综合性、设计性实验报告
(本科学生)
姓名：毛修林学号：2010021141
专业：化学班级：1班
实验课程名称：《分析化学实验》
指导教师及职称：郭红老师（高级实验师）
开课学期：2011 至2012 学年上学期
上课时间：2011 年12 月 6 日
资源环境学院编印
一、实验设计方案：
实验序号及名称：柠檬中总酸度的测定实验时间：2011年12月6日
小组合作：是小组号：一成员：毛修林、鲁静宁、杨全、
李丽霞
(一)．【实验目的】：
1.学会水果样品的预处理方法。
2.掌握酸碱滴定法测定水果样品中总酸度的原理和方法。
3.掌握强碱滴定弱酸的滴定过程，突跃范围及指示剂的选择原理。
4.柠檬总酸含量的测定。
5.规范记录数据并进行数据处理。
（二）．【主要试剂和仪器】：
1.试剂：KHP基准试剂，固体NaOH，酚酞指示剂，新
鲜柠檬2个。
2.仪器：榨汁机，50.00mL碱式滴定管，25 .00mL移液
管,250 mL锥形瓶3只，电子天平，250 mL容量瓶2只。
(三）．【实验原理】：
柠檬主要含有柠檬酸，其结构式为：
，各级解离常数分别为：K a1=7.4×10-4，K a2=1.7×10-5，K a3=4.0×10-7。由于柠檬酸各相邻解离常数之间相差不大，故不能分步滴定，但由于最后一级解离常数并不小，因此可以用NaOH标准溶液作滴定剂，按多元酸一次进行滴定。反应式为：HOOCCH2C(OH)(COOH)CH2COOH+3NaOH＝NaOOCCH2C(OH)(COONa)CH2COONa+3H2O。反应产物为弱酸弱碱盐，滴定范围在碱性范围内，因此可选用酚酞作指示剂，滴定至溶液由无色变为微红色即达到终点，再根据消耗NaOH标准溶液的体积计算柠檬总酸含量。
计算式为：总算度（g/100g）=(K(CV)NaOH×100)/(V试液×m试样/250)（其中：K=0.064）。
（四）．【实验内容、步骤】：
1.试样预处理：
取柠檬试样去皮、去柄、去核，切成块状，置于搅拌机中捣碎并混匀，称取50g捣碎试样充分抽滤，将滤液在75～80℃水浴中加热30分钟，冷却后再转入容量瓶中加蒸馏水稀释为250mL备用。
2. 配制0.1mol/LNaOH标准溶液250mL: NaOH的质量m=0.1×250/1000×39.997=1.0g KHP的质量m=0.1×10/1000×204.22=0.20g，或
m=0.1×15/1000×204.22=0.30g。
称取0.1 g的氢氧化钠固体于洁净的烧杯中，加蒸馏水溶解后，稀释至250mL。再准确称取
0.20～0.30g的KHP于3只洁净的锥形瓶中，加
15mL蒸馏水溶解后，加入2～3滴酚酞指示剂，用NaOH溶液标定至终点溶液由无色变为微红，计算NaOH溶液的准确浓度。
3.柠檬中总酸度的测定：
准确量取25 mL预处理试液于250mL锥形瓶中，加入2～3滴酚酞指示剂，用NaOH标准溶液标定至终点溶液由无色变为微红，计算柠檬的总酸度，平行滴定3次，把数据记录在表中。
(五)、【参考文献】：
1.华中师范大学、东北师范大学、陕西师范大学、北京师范大学、西南大学、华南师范大学合编的《分析化学》教材第四版。
2武汉大学主编的《分析化学实验》第五版。
https://www.doczj.com/doc/6013880118.html, →“柠檬总算含量的测定”（六）、指导教师对实验设计方案的意见：
指导教师签名：
年月日
二、实验报告：
1、实验目的、设备与材料、理论依据、实验方法步骤见实验设计方案。
2、实验现象、数据或图谱记录及数据处理：注、下表为Excel表：双击即可
表1.KHP 标定NaOH 溶液数据记录
项目序号
12
倾倒前m 瓶+KHP /g 34.891134.6784倾倒后m 瓶+KHP /g
34.678434.452m KHP /g 0.21270.2264消耗NaOH 体/mL 初读数
0.000.00终读数
9.5010.00净用量9.5010.00C NaOH /mol/L 0.1096
0.1109 平均C NaOH /mol/L 0.1095 平均偏差0.0011 标准偏差0.0015 相对标准偏差/% 1.4 姓名
毛修林项目序号
1
2m 柠檬/g 50C NaOH /mol/L 0.1095V 试样/mL 25.0025.00初读数
0.000.00
3、结论：综上所说，柠檬中总酸含量为：3.3533g/100g。
--
4、实验总结：
①、本次实验的成败之处及原因分析：本次实验成功之处在于根据自己设计的实验，很好地完成了操作，将理论和实际操作联系了起来。失败之处在于首先没有通过计算预测所称试样的质量，因此在操作过程中只好尝试滴定之后在做，原因在于不清楚柠檬总酸度的大体值。
②、本实验的关键环节及改进措施：
关键环节：首先，在预处理试样时，要充分捣碎。
其次，试样加热时，控制好温度和时间，充分出去二氧化碳。
再次，标定氢氧化钠的浓度时一定要精确，这样才能减小测定误差。
最后，准确测定柠檬总酸含量，注意结果的表示方法。
改进措施：。取少量试样，用不同浓度的氢氧化钠标准溶液滴定，然后在配制符合标定的氢氧化钠的浓度；或者将配制好的氢氧化钠溶液先进行初步标定，看氢氧化钠的浓度是否符合标定，若不符合，可将其稀释后在标定。
③.对实验的自我评价：。做完本次实验，让我感受很深，一方面，老师让我们自行设计实验，这有助于我们独自解决问题和动手操作的能力；另一方面，使我认识到了，实验不仅仅是理论的书写，更重要的是要将理论与实际操作联系起来，只有通过对理论的认识，再通过实验操作才能充分证明实验结果的准确性及其真实性。
5、指导教师评语及得分：
指导教师签名：
年月日
柠檬酸及生产工艺 一.柠檬酸的简介 1. 柠檬酸的理化性质 柠檬酸（Citric acid），又称枸椽酸，是一种三元羧酸,其学名为3-羟基-3-羧基戊二酸，分子式C6H8O7(无水物)，在自然界中存在于柠檬、柑桔、梅、子、梨、桃、无花果等水果中。柠檬酸具有无毒，无色，无臭特性，一般为半透明结晶或白色粉末，易溶于水、乙醇、乙腈、乙醚等[1]，不溶于苯，微溶于氯仿。相对密度1.542g/cm3，熔点153℃(失水)。柠檬酸结晶形态因结晶条件不同而不同，有无水柠檬酸，也有含结晶水的柠檬酸。在干燥空气中微有风化性，在潮湿空气中有潮解性，175℃以上分解放出水及二氧化碳。柠檬酸是一种较强的有机酸，有3个H＋可以电离；水溶液呈酸性，加热可以分解成多种产物，与酸、碱、甘油等发生反应。 2. 柠檬酸的用途 柠檬酸具有令人愉悦的酸味，入口爽快，无后酸味，安全无毒，被广泛用作食品和饮料的酸味剂；能与二价或三价的阳离子形成络合物，被用作金属加工的鳌合剂和洗净剂（起软化水作用的洗净力补充剂）；还能衍生形成许多衍生物，可用作有机化学工业的原料。因此被广泛用于食品饮料、医药化工、清洗与化装品、有机材料等领域，是目前世界需求量最大的一种有机酸[2]，到目前还没有一种可以取代柠檬酸的酸味剂。 二.生产技术 柠檬酸的生产方法共可分为 3 种: 水果提取法,化学合成法, 生物发酵法三种[17]，目前以发酵法生产柠檬酸为主[18]。发酵法又分为固体发酵法和液体深
层发酵法。固态发酵能耗小但劳动力大，占地面积大，不适合大规模的生产应用。深层通风发酵法采用不锈钢罐体，机械搅拌通风，微生物在液体相中分布均匀，发酵时不生成孢子，全部菌体细胞用于代柠檬酸，发酵速度高，实现了机械化或自动化操作，利于大规模生产。 三.生物发酵法制取柠檬酸 1.本工艺选择的原料及生产方法 本次生产工艺设计以薯干为原料，采用直接粉碎、调浆、液化，进行好气液体深层发酵，钙盐法提取，最后结晶、干燥得到柠檬酸 2.工艺流程 接收糖浆后，根据糖浆组成作适当的处理或配制，配成发酵原料，进行连续杀菌并冷却后，进入发酵罐，加入菌种和净化压缩空气后进行发酵；发酵液经升温、过滤处理后，进入中和罐，用中和处理；再经过过滤洗涤，得到柠檬酸钙固体，送入酸解罐，再添加酸解，并加入活性炭进行脱色；然后，通过带式过滤机过滤、酸解过滤，除去及废炭；酸解过滤液经离子交换处理后，进行蒸发、浓缩，再进行结晶；结晶后，用离心机进行固液分离，对得到的湿柠檬酸晶体进行干燥与筛选，最后得到成品柠檬酸。
实验四柠檬酸含量的测定 实验目的 1．掌握配制和标定NaOH标准溶液的方法。 2．进一步熟练滴定管的操作方法。 3．掌握柠檬酸含量测定的原理和方法。 主要试剂和仪器 仪器：4F滴定管；锥形瓶；容量瓶；移液管（25mL）；烧杯；洗瓶。 试剂：邻苯二甲酸氢钾（基准物质， 100-1250C干燥1小时，然后放入干燥器内冷却后备用）；NaOH固体；柠檬酸试样；0.2%酚酞乙醇溶液。 实验原理 大多数有机酸是固体弱酸，如果有机酸能
溶于水，且解离常数Ka ≥10-7，可称取一定量的试样，溶于水后用NaOH 标准溶液滴定，滴定突跃在弱碱性范围内，常选用酚酞为指示剂，滴定至溶液由无色变为微红色即为终点。根据NaOH 标准溶液的浓度c 和滴定时所消耗的体积V 及称取有机酸的质量，计算有机酸的含量。 n n 1(H A)(H A)100%1000c V M n m ω??=??样 有机酸试样通常有柠檬酸，草酸, 酒石酸, 乙酰水杨酸, 苯甲酸等。滴定产物是强碱弱酸盐,滴定突跃在碱性范围内,可选用酚酞为指示剂。用NaOH 标准溶液滴定至溶液呈粉红色(30s 不褪色)为终点。 实验步骤 1．0.10 mol ·L -1 NaOH 溶液的配制及标定 0.10 mol ·L -1 NaOH 溶液的配制同实验一。 准确称取0.4-0.6 g 邻苯二甲酸氢钾，置
于250 mL 锥形瓶中，加入20-30 mL水，微热使其完全溶解。待溶液冷却后，加入2-3 滴0.2%酚酞指示剂，用待标定的NaOH溶液滴定至溶液呈微红色，半分钟内不褪色，即为终点（如果较长时间微红色慢慢褪去，是由于溶液吸收了空气中的二氧化碳所致），记录所消耗NaOH溶液的体积。平行测定3次。 2.柠檬酸试样含量的测定 用分析天平采用差减法准确称取柠檬酸试样约1.5g，置于小烧杯中，加入适量水溶解，定量转入250mL容量瓶中，用水稀至刻度，摇匀。 用25mL移液管移取上述试液于250mL锥形瓶中，加入酚酞指示剂1～2滴，用NaOH标准溶液滴至溶液呈微红色，保持30秒不褪色，即为终点。记下所消耗NaOH溶液体积，计算柠檬酸质量分数。如此平行测定3次，相关数
柠檬酸及生产工艺 摘要：柠檬酸广泛应用于食品工业、医药工业和化学工业等方面。它可利用糖质原料如土豆、地瓜中的淀粉等，在多种霉菌及黑曲菌的作用下，控制较低的温度和pH值、较高的通气量和糖浓度，用发酵法制得。 关键词：柠檬酸化工产品发酵法 1 产品说明 柠檬酸又名枸橼酸，学名3-羟基-3-羧基戊二酸，分子式C6H8O7为无色、无臭、半透明结晶或白色粉未，易溶于水及酒精。加热可以分解成多种产物，与酸、碱、甘油等发生反应。 柠檬酸主要应用于食品工业，因为柠檬酸有温和爽快的酸味，普遍用于各种饮料、汽水、葡萄酒、糖果、点心、饼干、罐头果汁、乳制品等食品的制造。柠檬酸在化学工业上可作化学分析用试剂，用作实验试剂、色谱分析试剂及生化试剂，用作络合剂，掩蔽剂，配制缓冲溶液。采用柠檬酸或柠檬酸盐类作助洗剂，可改善洗涤产品的性能，可以迅速和沉淀金属离子，防止污染物重新附着在织物上，保持洗涤必要的碱性，使污垢和灰分散和悬浮，提高表面活性剂的性能，是一种优良的鳌合剂。 2 生产原理 2.1 生产方法简介 中国现有柠檬酸生产厂近百家，总年产能力约80万吨，是全球最大的柠檬酸生产国和出口国。目前，柠檬酸生产方法有水果提取法，
化学合成法和生物发酵法三种。水果提取法是指柠檬酸从柠檬、橘子、苹果等柠檬酸含量较高的水果中提取，此法提取的成本较高，不利于工业化生产。化学合成法的原料是丙酮，二氯丙酮或乙烯酮，此法工艺复杂，成本高，安全性低。而发酵法发酵周期短，产率高，节省劳动力，占地面积小，便于实现仪表控制和连续化，现已成为柠檬酸生产的主要方法。 2.2 反应方程式 C12H22011 +H20+302→2C6H8O7+4H2O (蔗糖) （柠檬酸） 3 工艺过程及流程图 3.1工艺过程 3.1.1菌种培养 在4～6波美度的麦芽汁内加入25％至30％的琼脂，然后接入黑曲霉菌种（无茵操作），在30～32℃条件下培养4天左右。这种培养方法称为“斜面培养”。将麸皮和水以1：1的比例掺拌，再加入10％的碳酸钙、0．5％的硫酸铵，拌匀后装入容量为250毫升的三角瓶中，用1．5公斤压力灭菌60分钟。接人斜面培养法培养出的菌种，培养96～120小时后即可使用。 3.1.2原料处理 湿粉渣必须经过压榨脱水，使含水量在60%左右；干粉渣含水量低，应按60％的比例补足水分；结块的粉渣需粉碎成二至四毫米颗粒。然后加入2%碳酸钙、10％至11％的米糠，掺匀后，堆放2小时，
货号：QS2107-25 规格：25管/24样线粒体柠檬酸（Mitochondrion citric acid, MCA）含量 试剂盒说明书 分光光度法 正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定 测定意义： CA是线粒体三羧酸循环的第一个中间产物，由柠檬酸合酶催化乙酰CoA与草酰乙酸合成，其含量是三羧酸循环强度的主要指标之一。 配合测定丙酮酸含量、丙酮酸脱氢酶活性、乙酰CoA含量、柠檬酸合酶活性和CA含量，其中（1）丙酮酸含量和丙酮酸脱氢酶活性变化可以反映糖酵解进行程度，（2）综合分析丙酮酸含量、丙酮酸脱氢酶活性和乙酰CoA含量变化可以反映脂肪酸β-氧化途径提供的乙酰CoA 情况，（3）乙酰CoA含量、柠檬酸合酶活性和CA含量变化可以反映三羧酸循环进行状况。 测定原理： CA在柠檬酸裂解酶的作用下，生成α-酮酸（草酰乙酸）；在弱酸性条件下，α-酮酸进一步与苯肼反应，生成相应的α-酮酸苯腙；α-酮酸苯腙在330nm处有吸收峰，该波长下吸光度的变化程度可反映出CA的含量。 自备实验用品及仪器： 分光光度计、水浴锅、可调式移液枪、1mL石英比色皿、研钵和蒸馏水。 试剂组成和配制： 酸性提取液：液体25mL×1瓶，4℃保存。 碱性提取液：液体25mL×1瓶，4℃保存。 试剂一：液体7.5mL×1瓶，4℃保存。 试剂二：液体2.5mL×1瓶，4℃保存。 试剂三：粉剂×1瓶，4℃保存；临用前加入7.5mL蒸馏水充分溶解待用；用不完的试剂4℃保存； 标准品：液体1mL×1支，10μmol/mL柠檬酸标准液，4℃保存。 线粒体中柠檬酸提取： 称0.05~0.1g样品（建议称0.1g样本），加入0.5mL酸性提取液，冰上充分研磨，600g/min 4℃离心5min；取上清至另一EP管中，11000g/min 4℃离心10min，弃上清（取300μL该上清液和300μL碱性提取液中和后可用于细胞质CA含量测定）；沉淀即线粒体，向沉淀中加入0.5mL酸性提取液，充分悬浮溶解，超声波破碎（功率20％，超声3秒，间隔10秒，重复30次），取此溶液300μL和300μL碱性提取液中和，混匀，置冰上待测（不可用于蛋白质含量测定）。 测定步骤： 1、分光光度计预热30 min以上，调节波长到330nm，蒸馏水调零。 2、试剂一、二和三37℃预热10min。 3、样本测定： 空白管和标准管通常只需要各做一个。 第1页，共2页
国电哈尔滨平南热电 #1机组热力系统化学清洗方案 （柠檬酸清洗） 河北电力长凯工贸有限公司 2013年5月23日
目录 1 清洗目的 2 编制依据 3 系统设备简介 4 清洗范围及清洗工艺 5 清洗系统安装应完成的工作 6 清洗前应具备的条件 7 清洗用药品及水量等估算 8 清洗过程及化学监督 9 清洗废液的处理 10 清洗后的检查与评定 11 组织分工 12 安全注意事项 附清洗系统图
1 清洗目的 除去新建锅炉在轧制、加工过程中形成的高温氧化轧皮以及在存放、运输、安装过程中所产生的腐蚀产物、油污、焊渣和泥沙等污染物，并形成良好的钝化保护膜，保持热力设备内表面清洁，提高热力系统水汽品质，防止受热面因结垢、腐蚀引起事故，保证机组顺利启动和安全、经济运行。 2 编制依据 2.1 《火力发电厂锅炉化学清洗导则》（ DL/T 794?2012）。 2.2 《火电工程启动调试工作规定》(1996 年)。 2.3 《电力建设施工及验收技术规范》火力发电厂锅炉篇（1996 年版）、管道篇（1994 年版）、化学篇（2002 年版）。 2.4 《火力发电厂基本建设工程启动及竣工验收规程(1996 年版)及相关规程》。 2.5 《火电工程调整试运质量检验及评定标准》(1996 年)。 2.6 《电力建设安全工作规程》（第1 部分：火力发电厂2002 年）。 2.7 《电力建设安全健康与环境管理工作规定》（2002 年）。 2.8 设备厂家、设计院等有关资料。 3 系统设备简介 国电哈尔滨平南热电厂2×350MW机组锅炉是哈尔滨锅炉有限责任公司自主研发技术的超临界锅炉，型号HG-1110/25.4-HM2，锅炉是采用单炉膛、一次中间再热、平衡通风、固态排渣、全钢结构的直流锅炉。 锅炉采用全钢结构构架，高强螺栓连接，受热面呈“П”型布置方式，炉膛上部分隔屏、后屏过热器。水平烟道中布置有末级再热器、末级过热器；后烟道有中间隔墙，竖井前部布置水平低温再热器、立式低温再热器，竖井后部布置水平低温过热器、立式低温过热器和省煤器。后烟道下部布置有两台三分仓回转空气预热器。 清洗系统设备部件特征参数见下表。 序号部件名称酸洗容积m3 碱洗容积m3 备注 1 省煤器系统35 / （含连接管） 2 水冷壁系统60 / 3 启动分离器和储水罐20 / 4 临时系统～30 / 5 高压加热器24 /
ODS为反相柱，流动相一般为甲醇、乙腈、水，等极性相对较大的物质，不可以用非极性物质做流动相，梯度洗脱时应从大水相开始，最后过渡到大有机相，实验结束后应用甲醇水或乙腈水冲洗，30-60min，如果实验中用到缓冲盐应用大水相冲洗60min以上，将盐替换出来，最后保存在85-95%的有机相中。 另外，色谱柱使用过程中不能碰撞、弯曲或强烈震动。 当柱子和色谱仪连结时，阀件或管路一定要清洗干净。 大多数反相色谱柱的pH稳定范围是2 ～7.5，硅胶柱pH8时会发生硅胶溶脱，键合型柱p H<2时会发生键合相断裂，流动相尽量不超过色谱柱的p H范围。普通C18柱尽量避免在4 0℃以上的温度下分析。保护柱：最好使用预柱作为保护柱，减少污染物对分析柱的损伤。压力升高通常是需要更换预柱的信号。 安装柱时，请注意流向，接口处不要留有空隙 反相柱（reversed phase column）：填料是非极性的，官能团为烷烃，例如：C18(ODS)、C8、C4等。在反相柱中C18（Octadecylsilyl，简称ODS），即十八烷基硅烷键合硅胶填料，这种填料在反相色谱中发挥着极为重要的作用，它可完成高效液相色谱70～80％的分析任务。由于C18(ODS)是长链烷基键合相，有较高的碳含量和更好的疏水性，对各种类型的生物大分子有更强的适应能力，因此在生物化学分析工作中应用的最为广泛，近年来，为适应氨基酸、小肽等生物分子的分析任务，又发展了CH、C3、C4等短链烷基键合相和大孔硅胶（20～40μm）。 色谱柱的分类 1.根据所有的担体材料分为三种： (1)硅胶型：机械强度高，易制成小颗粒，理论塔板数高。 (2)聚合物型：在广泛的PH值范围内稳定。 (3)羟基磷灰石型：对蛋白质等生物高分子样品有特殊的选择性。 2.根据分离方式分为： (1)正相：SIL--磷脂、NH--糖、维生素E，CN--甾类激素。 (2)反相：ODS(C18)、(C8 CN TMS Pheny1)低分子量化合物。 (3)离子交换等。
浅谈柠檬酸生产物废水处理方法 摘要：中国是世界上最大的柠檬酸生产和出口国，但柠檬酸生产工艺的固有特点使其生产过程中产生大量高浓度废水，对环境造成严重污染。柠檬酸废水污染物成分复杂、浓度高，属高浓度有机废水，并含有一定浓度的硫酸盐，处理难度较大。 关键词：柠檬酸废水处理工艺 1、概述 柠檬酸，又叫第一食用酸味剂，被广泛应用于食品、化工、铸造、电子、纺织、塑料等工业领域。我国是世界上最大的柠檬酸生产国和出口国，出口量在全球柠檬酸贸易总量中的比重超过了60%。但柠檬酸在生产过程中产生大量的高浓度废水又会对环境产生严重污染。柠檬酸生产过程中是以薯干或玉米为原料，经过处理、发酵、提取、精制等工序而制成。 柠檬酸生产过程中产生的废水主要来自发酵和提取工序产生的废液、洗糖水、洗罐水和洗滤布水，主要含有淀粉质、蛋白质、各种有机酸、生产菌体所分泌的酶、发酵残留物、葡萄糖、氨氮和脂肪等有机物，COD 浓度为2000- 3000 mg/L,属高浓度有机废水。 2、柠檬酸废水来源及水质特点 废水的产生主要来自洗滤布水、过滤水、洗柠檬酸钙和离子交换等工段。在柠檬酸液中，大部分是柠檬酸，但还含有一部分粮食粉渣和菌丝体以及其他代谢 CaCO中产物和杂质，经板框压滤后将固性物分离出来，含柠檬酸的上清液则用3 和生成难溶性的柠檬酸钙，从而从发酵液内沉淀出来，实现与其他可溶性杂质的分离。沉淀液再次通过带式压滤机过滤，产生大量的滤除废水，一般成浓糖水。滤出的固性柠檬酸钙用热水清洗，产生洗糖废水，加上过滤工艺产生的洗滤布水，就构成了柠檬酸生产废水处理的废水属于可生化性好的高浓度的有机废水，呈酸 BOD、SS 和PH。其特点有： 性，主要处理指标为COD、 5 (1)废水有机物浓度高，BOD/COD 比值在0.4～0.5 左右，具有良好的生化可降解
实验四 柠檬酸含量的测定 实验目的 1．掌握配制和标定NaOH 标准溶液的方法。 2．进一步熟练滴定管的操作方法。 3．掌握柠檬酸含量测定的原理和方法。 主要试剂和仪器 仪器：4F 滴定管；锥形瓶；容量瓶；移液管（25mL ）；烧杯；洗瓶。 试剂：邻苯二甲酸氢钾（基准物质，100-1250C 干燥1小时，然后放入干燥器内冷却后备用）；NaOH 固体；柠檬酸试样；%酚酞乙醇溶液。 实验原理 大多数有机酸是固体弱酸，如果有机酸能溶于水，且解离常数Ka ≥10-7，可称取一定量的试样，溶于水后用NaOH 标准溶液滴定，滴定突跃在弱碱性范围内，常选用酚酞为指示剂，滴定至溶液由无色变为微红色即为终点。根据NaOH 标准溶液的浓度c 和滴定时所消耗的体积V 及称取有机酸的质量，计算有机酸的含量。 n n 1 (H A) (H A)100% 1000 c V M n m ω??=??样 有机酸试样通常有柠檬酸，草酸, 酒石酸, 乙酰水杨酸, 苯甲酸等。滴定产物是强碱弱酸盐,滴定突跃在碱性范围内,可选用酚酞为指示剂。用NaOH 标准溶液滴定至溶液呈粉红色(30s 不褪色)为终点。 实验步骤 1． mol ·L -1 NaOH 溶液的配制及标定
mol·L-1 NaOH溶液的配制同实验一。 准确称取 g邻苯二甲酸氢钾，置于250 mL 锥形瓶中，加入20-30 mL水，微热使其完全溶解。待溶液冷却后，加入2-3 滴%酚酞指示剂，用待标定的NaOH 溶液滴定至溶液呈微红色，半分钟内不褪色，即为终点（如果较长时间微红色慢慢褪去，是由于溶液吸收了空气中的二氧化碳所致），记录所消耗NaOH溶液的体积。平行测定3次。 2.柠檬酸试样含量的测定 用分析天平采用差减法准确称取柠檬酸试样约，置于小烧杯中，加入适量水溶解，定量转入250mL容量瓶中，用水稀至刻度，摇匀。 用25mL移液管移取上述试液于250mL锥形瓶中，加入酚酞指示剂1～2滴，用NaOH标准溶液滴至溶液呈微红色，保持30秒不褪色，即为终点。记下所消耗NaOH溶液体积，计算柠檬酸质量分数。如此平行测定3次，相关数据填入表2中。 实验数据记录及处理 写出有关公式，将实验数据和计算结果填入表1和2。根据记录的实验数据分别计算出NaOH溶液的准确浓度和柠檬酸的质量分数，并计算三次测定结果的相对标准偏差。对标定结果要求相对标准偏差小于%，对测定结果要求相对标准偏差小于%。 表1 邻苯二甲酸氢钾标定氢氧化钠
柠檬酸综合废水的处理工艺 1 废水水质与水量 某柠檬酸厂生产过程中排放多股废水(浓糖水、洗糖水、洗滤布水等)，主要含有大量的可溶性有机物(糖类、脂肪酸、蛋白质、淀粉等)，其可生化性很好、不含有毒有害物质、呈现黄色。该厂柠檬酸产量为6×104 t/a，其废水水质、水量见表1。 2 工艺流程 柠檬酸废水采用以预处理、厌氧UASB为主体，三级好氧为后处理的工艺流程(见图1)。
2.1 预处理 废水首先通过预处理除去固体物质、降低水温、均化水质。预处理构筑物包括初沉池、调节池、冷却塔，经预处理后废水水温降至37 ℃左右，达到中温厌氧发酵所需的要求，同时它还能保证处理系统运行的稳定性。 2.2 UASB 反应器 建有2座UASB反应器，总体尺寸为40 m×24 m×12.8 m，有效区高度为9.8 m。每座反应器的总体积为6144m3(为目前我国最大的单体单室反应器)，有效体积率也高达76%。实际运行的水力停留时间为32 h，容积负荷为8 kgCOD/(m3·d)，COD去除率为92%～93%，这在我国大型的UASB反应器中也是较高的［1、2］ 2.3 中沉池 由于厌氧出水中带有一定的污泥，而好氧进水要求污泥含量较低，因此在UASB反应器后建一座中沉池用来去除大部分的厌氧污泥。 2.4 曝气沉淀池 柠檬酸废水中含有大量的Ca2+(厌氧出水Ca2+高达700～900 mg/L)，如不去除会对好氧设备及构筑物产生较大影响，曝气沉淀池就是针对去除Ca2+而设计的。在池中Ca2+因适量曝气形成钙盐沉淀或被污泥吸附最终通过排放污泥将其去除。设有两座曝气沉淀池，总尺寸为18 m×9 m×8 m，其对Ca2+的去除率达到30%以上，同时对COD 的去除率为40%～50%。 2.5 一体式氧化沟
货号：MS2101 规格：100管/96样柠檬酸（citric acid, CA）含量测定试剂盒说明书 微量法 注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。 测定意义： CA是生物体内常见的有机酸，是重要的食品风味物质。此外，CA是三羧酸循环第一步反应的产物。 测定原理： 酸性条件下，柠檬酸还原Cr6+生成Cr3+，在545nm处有特征吸收峰；通过测定545nm吸光值的增加，即可计算出样品中柠檬酸含量。 自备实验用品及仪器： 低温离心机、水浴锅、可调式移液枪、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板和蒸馏水。 试剂组成和配置： 试剂一：液体×2瓶，4℃保存。 试剂二：液体×1瓶，4℃保存。 试剂三：液体×1管，－20℃保存。 试剂四：粉剂×1管，室温保存。临用前配制，加入2mL试剂一，充分溶解。 试剂五：液体×1管，4℃避光保存。 标准品：液体×1管，250μmol/L柠檬酸标准液，4℃保存。 样品中柠檬酸提取： 1.液体样品中柠檬酸提取：取0.1mL液体加试剂一0.9mL，充分混匀，11000g，4℃离心10min， 取上清液，待测。 2.组织中柠檬酸提取：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约 0.1g组织，加入1mL试剂一）进行冰浴匀浆。11000g，4℃离心10min，取上清置冰上待测。 3.线粒体中柠檬酸提取：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取 约0.1g组织，加入1mL试剂一）进行冰浴匀浆，600g/min，4℃离心5min；取上清至另一EP管中，11000g，4℃离心10min，弃上清（此上清液可用于细胞质CA含量测定）；向沉淀中加试剂二200μl，以及试剂三2μl，充分悬浮溶解，11000g，4℃离心10min，取上清液，待测。 4.细菌、真菌中：按照细胞数量（104个）：试剂一体积（mL）为500~1000：1的比例（建议 500万细胞加入1mL试剂一），冰浴超声波破碎细胞（功率300w，超声3秒，间隔7秒，总时间3min）；11000g，4℃离心10min，取上清置冰上待测。 测定操作： 1. 分光光度计/酶标仪预热30 min，调节波长到545 nm，蒸馏水调零。 2. 试剂一置于30℃水浴中预热30min。 3. 空白管：取0.5 mL EP管，依次加入20μL蒸馏水，140μL试剂一，20μL试剂四，20μL 试剂五，混匀后室温静置30min，于545nm测定吸光度，记为A空白管。 第1页，共3页
艺工及生产柠檬酸柠檬酸的简介.一 1. 柠檬酸的理化性质 柠檬酸（Citric acid），又称枸椽酸，是一种三元羧酸,其学名为3-羟基-3-羧基戊二酸，分子式C6H8O7(无水物)，在自然界中存在于柠檬、柑桔、梅、李子、梨、桃、无花果等水果中。柠檬酸具有无毒，无色，无臭特性，一般为半透明结晶或白色粉末，易溶于水、乙醇、乙腈、乙醚等[1]，不溶于苯，微溶于氯仿。相对密度cm3，熔点153℃(失水)。柠檬酸结晶形态因结晶条件不同而不同，有无水柠檬酸，也有含结晶水的柠檬酸。在干燥空气中微有风化性，在潮湿空气中有潮解性，175℃以上分解放出水及二氧化碳。柠檬酸是一种较强的有机酸，有3个H＋可以电离；水溶液呈酸性，加热可以分解成多种产物，与酸、碱、甘油等发生反应。 2. 柠檬酸的用途 柠檬酸具有令人愉悦的酸味，入口爽快，无后酸味，安全无毒，被广泛用作食品和饮料的酸味剂；能与二价或三价的阳离子形成络合物，被用作金属加工的鳌合剂和洗净剂（起软化水作用的洗净力补充剂）；还能衍生形成许多衍生物，可用作有机化学工业的原料。因此被广泛用于食品饮料、医药化工、清洗与化装品、 有机材料等领域，是目前世界需求量最大的一种有机酸[2]，到目前还没有一种可以取代柠檬酸的酸味剂。 二.生产技术 柠檬酸的生产方法共可分为3 种: 水果提取法,化学合成法, 生物发酵法
三。发酵法又分为固体发酵法和液体深[18]，目前以发酵法生产柠檬酸为主[17]种 不适合大规模的生产应用。固态发酵能耗小但劳动力大，占地面积大，层发酵法。深层通风发酵法采用不锈钢罐体，机械搅拌通风，微生物在液体相中分布均匀，发酵时不生成孢子，全部菌体细胞用于代谢柠檬酸，发酵速度高，实现了机械化或自动化操作，利于大规模生产。 生物发酵法制取柠檬酸.三 本工艺选择的原料及生产方法1. 本次生产工艺设计以薯干为原料，采用直接粉碎、调浆、液化，进行好气液体深层发酵，钙盐法提取，最后结晶、干燥得到柠檬酸 工艺流程2. 接收糖浆后，根据糖浆组成作适当的处理或配制，配成发酵原料，进行连续杀菌并冷却后，进入发酵罐，加入菌种和净化压缩空气后进行发酵；发酵液经升中和处理；再经过过滤洗涤，得到柠檬酸钙固温、过滤处理后，进入中和罐，用酸解，并加入活性炭进行脱色；然后，通过带式过滤机体，送入酸解罐，再添加浓缩，酸解过滤液经离子交换处理后，及废炭；进行蒸发、过滤、酸解过滤，除去 再进行结晶；结晶后，用离心机进行固液分离，对得到的湿柠檬酸晶体进行干燥与筛选，最后得到成品柠檬酸。 淀粉筛配 酸
柠檬酸生产的废料处理方法与利用 于洋 摘要：中国是世界上最大的柠檬酸生产和出口国，但柠檬酸生产工艺的固有特点使其生产过程中产生大量高浓度废水，对环境造成严重污染。文章对我国柠檬酸废水处理的方法进行了综述，着重介绍了近几年发展起来的几种柠檬酸废水处理的方法如厌氧生物法、好氧生物法、厌氧-好氧组合法、厌氧-兼氧-好氧组合法、光合细菌法、乳状液膜法、微波辐射二氧化锰处理法、Fenton 试剂法等，对不同处理方法的原理和工艺流程做了比较。 关键字：柠檬酸废水；厌氧-兼氧-好氧组合法；光合细菌法；乳状液膜法；微波辐射二氧化锰处理法。 2000年世界柠檬酸总产量约为95万吨，我国的产量约为40碗吨，占世界总产量的40%左右。生产能力已达70万吨/a，是世界上最大的柠檬酸生产国。我国柠檬酸产量的80%左右用于出口，是世界上最大的柠檬酸出口国[1]。柠檬酸作为一种重要的化工原料和食品添加剂被广泛应用，其生产是以薯干或玉米为原料，依次经原料处理、发酵、提取、精制等工序制得产品。废水主要来自发酵和提取工序产生的废中和液、洗糖水、洗罐水和洗滤布水，主要含有淀粉质、蛋白质、各种有机酸、生产菌体所分泌的酶、发酵残留物、葡萄糖、氨氮和脂肪等有机物，COD 浓度为20 000－30 000 mg/L，属高浓度有机废水[2]。针对柠檬酸废水处理，国内外研究、应用的方法以生物法为主，主要包括好氧生物法、厌氧生物法、厌氧－好氧法和光合细菌法等[3]。 1 柠檬酸生产废水的产生与排放 玉米柠檬酸的生产工艺主要包括糖化、发酵、提取和精制等,柠檬酸废水的主要来源为: (1)糖化洗滤布水。在糖化过程中,糖化液必须过滤除去玉米渣,过滤机的滤布需要定期清洗,产生“糖化洗滤布水”,主要含有淀粉、蛋白质、纤维素、玉米脂肪及钠离子等。 (2)二压洗滤布水。糖液在发酵罐中发酵得到发酵液,经压滤机压滤去除菌丝体,成为发酵清液,送到提取车间。压滤机的滤布需要定期清洗,由此而产生“二压洗滤布水”,主要含有柠檬酸、残糖、蛋白质和维生素等。 (3)刷罐水。发酵罐排放发酵液后,在下一次进料前,要用清水将发酵罐洗涤干净,从而产生“刷罐水”,主要含有柠檬酸、残糖、蛋白质、维生素和聚醚等。 (4)浓糖水。发酵清液与CaCO3中和生成柠檬酸钙沉淀,上部母液称为“浓糖水”,含有柠檬酸、柠檬酸钙、残糖、油脂、蛋白质、微量钠盐、聚醚及有机色
柠檬酸的检测 2试验方法本试验所用水均为蒸馏水或离子交换水。 2.1鉴别试验 2.1.1试剂和溶液 2.1.1.1硫酸(GB625); 2.1.1.2硫酸汞:称取5g黄色氧化汞(HG3-1069),先加40ml水,然后缓缓加入20ml硫酸,边加边搅拌,再加40ml水搅拌使其溶解; 2.1.1.3高锰酸钾(GB643):0.1N溶液; 2.1.1.4氢氧化钠(GB629):4.3%(W/V)溶液; 2.1.1.5乙酸酐(GB677); 2.1.1.6吡啶(GB689); 2.1.1.7试样溶液:每毫升含柠檬酸5mg。 2.1.2试验步骤 2.1.2.1取少量试样,用直火炽灼,即缓缓分解,但不发生焦糖臭。 2.1.2.2取试样溶液2ml,用4.3%氢氧化钠溶液调至中性,加入1滴稀硫酸,加热至沸。加1滴0.1N 高锰酸钾溶液,振摇,紫色即消退。再加入1滴硫酸汞溶液,产生白色沉淀。 2.1.2.3取试样5mg,加入吡啶—醋酐(3:1)约5ml,即生成黄色到红色或紫红色的溶液。 2.2含量 2.2.1试剂和溶液 2.2.1.1氢氧化钠标准溶液(GB629):1N溶液,按GB601《标准溶液制备方法》配制和标定; 2.2.1.2酚酞(HGB3039):1%(W/V)溶液,按GB603《制剂及制品制备方法》配制。 2.2.2试验步骤称取1.5g试样(称准至0.0002g),加入50ml中性蒸馏水溶解,加3滴1%酚酞指示液,用1N氢氧化钠标准溶液滴定至粉红色为终点。 2.2.3计算 V·C×0.06404 X1＝————————×100 (1) m(1-0.08566) V·C×0.06404 X2＝———————-×100 (2) m 式中:X1-一水柠檬酸含量(按无水计),%; X2-无水柠檬酸含量,%; V-滴定试样所耗氢氧化钠标准溶液的体积,ml; C-氢氧化钠标准溶液的浓度,mol/L; m-试样质量,g; 0.06404-与1ml氢氧化钠标准溶液[CNaOH=1.000mol/L]相当的以克表示的柠檬酸的质量; 0.08566—C6H8O7.H2O中的H2O的理论含量,即18/210.14=0.08566。 2.3澄清度 2.3.1试剂和溶液 2.3.1.1硝酸(GB628):2M溶液;
柠檬酸废水的处理方法 点击数：77 发布时间：2013年2月1日来源： 【摘要】柠檬酸也称第一食用酸味剂,广泛应用于食品、化工、建筑、皮革、农业、铸造、电子、纺织、石油、摄影、塑料和陶瓷等工业领域G柠檬酸的生产主要有两种方法:一种是从含柠檬.... 柠檬酸也称第一食用酸味剂,广泛应用于食品、化工、建筑、皮革、农业、铸造、电子、纺织、石油、摄影、塑料和陶瓷等工业领域G柠檬酸的生产主要有两种方法:一种是从含柠檬酸的天然果实中榨汁提取,另一种是用发酵法生产G目前,世界上普遍采用发酵法生产柠檬酸G我国柠檬酸工业起步较晚,直到60年代才建立柠檬酸厂,但到90年代已达80多家,目前,柠檬酸年总产量约为200ktG柠檬酸生产会产生大量的高浓度有机废水G本文分析了柠檬酸废水的来源和水质特性,对采用的厌氧生物法、生物接触氧化法、乳状液膜法以及柠檬酸中和废水回用。从柠檬酸发酵废液制取糖化酶制剂等技术进行了综述。 一、柠檬酸生产废水的主要排放源 在我国柠檬酸的生产主要以薯干玉米等为原料以玉米原料生产柠檬酸为例其生产工艺及废水排放源见图 1. 由图1可见玉米柠檬酸的生产工艺主要包括糖化、发酵、提取和精制等。 1、柠檬酸废水的主要来源为糖化洗滤布水在糖化过程中糖化液必须过滤除去玉米渣过滤机的滤布需要定期清洗产生糖化洗滤布水主要含有淀粉蛋白质纤维素玉米脂肪及钠离子等。 2、二压洗滤布水糖液在发酵罐中发酵得到发酵液经压滤机压滤去除菌丝体成为发酵清液送到提取车间压滤机的滤布需要定期清洗由此而产生二压洗滤布水主要含有柠檬酸残糖蛋白质和维生素。 3、刷罐水发酵罐排放发酵液后在下一次进料前要用清水将发酵罐洗涤干净从而产生刷罐水主要含有柠檬酸残糖蛋白质维生素和聚醚等。 4、浓糖水发酵清液与中和生成柠檬酸钙沉淀上部母液称为浓糖水含有柠檬酸柠檬酸钙残糖油脂蛋白质微量钠盐聚醚及有机色素等。 5、洗糖水中和工序得到的固相柠檬酸钙调浆后送入过滤机继续使用的热水进一步洗去残糖及可溶解性杂质抽滤后排放出洗糖水含有柠檬酸柠檬酸钙残糖油脂蛋白质无机钙及有机色素等。 6、沙柱冲洗水精制工序中要把固体物质在沙滤器中除去沙柱需定期冲洗形成沙柱冲洗水含有硫酸钙柠檬酸以及其他结成滤饼的固性物。 7、离子交换淡酸水离子交换淡酸水由个位置产生沙柱炭柱阴柱阳柱离子交换柱再生前将淡酸液排入后柱然后用清水无离子水把残液冲向后柱所产生的废水为离子交换淡酸水含有柠檬酸铁钙氯等离子以及滤层微粒和破碎的阴阳树脂。8、炭柱废碱水酸碱液经沙柱过滤后进入活性炭柱吸附炭柱每周用水溶液再生再生所排放的水为炭柱废碱水含有柠檬酸盐及有机色素等。
货号: QS2101 规格：50管/48样柠檬酸（citric acid, CA）含量测定试剂盒说明书 可见分光光度法 注意：正式测定之前选择 2-3个预期差异大的样本做预测定。 测定意义： CA是生物体内常见的有机酸，是重要的食品风味物质。此外，CA是三羧酸循环第一步反应的产物。 测定原理： 酸性条件下，柠檬酸还原Cr6+生成Cr3+，在545nm处有特征吸收峰；通过测定545nm吸光值的增加，即可计算出样品中柠檬酸含量。 自备实验用品及仪器： 可见分光光度计、低温离心机、水浴锅、可调式移液枪、1mL玻璃比色皿和蒸馏水。 试剂组成和配制： 试剂一：液体×1瓶，4℃保存。 试剂二：液体×1瓶，4℃保存。 试剂三：液体×1支，－20℃保存。 试剂四：粉剂×1瓶，室温保存。临用前配制，加入5mL试剂一，充分溶解。 试剂五：液体×1瓶，4℃避光保存。 标准品：液体×1支，250μmol/L柠檬酸标准液，4℃保存。 样品处理： 1.液体样品：取0.1mL液体加试剂一0.9mL，充分混匀，11000g，4℃离心10min，取上清液 待测。 2.组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加 入1mL试剂一）进行冰浴匀浆。11000g，4℃离心10min，取上清置冰上待测。 3.线粒体：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织， 加入1mL试剂一）进行冰浴匀浆，600g/min，4℃离心5min；取上清至另一EP管中，11000g，4℃离心10min，弃上清（此上清液可用于细胞质CA含量测定）；向沉淀中加试剂二200μl，以及试剂三2μl，充分悬浮溶解，11000g，4℃离心10min，取上清液待测。 4.细菌、真菌中：按照细胞数量（104个）：试剂一体积（mL）为500~1000：1的比例（建议 500万细胞加入1mL试剂一），冰浴超声波破碎细胞（功率300w，超声3秒，间隔7秒，总时间3min）；11000g，4℃离心10min，取上清置冰上待测。 测定操作： 1. 分光光度计预热30 min，调节波长到545 nm，蒸馏水调零。 2. 试剂一置于30℃水浴中预热30min。 3. 空白管：取EP管，依次加入100μL蒸馏水，700μL试剂一，100μL试剂四，100μL试剂五，混匀后室温静置30min，于545nm测定吸光度，记为A空白管。 4. 标准管：取EP管，依次加入100μL标准液，700μL试剂一，100μL试剂四，100μL试剂五，混匀后室温静置30min，于545nm测定吸光度，记为A标准管。 5. 测定管：取EP管，依次加入100μL上清液，700μL试剂一，100μL试剂四，100μL试 第1页，共2页
柠檬酸废水处理案例分析 柠檬酸是一种重要的有机酸，广泛应用于饮料和食品工业、医药工业、化学工业和洗涤剂工业，柠檬酸废水排放量大，成分复杂。今天，我们来了解一下山东某厂柠檬酸废水处理案例分析。 一、项目背景 山东某柠檬酸厂是以薯干为原料，年产量1.5万吨，在生产过程中每天约排废水3,220m3,COD 总量约22-24t/d。 二、水质分析 柠檬酸废水属于高浓度有机废水，根据其生产工艺流程，所排放的废水主要包括三部分，第一部分为柠檬酸钙洗涤过程中产生的废糖水原液和一至三遍洗涤废糖水；第二部分为精提车间离子交换段产生的废水：第三部分全厂产生的其他一些低污染水。 三、废水处理工艺流程 由于柠檬酸生产过程中排放的废水浓度很高，特别是废糖水原液和第一遍洗糖废水，其COD 在2.5万mg/L以上，其他生产废水COD浓度值也在5,000mg/L左右，但废水的可生化性较好（一至三遍废糖洗液BOD与COD比值约为0.46）。因此，整个废水处理工艺宜采用运行稳定，投资和运行成本低的以生化为主的处理工艺。 1.废水处理 针对该柠檬酸厂废水排放情况，在使其处理后，废水达标的前提下，最大可能地回收能源，降低运行成本，对COD值在5,000mg/L左右和5,000mg/L以上的废水拟首先进行厌氧处理（UASB厌氧反应罐)，厌氧处理后的废水与低浓度的废水混合，再进入好氧处理工段，最后再由物化处理（气浮）把关，尽可能的降低水中的污染物和色度，使废水达标排放。 废水处理工艺流程如图1所示。
各工段去除率如表1所示。 2.污泥处理 由于柠檬酸废水中含有大量的有机物，在污水处理过程中会产生大量的污泥，如果污泥不进行适当的处理，势必会造成二次污染，因此工艺中必须考虑污泥的最终处置问题，处理方法如图2所示。
柠檬酸（citric acid,CA）含量测定试剂盒使用说明产品简介： CA又称枸橼酸，广泛存在于各种生物胞质中，是生物体内重要的有机酸。CA也存在于线粒体基质中，是三羧酸循环第一步反应的产物，与脂肪、蛋白质和糖最终转化为二氧化碳密切相关。酸性条件下，柠檬酸可将Cr6+还原成Cr3+，在545nm处有特征吸收峰；通过测定545nm吸光值的增加，即可计算出样品中柠檬酸含量。 试验中所需的仪器和试剂： 可见分光光度计、低温离心机、掌上离心机、可调式移液枪、1ml玻璃比色皿、双蒸水。 产品内容： 试剂一×1瓶，100ml，4℃保存； 试剂二×1瓶，10ml，4℃保存； 试剂三×1支，0.1ml，-20℃保存； 试剂四×2，临用前配制，每支充分溶解于2.5ml试剂一； 试剂五×1瓶，5ml，4℃避光保存； 标准品×1支，临用前将标准品加1ml双蒸水溶解，取出50μl再加双蒸水950μl稀释，即为50μg/ml的标准液。 操作步骤： 一、柠檬酸提取： 1、液体样品中柠檬酸提取：取0.1ml液体加试剂一0.9ml，充分混匀，11000g/min4℃离心10min，取上清待测。 2、组织中柠檬酸提取：称约0.1g组织，加入1ml试剂一，冰上充分研磨，11000g/min 4℃离心10min，取上清待测。
3、线粒体中柠檬酸提取：称约0.1g组织，加入1ml试剂一，冰上充分研磨，600g/min，4℃离心5min，取上清至另一EP管中，11000g/min，4℃离心10min，弃上清，向沉淀中加试剂二200μl，以及试剂三2μl，充分溶解，待测。 二、测定操作表： 按下表操作： 空白管标准管测定管 双蒸水（ml）0.1// 50μg/ml标准液（ml）/0.1/ 提取液（ml）//0.1 试剂一（ml）0.70.70.7 试剂四（ml）0.10.10.1 试剂五（ml）0.10.10.1充分混匀，掌上离心机离心30s左右，然后室温静置30min，空白管调零，于545nm处测定吸光值，20min内完成测定。 柠檬酸含量计算： 1、按液体样品的体积计算（如血液中柠檬酸含量）： 柠檬酸含量（μg/ml）=50（μg/ml）×OD测定管/OD标准管×稀释倍数 2、按鲜重计算（组织柠檬酸含量）： 柠檬酸含量（μg/g FW）=50（μg/ml）×OD测定管/OD标准管÷鲜重（g/ml） 3、按蛋白含量计算 柠檬酸含量（μg/mg prot）=50（μg/ml）×OD测定管/OD标准管÷蛋白含量（mg/ml）注意事项： （1）样品处理等过程均需要在冰上进行；
2000m3/柠檬酸废水处理工程设计 摘要 我国是世界上最大的柠檬酸生产和出口国，但柠檬酸生产工艺的固有特点使其生产过程中产生大量的高浓度废水，成为环境的严重污染源，因此废水治理已成为我国柠檬酸行业的当务之急：介绍了几种柠檬酸废水的处理工艺，如生产饲料酵母法，上流式厌氧污泥床（UASB)工艺，活性污泥法等方法，并对不同方法的原理和工艺流程作了简单的比较。此次设计采用的是UASB来处理柠檬酸污水。 关键词：柠檬酸废水UASB工艺 1000m3 / citric acid wastewater treatment engineering design Abstract China is the largest country of citric acid production and exportation. But the fixed characteristic of citric acid production technology produces amounts of highly concentrated wastewater in the precess, and becomes a serious source of environmental pollution. Therefore , it is crucial and urgent yo treat the wastewater in citric acid industry. Several wastewater treatment technologies of citric acid are presented, such as the feeding stuf yeast production, upflow anaerobic sludge bed process,activated-sludge process and so on. In addition, a simple comparison of the principles and technical flow different technologies is also made.This design is used in UASB to treatment of citric acid wastewater. KEY WARDS: citric acid wastewater , UASB process
综合性、设计性实验报告 (本科学生) 姓名：毛修林学号：2010021141 专业：化学班级：1班 实验课程名称：《分析化学实验》 指导教师及职称：郭红老师（高级实验师） 开课学期：2011 至2012 学年上学期 上课时间：2011 年12 月 6 日 资源环境学院编印
一、实验设计方案： 实验序号及名称：柠檬中总酸度的测定实验时间：2011年12月6日 小组合作：是小组号：一成员：毛修林、鲁静宁、杨全、 李丽霞 (一)．【实验目的】： 1.学会水果样品的预处理方法。 2.掌握酸碱滴定法测定水果样品中总酸度的原理和方法。 3.掌握强碱滴定弱酸的滴定过程，突跃范围及指示剂的选择原理。 4.柠檬总酸含量的测定。 5.规范记录数据并进行数据处理。 （二）．【主要试剂和仪器】： 1.试剂：KHP基准试剂，固体NaOH，酚酞指示剂，新 鲜柠檬2个。 2.仪器：榨汁机，50.00mL碱式滴定管，25 .00mL移液 管,250 mL锥形瓶3只，电子天平，250 mL容量瓶2只。
(三）．【实验原理】： 柠檬主要含有柠檬酸，其结构式为： ，各级解离常数分别为：K a1=7.4×10-4，K a2=1.7×10-5，K a3=4.0×10-7。由于柠檬酸各相邻解离常数之间相差不大，故不能分步滴定，但由于最后一级解离常数并不小，因此可以用NaOH标准溶液作滴定剂，按多元酸一次进行滴定。反应式为：HOOCCH2C(OH)(COOH)CH2COOH+3NaOH＝NaOOCCH2C(OH)(COONa)CH2COONa+3H2O。反应产物为弱酸弱碱盐，滴定范围在碱性范围内，因此可选用酚酞作指示剂，滴定至溶液由无色变为微红色即达到终点，再根据消耗NaOH标准溶液的体积计算柠檬总酸含量。 计算式为：总算度（g/100g）=(K(CV)NaOH×100)/(V试液×m试样/250)（其中：K=0.064）。