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粪便病原检查技术粪便检查是诊断寄生虫病常用的病原学检测方法，要取得粪便检查的准确结果，必须注意：保证粪便新鲜，送检时间一般不超过24小时，对原虫滋养体检查应立即送检，或暂时保存在35~37℃条件下待查；盛粪便的容器须干燥、洁净，无尿液或水混入，无药物、泥土和其他杂物污染；严格按照粪检程序进行操作，特别是镜检时要熟悉各病原体的形态特点并遵循顺序观察的原则，以免漏检。
常用方法有以下几种：一、直接涂片法直接涂片法（direct smear methed）适用于检查蠕虫卵、原虫的包囊和滋养体。
方法简便，由于用标本较少，故检出率较低，若连续图片3张，可提高检出率。
1、蠕虫卵检查取一清洁的载玻片，在玻片中央加一滴生理盐水。
再用竹签挑取绿豆（火柴头）大小的粪便一小块，均匀涂布于生理盐水中，涂片厚薄以透过涂片约能辨认书上的字迹为宜。
如果太厚，阻碍光线的透过，太薄则影响检查效果（必要时可加盖玻片）。
先用低倍镜观察，从左至右，由上到下顺序地移动载玻片或镜台推进器，仔细查找，找到被查物后，应将被查物移至视野中央，仔细辨认。
必要时可换高倍镜进一步观察。
观察粪便涂片时，镜台应平放，以免粪液下流污染镜台，同时影响观察。
镜检过程中应防止涂片干燥，如已干燥而不透明时，可再加生理盐水，涂匀后继续观察。
粪便中常有很多与蠕虫卵相似的杂质，如食物残渣、气泡、脂肪滴、动植物细胞、植物孢子、淀粉颗粒等，必须仔细地与虫卵鉴别，以免误诊。
至于属何种杂质，不必花费过多的时间去研究，以免因此而分散注意力。
蠕虫卵的形态特征：人体检查的蠕虫卵种类较多，但它们皆有一定的形态特征，即有一定的形状、大小、颜色，明显的卵壳及特有的内容物（如卵细胞、卵黄细胞、幼虫等）。
但上述特征可因虫卵位置、死活、个体差异、发育情况、新鲜程度等而有所变化，必须分析情况，做出正确判断。
由于受检的粪量少，检出率较低，故常规检查每份粪便应取不同部位粪便查三片，必要时连续送检三次（三送三检），才可做出报告。
实验二蠕虫学粪便检查法（二）一、内容1．沉淀法（1）自然沉淀法（2）离心沉淀法2．锦纶筛兜集卵法3．幼虫培养法4．虫卵计数法（1）斯陶尔氏法（2）麦克马斯特氏法二、参考资料1．蠕虫虫卵检查法（之二）（1）沉淀法：采用普通清水处理被检粪便，使虫卵沉淀集中，便于检查。
本法适用于检查各种虫卵，而比重较大的虫卵，如吸虫卵，棘头虫卵等尤宜采用此法。
本法根据需要和条件又可分为自然沉淀法和离心沉淀法。
①自然沉淀法取粪便约5－10克，放在干净的烧杯内，加水搅拌，充分混匀称悬浮液，然后用40目铜丝筛过滤至另一干净量杯中，滤液静止10－15分钟后，将上清液倒掉，再加水沉淀，再静止10－15分钟，倒掉上清液，如此反复多次，直至上清液澄清为止，把上清液倒掉，取沉渣做成涂片镜检。
②离心沉淀法取粪便1－2克，放在干净的小烧杯中，约加十倍量的水，充分混匀成悬浮液，再用40目钢丝筛过滤至另一干净的离心管中，放入离心机内，也可以用上法处理过的滤液倒入离心管中，放入离心机内，以1500转/分的速度离心2－3分钟，此时，因虫卵比重大，经离心后沉于管底，然后倒去上清液，取沉渣进行镜检。
（2）锦纶筛兜集卵法：检查较大的虫卵时，虫卵直径再60微米以上，如片形吸虫、姜片吸虫、同盘科吸虫、日本分体吸虫等的虫卵，可取上述经40目铜丝筛过滤的滤液倒入260目的锦纶筛兜中过滤，反复用水冲洗，直到洗出液体清澈透明为止，而后挑取兜中粪渣做抹片检查，可获得满意的结果。
2．幼虫培养法圆形目的线虫种类很多，其虫卵在形态和大小上都非常相似，镜检时很难区别，生前诊断时为了区别这些线虫的种类，常将含虫卵的粪便加以培养，待其中虫卵发育位第三期幼虫时，再行检查，根据第三期幼虫的形态进行鉴别，达到诊断的目的。
最简单的方法是将待检的新鲜粪便塑成半球形，放在平皿中，并加少许水，如粪便已很稀，就不必加水，放在25－30℃温箱中（夏天在室温内）培养，根据具体情况，每天加少量水，使粪便保持一定的湿度，经7－10天，多数虫卵即可发育成第三期幼虫，并集中在皿盖上的水滴中，将幼虫吸出置载玻片上，放显微镜下检查。
粪便的显微化学检验
显微化学反应（microchemical neaction）检验法，是在显微镜观察下的食物残渣、包囊等物，为了辨认给标本滴加化学试剂，观察其瞬间反应结果，藉以鉴别某些粪便中的正常或异常成分。
一、淀粉颗粒（starch grain）
取少许粪便于载玻片上，滴加碘液1～2 滴混合镜检，淀粉颗粒被染为蓝色。
如部分水解为红糊精则为棕红色。
正常粪便可见少量。
腹泻者粪便中常见到。
在慢性胰腺炎，胰腺功能不全，碳水化合物消化不良时，粪便中可大量出现。
二、结缔组织与弹力纤维（connective tissueand elastic fibers）
取少许粪便于载玻片上，滴加30％醋酸2～3 滴，混匀，显微镜下观察，结缔组织膨胀而弹力纤维更清晰。
正常粪便少见。
结缔组织常与弹力纤维并存于粪便，有胃部疾患而缺乏胃蛋白酶时可较多出现。
粪便直接涂片法漏检肝吸虫感染1例分析陶永平[1]李晓艳[2]（[1]湖北省襄阳职业技术学院医学院湖北·襄阳441000；[2]湖北省襄阳市中心医院万山分院湖北·襄阳441000）摘要目的：通过临床一例肝吸虫感染者初筛漏检的案列，比较多种粪便镜检方法对肝吸虫卵的镜下检出效果。
方法：采用粪便直接涂片法和水洗沉淀法及加藤厚涂片。
结果：粪便水洗沉淀法及加藤厚涂片法明显比直接涂片法更易检出肝吸虫卵。
结论：医院检验科在对高度怀疑的肝吸虫感染者进行粪便初筛时，如遇直接涂片法镜检阴性时，有必要进一步采用水洗沉淀法或加藤厚涂片复核，以免漏检。
关键词直接涂片法肝吸虫漏检中图分类号：R383.2文献标识码：A1病例摘要男，53岁，农民。
有饮酒嗜好，平时在家务农。
2017年9月因上腹部不适及右肋弓区隐痛1月，就诊于当地社区卫生服务站，给予小柴胡颗粒及三九胃泰治疗数周，上腹部不适缓解，但肝区隐痛加重并伴随腹泻症状，遂来院内科进一步住院检查。
查体：体温36.8℃，巩膜轻度黄染，肝脾肋下未触及，唯右上腹轻微压痛，无反跳痛，血常规：嗜酸性粒细胞9.1%；肝功能T-BiL 23mol/L，HBsAg阳性，其余正常。
腹部B超、CT检查，提示疑为寄生虫样异物；胆管扩张。
医生询问患者既往史后得知其有食用醋腌生鱼的习惯，故送检验科进一步粪便检查，但报告未发现肝吸虫卵及其他寄生虫卵，检验科便将粪便标本交于医学院寄生虫实验室协助进一步排查。
实验室人员考虑到患者有既往史，体检特征也提示可能存在肝吸虫感染，但该院检验科未从粪便中直接发现相关虫卵，怀疑可能是标本采集或检查方法的原因。
经沟通得知检验科操作时采用的是直接涂片法，故嘱咐患者再次留取粪便标本复检。
次日，实验室对患者粪便标本进行复检，首先采用直接涂片法（三张），置显微镜低倍镜下观察。
由于患者当日仍有腹泻现象，三张直接涂片标本在制作时厚度较薄，也未直接找到寄生虫卵。
最后采用水洗沉淀法和加藤厚涂片法复检，这两种方法均检出肝吸虫卵。
粪便显微镜检查标准操作程序【目的】用于粪便显微镜检查标准操作。
【该SOP文件变动程序】本标准操作程序的变动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，请专业组长及科主任签字后生效。
【方法】生理盐水直接涂片法。
【操作步骤】1、洁净玻璃片上加生理盐水1-2滴，用竹签挑取粪便的不正常部位（粘液脓血部分），或挑取不同部位的粪便做直接涂片检查。
2、制成涂片后在显微镜下镜检，涂片的厚度以能透过印刷物字迹为准，先用低倍镜镜检，如有红细胞、白细胞、虫卵等不易分辨时用高倍镜镜检。
3、再涂片中如发现疑是包囊，则在该涂片上加1滴碘液，在高倍镜下仔细鉴定，如仍不能决定时，可取全量粪便浓缩法检查。
4、虫卵的报告方式：未找到者注明“未找到虫卵”，找到一种报告一种，找到几种报告几种，并在该虫卵后面注明数量若干，以低倍视野计算。
5、应注意将植物纤维及其细胞与寄生虫、人体细胞相鉴别，并应注意有无肌纤维、结缔组织、弹力纤维、淀粉颗粒、脂肪小滴球等。
若大量出现，则提示消化不良或胰腺外分泌功能不全。
6、细胞中应注意红细胞、嗜酸性粒细胞（直接涂片干后用瑞氏染色）、上皮细胞、巨噬细胞等。
7、夏科-雷登（Charcot-Leyden ）结晶：为无色或浅黄色两端尖而透明具有折光性的菱形结晶，大小不一。
常见于肠道溃疡，尤以阿米巴感染粪便中最易检出。
过敏性腹泻及钩虫病患者粪便亦常可见到。
8、细菌：占粪便净重的1/3 （40亿/g干粪），正常菌群主要是大肠杆菌和肠球菌，占80% ；而过路菌（产气杆菌、变形杆菌、绿脓杆菌等）不超过10% ；芽胞菌（如梭状菌）和酵母菌为常住菌，但总量不超过10%。
正常菌群消失或比例失调可因大量应用抗生素所致，除涂片染色找细菌外，应采用不同培养基培养鉴定。
【临床意义】1、白细胞正常粪便中不见或偶见。
小肠炎症时，数量较少（＜15个/HP），均匀混合于粪便中，且细胞已被部分消化难以辨认。
结肠炎症如细菌性痢疾时，白细胞大量出现，可见白细胞呈灰白色，细胞质中充满细小颗粒，核黄素不清楚，呈分叶状，细胞肿大，边缘已不完整或已破粹，出现成堆的脓细胞。
