变形杆菌检验

变形杆菌生化鉴定条使用说明书（HB I G05）
1、实验准备：从包装盒中取出一条生化鉴定条，打开盖子，用打孔器开孔或直接撕下封口
膜。

如果染菌或变色，则不能使用，重新拿一条。

注：打孔器用75%酒精擦拭后使
用。

2、接种方法：
从选择性琼脂平板（SS琼脂、EMB琼脂）上至少选取2-3个典型菌落或可疑菌落，接种于营养琼脂平板上纯化培养（36C±1C培养24h±2h）。

取纯化后2-3个单菌落制成菌悬液，接种三糖铁琼脂斜面和生化鉴定条各孔，本生化鉴定条中不含三糖铁琼脂斜面；请参照WS/T9-1996标准的判断结果。

菌悬液法：取一内盛2ml无菌水或无菌生理盐水试管，用接种环挑取纯化后2-3个单菌落至无菌水中仔细研磨制成0. 5麦氏浊度的均一细菌悬液，每孔加入100ul 菌悬液。

其中鸟氨酸和氨
基酸对照需加灭菌石蜡覆盖液面。

3、接种完后盖上盖子，放入底托中，放置36±1T培养。

4、培养结束后，放在记录卡上观察。

变形杆菌类及其检验变形杆菌类为有动力的革兰氏阴性杆菌，包括变形杆菌属、普罗菲登属和摩根氏菌属。

变形杆菌属分为普通变形杆菌(P．vulgaris)、奇异变形菌(P．mirabilis)、产粘液变形杆菌(P．myxofaciens．)和潘氏变形杆菌(P．pennea)。

普罗菲登斯菌属共有5个种。

摩根氏菌属只有一个种，即摩根氏菌(Morganella morganii)。

变形杆菌类是腐物寄生菌，自然界中广泛分布，水、土壤、腐败有机物中以及动物肠中都有存在，是一种条件致病菌，这种活菌在肉品上大量繁殖，被人摄食后进人人体，在条件适合时，就有可能引起食物中毒。

所以只从样品中检出变形杆菌并无实际意义，只有变形杆菌类严重污染的食品被人摄食后，才能引起食物中毒。

检验变形杆菌引起的食物中毒时，不仅要分离鉴定变形杆菌而且还要检验变形杆菌在每克食品中的最近似数。

4起中毒事件概况1.1 2003年4月18日，康乐县苏集乡古洞沟村一村民在家举行宗教活动，参加活动的66人就餐后发生食物中毒。

经及时救治，未发生死亡。

对所食鸡肉和烩菜进行检验,检出变形杆菌；1.2 2003年4月18日，广河县阿里麻土乡古城村一村民在家举行宗教活动，参加活动的90人就餐后有62人发生食物中毒。

经及时救治，未发生死亡。

对所食羊肉进行检验，检出变形杆菌；1.3 2003年5月16日，康乐县白王乡老树村一村民宰杀病畜分食，30人发生食物中毒，未发生死亡。

经采样检验，检出变形杆菌；1.4 2003年5月26日，和政县梁家寺乡宋家沟村一清真寺举行宗教活动，参加活动者集体就餐，115人发生食物中毒，无死亡。

经采样检验，检出变形杆菌。

一、生物学特性1．形态与染色特性变形杆菌是一类大小、形态不一的细菌，有时球形，有时丝状，呈明显的多形性，周身鞭毛，能运动，无芽孢荚膜，革兰氏阴性。

2．培养特性1）需氧及兼性厌氧。

2）对营养要求不高，在普通琼脂上生长良好。

3）在固体培养基上普通和奇异变形杆菌常扩散生长，形成一层波纹薄膜，叫做迁徙生长现象。

变形杆菌分离鉴定标准(一)变形杆菌分离鉴定标准引言变形杆菌是一类常见的细菌，其形状呈现为弯曲状或螺旋状，广泛存在于环境中。

由于其特殊的形态和生理特征，变形杆菌在科学研究和工业应用中具有重要作用。

为了准确分离和鉴定变形杆菌，一套规范的实验方法和标准被广泛应用。

变形杆菌分离鉴定标准变形杆菌的分离鉴定可以按照以下步骤进行：1.样品采集：从目标环境中采集样品，如土壤、水体、动物肠道等。

2.预处理：对采集的样品进行预处理，以去除干扰物质并提取变形杆菌。

–用适当的缓冲液将样品悬浮并混合均匀。

–利用离心等方法将悬浮液离心，以获得细菌沉淀。

–通过适当的水洗和稀释方法，去除干扰物质并浓缩变形杆菌。

3.培养：将预处理后的样品接种到合适的培养基上进行培养。

–选用含有适当营养物质的培养基，如Czapek培养基。

–调整pH值和温度，提供适宜的培养环境。

–培养时间根据需要进行调整。

4.纯化：从培养液中筛选出单一的变形杆菌菌落。

–用不同浓度的培养基进行稀释，以筛选出单一菌落。

–利用传代培养的方法，使菌落变纯。

5.形态观察：观察和描述变形杆菌的形态特征。

–使用显微镜对菌落进行观察。

–描述变形杆菌的长度、形状、弯曲度等特征。

6.生理特征鉴定：通过多种生理特征判断菌株的身份。

–进行生化试验，如碳水化合物利用能力、蛋白质水解能力等。

–进行氧需求试验，如需氧菌或耐气菌。

–进行其它适合的鉴定试验。

7.分子鉴定：使用分子生物学方法进行鉴定。

–提取变形杆菌的DNA。

–利用PCR扩增目标基因片段。

–进行测序和比对，鉴定菌株的身份。

结论变形杆菌的分离鉴定是进行科学研究和应用的重要步骤。

遵循规范的实验方法和鉴定标准，可以准确鉴定变形杆菌并获取可靠的实验结果。

各个步骤的严格操作和结果的准确判断是保证实验成功的关键。

通过不断的实践和改进，我们可以更好地理解和利用变形杆菌在不同领域中的作用。

变形杆菌引起的食物中毒的检验分析【中图分类号】r155.3 【文献标识码】a 【文章编号】1672-3783（2013）03-0273-01【摘要】目的：了解庄河市发生的食物中毒事件中变形杆菌检测分析的流程，为变形杆菌食物中毒的实验室的检测分析与诊断提供参考。

方法：对庄河市2003-2012年间的18起食物中毒资料进行比较分析综合。

结果：引起食物中毒的 13起病原菌为普通变形杆菌， 5起病原菌为奇异变形杆菌，初步确定了引起食物中毒的变形杆菌的检验流程及判定标准。

结论：变形杆菌为引起食物中毒的常见条件致病菌，确定变形杆菌引起的食物中毒必须有完整的实验室的检验依据。

【关键词】：食物中毒检验程序普通变形杆菌/奇异变形杆菌在我国细菌性食物中毒占食物中毒总数的 2 /3 ，其中变形杆菌引起的食物中毒近年来较为常见。

由于变形杆菌食物中毒缺乏典型症状，给食物中毒的正确判定带来了一定的困难，因而实验室的检测在变形杆菌食物中毒的判定中起到了关键作用，也直接影响着变形杆菌食物中毒应急处理的工作质量。

本文就庄河市 2003年-2012年所发生的18起变形杆菌食物中毒事件，对食物中毒病原微生物之一变形杆菌的检测进行分析探讨，从而为变形杆菌食物中毒提供检测参考。

1 资料与方法来源于庄河市 2003年-2012年食物中毒资料。

1.1 流行病学资料2003年-2012年间共发生了18起变形杆菌引起的食物中毒，共涉及进食人数为 103人，发病 75人。

症状以腹痛、腹泻为主（占发病人数 80 % 以上），其次是恶心、呕吐（占40%以上），发热只占18.4%。

潜伏期最短2.5 h ，最长 20 h ，平均为 8-13 h。

发生季节 1-3月1起， 5-8月15起， 10-12月2起。

1.2 实验室检测程序1.2.1 标本采集 18起食物中毒共计采集凉菜间食物：熟制肉类36份，豆淀粉类熟制品 16份，凉拌菜 9份；冰箱内食物：熟制肉类 45份，豆淀粉类熟制品 13份；熟食砧板、刀具涂抹拭子 29份；患者肛拭子或粪便 34份，患者呕吐物 19份，厨工肛拭子 33份。

奇异变形杆菌鉴定流程一、标本采集。

这就像是破案找线索，咱得先有东西才能开始鉴定呀。

那这个标本可以从好多地方采呢。

比如说尿液，要是有人怀疑泌尿系统感染可能是奇异变形杆菌捣的鬼，那取尿液就很关键啦。

还有伤口分泌物，如果是伤口感染的话，从那儿取分泌物就像从坏蛋的作案现场找证据一样。

采集的时候可得小心哦，就像呵护小宝贝似的，保证标本不受污染，不然就像线索被弄乱了，后面的鉴定可就麻烦啦。

二、初步观察。

把标本拿到手之后，咱先大概看看。

就像看一个新朋友，先有个第一印象。

这个时候是看它的形态呢。

奇异变形杆菌在显微镜下是有它自己的小模样的。

它是革兰阴性杆菌，这就好比它穿着一件特定款式的衣服，是咱们识别它的一个重要特征。

而且它的形态还会变来变去，可调皮了，有时候是单个的杆菌，有时候又像排着队的小士兵一样，呈现出丝状。

三、培养。

这就像给这个小细菌一个小房子，让它在里面生长繁殖，这样我们就能更清楚地认识它啦。

咱们会把标本放到合适的培养基里，就像给小种子找了一块肥沃的土地。

奇异变形杆菌比较喜欢在那种营养丰富的培养基里生长。

它在培养基上生长的时候也有自己的特点呢。

它会长出那种迁徙性的菌落，就像小细菌在培养基上画了一幅抽象画，从一个点慢慢向外蔓延，可有意思了。

而且啊，它还有一股特殊的气味，有点像那种刺鼻的味道，就好像它在说“我在这儿呢，快来找我呀”。

四、生化鉴定。

这可是鉴定奇异变形杆菌的重头戏哦。

就像是一场小细菌的考试，看看它到底是不是我们要找的奇异变形杆菌。

它有好多特殊的生化反应呢。

比如说它能分解尿素，就像它有一个特殊的技能一样。

还有啊，它对某些糖的分解能力也不一样，通过检测这些，就像看它在不同学科上的成绩，我们就能越来越确定它是不是奇异变形杆菌啦。

这一步就像是在一堆嫌疑人里，根据他们不同的表现来确定真正的犯人一样。

五、血清学鉴定。

这就像是给奇异变形杆菌做一个更细致的身份验证。

就好比我们每个人都有身份证，细菌也有它自己的“身份证”，那就是它的抗原。

普通变形杆菌菌落特征一、引言普通变形杆菌是一种常见的细菌，广泛分布于自然环境中。

其形态特征为杆状，大小约为0.5-1.0微米×2.0-5.0微米，具有两端略尖的形态。

普通变形杆菌可以通过观察其菌落特征来进行初步鉴定。

本文将详细介绍普通变形杆菌的菌落特征。

二、菌落特征1. 形态普通变形杆菌在营养琼脂平板上生长的菌落呈现出灰白色、乳白色或淡黄色等颜色，直径约为1-2毫米，表面光滑平整，边缘清晰。

在显微镜下观察，其形态呈不规则圆形或不规则卵圆形。

2. 质地普通变形杆菌的菌落质地较软，易于切割和移植。

3. 透明度普通变形杆菌的菌落透明度较高，在透光条件下可见到底部培养基。

4. 气味普通变形杆菌的菌落有一种特殊的气味，类似于腐败的气味。

5. 生长速度普通变形杆菌的菌落生长速度较快，在24小时内即可形成完整的菌落。

三、鉴定方法普通变形杆菌可以通过观察其菌落特征来进行初步鉴定。

但为了确诊，还需要进行进一步的生化和分子学检测。

1. 生化检测普通变形杆菌可以通过进行氧化-发酵试验、葡萄糖利用试验、淀粉水解试验等生化试验来进行鉴定。

2. 分子学检测近年来，随着分子生物学技术的发展，PCR技术已经成为了细菌鉴定的重要手段。

通过对细菌DNA进行PCR扩增和序列分析，可以准确地鉴定出普通变形杆菌。

四、结论普通变形杆菌是一种常见的细菌，在自然环境中广泛存在。

其在营养琼脂平板上生长的菌落具有灰白色、乳白色或淡黄色等颜色，表面光滑平整，边缘清晰，透明度较高。

通过观察其菌落特征，可以进行初步鉴定。

但为了确诊，还需要进行进一步的生化和分子学检测。

变形杆菌食物中毒应该做哪些检查？*导读：本文向您详细介变形杆菌食物中毒应该做哪些检查，常用的变形杆菌食物中毒检查项目有哪些。

以及变形杆菌食物中毒如何诊断鉴别，变形杆菌食物中毒易混淆疾病等方面内容。

*变形杆菌食物中毒常见检查：常见检查：粪细菌培养、细菌性食物中毒检测、血凝试验*一、检查取患者急性期和恢复期(中毒后12～15d)的血清，用分离的菌株做血清凝集效价测定，恢复期滴度高于急性期滴度四倍，即有诊断意义。

同时以健康人做为对照，应为阴性。

取可疑食物、呕吐物和粪便作细菌培养，可分离出同型变形杆菌。

分离出的变形杆菌，必须作血凝试验，才能确认。

普通变形杆菌对OX19，奇异变形杆菌对OXK的凝集效价应在4倍以上增长者，才能肯定诊断。

如作间接血凝试验，灵敏度可提高2～16倍。

近年来应用变形杆菌对尿素(urea)、苯丙氨酸(phenylalanine)、硫化氢(hydrogen sulfide)的生化特性建立了快速同步定性定量检测方法-UPS法。

正确鉴定率为100%。

*以上是对于变形杆菌食物中毒应该做哪些检查方面内容的相关叙述，下面再来看看变形杆菌食物中毒应该如何鉴别诊断，变形杆菌食物中毒易混淆疾病。

*变形杆菌食物中毒如何鉴别？：*一、鉴别据进食可疑食物、共食者集体发病和临床表现等可作出初步诊断。

粪便培养可检得变形杆菌，用获得的变形杆菌为抗原作病人血清凝集反应，病人组较健康对照组凝集效价明显增高，以此可协助确诊。

血清凝集抗体有助于诊断。

本病需与霍乱及副霍乱、急性细菌性痢疾、病毒性胃肠炎、非细菌性食物中毒等疾病相鉴别。

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动力试验变形杆菌实验现象一、动力试验变形杆菌实验现象在进行动力试验时，会发现试件表面出现了一些白色斑点，这些斑点是由变形杆菌所引起的。

这种细菌是一种革兰氏阴性菌，可以在环境中自然生长繁殖。

当试件表面存在微小的裂纹或缺陷时，变形杆菌会侵入其中并在表面形成白色粘液状物质。

二、变形杆菌的特性1. 革兰氏阴性：革兰氏染色是一种常用于细菌分类的方法，根据细胞壁结构的不同分为革兰氏阳性和革兰氏阴性两类。

变形杆菌属于革兰氏阴性菌。

2. 好氧：好氧细菌需要氧气才能进行代谢和生长。

变形杆菌也属于好氧细菌。

3. 能产生粘液：变形杆菌能够产生粘液状物质，这种物质有助于其在试件表面附着并生长繁殖。

4. 能够侵入裂纹和缺陷：由于变形杆菌体积较小，可以侵入试件表面微小的裂纹和缺陷中生长繁殖。

三、变形杆菌实验的意义动力试验变形杆菌实验是一种常用的金属表面检测方法，可以用于检测金属表面裂纹和缺陷。

由于变形杆菌能够侵入微小的裂纹和缺陷中生长繁殖，因此可以通过观察试件表面出现的白色斑点来确定试件是否存在裂纹或缺陷。

这种实验方法具有以下优点：1. 灵敏度高：由于变形杆菌能够侵入微小的裂纹和缺陷中生长繁殖，因此对于微小的裂纹和缺陷也能够进行有效检测。

2. 非破坏性：动力试验变形杆菌实验是一种非破坏性检测方法，不会对试件造成任何损伤。

3. 易操作：这种实验方法操作简单易行，不需要复杂的仪器设备和高超的技术水平。

四、动力试验变形杆菌实验步骤1. 准备工作：将金属试件表面清洁干净，并确保表面没有任何油脂或污垢。

2. 培养变形杆菌：将变形杆菌培养在适当的富营养培养基中，培养条件为温度在25-30℃，通气良好。

3. 涂布变形杆菌：将培养好的变形杆菌涂布在金属试件表面，涂布后放置在恒温箱中，在适当的时间内让细菌生长繁殖。

4. 观察实验现象：观察试件表面是否出现白色斑点，如果出现则说明试件存在裂纹或缺陷。

五、实验注意事项1. 变形杆菌对环境要求较高，应该注意保持实验室的卫生和通风。