，比如校准实验室要满足CNASCL25 等。

( 2)正式运行是指初次建立管理体系的实验室，一般要先进入试运行阶段，通过内审和管理评审，对管理体系进行调整和改进，然后再正式运行。

( 3) 有效运行是指管理体系所涉及的要素都经过运行，且保留有相关记录。

( 4) 管理体系，且正式、有效运行6 个月后，进行覆盖管理体系全范围和全部要素的完整的内审和管理评审。

3 申请的技术能力满足CNAS-RL02 《能力验证规则》的要求只要存在可获得的能力验证，实验室初次申请认可的每个子领域应至少参加过1 次能力验证且获得满意结果( 申请认可之日前3 年内参加的能力验证有效) 。

4 实验室具有开展申请范围内的检测/校准活动所需的足够的资源( 1) 人员: 有满足CNAS 要求的人员，且人员数量、工作经验与实验室的工作量、所开展的活动相匹配。

实验室的主要管理人员和所有从事检测或校准活动的人员要与实验室或其所在法人机构有长期固定的劳动关系，不能在其他同类型实验室中从事同类的检测或校准活动。

微生物实验室标准化操作规程一、目的：本规程旨在为微生物实验室操作提供一个标准化规程；二、适用范围：微生物实验室；三、责任人：实验室、微生物检测员；四、安全注意事项：严格遵循无菌操作，防止微生物污染;操作人员进入微生物实验室应先关掉紫外灯。

五、微生物实验室标准化操作规程：1.微生物实验室应设有无菌操作间和缓冲间，无菌操作间洁净度应达到10 000级，室内温度保持在20～24℃，湿度保持在45～60%，超净台洁净度应达到100级。

2.微生物实验室应保持清洁，严禁堆放杂物，以防污染。

3.严防一切灭菌器材和培养基污染，已污染者应停止使用。

4.微生物实验室应备有工作浓度的消毒液(75％的酒精)。

5.微生物实验室应定期用适宜的消毒液灭菌清洁，以保证微生物实验室的洁净度符合要求。

6.需要带入微生物实验室使用的仪器，器械，平皿等一切物品，均应包扎严密，并应经过适宜的方法灭菌。

7.工作人员进入微生物实验室前，必须用肥皂或消毒液洗手消毒，然后在缓冲间更换专用工作服，鞋，帽子，口罩和手套(用75%的乙醇再次擦拭双手)，方可进入微生物实验室进行操作。

8.微生物实验室使用前必须打开微生物实验室的紫外灯辐照灭菌30分钟以上，并且同时打开超净台进行吹风。

操作完毕，应及时清理微生物实验室，再用紫外灯辐照灭菌30分钟。

9.供试品在检查前，应保持外包装完整，不得开启，以防污染。

检查前，用75%的酒精棉球消毒外表面。

10.每次操作过程中，均应做空白对照，以检查无菌操作的可靠性。

11.吸取菌液时，必须用吸耳球吸取，切勿直接用口接触吸管。

12.接种针每次使用前后，必须通过火焰灼烧灭菌，待冷却后，方可接种培养物。

13.带有菌液的吸管，试管，培养皿于高压蒸汽灭菌锅121℃保持20min后取出清洗。

14.如有菌液洒在桌上或地上，应立即用75%酒精溶液覆在被污染处至少3 0分钟，再做处理。

工作衣帽等受到菌液污染时，应立即脱去，高压蒸汽灭菌后洗涤。

微生物限度检查法标准操作规程一、目的：建立一个微生物限度检查标准操作规程，规范质检员的操作，保证实验的安全性、准确性。

二、范围：适用于微生物限度检查的产品。

三、责任：QC部质检员对本规程实施负责。

四、内容1.检验依据：《中国药典》2010年版二部。

2. 简述2.1.微生物限度检查法系检查非规定灭菌制剂及其原料、辅料受微生物污染程度的方法。

检查项目包括细菌数、霉菌数、酵母菌数及控制菌数检查。

2.2.微生物限度检查应在环境洁净度10000级下的局部洁净度100级的单向流空气区域内进行。

检验全过程必须严格遵守无菌操作，防止再污染，防止污染的措施不得影响供试品中微生物的检出。

单向流空气区域、工作台面及环境应定期按《医药工业洁净室（区）悬浮粒子、浮游菌和沉降菌的测试方法》的现行国家标准进行洁净度验证。

2.3.供试品检查时，如果使用了表面活性剂、中和剂或灭活剂，应证明其有效性及对微生物无毒性。

2.4.除另有规定外，本检查法中细菌及控制菌培养温度为30～35℃；霉菌、酵母菌培养温度为23～28℃2.5.检验结果以1g、1ml、10g、10ml或10cm2为单位报告，特殊品种可以最小包装单位报告。

3.设备、仪器3.1.设备：3.1.1.洁净实验室：微生物限度检查应有单独的洁净实验室，每个洁净实验室应有独立的净化空气系统。

结构和要求：洁净室应采光良好，避免潮湿、远离厕所及污染区。

操作间与缓冲间应有样品传递窗，出入操作间和缓冲间的门不应直对。

洁净实验室内应六面光滑平整，能耐受清洗消毒。

墙壁与地面、天花板连接处无缝隙，不留死角。

操作间不应安装下水道。

洁净实验室内的照明灯应嵌装在天花板内，室内光照应分布均匀，光照度不低于300LX。

●温度、湿度：洁净实验室内温度应控制在18～26℃，相对湿度最好在40％～60％。

●操作间：操作间应安装空气除菌过滤层流装置。

洁净度不应低于10000级，局部洁净度为100级（或放置同等级净化工作台）。