58.变形杆菌属的鉴定.pptx

变形杆菌属概述●广泛存在于自然界，以及人和动物的肠道内●为肠道正常菌群，一般不致病●在一定条件下会引起各种感染，是引起医院感染的常见条件致病菌●原先包括普通变形杆菌、奇异变形杆菌、产黏变形杆菌和潘氏变形杆菌4个种，2000年又命名豪氏变形杆菌，取代了以前的普通变形杆菌生物3群。

所以现在为5种生物学特性形态与染色●G–杆菌两端钝圆，多形性，可为球状或丝状●周身鞭毛：运动活泼●无芽胞●无荚膜●有菌毛培养特性●兼性厌氧●营养要求不高●在营养琼脂和BAP上普通变形杆菌和奇异变形杆菌的大多数菌株呈迁徙生长☺迁徙生长现象：呈扩散性生长,形成以菌接种部位为中心的厚薄交替,同心圆型的层层波状菌苔☺易受0.1%石炭酸、5~6%琼脂、同型抗血清或胆盐所抑制●SS、MAC:不发酵乳糖而形成无色透明或半透明的菌落；产H2S的菌落，在SS上菌落中心呈黑色●产粘变形杆菌：产黏液状薄膜层及溶血生化反应●氧化酶阴性●硝酸盐还原阳性●不发酵乳糖●苯丙氨酸脱羧酶阳性●脲酶阳性●KIA：KA＋＋/－●MIU：＋－/＋－●IMViC：－/＋＋－－抗原构造●主要有O、H、K三类抗原●O抗原较为复杂，血清分型的主要依据●特殊抗原变形杆菌X19、X2、X K的Ｏ抗原与立克次体有共同抗原成分，可发生交叉反应，提取上述类型变形杆菌的Ｏ抗原代替立克次体的抗原，与疑为立克次体病患者的血清进行凝集反试验，辅助诊断立克次体病，为外斐试验外斐试验立克次氏体：是一类严格细胞内寄生的G-原核细胞型微生物，介于细菌与病毒之间（相对接近于细菌）。

一般呈球杆状或杆状,临床意义●奇异变形杆菌和普通变形杆菌是仅次于大肠杆菌泌尿道感染的主要病原菌●脲酶可分解尿素产氨，使尿液pH增高，碱性环境有利于变形杆菌的生长，肾结石和膀胱结石的形成可能与变形杆菌感染有关●食物中毒、婴幼儿肠炎食物中毒（胃肠炎）：潜伏期3~20 h ，起病急骤，恶心、呕吐、腹痛、腹泻，腹泻为水样，带黏液、恶臭，无脓血，一日数次至十余次●烧伤、创伤和呼吸道等多种感染，是医院感染主要病原菌●变形杆菌对磺胺类、氨苄西林、羧苄西林和四环素等耐药率较高●对喹诺酮类、二、三代头孢菌素类、氨基糖苷类敏感率较高，但须对奇异变形杆菌进行ESBLs 监测●根据药敏结果合理使用抗生素微生物学检验标本采集：不同疾病采集不同标本，如中段尿、脓液及分泌物、婴幼儿粪便、可疑食物检验方法与鉴定①显微镜检查：革兰染色查见革兰阴性杆菌②分离培养培养基：BAP、MAC或SS等大多数普通、奇异变形杆菌在BAP上呈迁徙生长③初步鉴定：可疑菌落接种KIA、MIU及苯丙氨酸琼脂作初筛试验④最后鉴定:种间鉴定⑤食物中毒的检验除分离到变形杆菌外,还需做下列试验确定可疑食物细菌计数、菌株同一性试验、动物试验、特异性抗体测定思考题●迁徙生长现象●外斐试验●尿液标本检查变形杆菌的程序。

变形杆菌检验变形杆菌（Proteus）在自然界分布极广，人和动物的粪便带菌很高，各类食品及用具等均可检出，虽是常见的腐生细菌，但在严重污染的食物中，通过生长繁殖后，可使食物含有大量此菌，食入后亦易引起食物中毒。

对此菌的实验室诊断，主要是根据生物学特性进行鉴别，也可以用血清学分型，但目前变形杆菌因子血清在国内应用尚不普遍，其检验程序一般是按肠道细菌检验方法进行。

一、检验方法（一）操作步骤1. 取被检样品25g，加225mL灭菌盐水，用均质器打碎或用乳钵磨碎，接种在SS琼脂平板和EMB琼脂平板上，经37℃、培养18~24h，普通变形杆菌和奇异变形杆菌在弱选择性的固体培养基上可出现菌落蔓延生长的特点，SS琼脂能抑制其蔓延生长，呈单个菌落。

其他变形杆菌呈半透明圆形菌落。

2. 挑取上述可疑菌落，接种三糖铁斜面培养基，经37℃、24h培养后，斜面产碱不变，底层产酸变黄，多数产少量气体，有的产硫化氢或不产硫化氢者均为可疑反应。

3. 将三糖铁斜面上可疑反应的培养物做尿素酶试验和涂片革兰氏染色镜检。

4. 对尿素酶阳性的革兰氏阴性杆菌，根据生化特性进行分型鉴定。

必要时做血清分型。

（二）检验程序表9-1变形杆菌检验程序二、结果分析判定（一）形态革兰氏阴性杆菌，形态大小很不一致，有明显的多形性，约为1~2μm×0.1-0.5ｕm，有周身鞭毛，不产生芽胞，无荚膜。

（二）培养特性生长条件与其他肠道细菌相同，一般培养基都能生长，有动力，运动活泼，普通变形杆菌和奇异形杆菌在湿润的普通琼脂培养基上和血琼脂平板上都能蔓延生长（或称游散生长），在选择性较弱的如EMB培养基，不能抑制其蔓延生长，在选择性较强的SS琼脂和DC琼脂培养基上能受到抑制，呈现单个菌落。

莫尔根变形杆菌和雷极变形杆菌呈半透明、圆形、光滑菌落，如果在1％琼脂上或经多次移种之后，莫尔根变形杆菌也可看到蔓延生长现象。

（三）生化特性根据变形杆菌属的生化学性状分为：普通变形杆菌（P.Vulgaria）、奇异变形杆菌（P.mirabilis）莫尔根变形杆菌（P.morganii）和雷极变形杆菌（P.rettgeri），共同的生化学性状为：均能迅速水解尿素，苯丙氨酸脱氨酶阳性，赖氨酸脱羧酶阴性，精氨酸阴性，不利用丙二酸盐，能在含氰化钾（KCN）的肉汤内生长，均不分解乳糖、棉子糖、纤维二糖、阿拉伯糖、卫矛醇、山梨醇。