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丹参的水溶性成分的分离与纯化一、实验目的对丹参药材中脂溶性成分，利用大孔吸附树脂进行脂溶性成分纯化研究二、实验原理丹参是中国传统中药, 是山东省的地道药材。
其主要功效为祛瘀止痛、活血通经、清心除烦。
广泛应用于治疗冠心病、中风、微循环障碍等疾病据文献报道, 丹参中的化学成分主要为脂溶性与水溶性两大类。
其中α脂溶性成分主要有三种: 丹参酮Ⅰ、丹参酮ⅡA 和隐丹参酮, 目前多以丹参酮Ⅱ A 或以丹参酮Ⅰ、二氢丹参酮Ⅰ、丹参酮ⅡA 及隐丹参酮等多种脂溶性成分联合作为含量测定的指标。
大孔吸附树脂具有吸附性和筛选性，其吸附性是由范德华引力或产生氢键的结果，分子筛选性是有其本身多孔性结构所决定的。
通过吸附和分子筛原理，有机化合物根据吸附力的不同及分子量的大小，在大孔吸附树脂上经一定的溶剂洗脱而达到分离、纯化、除杂、浓缩等不同目的。
三、仪器与材料1、丹参药材、乙醚、乙醇、蒸馏水、丹参素对照品、、大孔树脂等2、高效液相色谱仪、电子天平、蒸发仪、水浴锅、锥形瓶等四、实验内容1、提取1.1 丹参脂溶性成分初提物的制备取粉碎的丹参药材50g，90%乙醇水浴回流三次，每次10倍量、1.5h。
合并滤液并回收溶剂。
残渣用氯仿萃取溶解3次，每次50ml，合并氯仿液，回收氯仿，残渣用适量乙醇溶解，备用2、大孔吸附树脂使用2.1三种不同的大孔吸附树脂对丹参素的静态吸附量考察精密称取大孔树脂各1g，置100ml烧杯中，精密加入上样溶液20ml，每隔5min振摇10s，持续120min，然后静置过夜，使其达到饱和吸附，过滤取续滤液，通过0.45μm的微孔滤膜，上高效液相色谱仪测定丹参素的含量，按公式计算树脂的饱和吸附量静态饱和吸附量=[（初始浓度—吸附后浓度）×吸附液体积]／树脂量（mg.g-1）。
2.2 各种大孔树脂对丹参总黄酮的静态吸附-洗脱性能将2.1中过滤的大孔树脂精密加入70%乙醇20ml，时时振摇，持续120min，静置过夜，过滤取续滤液，通过0.45μm的微孔滤膜，用高效液相色谱法计算丹参素的含量静态洗脱率=（洗脱剂浓度×洗脱剂体积）／饱和吸附量×100%。
多指标综合评价优选丹参提取工艺
丹参提取工艺是指从丹参植物中提取有效成分的过程，其主要目的是
提高丹参有效成分的提取率和纯度，以获得高质量的丹参提取物。
在选择
丹参提取工艺时，需要进行多指标综合评价，以确定最优的工艺方案。
1.提取率：提取率是评价提取工艺效果优劣的重要指标，指提取物中
有效成分（如丹参酮、丹酚酸等）的含量与原料中相应成分的含量的比值。
提取率越高，说明工艺效果越好。
2.纯度：纯度是指丹参提取物中有效成分的含量与其他杂质的含量之
间的比值。
如果提取物中的有效成分含量高，而杂质含量低，则纯度高。
3.气味和颜色：丹参提取物的气味和颜色是直接影响其品质的重要因素。
优质的丹参提取物应该具有浓郁的丹参特有气味和深红的颜色。
4.工艺条件：工艺条件包括提取温度、提取时间、溶剂种类和用量等
因素。
工艺条件的选择应考虑丹参提取率和纯度的影响，同时要考虑工艺
操作的简便性和经济性。
在进行多指标综合评价时，可以根据以上指标对不同的工艺方案进行
打分。
比如，对于提取率和纯度这两个关键指标，可以根据实验数据进行
计算，得到不同方案的得分，并进行比较。
对于气味和颜色这两个主观指标，可以邀请专业人士进行评价和打分。
最后，根据所有指标的综合评价结果，选择得分最高的工艺方案作为
最优方案。
同时，还可以对最优方案进行经济性评估，考虑成本和效益的
关系，以确定最终的丹参提取工艺方案。
综上所述，通过多指标综合评价优选丹参提取工艺，可以全面考虑工艺效果、提取物品质和经济性等因素，以选择最佳的工艺方案。
丹参中脂溶性成分的提取方法的探究丹参中脂溶性成分的提取方法的探讨【摘要】目的丹参中脂溶性成分丹参酮ⅡA是丹参制剂中重要的活性成分,也是成品的主要检测指标,通过对丹参酮ⅡA提取方法的研究,对丹参制剂提取工艺的优化具有重要的现实意义。
方法根据当前丹参制剂的生产工艺出发,在提取时间、溶媒倍数、提取温度、溶媒浓度等方面进行筛选试验,利用高效液相色谱法进行含量测定。
结果丹参的最佳提取重要条件为,4倍量90%的乙醇,70℃温浸小时,通过实验证明采用以上所述的丹参提取方法,干燥过程同样采用低温减压浓缩的丹参提取物中丹参酮ⅡA转移率超过50%。
结论本方法简便,快速,利于有效成分保留,适用于丹参中脂溶性成分的提取,对于丹参制剂的生产工艺优化有指导意义。
【关键词】丹参酮ⅡA 提取方法工艺优化丹参为唇形科鼠尾草,属多年生草本植物丹参的干燥根,其活性成分可分为脂溶性成分和水溶性酚酸成分,前者主要包括丹参酮ⅡA、丹参酮I和隐丹参酮等;后者主要包括丹参素、原儿茶醛、咖啡酸、丹酚酸B和丹酚酸C等。
本文以脂溶性成分丹参酮ⅡA为指标对提取方法进行研究。
丹参酮ⅡA在临床上具有很好的药理活性,有抗凝血、促纤溶作用。
我们以丹参酮ⅡA这一活性成分为指标,从提取时间、提取溶媒倍数、提取温度、提取溶媒浓度等方面进行试验,以筛选提取条件,为提取工艺优化奠定基础。
1 药品与试剂丹参(蓟县野生药材),丹参酮ⅡA对照品(购于中国药品生物制品检定所),甲醇(分析纯)、乙醇(药用级)、蒸馏水。
2 方法色谱条件的确定高效液相色谱仪:SP-8100。
色谱柱:YMC C18分析柱(×150mm)。
流动相:甲醇-水(75∶25)。
检测波长:270nm。
流速:1ml/min。
对照品溶液的制备精密称取丹参酮ⅡA对照品,用分析甲醇配制成浓度为/ml的对照品溶液。
3 试验及结果试验用丹参药材中丹参酮ⅡA的含量测定取丹参粉末(过三号筛),精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加甲醇50ml,密塞,称定重量,加热回流1小时,放冷,密塞,再称定重量,用甲醇补足重量,摇匀,滤过,取续滤液,即得。
丹参最主要含有的成分为脂溶性的二萜类成分和水溶性酚酸类成分，所以在设计丹参提取分离时，主要考虑的是这两类物质的提取过程。
其中脂溶性成分以丹参酮ⅡA为主要有效成分，其含量也相对较高；而水溶性成分以丹参素、丹参酚酸类、原儿茶醛为主要成分，原儿茶醛虽为活性成分，但其在丹参中含量很低。
且水溶性成分对于热的敏感性强，脂溶性成分有升华性，在长时间热处理过程中容易成分损失。
1、提取已知丹参中成分热不稳定，采用梯度渗漉法对脂溶性成分和水溶性成分进行提取。
先以95%乙醇对丹参药材进行浸泡溶胀一段时间后，再用95%乙醇进行渗漉，采用正交法选用合适的渗漉速率，注意低温操作。
滤去渗漉液A（主要为提取丹参酮等脂溶性成分），再用8倍量水对药渣进行渗漉，滤去渗漉液B，提取水溶性成分。
两份渗漉液均需要采用减压浓缩的方式进行适当浓缩，温度不宜过高，时间也不宜过长。
2、分离对渗漉液A可以采用水沉法进行精制。
因为丹参酮ⅡA等二萜醌类成分具有共轭体系，刷型作用力强，也可以选用合适的大孔树脂吸附进行分离，再使用95%的乙醇进行解吸附。
对渗漉液B可以采用醇沉法，查资料可以加醇使药液含醇量达50%，能减少成分的损失，起到最好的分离效果。
另外，由于水溶性酚酸成分中，丹酚酸具多个酚羟基、且分子量较大，可以采用大孔吸附树脂和聚酰胺树脂吸附的方法进行分离；而丹参素与原儿茶醛分子量小于丹酚酸类成分，分子间作用力相对于丹酚酸类较小，因此与水的亲和力更大，更适合于阴离子交换树脂进行分离。
若要对丹酚酸类成分过大孔树脂进行分离，可采用先用水洗脱，再用醇洗脱的方式进行分离纯化。
3、超临界流体萃取法超临界流体萃取法是现行方便、有效提取丹参中有效成分的方法，同样在条件的选择上需要控制温度、压力、时间等因素，另外可以加入适当的夹带剂来提高提取效率。
如脂溶性成分可以加入高浓度的乙醇来增加脂溶性成分的溶解性，而水溶性成分也可以选用合适的夹带剂，有文献提出可以选用10%醇和非离子表面活性如吐温的混合体系溶液进行提取。
丹参提取工艺研究丹参由脂溶性成分和水溶性成分组成，其酯溶性成分丹参酮ⅡA是治疗心脑血管疾病的有效成分。
本方案采用乙醇回流提取，通过正交实验（将丹参用不同提取时间、浓度乙醇溶液、不同溶媒量及提取次数各设置3个水平）选择最佳乙醇提取工艺条件，并以丹参酮ⅡA含量作为考察指标。
通过实验最终得：以12倍量85%的乙醇回流提取3次，1.5 h/次，丹参酮ⅡA的提取率最高。
标签：丹参；丹参酮ⅡA；提取工艺；正交试验1丹参提取方法丹参提取方法有：①水煎煮法，②乙醇回流法，③乙醇回流-水煎煮提取法，④超临界提取法，⑤超声提取法。
2丹参研究的现实意义近年来管疾病的治疗取得迅猛发展，溶栓药物和介入治疗等大大改善了冠心病患者的预后。
随着人们生活水平提高，人们越来越关注自身的健康问题，天然药物及其保健品的需求也越来越大，为了更好地发挥丹参的药用价值，本文采用乙醇回流提取法，运用正交设计法，考察丹参醇提的影响因素，并以丹参酮ⅡA 作为参考指标，筛选最佳提取工艺条件。
2.1实验材料2.1.1仪器，见表1。
2.1.2试剂及药材乙醇（95%）（分析纯，杭州长征化工厂）；甲醇（分析醇，杭州双林化工试剂厂）；甲醇（色谱纯）。
丹参药材（20140108，亳州市安利达药业有限公司）。
2.2实验步骤2.2.1正交试验的设计2.2.1.1正交试验因素水平表根据影响乙醇回流提取的因素：以乙醇浓度、提取时间、溶媒量、提取次数为因素，每个因素拟定3个水平，因素水平表，见表2。
2.2.1.2 L934正交试验将丹参药材粉碎为粗粉，平行精密称取9份药材，每份10 g，按L934正交试验表安排实验，以丹参酮ⅡA的含量为指标。
将丹参药材粗粉，置蒸馏烧瓶中，精密加入规定量乙醇，称重，加热回流，放冷，再称定重量，用乙醇补足减失重量，摇匀，合并提取液，滤过，续滤液，即得。
2.2.2含量测定2.2.2.1色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-水（75-25）为流动相；检测波长270 nm。
引言丹参是唇形科鼠尾草植物丹参( Salviamiltiorrhiza Bge.) 的干燥根和根茎，是临床最常用的活血化瘀中药。
丹参的脂溶性成分丹参酮具有抑菌、抗炎、抗凝血等功效。
丹参的主要有效成分包括水溶性的酚酸类化合物以及脂溶性的二萜醌类化合物，丹参酮ⅡA是丹参的脂溶性成分。
目前，丹参酮ⅡA的分离方法主要有柱层析切割配合真空液相层析法、高速逆流色谱等技术。
这些分离纯化丹参酮的技术虽然可分离出高纯度的丹参酮，但存在回收率低，一次分离得到产品的量少，不可连续分离纯化操作生产等缺点。
大孔树脂是一种不溶于酸、碱及各种有机溶剂的有机高分子聚合物，常用的为苯乙烯型、丙烯腈型及丙烯酸酯型等。
按其表面性质可分为非极性、中极性、极性和强极性几种类型。
具有成本低、吸附性强、吸附容量大、解吸容易、机械强度好、可反复使用和流体阻力小等优点，在植物天然产物的分离中得到了广泛的应用。
本文应用大孔树脂法考察丹参酮ⅡA的分离纯化方法。
1 实验部分1.1 材料不同型号树脂：HPD100、HPD200、HPD400、HPD600、D101、AB-8、SP825，河北沧州宝恩化工有限公司，甲醇为色谱纯，乙醇、NaOH为分析纯，水为娃哈哈纯净水，丹参醇提液，丹参酮ⅡA对照品等。
1.2 仪器岛津LC-20AT高效液相色谱仪，分析天平。
1.3 含量测定方法1.3.1 色谱条件以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇：水（75:25）为流动相；检测波长为270nm，柱温：30℃流速：1.0ml/min。
理论板数按丹参酮ⅡA峰计算应不低于2000。
1.3.2 对照品溶液的制备取丹参酮ⅡA对照品适量，精密称定，置棕色量瓶中，加甲醇制成每1mL含丹参酮ⅡA 10µg的溶液，即得。
1.4 方法和结果1.4.1树脂型号的选择称取不同型号的树脂各10g，用100ml乙醇浸泡24小时，上柱，然后用水洗至无醇味，用 5% NaOH 约400ml冲洗，然后用水洗至中性，最后用乙醇和水反复冲洗，直至醇洗液加水不变浑浊为止，然后用水冲洗至无醇味，流速为1.0ml/min，备用。
