冰冻切片工作中的经验总结

不同组织的冰冻切片体会来源：第三军医大学大坪医院病理科作者：毛成毅，杜娟，肖华亮，李增鹏冰冻切片原理：组织被冷冻时，组织中的水变成冰，而在这种状态中，组织变坚硬的。

冰冻块的硬度可通过改变组织温度来改变。

降温会使组织块更加坚硬，提高温度使组织变软。

大多数非脂肪不固定组织的切片最好在-20到-25℃制作。

因其制作过程较石蜡切片快捷、简便，多应用于手术中的快速病理诊断。

冰冻切片的制作过程中，常有许多因素影响其质量，并进一步影响结果的观察和分析，甚至会影响诊断，造成无法挽救的后果，对此我们经过比较及总结得出如下经验。

冰冻温度及组织冰冻的时间对冰冻切片质量的影响是至关重要的。

冰冻温度对细胞的影响：温度太低，细胞容易收缩，温度太高，细胞容易膨胀，结构不清，模糊，影响冰冻诊断。

充分利用冷冻台、冰锤及速冻头的功能。

将放有新鲜组织的冻托放在冻台上然后压上压板，等组织冻住后，轻敲压板，冻有组织的冻托就会下来，然后进行切片。

在实际工作中，一般冰冻机温度设定如下：冻台温度：-18℃；工作温度：-18℃；冻头温度：-20℃。

（一）乳腺组织的冰冻切片乳腺组织（纤维腺瘤，间质胶原化）含纤维组织较多，冰冻切片染色时容易脱片。

1、使用免疫组化防脱载玻片进行贴片，冰冻切片脱片率明显下降。

2、乳腺含脂肪组织比较丰富，在冰冻切片时不容易成片或展片。

3、乳腺组织在取材时，取材医生应尽量将病变周围的脂肪组织剔除。

4、当遇到脂肪组织较多，又无法剔除时，建议使用液氮。

5、充分利用冰冻切片机（速冻台）的功能。

（二）子宫肌瘤的冰冻切片1、温度的控制：冷冻温度是冰冻切片的关键；冷冻室温度设定-17~-22度；控制肌瘤组织冷冻时间，4/5组织冻好就可以；冷冻过头时拿出冷冻室解冻软化一下。

2、包埋剂(OCT)的使用：冻头中心滴好OCT粘好组织块，再在周围加固一圈；虽然有可能加长了冷冻时间，但可以将组织牢牢固定住；修片时不能太厚，要用慢进；防止修片和切片时产生的抖动。

冰冻切片制作技巧1.从锋利的刀片开始我发现使用新的锋利的刀片时常常做出高质量的片子。

我觉得在医疗场合中某些尽量省钱的做法显得有些因小失大。

一般我对每位患者的标本都使用一组新的刀片，当片子的质量开始下降时，我会立刻更换刀片。

某些组织如质地较硬的胶原和钙化组织会使刀片很快变钝，因此，经常更换刀片显得很有必要，有时候我在切片过程中要连续更换2-3次刀片。

2.坐着还是站着我切片时总是坐在一张凳子上。

要学会把刷子作为一种便捷的辅助工具来操作，从而精细地控制显微厚薄程度的片子。

切片时俯身弯腰，颈部过伸的姿势有些不妥，要尽量处于放松和舒适的姿势以便能最大程度控制你的左手。

3.刷子我是一位刷子的使用者。

我相信要想切好片子首先学会使用刷子。

刷子的作用就在于粘住片子并把片子弄到台子上。

冷冻的片子会自发的卷缩并从刷子上脱离下来，因此，我使用一把有硬毛、夹取面宽的刷子。

我发现来自中国的野猪毛十分坚硬，非常管用。

你可以花3美元从工艺店买一把1/4英寸长的#2号扁平无色的刷子，把毛削成一个角度。

由于是个有角的头端，加上握持刷子成一定的角度，这样刷子与组织接触时就会象扫帚一样的平。

我不能理解为什么有人使用脆弱的骆驼毛刷子，组织片很容易从这些柔软的毛上掉下来。

4.握持刷子左手象拿笔一样握持刷子，将第五指轻压于台面上以稳定握笔的手(或根据手和切片机尺寸的大小置于你感觉合适的地方)，这样可以保证操作者动作的灵活及可控性。

我把刷子削成一个角度，大致与左手握持刷子的角度相同，这样使刷子平着接触组织的1/4。

5.摇柄的旋转以连续均匀的力量转动切片机的摇柄，且要毫不犹豫。

我看到很多冰冻切片者手握着刷子在开始切片时总要停一下，缓慢的抓取组织，然后再开始转动摇柄。

依我的经验看来，这种动作增加了起始切片假象的可能，会使片子的厚度不均匀，也增加了处理脂肪类组织的难度。

我切片时，象前面所说的那样手握刷子，以一种连续的动作抓取组织，这个动作与刀片接触组织同时开始并贯穿于整个过程。

制作冰冻切片的体会无论是在组织胚胎学等医学基础课中，还是在临床检验工作中，冰冻切片都有着举足轻重的作用，冰冻切片被广泛的运用在科研、教学和临床诊断中。

所谓冰冻切片就是组织在低温状态下在很短的时间内变硬并进行切片。

在临床外科手术中常常需要进行快速病理诊断，而冰冻切片就是一个很好的方法。

标签：冰冻切片；制作；体会冰冻切片是一种在低温的条件下使组织快速冷冻到一定的硬度然后进行切片的方法。

其制作过程简单方便快捷，在手术中快速进行病理诊断从而为手术在中快速确定组织性质，对医生的手术方案具有指导意义。

冰冻切片的组织在送检前不需要进行处理，其组织没有发生变化，使得原来的生活形态得以保持，特别是在免疫组织化学染色中，组织中的糖、酶、抗原、脂类等成分由于没有受到干扰而存在，组织中的细胞抗原的免疫性也得到了保存，对于需要检测糖、酶、抗原、脂类的不会受到影响。

但是，冰冻切片的制作过程要比普通的蜡切片难度大、要求高，而且组织冰冻的程度不好把握，在切片的过程中组织较易破碎，很难切成符合要求的薄片，在染色的过程中很容易脱片，所有以上这些因素都会影响到切片的质量，从而影响到了检测结果。

对于如何能有效快速高质量的制作符合要求的冰冻切片一直使我们面对的问题。

1材料和方法1.1 材料：恒冷切片机，切片刀，固定液，胶水，实验用用的新鲜组织如肝、肾、脾、皮肤、食管、胃、淋巴结、心肌、脑、卵巢、小肠等组织。

1.2 方法：采用新鲜的实验用的新鲜组织，取一块大小为1.5cm×1.5cm×3cm 的新鲜实验用组织，去除组织中的脂肪组织，在取组织的时候要注意保持干燥以免引起组织细胞发生变性和变化，把组织放在低温液氮中快速冷冻放置于冰冻台上。

在切片机内快速冰冻2分钟之后待切。

如果组织的体积较大冰冻时间相应延长，如果所取组织体积较小则相应的缩短冰冻时间，切片刀的温度控制在零下25℃-零下30℃之间。

在开始切片之前要对切片刀和防卷板之间的角度进行调整以防切出来的组织薄片卷曲。

切片工工作总结
作为一名切片工，我深知这项工作的重要性和挑战性。

在过去的一段时间里，我积累了丰富的经验，并且对这个行业有了更深入的了解。

在这篇文章中，我将对我的工作进行总结，分享我的心得体会和工作经验。

首先，作为一名切片工，我需要具备一定的技术和操作能力。

我需要熟练掌握切片机的使用方法，了解不同材料的切割特点，以及如何进行精准的切割。

在工作中，我时刻保持警惕，严格按照操作规程进行操作，确保切片的质量和精度。

其次，作为一名切片工，我需要具备团队合作精神和沟通能力。

在工作中，我经常需要与其他部门的同事进行协作，比如与设计师沟通切片要求，与质检人员协商切片质量等。

我学会了如何与他人有效沟通，协调工作，共同完成任务。

另外，作为一名切片工，我还需要具备一定的责任心和细心。

在工作中，我时刻关注切片机的运行状态，确保设备正常运转，及时发现并解决问题。

我还需要仔细检查每一块切片的质量，确保没有任何瑕疵，以满足客户的要求。

总的来说，作为一名切片工，我需要具备技术能力、团队合作精神、责任心和细心。

通过不断的学习和实践，我相信我会在这个岗位上不断成长，为企业创造更大的价值。

希望我的总结能够对其他切片工有所帮助，也希望能够得到领导和同事的指导和支持，共同进步，共同发展。

冰冻切片工作中的经验总结【中图分类号】R2【文献标号】A【文章编号】2095-9753（2018）08-0235-01快速冰冻诊断报告用于术中确定病变的良恶性，手术方式和手术范围等，快速冰冻切片是手术中病理诊断的一种重要方法。

手术病人可以通过冰冻结果来确定是否需要由腹腔镜转为开腹手术，或者开腹手术是否需要扩大手术范围或者清扫淋巴结，免去病人受到二次手术的痛苦，因此为病理医生提供一张高质量的冰冻切片十分重要。

我院近来的术中冰冻标本量都在每年3万例-4万例左右，并且逐年递增，通过长时间的冰冻切片工作，我对快速冰冻切片有一些自己的经验总结。

一、冰冻取材1、经过福尔马林浸泡的组织标本不能用于冰冻切片。

2、室温下，切片组织冰晶融化，将出现许多孔状空隙，导致结构破坏甚至酶和蛋白等微细结构移动，以致影响诊断，我们在取材过程中应尽量减少冰晶[1]的产生。

⑴在取材前应将所有器械的水擦拭干净，减少取材标本冰晶的产生；⑵与临床医生沟通，不要用浸泡过生理盐水、酒精、碘伏的纱布包裹标本；3、取材组织大小最好为1.5cm×1.5cm×0.2cm，如果组织过大过厚，冻后组织块脱水不好，影响冻后诊断。

4、在工作中，经常会遇到针尖样大小的标本组织送检，如宫内膜，各种小结节等，我们可以先滴加一定量的包埋剂于标本台上，突出于支撑面0.5cm左右，将极少量的标本立即放置于包埋剂表面，在包埋剂下沉以前迅速将标本台放置于冷室冷冻。

最后冻好的标本凝固于包埋剂表面，并突出支撑面，利于切片。

5、医生在取完材后，一定要对取材台、取材器械进行清洁消毒，避免交叉污染。

6、通过长期的工作实践，我们可以使用胶水替代OTC包埋剂，以节约成本。

注意在组织脱水前，应将胶水冲洗干净，避免组织与纸质标签粘连，影响组织包埋。

二、冰冻切片1、温度[2]是保证冰冻切片质量的重要因素：细胞致密且较硬的组织冷冻温度较高（-16～-20℃），且冷冻时间较短；细胞疏松且较软的组织温度稍低（-20～-22℃），冷冻时间较长；脂肪组织所需温度更低（-22～-24℃），冷冻组织更长。

剂的稳定性达标，才可用于血液筛查工作。

检出限是可检测出的最低分析物的浓度，本室采用将弱阳性质量控制物倍比稀释的方法进行验证。

这种验证方法只能说明在对样本进行稀释状态下的最低检出限，并不代表最低检出限低的试剂其检出能力就一定好于最低检出限高的试剂[2]。

同时，CNAS ⁃CL02⁃A004：2018建议，弱阳性质量控制物作为外对照监控实验的有效性，浓度宜在2~4倍临界值左右。

对ELISA 试剂的检出限进行测定后，可以此为依据，对弱阳性质量控制物浓度进行调整，有利于室内质量控制。

符合率的验证可采用国家标准血清盘或临床诊断明确的阴阳性样本[2]，因血清盘一般不易获得，且价格昂贵，故在进行符合率验证时选择了往年国家卫生健康委员会临床检验中心对室间质量评价。

酶联免疫吸附试剂的敏感度和特异性亦是需要重点考察的指标，可以有效防止弱阳性标本漏检和阴性标本误判为阳性[3]。

依据CNAS ⁃CL02⁃A004：2018文件要求，当采用手工操作或同一项目使用2套及以上检测系统时，应进行实验室内部比对，包括人员和不同检测系统间的比对。

因此，当实验室有1套以上全自动加样仪、1套以上全自动酶免分析仪进行ELISA 检测时，应进行全自动加样仪比对、全自动酶免分析仪比对。

倘若某仪器不能正常运行时，可将该项目检测转移至其他自动加样仪或全自动酶免分析仪中，其结果亦可信。

人员比对验证表明，在全自动加样仪或全自动酶免分析仪运行发生故障时，不同工作人员手工操作ELISA 后续步骤的结果与仪器操作时结果相一致。

此外，CNAS ⁃CL02⁃A004：2018对实验室设备故障修复后，如果影响了方法学性能，应进行合适的方式进行相关的验证，我们结合文件要求与本室工作实际，也进行了相应的验证，以确保设备维修前、后试验结果的一致性。

自2016年以来，我室通过以上方法验证酶联免疫试剂共15次，调整弱阳性质量控制浓度4次，保证了试剂的品质和室内质量控制水平。