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实验十四狂犬病的实验室诊断目的掌握狂犬病的病理组织学和动物试验诊断技术。
内容及方法一、病理组织学检查1．病料的采取对疑为狂犬病而扑杀或死亡的小动物可送检完整的新鲜尸体，如为大动物，则送检未剖开的头或保存于30％甘油中的新鲜大脑。
采取病料时，按一般方法剖开头骨，术者须戴胶皮手套及防护眼镜，以免病料侵入皮肤或溅人眼内。
头骨打开后小心地将脑取出，置于一盘中。
作生物学试验时，可采取脑的任何部分，而检查内基氏小体时，则常采取脑海马角、小脑和延脑。
摘除海马角最简单的一种方法是从脑底面采取，即将脑底朝上放，切除小脑，此时可在内面见到海马回(图8左)。
然后将海马回的边缘稍翻转，即可在它下面看到海马角(图8右)。
2．切片及触片的检查(1) 切片的制作从海马角横切下几块3～4mm厚的组织，浸泡在固定液中，按常规制作切片。
(2) 触片的制作取海马角一小块,用锐利的外科刀或刀片取一小块组织,使断面向上贴于软木塞上或木片上,以清洁的载玻片细心地接触切面，按压2～3个捺印，一份病料做3～4张触片。
(3)切片或触片的染色镜检塞勒(Seller)氏染色法：标本不需事先固定，直接将玻片浸入塞勒氏染液中，染色3～5s。
染色液配制法如下：碱性复红饱和甲醇溶液2～4ml (100ml甲醇内加复红6～8g)；美蓝饱和甲醇溶液15～20ml (100ml甲醇内加美蓝1．5g)；甲醇(不含丙酮者)25ml；先将后两液混合，再加入前液。
经3～5s染色后用蒸馏水冲洗，干燥后镜检。
内基氏小体染成樱桃红色，嗜碱性组织与细胞核呈深蓝色，细胞浆呈蓝紫色，间质呈粉红色，而神经鞘不着色，红细胞染成古铜色，杂菌为深蓝色。
曼(Mann)氏染色法：染液配制 l％复红水溶液35ml，1％美蓝水溶液35ml，加蒸馏水l00ml。
碱性纯酒精(1％苛性钠无水酒精溶液lml，无水酒精30m1)。
微酸性水(蒸馏水l00ml加纯醋酸2～3滴)。
染色法将触片或脱脂的切片浸入前液中5min，染色后迅速在水中洗涤并用滤纸吸干，然后置于无水酒精中洗涤并置于碱性纯酒精中20s。
犬狂犬病的诊断及防治措施伴随着城市化建设脚步逐渐加快，犬类不仅仅用于狩猎和放牧等工作，还被作为宠物饲养，成为首选的宠物种类，已经成为人们日常生活中不可缺少的一部分。
但是若不能对饲养的宠物犬科学管理，将出现扰民、污染环境甚至犬伤人引发狂犬病。
而狂犬病是由狂犬病毒引起的急性人畜共患传染病，可由感染狂犬病病毒的犬咬伤后传染给人类。
其致死率几乎百分之百，治疗方法是在咬伤后立即注射抗狂犬病血清，或在24 h 内注射狂犬病疫苗。
相关部门应加强对犬狂犬病的防控力度，采取有效防控措施。
1 流行特点犬狂犬病没有季节性，全年都可发生，不仅危害犬类，会通过患犬咬伤危害其它动物和人类，其致死率几乎百分之百，危害非常严重。
同时，犬狂犬病潜伏期较长，最短为半个月，最长数十年。
主要通过咬伤或抓伤动物进行传播，患病动物为主要传染源，一旦患病，将很难痊愈。
2 临床症状及病理变化犬狂犬病的潜伏期约为2～8 周，相关症状的表现时间与感染部位具有密切关系，感染部位与脑部越近，则症状出现越快。
病犬常表现来回走动、双耳竖起、隔空扑咬、反射兴奋性较强，并对外界任何声音表现比较敏感，食欲忽大忽小，伴有体温上升等症状。
经过2～4 d，患病犬食欲显著下降，出现异常兴奋或异常郁闷症状，对周边事物存在较高的攻击性，乱啃乱咬，意识模糊。
伴随着患病时间逐渐延长，患病犬将进入麻痹阶段，卧地不起，最终窒息而死。
剖检病死犬尸体发现，其咽喉部充血比较严重，其他器官也有不同程度的充血。
该病的诊断，主要根据患病犬的临床症状、病史及实验室检测结果。
3 防犬狂犬病控的意义在宠物给人们生活增添很多乐趣的同时，也造成了一些社会问题，犬类伤人现象频繁出现，甚至出现狂犬病死亡事件，对社会稳定产生了不利影响。
狂犬病是一种致死性几乎百分之百的人畜共患病，人类和牲畜都容易因咬伤或食入被狂犬病病毒污染的水和饲料而感染，并且死亡率接近于100%。
而若加强对犬的管理力度，重视对狂犬病免疫接种，能够形成有效的免疫屏障，降低狂犬病的只有概率。
狂犬病狂犬病(Rabies)又名恐水症(hydrophobia)，是由狂犬病毒(Rabies virus)侵犯中枢神经系引起的急性传染病，为人兽共患传染病。
人狂犬病通常由病兽以咬伤方式传给人。
临床表现为特有的狂躁、恐惧不安、恐水、怕风、怕声、流涎、咽肌痉挛、进行性瘫痪等。
病死率几乎100 %。
【病原学】狂犬病毒属弹状病毒科(Rhabdoviridae)拉沙病毒属(Lyssa virus),一端圆，另一端扁平，形似子弹，大小约75 nn×180nmm，病毒中心为单股负链RNA，外绕以核衣壳和含脂蛋白及糖蛋白的包膜。
目前已明确狂犬病毒的蛋白质由5个主要蛋白和2个微小蛋白构成。
5种主要蛋白是：转录酶大蛋白（Large Protein,LP），具有合成病毒RNA所必需的RNA转录酶活性；糖蛋白(Glycoprotein,GP),是病毒棘突成分，具有凝聚细胞能力，能与乙酰胆碱结合，决定了狂犬病毒的嗜神经性，能刺激机体产生中和抗体和诱导细胞免疫；核蛋白(Nuclear Protein,NP), 构成核酸的衣壳，是病毒颗粒的主要成分之一，它不仅保护基因在RNA免受核酸酶降解，也是狂犬病毒重要的抗原成分，不能刺激机体产生中和抗体；衣壳基质蛋白（Matrix protein 1，M1P），即磷蛋白，又称NS蛋白，它位于病毒核心壳和包膜之间，与核酸衣壳一起，是狂犬病毒属特异性抗原；包膜基质蛋白（Matrix protein 2，M2P），是狂犬病毒的包膜的重要成分。
还有两个微小蛋白是非结构蛋白。
从世界各地分离的狂犬病毒抗原性均相同，但其毒力可有差异，从自然条件下感染的人或动物体内分离到的病毒称野毒株(wild virus)或街毒株(street virus)，特点是接种动物潜伏期长，自脑外途径接种后容易侵入脑组织和唾液腺内，在感染的神经细胞内易发现内基小体（Negri Bodies）.致病力强。
街毒株在家兔连续脑内多次传代获得的毒株固定毒株(fixed strain)，特点为毒力减弱，但仍保持其免疫原性，可供制备疫苗。
狂犬病即疯狗症，又名恐水症狂犬病即疯狗症，又名恐水症，是一种侵害中枢神经系统的急性病毒性传染病，所有温血动物包括人类，都可能被感染。
它多由染病的动物咬人而得。
一般认为口边出白色泡沫的疯狗咬到传染，其实猫，白鼬，浣熊，臭鼬，狐狸或蝙蝠也可能患病并传染。
患病的动物经常变得非常野蛮，在唾液里的病毒从咬破的伤口进入下一个病人。
狂犬病从一个人传到另外一个人极为少见，患狂犬病的人类患者多数会发病身亡，在1971年有1个痊愈的病例。
2004年在美国一个未诊断为狂犬病的患者过世之后捐献内脏，获得捐献的三个人因狂犬病身亡。
另有同名电影。
目录基本概述病原体临床表现分期表现症状狂犬病并发症发病机理病理狂犬病恐惧症发病机制临床诊断实验室诊断急救措施治疗措施预防传染源管理狂犬疫苗注意事项热点知识问答虚假诈骗同名电影狗咬伤后的紧急处理展开基本概述人受感染后并非全部发病，被病犬(狂犬病)咬伤者约30%-70%发病，发病与否以及潜伏期的长短与下列因素有关：①咬伤的部位。
咬伤头、颈、手者，潜伏期较短；②狂犬病病毒对神经系统有强大的亲和力，病毒进入人体后，主要沿神经系统传播和扩散，病毒侵入人体后先在伤口的骨骼肌和神经中繁殖，这称为局部少量繁殖期，此期可长可短，最短为72小时，最长可达数周、数月甚至更长。
病毒在局部少量繁殖后即侵入神经末梢，沿周围神经以每小时3mm的速度向中枢神经推进，到达脊髓后即大量繁殖，24小时后遍布整个神经系统。
以后病毒又沿周围神经向末梢传播，最后到达许多组织器官，如唾液腺、味蕾、角膜、肌肉、皮肤等，由于头、面、颈、手等部位神经比较丰富，病毒易于繁殖，再加上离中枢神经较近，故这些部位被咬伤后发病者较多，潜伏期也较短；伤势越严重，也越容易发病。
病毒在中枢神经中主要侵犯迷走神经核、舌咽神经核和舌下神经核等。
这些神经核主要支配吞咽肌和呼吸肌，受到狂犬病病毒侵犯后，就处于高度兴奋状态，当饮水时，听到流水声，受到音响、吹风和亮光等刺激时，即可使吞咽肌和呼吸肌发生痉挛，引起吞咽和呼吸困难。
狂犬病的中西医结合诊疗方案与思路狂犬病（rabies）亦称恐水症，是由狂犬病病毒引起的一种人兽共患的中枢神经系统急性传染病。
主要发生在亚洲、非洲和拉丁美洲等发展中国家，中国是受狂犬病危害较为严重的国家之一。
狂犬病在我国曾一度得到控制，但近年随着养犬、猫等宠物的迅速增加而缺乏对其严格管理，加之缺乏狂犬病防治知识，狂犬病疫情有所回升。
其主要临床表现为特有的狂躁、恐惧不安、恐水、恐声、怕风、流涎和咽肌痉挛、进行性瘫痪，常有典型的恐水症状，故又称恐水症。
一旦发病，死亡率近100%。
中医称狂犬病为“猁犬病”、“癫犬病”、“疯犬病”，对狂犬病最早记载的是东晋葛洪的《肘后备急方》，详细记载了狂犬病的发病、治法及禁忌等内容。
一、病原学狂犬病病毒属弹状病毒科拉沙病毒属，一端圆、另一端扁平，形似子弹，大小约80 nm ×160 nm，病毒中心为单股负链RNA，外为核衣壳和含脂蛋白及糖蛋白的包膜。
狂犬病毒含G、N、L、P、M共5个结构基因，分别编码糖蛋白、核蛋白、转录酶大蛋白、磷蛋白和基质蛋白。
糖蛋白易与乙酰胆碱受体结合，决定了狂犬病毒的嗜神经性，能刺激抗体产生保护性免疫反应。
核蛋白是荧光免疫法检测的靶抗原，有助于临床诊断。
狂犬病病毒可接种于鸡胚、鼠脑中，也可在地鼠肾细胞、人二倍体细胞中增殖、传代。
从患者或患病动物直接分离的病毒称为野毒株（wild virus）或街毒株（street strain），致病力强，能在唾液腺中繁殖。
街毒株在动物脑内传代50代后其毒力减弱，对人和犬失去致病能力，但仍保持其免疫原性，可供制备疫苗，称为固定毒株（fixed strain）。
狂犬病毒易被紫外线、苯扎溴铵（新洁尔灭）、碘酒、高锰酸钾、乙醇、甲醛等灭活，对热敏感，加热100 ℃2分钟即可灭活。
二、流行病学狂犬病是一种世界性的急性传染性疾病，主要集中在亚洲和非洲。
（一）传染源带狂犬病毒的动物是本病的传染源。
我国主要传染源是病犬，85%～95%狂犬病由病犬传播，其次是猫、猪、牛、野兽等温血动物。
狂犬病的诊断与治疗⏹2007年，在国际狂犬病控制联盟的倡议下，世界卫生组织、世界动物卫生组织及美国疾病预防控制中心等共同发起了“世界狂犬病日”，各国纷纷开展相应宣传活动，“共同努力，使狂犬病成为历史”。
概述⏹狂犬病是由狂犬病毒引发的急性、进行性、几乎不可逆转的脑脊髓炎，是人畜共患的急性传染病。
因其有恐水特征，故又名恐水症，它是目前病死率最高的疾病。
⏹1881年法国巴斯德认为本病的病原体是极小的生物，1903年Negri在狂犬病人尸脑部发现了包涵体，并命名为Negri小体，直至现在仍然是诊断狂犬病的标准之一。
病原学⏹狂犬病毒于1962年首次在电镜下被发现，一年后，对其形态结构进行了描述。
随后在鸡胚组织、神经组织中增殖成功。
⏹狂犬病毒属弹状病毒科拉沙病毒属，大小约75×180nm，病毒中心为单股负链RNA，狂犬病毒是拉沙病毒属的典型种。
从感染动物或病人中发现的狂犬病毒称野毒株或街毒，街毒经过系列传代称固定毒。
⏹根据对不同毒株的血清学反应和单克隆抗体分析，将狂犬病毒分为5个血清型：⏹1血清Ⅰ型：为典型的狂犬病毒标准攻击毒株；⏹2血清Ⅱ型：拉哥斯蝙蝠病毒，从非洲分离到，包括6个亚型；⏹3血清Ⅲ型：马可拉原型株，在非洲分离出，包括5个亚型；⏹4血清Ⅳ型：杜文海格原型株，首先从南非分离到，以后从南非和中欧的蝙蝠中分离到，含有8个亚型；⏹5血清Ⅴ型：欧洲蝙蝠狂犬病毒。
流行病学(一)传染源⏹病犬仍是狂犬病的主要传染源，其它传染源还有猫、狼、狐、獾、熊、臭鼬、蝙蝠等动物。
近年来对世界上54个国家和地区狂犬病报告的综合分析表明，因犬所致的狂犬病占57％，野生动物所致占33％，因蝙蝠所致占10％。
⏹国内由狂犬传播者约占80％一90％，其次是猫、猪及牛、马等家畜和野兽如狼、狐、狗獾等温血动物。
狂犬病的主要传染源⏹区域主要宿主⏹亚洲狗，猫，猫鼬，⏹非洲狗，豺，猫鼬，狐狸⏹拉丁美洲狗，蝙蝠⏹北美洲臭鼬，浣熊，狐狸，蝙蝠⏹加勒比海地区猫鼬⏹西欧狐狸，蝙蝠⏹东欧狐狸，狗几乎所有的温血动物都可以感染狂犬病。
