2012届高三生物二轮复习专题练习1:基因工程
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基因工程1. (2012浙江T6,6分)天然的玫瑰没有蓝色花,这是由于缺少控制蓝色色素合成的基因B,而开蓝色花的矮牵牛中存在序列已知的基因B。
现用基因工程技术培育蓝玫瑰,下列操作正确的是()A.提取矮牵牛蓝色花的mRNA,经逆转录获得互补的DNA,再扩增基因BB.利用限制性核酸内切酶从开蓝色花矮牵牛的基因文库中获取基因BC.利用DNA聚合酶将基因B与质粒连接后导入玫瑰细胞D.将基因B直接导入大肠杆菌,然后感染并转入玫瑰细胞答案:A解析:提取矮牵牛蓝色花的mRNA,逆转录得到DNA,然后扩增,可获得大量的基因B,A正确;从基因文库中获取目的基因,只要根据目的基因的相关信息和基因文库中的信息进行筛选对比即可,不需要用限制酶进行切割,B错误;目的基因与质粒的连接需要用DNA连接酶,而不是DNA聚合酶,C错误;目的基因需要和运载体连接后形成重组质粒再导入,而且应该用农杆菌进行感染,而不是大肠杆菌,D错误。
2.(2012江苏T13,2分)下列关于转基因生物安全性的叙述,错误的是()A. 种植转基因作物应与传统农业种植区隔离B. 转基因作物被动物食用后,目的基因会转入动物体细胞中C. 种植转基因植物有可能因基因扩散而影响野生植物的遗传多样性D. 转基因植物的目的基因可能转入根际微生物答案:B解析:种植转基因作物应防止对别的植物产生基因污染,所以与传统农业种植区隔离,A正确;动物取食转基因作物后,要经过消化吸收才进入身体,目的基因不可能直接进入动物细胞,B错;转基因植物可能与野生植物发生杂交而出现基因交流,影响野生植物的多样性,C正确;目的基因被微生物摄入细胞内后,可能进入这些微生物中,D正确。
非选择题1. (2012全国新课标T40,分)根据基因工程的有关知识,回答下列问题:(1)限制性内切酶切割DNA分子后产生的片段,其末端类型有和。
(2)投料运载体用EcoRⅠ切割后产生的片段如下:为使运载体与目的基因相连,含有目的基因的DNA除可用EcoRⅠ切割外,还可用另一种限制性内切酶切割,该酶必须具有的特点是。
换兑市暧昧阳光实验学校育种方法专题一、知识整理在高中阶段所介绍的育种方法主要有:诱变育种、杂交育种、多倍体育种、单倍体育种、细胞工程育种(组织培养育种)、基因工程育种(转基因育种)、植物激素育种。
根据“可遗传变异的来源”原理进行育种1、杂交育种(1)原理:(2)方法:连续自交,不断选种,直到后代不发生形状分离为止。
(不同个体间杂交产生后代,然后连续自交,筛选所需纯合子)(3)发生时期:有性生殖的减数分裂第一次分裂后期或四分体时期(4)优点:使同种生物的不同优良性状集中于同一个个体,具有预见性。
(5)缺点:。
(6)举例:矮茎抗锈病小麦2、诱变育种(1)原理:(2)方法:用物理因素(如中子、激光、电离辐射)化学因素(如各种化学药剂)空间诱变育种(用宇宙强辐射、微重力条件)来处理生物。
(3)发生时期:有丝分裂间期或减数分裂第一次分裂间期(4)优点:,加速育种进程,可大幅度改良某些性状,创造人类需要的变异类型。
(5)缺点:有利变异少,须大量处理材料,具有盲目性;诱变的方向和性质不能控制。
(6)举例:青霉素高产菌株、太空椒3、多倍体育种(1)原理:(2)方法:。
(3)优点:可培育出自然界中没有的品种,且培育出的植物器官大,产量高,营养丰富。
(4)缺点:结实率低,发育延迟。
(5)举例:三倍体无子西瓜、八倍体小黑麦4、单倍体育种(1)原理:(2)方法:获得单倍体植株,再人工诱导染色体数目加倍。
(3)优点:。
(4)缺点:技术相当复杂,需与杂交育种结合,其中的花药离体培养过程需要组织培养技术手段的支持,多限于植物。
(5)举例:“京花一号”小麦5、细胞工程育种(植物体细胞杂交)(1)原理:(2)方法:。
(3)优点:。
(4)缺点:技术复杂,难度大;需植物组织培养技术(5)举例:白菜--甘蓝6、基因工程育种(转基因育种)(1)原理:(2)方法:基因操作(提取目的基因→装入载体→导入受体细胞→基因表达→筛选出符合要求的品种)(3)优点:。
2012年高考典型题说题设计(2012全国卷新课标版)40.现代生物科技专题(15分)根据基因工程的有关知识,回答下列问题:·(1)限制性内切酶切割DNA分子后产生的片段,其末端类型有和。
(2)质粒运载体用EcoRⅠ切割后产生的片段如下:为使运载体与目的基因相连,含有目的基因的DNA除可用EcoRⅠ切割外,还可用另一种限制性内切酶切割,该酶必须具有的特点是。
(3)按其来源不同,基因工程中所使用的DNA连接酶有两类,即DNA连接酶和DNA连接酶。
(4)反转录作用的模板是,产物是。
若要在体外获得大量反转录产物,常采用技术。
(5)基因工程中除质粒外,和也可作为运载体。
(6)若用重组质粒转化大肠杆菌,一般情况下,不能直接用未处理的大肠杆菌作为受体细胞,原因是。
一、考点分析本题着重考查基因工程方面的知识。
限制性核酸内切酶可以将DNA分子切成两种类型的末端,平末端和黏性末端。
两种不同酶切割之后便于相连,所产生的黏性末端必须相同。
EcoliDNA连接酶可以连接黏性末端,T4DNA连接酶可以连接两种末端,反转录是以mRNA 为模板逆转录先合成单链DNA,再合成双链DNA,利用PCR技术进行大量扩增。
基因工程中可以选用质粒,噬菌体、动植物病毒做载体。
当受体细胞是细菌时,为了增大导入的成功率,常用Ca+处理,得到感受态细胞,此时细胞壁和细胞膜的通透性增大,容易吸收重组质粒。
二、能力考查考查熟练运用基础概念的能力,能理解所学知识的要点,把握知识间的内在联系,形成知识的网络结构。
三、易错点及解决方法分析1、记忆不清,导致书写上出现错误。
如(3)小问。
2、表述不清楚,如(6)小问。
所以我们在教学中要反复强调基础知识,学生不能只会听,更要会读、会写。
【正确答案】(1)平末端和粘性末端(2)切割产生的DNA 片段末端与EcoRⅠ切割产生的相同(3)T4Ecoli (4)mRNA 单链DNAPCR(聚合酶链式反应)(5)动植物病毒λ噬菌体的衍生物(6)未处理的大肠杆菌吸收质粒(外源DNA)的能力极弱四、变式训练例1(2012福建卷)32.现代生物科技专题肺细胞中的let-7基因表达减弱,癌基因RAS表达增强,会引发肺癌。
高考生物二轮专题复习《病毒》专题复习精练1.培养禽流感病毒时,应选用()A、无菌的牛肉汤B、含有多种无机盐的培养基C、固体培养基D、适宜温度和湿度条件下的活鸡胚【答案】D【分析】病毒不能从外界环境摄取营养物质,都没有酶系统,也没有蛋白质合成系统,只能借助宿主细胞的合成代谢体系完成核酸的复制和蛋白质的合成,最后组装成完整的子代病毒。
【详解】病毒不能从外界环境摄取营养物质,没有酶系统,没有蛋白质合成系统,寄生在宿主细胞中,只能用活细胞——活鸡胚培养病毒。
A、 B、C项错误,D项正确。
2. 下列对病毒繁殖方式的叙述中正确的是()A.通过形成受精卵的方式进行繁殖B.通过细胞分裂的方式进行繁殖C.靠自己遗传物质中的遗传信息,利用自己的蛋白质,制造新的病毒D.靠自己遗传物质中的遗传信息,利用所寄生细胞中的物质,制造新的病毒【答案】D【分析】病毒没有细胞结构,营专性寄生,只能借助宿主细胞的合成代谢体系完成核酸的复制和蛋白质的合成,最后组装成完整的子代病毒。
A、 B、C项错误,D项正确。
3. (2021广东卷·4)对丙型肝炎病毒(RNA病毒)研究有突出贡献的科学家获得了2020年诺贝尔生理学或医学奖。
下列叙述正确的是()A. 在RNA聚合酶的催化下,病毒直接复制其RNAB. 在琼脂糖固体培养基上进行病毒培养,用于研究C. RNA病毒容易发生突变,疫苗的研发较困难D. RNA病毒寄生在活细胞内,离开细胞就死亡【答案】C【分析】病毒只有寄生在活细胞里才能进行生命活动。
一旦离开就会变成结晶体,病毒进入休眠状态,当再次进入生物时,病毒就会从休眠状态中恢复正常生命活动。
【详解】A、在RNA复制酶的催化下,病毒直接复制其RNA,RNA聚合酶在转录时起作用,A错误;B、琼脂糖固体培养基不含细胞,而病毒需要寄生在活细胞中,琼脂糖固体培养基无法培养病毒,B项错误;C、单链RNA病毒容易发生基因突变,疫苗的研发较困难,C正确;D、RNA病毒寄生在活细胞内,离开细胞会处于休眠状态,不一定立即死亡,D错误。
高考生物基因工程专题训练在高考生物中,基因工程是一个重要且具有一定难度的专题。
基因工程作为现代生物技术的核心领域之一,不仅在科学研究中发挥着关键作用,也是高考中的重点考查内容。
基因工程,又称为重组 DNA 技术,是指按照人们的意愿,进行严格的设计,并通过体外 DNA 重组和转基因等技术,赋予生物以新的遗传特性,从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。
基因工程的操作工具,包括限制性核酸内切酶、DNA 连接酶和运载体。
限制性核酸内切酶能够识别特定的核苷酸序列,并在特定的切点上切割 DNA 分子。
DNA 连接酶则能将切割后的 DNA 片段连接起来,形成重组 DNA 分子。
而运载体,常见的有质粒、噬菌体和动植物病毒等,它们能够将目的基因导入受体细胞。
在基因工程的操作步骤中,首先要获取目的基因。
这可以通过从基因文库中获取、利用PCR 技术扩增,或者通过人工合成等方法来实现。
获取目的基因后,需要构建基因表达载体。
这是基因工程的核心步骤,目的是使目的基因在受体细胞中稳定存在并表达。
接下来是将基因表达载体导入受体细胞。
根据受体细胞的不同,导入的方法也有所不同。
例如,将目的基因导入植物细胞可以采用农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法;导入动物细胞常用的方法是显微注射法;而导入微生物细胞则通常用感受态细胞法。
导入受体细胞后,还需要对目的基因进行检测与鉴定。
这包括检测转基因生物染色体的 DNA 上是否插入了目的基因,检测目的基因是否转录出了 mRNA,以及检测目的基因是否翻译成蛋白质等。
基因工程在农业、医药、环境保护等领域都有着广泛的应用。
在农业方面,通过基因工程可以培育出抗虫、抗病、抗逆的农作物新品种,提高农作物的产量和品质。
例如,抗虫棉就是通过基因工程技术将苏云金芽孢杆菌中的抗虫基因导入棉花细胞中培育而成的。
在医药领域,基因工程可以用来生产胰岛素、生长激素、干扰素等药物。
利用基因工程生产的药物具有成本低、效率高、质量好等优点。
2012届高三生物二轮复习专题练习5:基因工程一、选择题1.基因工程中,需使用特定的限制酶切割目的基因和质粒,便于重组和筛选。
已知限制酶Ⅰ的识别序列和切点是,限制酶Ⅱ的识别序列和切点是。
根据图示判断下列操作正确的是( )A.目的基因和质粒均用限制酶Ⅱ切割B.目的基因和质粒均用限制酶Ⅰ切割C.质粒用限制酶Ⅱ切割,目的基因用限制酶Ⅰ切割D.质粒用限制酶Ⅰ切割,目的基因用限制酶Ⅱ切割2.下列关于转基因植物的叙述,正确的是( )A.转入到油菜的抗除草剂基因,可能通过花粉传入环境中B.转抗虫基因的植物,不会导致昆虫群体抗性基因频率增加C.动物的生长激素基因转入植物后不能表达D.如转基因植物的外源基因来源于自然界,则不存在安全性问题3.科学家利用生物技术将人的生长激素基因导入小鼠受精卵的细胞核中,经培育获得一种转基因小鼠,其膀胱上皮细胞可以合成人的生长激素并分泌到尿液中,在医学研究及相关疾病治疗方面都具有重要意义。
下列有关叙述错误的是 ( )A.选择受精卵作为外源基因的受体细胞是因为这种细胞具有全能性B.采用DNA分子杂交技术可检测外源基因在小鼠细胞内是否成功表达C.人的生长激素基因能在小鼠细胞内表达,说明遗传密码在不同种生物中可以通用D.将转基因小鼠体细胞进行核移植(克隆),可以获得多个具有外源基因的后代4.下列获取目的基因的方法中需要模板链的是( )①从基因文库中获取目的基因②利用PCR技术扩增目的基因③反转录法④通过DNA合成仪利用化学方法人工合成A.①②③④B.①②③C.②③④D.②③5.下图是获得抗虫棉的技术流程示意图。
卡那霉素抗性基因(kan R)常作为标记基因,只有含卡那霉素抗性基因的细胞才能在卡那霉素培养基上生长。
下列叙述正确的是( )A.构建重组质粒过程中需要限制性内切酶和DNA连接酶B.愈伤组织的分化产生了不同基因型的植株C.卡那霉素抗性基因(kan R)中有该过程所利用的限制性内切酶的识别位点D.抗虫棉有性生殖后代能保持抗虫性状的稳定遗传6.如图是将人的生长激素基因导入细菌B细胞内制造“工程菌”的示意图。
2012届高三生物二轮复习专题练习1:基因工程一、选择题1.上海医学遗传研究所成功培育出第一头携带人白蛋白基因的转基因牛。
他们还研究出一种可大大提高基因表达水平的新方法,使转基因动物乳汁中的药物蛋白含量提高了30多倍,标志着我国转基因研究向产业化的目标又迈进了一大步。
以下与此有关的叙述中,正确的是( )A.所谓“提高基因表达水平”是指设法使牛的乳腺细胞中含有更多的人白蛋白基因B.可将白蛋白基因导入牛的卵细胞中,通过组织培养形成转基因牛C.人们只在转基因牛的乳汁中才能获取人白蛋白,是因为只在转基因牛的乳腺细胞中才有人白蛋白基因D.运用基因工程技术让牛合成人白蛋白,该技术将导致定向变异2.一对等位基因经某种限制性核酸内切酶切割后形成的DNA片段长度存在差异,凝胶电泳分离酶切后的DNA片段,与探针杂交后可显示出不同的带谱。
根据该特性,就能将它作为标记定位在基因组的某一位置上。
现有一对夫妇生了四个儿女,其中1号性状特殊(如下图),由此可推知这四个儿女的基因型(用D、d表示)正确的是(多选) ( )A.1号为XdXd B.2号为X D YC.3号为Dd D.4号为DD3.目的基因导入受体细胞后,是否可以稳定维持和表达其遗传特性,只有通过鉴定与检测才能知道。
下列属于目的基因检测和鉴定的是( )①检测受体细胞中是否有目的基因②检测受体细胞中是否有致病基因③检测目的基因是否转录出了mRNA④检测目的基因是否翻译成蛋白质A.①②③ B.②③④C.①③④ D.①②④4.下列获取目的基因的方法中需要模板链的是( )①从基因文库中获取目的基因②利用PCR技术扩增目的基因③反转录法④通过DNA 合成仪利用化学方法人工合成A.①②③④B.①②③C.②③④D.②③5.下列关于基因工程应用的叙述,正确的是( )A.基因治疗就是把缺陷基因诱变成正常基因B.基因诊断的基本原理是DNA分子杂交C.一种基因探针能检测水体中的各种病毒D.利用基因工程生产乙肝疫苗时,目的基因存在于人体B淋巴细胞的DNA中6.以下有关蛋白质工程的叙述,不.正确的是( )A.蛋白质工程发展的基础是基因工程B.蛋白质工程的原理是从预期的蛋白质功能出发最终找到脱氧核苷酸序列的过程C.T4溶菌酶中引入二硫键提高了它的热稳定性是蛋白质工程应用的体现D.蛋白质工程只能改造现有的蛋白质而不能制造新的蛋白质7.已知某种限制性内切酶在一线性DNA分子上有3个酶切位点,如上图中箭头所指。
如果该线性DNA分子在3个酶切位点上都被该酶切断,则会产生a、b、c、d四种不同长度的DNA 片段。
现有多个上述线性DNA分子,若在每个DNA分子上至少有1个酶切位点被该酶切断,则从理论上讲,经该酶酶切后,这些线性DNA分子最多能产生长度不同的DNA片段种类数是( )线性DNA分子的酶切示意图A.3 B.4 C.9 D.128.基因工程技术可使大肠杆菌合成人的蛋白质。
下列叙述不正确的是( ) A.常用相同的限制酶处理目的基因和质粒B.DNA连接酶和RNA聚合酶是构建重组质粒必需的工具酶C.可用含抗生素的培养基检测大肠杆菌中是否导入了重组质粒D.导人大肠杆菌的目的基因不一定能成功表达9.在已知某小片段基因碱基序列的情况下,获得该基因的最佳方法是( )A.用mRNA为模板逆转录合成DNAB.以4种脱氧核苷酸为原料人工合成C.将供体DNA片段转入受体细胞中,再进一步筛选D.由蛋白质的氨基酸序列推测mRNA10.下列有关基因工程中限制酶的描述,错误的是( )A.一种限制酶只能识别一种特定的脱氧核苷酸序列B.限制酶的活性受温度影响C.限制酶能识别和切割RNAD.限制酶可从原核生物中提取11.模型是人们为了某种特定目的而对认识的对象所做的一种简化的概括性描述,模型构建是生物学教学、研究和学习的一种重要方法。
对下列两个生物概念模型的理解或者分析错误的组合是 ( )①若图1表示基因工程的操作流程图,则C表示重组质粒,D是受体细胞②若图1表示植物体细胞杂交过程,则A、B在融合前必须经过特殊处理——制备原生质体,形成的C称为杂种细胞,从C到D需要的技术是植物组织培养③若图2中B是核移植技术,C是胚胎移植技术,则形成d的过程体现了高度分化的动物体细胞也具有全能性④若图2中B表示下丘脑,C表示垂体,切断下丘脑与垂体的联系,对胰岛的影响比对甲状腺、肾上腺的影响更大A.①② B.③④ C.①③ D.②④12.下列关于转基因植物的叙述,正确的是( )A.转入到油菜的抗除草剂基因,可能通过花粉传入环境中B.转抗虫基因的植物,不会导致昆虫群体抗性基因频率增加C.动物的生长激素基因转入植物后不能表达D.如转基因植物的外源基因来源于自然界,则不存在安全性问题二、填空题13.苏云金杆菌(Bt)能产生具有杀虫能力的毒素蛋白。
下图是转Bt毒素蛋白基因植物的培育过程示意图( amp r为抗氨苄青霉素基因),据图回答下列问题。
(1)将图中①的DNA用HindⅢ、Bam HⅠ完全酶切后,反应管中有________种DNA片段。
(2)图中②表示HindⅢ与Bam HⅠ酶切、DNA连接酶连接的过程,此过程可获得________种重组质粒;如果换用BstⅠ与BamHⅠ酶切,目的基因与质粒连接后可获得____________种重组质粒。
(3)目的基因插入质粒后,不能影响质粒的________。
(4)图中③的Ti质粒调控合成的vir蛋白,可以协助带有目的基因的T-DNA导入植物细胞,并防止植物细胞中________________________对T-DNA的降解。
(5)已知转基因植物中毒素蛋白只结合某些昆虫肠上皮细胞表面的特异受体,使细胞膜穿孔,肠细胞裂解,昆虫死亡。
而该毒素蛋白对人类的风险相对较小,原因是人类肠上皮细胞________________________________________________________________________。
(6)生产上常将上述转基因作物与非转基因作物混合播种,其目的是降低害虫种群中的________________基因频率的增长速率。
14.2007年度诺贝尔生理学或医学奖授予了美国科学家马里奥·R·卡佩奇和奥利弗·史密西斯、英国科学家马丁·J·埃文斯,奖励他们创造了一套完整的“基因敲除小鼠”的方式。
所谓“基因敲除小鼠”,就是先在小鼠的胚胎干细胞上通过基因重组的办法进行基因修饰,即将胚胎干细胞中的某基因改掉,然后将“修饰”后的胚胎干细胞植入小鼠的早期胚胎,生成嵌合体小鼠。
这种嵌合体小鼠长大后,体内同时存在被“修饰”过的基因和未被“修饰”的基因。
如果某些小鼠的生殖细胞恰巧被“修饰”过,则它们就会生出基因完全被“修饰”过的小鼠。
据所学知识回答下列问题:(1)切割目的基因时,如图所示,该限制酶能识别的碱基序列是________,切点在________之间。
(2)将目的基因转入小鼠胚胎干细胞后,胚胎干细胞能够发育成转基因小鼠,所依据的生物学原理是________。
胚胎干细胞在体外培养的条件下可以增殖而不发生________,但通过体外定向诱导,能培育出人造________。
(3) 从胚胎干细胞转化到获得目的基因纯合子,并配合基因检测,最少需要代。
育种过程是:检测目的基因→________→从中选出目的基因纯合的个体。
(4)基因敲除技术中存在着一个难以克服的缺陷:敲除了某个基因后,可能不会产生容易识别的表型改变,因此就不能获知该基因的功能,请你分析原因:________________________________________________________________________。
0.2012届高三生物二轮复习专题练习1:基因工程答案解析一、选择题1.解析:“提高基因表达水平”是指设法使牛的乳腺细胞中的人白蛋白基因合成出更多的蛋白质。
动物细胞的全能性较难实现,用牛的卵细胞不能培养形成转基因牛。
转基因牛的细胞中都含有人白蛋白基因,人们只在转基因牛的乳汁中才能获取人白蛋白,是因为人白蛋白基因只在转基因牛的乳腺细胞中表达。
答案:D2.CD3.解析:目的基因的检测包括:检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因,方法是用DNA探针与基因组DNA杂交。
检测目的基因是否转录出了mRNA,方法是用基因探针与mRNA杂交。
最后检测目的基因是否翻译成蛋白质,方法是进行抗原-抗体杂交。
答案:C4.D5.解析:基因治疗是把正常基因导入有基因缺陷的细胞中;基因诊断是让正常人的DNA 与病人基因组中分离出的DNA进行杂交来诊断疾病;一种基因探针只能检测水体中的一种病毒;利用基因工程生产乙肝疫苗时的目的基因是乙肝病毒的核酸。
答案:B6.解析:蛋白质工程既能改造现有的蛋白质,也能制造新的蛋白质。
答案:D7.C解析:限制性内切酶具有专一性,据题干信息可知,三个切点都是该酶的切点,若线性DNA 分子在三个切点都被切断,则得a、b、c、d;有一个切点被切断,得ab、cd,或abc、d,或a、bcd;有两个切点被切断,得a、b、cd,若ab、c、d,或a、bc、d。
因此,共得到不同长度的DNA片段有9种。
8.B9.B解析:在已知某小片段基因碱基序列的情况下,获得该基因的最佳方法是以4种脱氧核苷酸为原料,人工合成目的基因;以mRNA为模板逆转录合成DNA是获得真核生物目的基因的常用方法;将供体DNA片段转入受体细胞中,再进一步筛选,检测目的基因是否进入受体细胞。
10.解析:限制酶识别特定DNA序列但不能识别切割RNA序列。
它主要从原核生物中提取,具有酶的特性,受温度的影响。
答案:C11.B12.解析:转入到油菜的抗除草剂基因可能会通过花粉被油菜的近缘物种接受,造成意料之外的抗除草剂基因传播,形成基因污染,有可能会对生态系统的平衡和稳定构成威胁,A项正确;在转入抗虫基因后,不能适应这种抗虫植物的昆虫的死亡率将大大增加,只有存在对应的抗性基因的昆虫才能生存下来,增加了昆虫群体中抗性基因的频率,B项错误;生物界中所有物种基因的转录和翻译用同一套密码子和相同的氨基酸,所以动物的生长激素基因可以在植物体内得到表达,C项错误;即便转基因植物的外源基因来自于自然界,通过转基因工程后,可能会使目标生物出现非正常进化过程中的性状改变,有可能会影响生态系统的稳定性,D项错误。
答案:A二、填空题13.解析:(1)Bam HⅠ在①中有2个切点,HindⅢ在①中有1个切点,故可切出4种DNA片段。
(2)因HindⅢ切出的末端与Bam HⅠ切出的末端不同,则重组的质粒有2种,而Bam HⅠ与BstⅠ酶切点相同,因此只能得到1种重组质粒。
(3)质粒进入宿主细胞必须能正常复制才能为目的基因的扩增提供必要的条件。