骨髓细胞化学染色讲义资料
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骨髓片染色方法一、背景介绍骨髓是人体内产生血液细胞的重要组织,骨髓片染色是一种常用的方法,用于观察和分析骨髓中各种血细胞的形态、数量和分布。
本文将详细介绍常用的骨髓片染色方法及其原理。
二、常用的骨髓片染色方法2.1 Wright-Giemsa染色法Wright-Giemsa染色法是一种常用的骨髓片染色方法,它可以同时染色骨髓中的细胞核和细胞质。
该方法具有简便、快速、可靠的特点,被广泛应用于临床实验室。
2.2 染色原理Wright-Giemsa染色法的染色原理是通过染料与细胞成分之间的化学反应来实现的。
染料将与细胞中的某些结构特异性地结合,从而在显微镜下呈现出不同的颜色。
2.3 染色步骤Wright-Giemsa染色方法的步骤如下: 1. 将待染色的骨髓片固定在玻片上。
2.将固定的骨髓片浸入Wright-Giemsa染料溶液中,染料浓度根据需要进行调整。
3. 在染料中浸泡时间一般为5-10分钟。
4. 取出骨髓片,用水冲洗去掉多余染料。
5. 将骨髓片风干后进行观察。
2.4 显微镜观察完成染色后,将骨髓片放置在显微镜下观察,可以通过调节镜头来观察不同倍数下的细胞形态和细胞质颜色。
不同种类的血细胞在染色后呈现出特定的形态特征和染色性质,通过观察不同细胞的形态和染色特点,可以进行血液病的诊断和分类。
三、骨髓片染色的应用领域3.1 临床诊断骨髓片染色方法在临床诊断中起着重要的作用。
通过观察骨髓中各种血细胞的形态、数量和分布,可以帮助医生判断患者是否有血液病变,并确定病变的类型和程度。
3.2 科学研究除了在临床诊断中的应用,骨髓片染色方法也广泛应用于科学研究。
通过观察和分析骨髓中不同类型血细胞的形态和染色特点,可以深入了解血液系统的发育、功能和病理。
这有助于揭示血液病发生的机制,并为疾病的治疗提供理论依据。
3.3 周期性评估骨髓片染色方法还可以用于周期性评估,跟踪疾病的进展和治疗效果。
通过定期观察和统计骨髓中各种血细胞的数量和形态变化,可以帮助医生及时判断治疗效果,并进行调整。
骨髓细胞化学染色(一) 过氧化酶染色(POX)【结果判断】细胞中出现蓝绿色颗粒为阳性反应。
按颗粒大小和密集程度分为强阳性和弱阳性。
【临床意义】过氧气酶主要存在于粒细胞系统,除早期原始粒细胞外,其后各阶段均呈阳性反应。
单核细胞从幼稚单核细胞起呈弱阳性反应。
淋巴细胞各阶段均为阴性。
故对急性粒细胞白血病和急性淋巴细胞、急性粒细胞与急性单核细胞白血病的鉴别诊断有帮助。
急性淋巴细胞白血病全部阴性,急性单核细胞白血病POX颗粒细小、染色浅淡。
(二) 中性粒细胞碱性磷酸酶染色(NAP)碱性磷酸酶主要存在于成熟中性粒细胞中,其他细胞均阴性。
网状细胞及吞噬细胞的酶活性很强。
【结果判断】染色结果,在细胞浆中出现灰色至棕黑色颗粒者为阳性,阴性与阳性程度可表示为:(一) 胞浆呈淡红色,无颗粒。
(+) 全部胞浆呈淡灰色,无颗粒。
或胞浆中出现棕黑色或黑色颗粒,但不超过整个细胞的1/4。
(十十) 同(+),胞浆呈灰色,或颗粒不超过细胞1/2。
(+十十) 胞浆内充满棕黑色或黑色颗粒,但尚不十分致密,范围可超过整个细胞的3/4。
(十十十十) 颗粒粗大稠密,甚至遮盖细胞核。
以积分值表示:正常人阳性率一般在40%左右,NAP积分值80分左右,以弱阳性为主。
【临床意义】(1) 急性白血病与中性粒细胞类白血病样反应的鉴别。
前者NAP减弱,后者活性明显增强。
(2) 慢性粒细胞性白血病时降低。
阵发性睡眠性血红蛋白尿患者的成熟粒细胞NAP降低。
(3) 急性淋巴细胞白血病、淋巴肉瘤、多发性骨髓瘤、真性红细胞增多症、骨髓硬化症患者NAP明显增强。
(4) 再生障碍性贫血时NAP增强,而其他类型贫血多无变化。
(5) 激素的影响,垂体肾上腺皮质功能亢进,或应用皮质激素时NAP增强。
妊娠亦出现 NAP 增强。
(三) 糖原染色 (PAS)糖原存在于细胞浆内,粒系统细胞自早幼粒细胞开始就可呈现阳性,阳性程度随细胞成熟而增强。
成熟中性分叶粒细胞糖原最为丰富。
单核细胞呈弱阳性。