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实验一花粉收集、贮藏及花粉生活力测定一、实验目的1.掌握鲜花粉收集、储藏的方法及原理。
2.观察花粉在人工配制的培养基上的萌发情况，认识花粉萌发形成花粉管的外形和伸长过程，为理解植物的生殖过程奠定基础。
二、实验原理花期不遇，给杂交工作造成困难，有的树木和园林植物可通过延长花期解决，有的不得不进行花粉储藏，花粉贮藏对某些园林植物杂交育种具有重要的意义。
通过花粉贮藏，它可以使一些迟开花的园林植物和早开花的园林植物进行杂交，或到较远的地方给母本授粉，花粉的贮藏与运输可以打破杂交育种中双亲时间上和空间上的隔离，扩大育种的范围。
花粉在贮藏期间的稳定性，与花粉壁外层（外壁）的性质和贮藏期间花粉原生质的代谢有关。
在贮藏期间代谢调较少可溶性糖类和有机酸的花粉能够在较长期间保持其活力。
花粉贮藏的原理在于创造一定的条件，使花粉降低代谢强度，延长花粉的寿命。
花粉寿命的长短，因植物种类不同而异。
在自然条件下，大多数植物的花粉从花药散出后只能存活几小时，几天或几个星期。
如一般木本植物花粉寿命很长，如在干燥凉爽的条件下，柑橘花粉能存活40～50d，椴树45d，苹果10～70d，樱桃30～100d，麻栎一年，叶培忠教授试验发现杉木的花粉可存活17年之久；而在草本植物中，如棉属花粉采下后24h存活只有65％，超过24h 很少存活；多数禾本科植物的存活时间不超过一天，如玉米1～2d，水稻花粉在田间条件下3min就有50％丧失生活力，5min后几乎全部死亡，是寿命最短的例子。
一般在自然条件下自花授粉植物花粉寿命比常异花、异花授粉植物为短。
花粉的类型和生活力也表现了相关性，通常三胞花粉的寿命要比二胞花粉短，如水稻等禾本科植物为三胞花粉，寿命都是比较短的。
花粉寿命的长短除了上述因种遗传性的差异以外，还与温度、湿度有密切的关系。
通常高温高湿下花粉呼吸旺盛，会很快失去生命力，但在极干燥的条件下，花粉失去水分，也不利于保存。
据亚达姆斯试验，苹果花粉在干燥状态下，可保存3个月；如放在2～8℃，湿度80％的条件下，经过5个星期即失去生活力。
刺槐花粉生活力测定方法及贮藏特性王存纲;晋佳路【期刊名称】《南方农业学报》【年(卷),期】2014(045)008【摘要】[目的]探索刺槐花粉生活力测定方法及其贮藏特性,为刺槐生产及育种提供参考依据.[方法]以刺槐花粉为试材,使用培养基萌发试验法测定其生活力,并研究不同浓度Ca2+、不同贮藏条件及时间对刺槐花粉萌发的影响.[结果]刺槐花粉在琼脂8.0 g/L+蔗糖20.0 mg/L+硼酸2.0 mg/L的培养基中萌发率高达30.25％;适当浓度的Ca2+能促进花粉萌发和花粉管伸长,当Ca2+浓度为1.6×104 mg/L时,花粉萌发率高达40.25％,花粉管伸长最快;适宜刺槐花粉贮藏的条件依次为-80℃、4℃、-23℃和常温;花粉在-80℃贮藏32 d后,萌发率仍达15.30％.[结论]适合刺槐花粉萌发的培养基为:琼脂8.0 g/L+蔗糖20.0 mg/L+硼酸2.0 mg/L;培养基中添加低浓度外源钙能促进刺槐花粉萌发和花粉管生长;于超低温真空冷冻条件下贮藏的刺槐花粉保持活力时间更长.【总页数】4页(P1443-1446)【作者】王存纲;晋佳路【作者单位】鹤壁职业技术学院,河南鹤壁458030;鹤壁职业技术学院,河南鹤壁458030【正文语种】中文【中图分类】S792.27【相关文献】1.不同鲜食葡萄品种花粉生活力测定及贮藏特性研究 [J], 苏来曼·艾则孜;王勇;李玉玲;热比古丽·哈力克;郭平峰;骆强伟2.野牡丹花粉生活力与贮藏特性研究 [J], 江鸣涛;吴沙沙;卓孝康;唐淑玲;李淑娴;彭东辉3.刺槐花粉生活力测定方法及贮藏特性 [J], 王存纲;晋佳路;4.马蔺花粉生活力测定及贮藏特性研究 [J], 贾文庆;陈韵5.白花树花粉生活力检测方法与贮藏特性研究 [J], 吴君;李因刚;柳新红;何云核;石从广;朱光权因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
实验四花粉贮藏及花粉生活力的测定花期不遇给杂交工作造成困难，有的园林植物可通过调整花期来解决，有的则不得不进行花粉贮藏，或者从外地寄运花粉。
为了避免杂交工作失误，在使用外地寄来的花粉或经过一段时间贮藏的花粉之前，必须对花粉的生活力进行检测，以便对杂交结果进行分析与研究。
因此我们必须掌握花粉贮藏及花粉生活力测定的原理和技术。
（为什么贮藏花粉？）一、实验目的掌握花粉贮藏及花粉生命力鉴定的方法和原理。
二、实验材料油松、辣椒、一串红、矮牵牛、油茶、油菜等植物的花粉。
三、仪器及药品载玻片、盖玻片、解剖针、镊子、毛笔、干燥器、小指形管、标签、记号笔、显微镜、天平、烧杯、培养皿、滴管、玻璃棒、量筒、电炉、石棉网、冰箱；凡士林、无水氯化钙、蔗糖、琼脂、蒸馏水、硼酸、磷酸二氢钾、磷酸氢二钠、碘、碘化钾、氯化二苯基四氮唑（TTC ）。
四、实验原理花粉在低温（0 ～ 2 ℃）、干燥、黑暗等条件下代谢强度降低，花粉贮藏的原理就是要创造这样低代谢的环境条件，从而延长花粉的寿命。
花粉的形态、花粉中酶的活性以及积累淀粉的多少（淀粉质花粉）通常与其生活力密切相关，因此可以利用花粉的形态观察、过氧化物酶、脱氢酶的活性高低（呼吸）、淀粉的含量以及在人工培养基上花粉管萌发的情况作为鉴定花粉生活力高低的标准。
鉴定花粉生活力的方法很多，概括起来主要有如下几种：1 ．直接测定法将待测花粉直接授粉，然后统计结实情况。
此法最准确，但需时较长，且实验结果易受气候条件的影响。
也可在授粉后隔一定时间切下柱头，在显微镜下压片检查花粉的萌发情况，根据萌发率的高低来鉴定花粉的生活力。
2 ．形态观察法直接在显微镜下观察花粉的形态，根据品种花粉的典型性（如具有正常的大小、形状、色泽等）判断花粉的生活力，即形态正常的花粉有生活力，而一些小的、皱缩的、畸形的花粉不具有生活力。
此法简便易行但准确性差，一般只用于测定新鲜花粉的生活力。
3 ．染色观察法1 ）碘－碘化钾染色法：以碘－碘化钾溶液（0.3g 碘＋1.3g 碘化钾溶于100ml 蒸馏水）染色后于显微镜下观察，花粉被染成蓝色者表示具有生活力，花粉呈黄褐色者不具有生活力（不太准，比如刚死的花粉）。
10个菊花品种花粉生活力测定和贮藏方法研究作者：李亚军黄河牛雅静李霞来源：《福建农业学报》2020年第03期摘要：[目的]筛选菊花花粉离体培养生活力测定的最佳培养基配方，探究花粉贮藏的最适温度和耐贮藏时间，并挑选出较耐贮藏的菊花品种，为菊花新品种选育和种质资源保存提供参考。
[方法]以10个菊花品种盛花期花粉为试验材料，通过离体萌发测定法筛选菊花花粉萌发最适培养基，以该培养基测定花粉在4℃、-20℃和-80℃3种温度下进行60d或120d贮藏周期的生活力变化趋势观测，每隔15d取样检测1次;对贮藏120d的花粉进行授粉，统计结实率。
[结果]培养基为ME3+200g·L-1PEG4000+6g·L-1琼脂的处理，10种花粉都能萌发，且萌发率较其他培养基有显著差异;花粉贮藏60d后，所有花粉生活力均下降，其中‘5’‘52’‘64’和‘85’4个品种花粉生活力下降较缓慢;4种花粉贮藏120d后，在-80℃贮藏的花粉生活力较高，花粉授粉后均能够结实，且品种‘5’花粉授粉结实率最高，平均每个授粉花序结实8粒。
[结论]花粉萌发培养基、植物品种基因型、贮藏温度和贮藏时间都会影响菊花花粉生活力。
本文研究表明，菊花花粉最适贮藏温度为-80℃，品种‘5’花粉可贮藏120d保持较高的授粉结实率，在杂交育种中可优先考虑。
关键词：菊花，花粉生活力，贮藏，授粉中图分类号：S682.1+1文献标志码：A 文章编号：1008-0384（2020）03-0295-080 引言（研究意义）花粉是植物遗传信息的载体和交流工具，花粉贮藏是保存种质资源最简洁、高效的途径。
在杂交育种工作中，花粉贮藏能够解决亲本花期不遇和远距离杂交问题，打破杂交亲本的空间和时间隔离。
菊花（Chrysanthemum X morifolium Ramat.）是菊科菊属植物，在世界各地园艺造景中广泛应用，杂交育种是培育菊花新品种的主要手段。
因而探讨菊花花粉最佳贮藏条件对于解决菊花近缘属间杂交以及品种间杂交所面临的花期不遇或远距离杂交等问题具有重要意义，同时在使用贮存花粉之前，选择合适的方法对花粉生活力进行测定，可确保选择了最优花粉进行人工授粉而得到性状优良的后代。
实验三花粉的贮藏和生活力测定一、目的和要求在正常条件下花粉在雌蕊上萌发的能力，就是花粉的生活力。
花粉生活力测定在杂交工作中很重要，尤其亲本花期不相同需要从外地采集花粉作父本时，花粉要经过一段较长时间的贮藏运输过程，因此在杂交前应检验花粉的生活力，以免应用无生活力的花粉而造成杂交工作的失败。
从生产上来看，在选择相互授粉的品种时，也应考虑到品种的花粉发芽能力，凡是花粉发育不全的品种，其花粉的发芽率都很低。
因此不适宜做授粉品种。
本实验的主要目的是掌握花粉贮藏和花粉生活力测定的方法。
二、花粉及用具材料：桃或苹果树的花粉。
用具：显微镜、天平、盖玻片、凹式载玻片、培养皿、干燥器、试管、滴瓶、蒸馏水、凡士林、蔗糖、氯化钙、琼脂、联苯胺、α-奈酚、碳酸钠、过氧化氢等。
三、方法（一）花粉贮藏从发育良好的植株上采下将开的花朵、取出花药放在纸上或培养皿中，放于干燥的室内，令其开裂，花药裂开后将花粉倒入小玻璃瓶或指形管中，口上塞以棉花或橡皮塞，贴上写有品种名称的标签。
再把花粉瓶放于干燥器内，使花粉在空气相对湿度较低的条件下（一般0～40%）保存；为了减少呼吸作用，可以放在低温（0～4℃）黑暗的地方贮藏。
（二）花粉生活力试验1、花粉发芽法人为的创造适合于花粉发芽的环境条件，以花粉发芽的情况来鉴定花粉生活力的强弱，此法的缺点是花粉发芽条件与实际不完全相符，所得的结果与实际有一定的差异，但操作方便，能测定出相对发芽率来。
（1）培养基的制作与接种一般采用5～20%蔗糖或葡萄糖加1～2%琼脂，溶于蒸馏水中。
加热煮沸即可，将已配制好的培养基保持在40℃温度即不凝固，用玻璃棒点一点培养基敷在载玻片的凹坑内，然后用接种针或解剖针沾以少量花粉。
轻轻振动，使花粉均匀地撒在培养基上，将载玻片放在垫有湿润棉花培养皿内或倒扣在培养皿上，并贴上标签写明处理、种类、播种日期，将培养皿放于20℃的恒温箱中培养。
（2）观察记数在显微镜下隔一定时间检查一次（花粉发芽快的经过几个小时即可观察到已经发芽，慢的需24小时以上）若发现花粉已发芽时，便按一定方向，就同一视野中用记数器记录花粉粒总数和发芽数，观察记录3～5个显微镜视野的数字，求其平均数，即得出花粉发芽百分率。
花粉的保存及生活力测定方法的探讨
刘芳;周蕴薇
【期刊名称】《南方农业》
【年(卷),期】2007(001)003
【摘要】花粉在有性繁殖中发挥着重要作用,采集和贮存的花粉,在使用之前必须进行生活力的鉴定.本文介绍了花粉的采集、保存及花粉生活力的测定方法,并对各种方法的优缺点进行了讨论.
【总页数】2页(P70-71)
【作者】刘芳;周蕴薇
【作者单位】东北林业大学园林学院,黑龙江,哈尔滨,150040;东北林业大学园林学院,黑龙江,哈尔滨,150040
【正文语种】中文
【中图分类】S6
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