三聚氰胺检测标准模板

牛奶中三聚氰胺的含量测定一．样品分子结构中文名英文名分子结构三聚氰胺Melamine二. 样品来源记录样品商品名：样品测定描述：主成分含量测定生产厂家：三. 液相方法条件方法来源：自主开发；具体方法：色谱柱：AQ-C18，5um，4.6×250mm流动相：10mmol/L辛烷磺酸钠和20mmol/L磷酸氢二铵（用磷酸调节pH＝3.3）：乙腈＝90：10；检测波长：236nm；温度：室温29度；流速：1.0ml/min；进样量：20ul；流动相的配制：准确称取10mmol的辛烷磺酸钠和20mmol的磷酸氢二铵溶于1000ml水中，用磷酸调节pH至3.3准确量取该溶液450ml与50ml乙腈混合均匀，超声脱气；样品处理方法：标准品处理：准确称量250mg三聚氰胺标准品加入250ml容量瓶中，用一定量的水：乙腈＝50：50超声溶解，然后用水：乙腈＝50：50溶液稀释至刻度，配制成1000ug/ml 的三聚氰胺溶液，得溶液BZ1；量取BZ1标准溶液1.0ml，加入100ml容量品中，用乙腈：水＝50：50稀释至刻度，摇匀的标准溶液BZ2(此时浓度为10ug/ml)；样品处理：准确称取2.000g奶粉，加入到10ml容量瓶中，加入乙腈：水＝50：50至刻度以下，摇匀，超声20min；用乙腈：水＝50：50溶液稀释至刻度；离心或静置分层，取上层清夜用纯水稀释至原来浓度的1/5倍，针筒过滤，进样20ul；注意事项：1. 分析前，先用纯水以1.0ml/min流速冲洗色谱柱30min；分析完成后，先用纯水以1.0ml/min流速反向冲洗色谱柱45min，然后再用乙腈：水＝90：10以1.0ml/min流速反向冲洗色谱柱45min；反向冲洗，正向使用；2. 缓冲溶液，隔天需重新配制。

四. 谱图及数据处理1. 标准曲线的绘制：1）标准溶液的配制：准确量取标准品溶液BZ2 0.25ml、0.5ml、2.0ml、4.0ml、6.0ml、8.0ml、10.0ml分别加入到10ml的容量瓶中，用乙腈：水＝50：50稀释至刻度，摇匀；2）标准曲线：三聚氰胺标准曲线线性回归方程：y = 174175x + 14323R2 = 0.9994样品编号 1 2 3 4 5 6 7浓度（ug/ml）0.25 0.5 2 4 6 8 10吸光度（mAU）26552 51402 180649 370150 538627 716436 8783813)结论：本方法中三聚氰胺浓度在0.25ug/ml～10ug/ml范围内线性良好，可以作为外标法定量使用；2．谱图1）标准品谱图2）样品谱图第24卷第1期2021年3月西南科技大学学报Journal of South west University of Science and Technol ogy Vol .24No .1M ar .2021收稿日期:2021-11-17项目: “十一五”科技支撑计划重大专项课题(NO.2007BAD89B15。

食品中三聚氰胺检测仪器配置及分析介绍第一部分：关于三聚氰胺三聚氰胺：英文名“melamine”，简称三胺，学名三氨三嗪，别名蜜胺、氰尿酰胺、三聚酰胺。

分子式：C3N6H6、 C3N3(NH2)3 ；分子量：126.12物理性能：白色结晶粉末，无毒，无味；相对密度：1570kg/m3 ；熔点：在常压下，354℃分解；升华温度：300℃；溶解性：能溶于甲醇、甲醛、乙酸、热乙二醇、甘油、吡啶；微溶于水、乙醇；不溶于乙醚、苯和四氯化碳，水溶液呈弱碱性化学性能：三聚氰胺是一种重要的氮杂环有机化工原料，显弱碱性，能够与各种酸反应生成三聚氰胺盐；在强酸或强碱液中，三聚氰胺发生水解，胺基逐步被羟基取代，生成三聚氰酸二酰胺、三聚氰酸一酰胺和三聚氰酸；三聚氰胺与醛类反应生成加成化合物；三聚氰胺与甲醛反应制成树脂，三聚氰胺树脂是一种多种用途的材料，防火耐热且有很高的稳定性，用于生产塑料、地板砖，厨房用具，防火纤维，商业滤膜，胶水和阻燃剂。

固相萃取(SPE)方法1 固相萃取(SPE)柱的选择：三聚氰胺呈弱碱性(弱阳离子化合物)，净化过程一般选择阳离子交换柱。

混合型的阳离子交换柱(PCX)通过将磺酸基团(-SO3H)键合在极性高聚物聚苯乙烯/ 二乙烯苯（PEP）吸附剂上，具有阳离子和反相两种吸附机理，并具有以下优点：1) 可通过两种不同溶液的洗涤(水/一定pH值的缓冲溶液和有机溶剂)，使样品更干净，提高检测的灵敏度。

2) 批次重复性好。

3) 回收率高，重现性好，即使小柱跑干也可以得到较高回收率。

2 样品前处理步骤：2.1标准样品配制：取50mg三聚氰胺标准品，以20%甲醇溶解定容至50mL得到1000ppm的标准溶液，使用时，以提取液(1%三氯乙酸)稀释至所要的浓度。

2.2提取：称取饲料/奶粉样品5g (或牛奶10ml)，加入50ml 1%三氯乙酸提取液，充分混匀，加入2mL 2%乙酸铅溶液，超声20min。

然后取部分溶液转移至10mL离心管中，8000rpm/min离心10min，取上清液3mL过混合型阳离子交换小柱(PCX)。

三聚氰胺检测步骤1药品配制1.1三氯乙酸溶液（1％）：10克三氯乙酸于1L容量瓶中。

1.2氨化甲醇溶液（5％）：5ML氨水和95ML甲醇，混匀备用．1.3流动相：离子对试剂缓冲液：乙腈= 9:1 1.4离子对试剂缓冲液：2.10克柠檬酸和2.16克辛烷磺酸钠，定容至1L备用．1.5三聚氰胺标准品：纯度大于99.0％．1.6三聚氰胺标准储备液：100mg（精确至0.1mg）三聚氰胺标准品于100ML容量瓶中，用甲醇水溶液溶解并定容至刻度，配制成浓度为1mg/ml的标准储备液，于4℃避光保存．2样品前处理……奶样2g——→……15ml三氯乙酸和5ml乙腈……超声，振荡，离心各10min……过滤（三氯乙酸定容至25ml．）……3ml甲醇、5ml水……取滤液5ml，与5ml水混匀，做待净化液……3ml水、3ml甲醇……6ml氨化甲醇（开始收集洗脱水）……50℃下氮气吹干样液（2.5）……残留物用1ml流动相定容，振荡1min．3高效液相色谱仪进样前准备工作3.1进样管插入甲醇水（1：9）中，出水口插入废液缸，同时，过滤管进口插入甲醇水中，出口插入废液缸．3.2打开排气阀排气，当流动较慢时，可在色谱工作站中点击＂启动＂，泵启动，加快排气，至气体全部排出，点击＂停止＂泵，关闭排气阀．3.3在色谱工作站中点击＂采集基线＂，至线走平为止（量程在100µl以下），点击＂停止采集＂，＂停泵＂．3.4进样管插入流动相溶液中，再次按照步骤3.3排气，待排气完毕，按步骤5，至线走平，平衡色谱柱工作完毕．4进样4.1一次性针管吸样液（2.7），过微孔滤膜后，收集于小塑料瓶中．4.2上述收集样液冲洗进样针（100µl）6～8次，提取样品，慢慢吸液，赶走针中的气泡．4.3插入进样阀，匀速进样，快速向下（inject）搬动阀门，针不得拔出，开始采集样品．4.4出现三聚氰胺峰后，点击＂停止采集＂，＂停止＂，停泵，保存数据．5仪器冲洗5.1进样管从流动相转入甲醇水（1：9）中，按3.3排气，至完毕后，点击工作站中的＂采集基线＂，直至线走平，点击＂停止采集＂，＂停止＂泵．5.2进样管从甲醇水转到纯甲醇中，按上述5.1步骤操作．5.3进样针用甲醇冲洗6～8次．关闭工作站．。

乳制品中三聚氰胺检测方案乳制品中三聚氰胺检测方案一、标准品及标准品及溶液配制溶液配制溶液配制：：1. 三聚氰胺标准储备液：准确称取100 mg （精确到0.1 mg ）标准品于100 mL 容量瓶中，用50：50甲醇：水（体积比）溶解并定容至刻度，配制成浓度为1 mg/mL 的标准储备液，于4℃避光保存。

【使用时间为三个月】 2. 流动相配制：a) 准确称取2.10 g 柠檬酸（不含结晶水）和2.16 g 辛烷磺酸钠（不含结晶水），加入约980 mL 水溶解，然后定容至1L ，【说明：如果柠檬酸或辛烷磺酸钠中含有结晶水，需要进行换算】，用0.45um 水性滤膜过滤b) 将a ）和乙腈按照90：10的体积比进行混合，作为流动相（可以根据三聚氰胺出峰时间以及和杂质的分离情况对体积比进行调节）3. 标准工作液配制：用流动相将标准储备液逐级稀释得到的浓度为0.5，1，2，5，10 µg/mL 的标准工作溶液，浓度由低到高进样检测，以峰面积-浓度做图，得到标准曲线回归方程。

4．5％氨水甲醇溶液： 将氨水（分析纯，浓度25％）和甲醇以5：95的体积比混合。

二、样品前处理样品前处理步骤步骤步骤：：（SPE 净化过程） 取样品2g ，加入15mL 1％三氯乙酸和5mL 乙腈，蜗旋,超声提取10min ，1％三氯乙酸定容至25mL ，以4000转/min 速离心10min ，移取上清液5毫升进行SPE 。

将Oasis MCX 小柱 （3 cc ，60 mg ）依次用3 mL 甲醇和5 mL 水进行活化，将5mL 上清液上样，然后依次用3 mL 水和3 mL 甲醇进行淋洗，抽干10s ；最后用6 mL 5％氨水甲醇溶液进行洗脱；50℃氮气吹干，用流动相2 .b ）定容至 1 mL 。

三、液相色谱液相色谱条件条件I. HPLC 方法仪器配置：Alliance 2695 ＋ 2489 紫外检测器色谱柱： Symmetry C8, 4.6x 250mm, 5µm （订货号：W AT054270） 流动相： 2，b ） 流 速： 1.0 mL/min 柱 温： 40℃ 进样量： 20µL 检测波长：240nm样 品： 巧克力早餐奶，香草冰淇凌固相提取小柱: Waters Oasis® MCX 3cc(60mg ） P/N:186000254两类样品分别进行基质空白加标处理（添加水平2 mg/kg ，此水平下重复3次，考察方法准确度和精密度）。