几种果蔬中维生素C含量的测定

实验十：果蔬中维生素C的测定(2,6—二氯靛酚滴定法) 教学目的要求基本知识点1、了解从果蔬中提取Ve的方法。

2、掌握2,6—二氯靛酚滴定法测定果蔬中VC的原理、基本过程和操作关键。

3、熟练采样、样品处理、称量、过滤、定容、滴定等基本操技术。

4、掌数据处理和结果计算技术。

重占≡≡.∕∙⅜t2,6—二氯靛酚滴定法测定果蔬中Vc的基本过程和操作关键。

难点2,6—二氯靛酚滴定法测定果蔬中Vc的原理课时教学方案：复习与提问：1、2,6—二氯靛酚滴定法测定果蔬中VC的原理。

2、2,6—二氯靛酚滴定法测定果蔬中Vc的基本过程和操作关键。

3、检查学生实验准备情况。

【引入新课】Ve在人体内的主要功能是：参加体内的氧化还原过程，促进人体的生长发育，增强人体对疾病的抵抗能力，促进细胞间质中胶原的形成，维持牙齿、骨骼、血管和肌肉的正常功能，增强肝脏的解毒能力。

当人体中缺少VC时，就会出现牙龈出血、牙齿松动、骨骼脆弱、粘膜及皮下易出血、伤口不易愈合等症状。

近年来，科学家们还发现，VC能阻止亚硝酸盐和仲胺在胃内结合成致癌物质一亚脱胺，从而减低癌的发病率。

据测定，成年男子每天约需VC65mg,成年女子每天约需VC60mg oVC广泛存在于植物组织中，新鲜的水果、蔬菜,特别是獄猴桃、鲜枣、草莓、枇杷、橙、橘、柿子等含有丰富的％。

以IOOg水果的VC的含量来计算，獄猴桃含420nιg,鲜枣含380mg,草莓含8Omg,橙含49mg,枇杷含36mg,橘含30mg,柿子含3Omg0但葡萄、无花果、苹果各自只有5nιg,香蕉、桃子各含IOmg,梨子仅含4mg。

实验十：果蔬中维生素C的测定—2,6—二氯靛酚滴定法维生素C是人类营养中最重要的维生素之一，缺少它时会产生坏血病，因此又称为抗坏血酸(ascorbicacid)。

化学名称为：L-3-氧代苏己糖醛酸内酯【英文名:ASCOrbiCACid(INN)],分子式为C6H8O6,相对分子质量：176.13o自然界存在两种形式的维生索C:抗坏血酸（还原型VC）和脱氢抗坏血酸（氧化型DHVC）,抗坏血酸易氧化成脱氢抗坏血酸，脱氮抗坏血酸又易还原成抗坏血酸。

[实验一] 几种果蔬中维生素C含量的测定教学目标1.知识方面（1）理解测定果蔬中维生素C含量的原理；（2）了解从果蔬中提取维生素C的方法；（3）初步学会果蔬中维生素C含量的测定方法。

2.态度观念方面（1）通过分组测定不同果蔬的维生素C含量，小组间共享实验数据，培养学生的小组合作精神；（2）通过学生认真操作，记录实验数据和计算实验结果，培养学生严谨求实的科学态度。

3.能力方面（1）通过实验操作和数据分析，培养学生动手能力和思维能力；（2）通过学生在实验中观察实验现象、分析实验中出现的问题，培养学生分析问题和解决问题的能力。

重点、难点分析1.果蔬中维生素C含量测定的原理和方法。

2.本实验是高中生物教材必做实验中唯一的测定实验，要求学生严格操作，认真记录实验数据。

教学模式小组合作模式教学手段分组实验课时安排一课时设计思路将学生分成四个大组（每个大组中两人为一小组），分别测定柿子椒、白萝卜、橘子和梨的维生素C含量。

分析测定结果，如与“食物成分表”中数据存在较大差异，应如实分析原因，写出实验报告。

教学过程一、课前准备1.教师应要求学生在课前预习实验内容，理解实验原理和目的要求，了解操作步骤和方法，回忆化学课上学过的有关酸式滴定管的使用方法和注意事项。

2.课前准备实验工具：容量瓶（250mL），酸式滴定管（50mL），锥形瓶，量筒，玻璃棒，尼龙纱布，天平，多功能粉碎机，漏斗，pH试纸，烧杯。

3.课前配制药液：0.02mol/L碘溶液，质量分数为2%的盐酸，质量分数为2%的可溶性淀粉溶液，蒸馏水。

4.教师在课前逐一检查酸式滴定管是否有漏液现象。

先用蒸馏水将酸式滴定管冲洗干净（一般冲洗2~3次），再用碘溶液冲洗2次。

然后将碘溶液装入滴定管。

5.滴定标准维生素C溶液，为学生提供标准数据。

取维生素C片剂（100mg/片）一片，放入小烧杯中，用玻璃棒压碎，加入10~15mL蒸馏水，搅拌形成浊溶液。

然后移至锥形瓶中，再用少量蒸馏水冲洗烧杯2~3次，全部倒入锥形瓶中。

几种果蔬中维生素C含量的测定实验原理维生素C广泛存在于新鲜的水果和蔬菜中。

不同果蔬的维生素C含量不同。

维生素C具有很强的还原性，能将碘还原成碘离子。

碘遇淀粉变蓝色，而碘离子不能使淀粉溶液改变颜色；因此，在含有维生素C的溶液中，加入淀粉溶液，就可以用碘溶液来滴定被检测样品中的维生素C。

记录滴定用去的碘溶液量，再根据已知的每毫升碘溶液可以与多少毫克的维生素C发生反应，就可以计算出被检测样品的维生素C含量。

目的要求1．了解从果蔬中提取维生素C的方法。

2．初步学会果蔬中维生素C含量的测定方法。

材料用具新鲜的水果和蔬菜(如西红柿、青椒、梨、桔子苹果猕猴桃菠菜等)。

解剖刀，培养皿，小烧杯，滴管，试管，广口瓶，量筒，玻璃棒，纱布，天平，多功能食物粉碎机，pH试纸，标签纸，试管刷。

0.02 mol/L碘溶液，氯化氢的质量分数为2％的盐酸，可溶性淀粉的质量分数为2％的溶液，蒸馏水，维生素C药片(100 mg/片)。

方法步骤一、制备果蔬组织提取液1．称取50g水果或蔬菜，放入多功能食物粉碎机中，再加入50mL蒸馏水，然后进行粉碎。

2．在漏斗中垫上纱布，将粉碎后的果蔬液过滤到烧杯中。

3．向烧杯中加入滴加盐酸，将pH调至3。

二、测定果蔬组织提取液中的维生素C含量1取五支洁净的试管，分别加入3ml淀粉和碘的混合液，分别对其进行标号。

2其中一试管不作任何处理，以做对照。

在其余四个试管中各滴加一种果蔬组织提取液，观察现象并记录提取液滴数。

实验结果分析讨论1 你的预测与实验结果是否一致？2 小组间交流实验结果。

你有什么发现？3 全班共检测了多少种生物材料？这些生物材料种维生素C的含量一样吗？这对我们选择食物有什么启发？。

蔬菜水果中维c含量的测定摘要：利用维生素Ｃ对紫外产生吸收和对碱不稳定的特性，用紫外分光光度法测定５种常见果蔬中维生素Ｃ的含量。

最大吸收波长为２４３．４ｎｍ，标准曲线方程为Ａ＝０．０５２８ｃ－０．０５６８，相关系数为Ｒ２＝０．９９９６。

５种果蔬中维生素Ｃ含量［ｍｇ·（１００ｇ）－１］分别为：黄瓜２０．５、苹果１４．９、西红柿１８．４。

关键词：紫外分光光度法；维生素Ｃ；果蔬维生素Ｃ又称抗坏血酸，是一种水溶性维生素。

能预防牙龈出血及萎缩、提高人体免疫力，对坏血病、动脉硬化、贫血等有一定疗效。

实验１．１材料、试剂与仪器:青椒、橙子、黄瓜、苹果、西红柿，市售抗坏血酸、ＨＣｌ、ＮａＯＨ均为分析纯，实验用水为二次蒸馏水。

ＵＶ１１０２型紫外可见分光光度计，ＴＢ－２１４型电子天平１．２方法１．２．１标准溶液的配制准确称取０．０５０ｇ抗坏血酸，加１０ｍＬ１０％ＨＣｌ溶解，用蒸馏水定容至５００ｍＬ，混匀，即得１００μｇ·ｍＬ－１维生素Ｃ标准溶液。

１．２．２吸收曲线的绘制移取１０ｍＬ维生素Ｃ标准溶液于５０ｍＬ比色管中，稀释至刻度，混匀。

用１ｃｍ石英比色皿，以蒸馏水为参比，在２００～３００ｎｍ波长范围内用紫外可见分光光度计自动扫描。

绘制吸光度与波长关系曲线，以最大吸收波长作为测定波长。

１．２．３标准曲线的绘制分别准确移取１００μｇ·ｍＬ－１维生素Ｃ标准溶液０．５ｍＬ、１．０ｍＬ、１．５ｍＬ、２．０ｍＬ、２．５ｍＬ、３．０ｍＬ、４．０ｍＬ、５．０ｍＬ于５０ｍＬ容量瓶中，定容至刻度。

以水为参比，在最大吸收波长处测定吸光度，以维生素Ｃ浓度为横坐标、吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。

１．２．４果蔬样品的处理将青椒、西红柿、黄瓜洗净晾干，橙子和苹果取肉，分别称取１０．００ｇ于研钵中，各加入１％ＨＣｌ１０ｍＬ，匀浆，转移到５０ｍＬ容量瓶中，稀释至刻度，混匀。

移至离心管中离心１０ｍｉｎ，取上清液即为待测果蔬提取液。

郑州轻工业学院轻工职业学院专科毕业设计（论文）题目不同果蔬中VC含量的比较研究学生姓名专业班级学号院（系）化学工程系指导教师（职称）完成时间不同果蔬中VC含量的比较研究摘要维生素C是一种对人体极为重要的营养物质,对人体胶原蛋白的合成，提高人体抗应变能力机能，治疗贫血，坏血病，预防动脉硬化，保护细胞、解毒等都具有重要作用。

目前维生素C的主要测定方法主要有荧光法、2,6-二氯靛酚滴定法、2,4-二硝基苯肼法、碘量法、光度分析法、电化学分析法及色谱法等。

本文从维生素C的性质，对人体的作用，摄取途径，测定方法等方面对维生素C的研究做了全面的阐述，并选择用紫外分光光度法对新鲜果蔬中维生素C含量进行测定。

本文不但对不同样品进行了横向比较研究，也对同一样品进行了热破坏的纵向比较研究。

关键词坏血病/紫外分光光度法/维生素CA comparative study of different fruits andvegetables VC contentABSTRACTVitamin C is an essential nutrient for the human body substances, synthetic human collagen, improving the resilience of the human anti-functioning, treatment of anemia, scurvy, prevent arteriosclerosis, protect cells, detoxifiCation and so has an important role. Determination of vitamin C is mainly mainly fluorescence, 2,6 - diChloro-indophenol titration, 2,4 - dinitrophenylhydrazine method iodimetry, photometric analysis, electrochemical analysis and chromatography . From the aspect of the nature of vitamin C, the body's role, uptake pathways, such as the study of determination of vitamin C do a comprehensive exposition and ultraviolet spectrophotometry choose fresh fruits and vegetables in the vitamin C content were determined. This paper not only a comparative study of different samples laterally, but also on the same sample were compared longitudinal thermal damage.KEYWORDS scurvy / UV spectrophotometry /Vitamin C摘要 (I)ABSTRACT (II)1 前言 (I)1.1维生素C的性质 (I)1.1.1物理性质 (I)1.1.2化学性质 (I)1.2维生素C的作用 (I)1.3维生素C缺乏的影响.............................................................................................................. I II 1.4维生素C主要来源 ................................................................................................................. I II 1.5维生素C摄入过量的影响...................................................................................................... I V 1.6维生素C的测定方法的选择 ................................................................................................... I V1.6.1二甲苯－二氯靛酚比色法................................................ I V1.6.2荧光法 (V)1.6.3碘量法 (V)1.7测定果蔬中VC的意义 (1)2 实验 (2)2.1原理 (2)2.2试剂 (2)2.3仪器 (2)2.4实验步骤 (2)2.4.1吸收曲线的测定 (2)2.4.2 VC标准溶液的配制 (3)2.4.3 标准曲线的测定 (3)2.4.4样品的处理 (3)2.4.5样品的测定 (3)2.4.6热破坏比较测定 (3)2.4.7 新鲜度对VC破坏的测定 (4)2.5注意事项 (4)3实验数据及绘图 (5)3.1维生素C最大吸收波长的测定 (5)3.2标准曲线的绘制 (6)3.3果蔬样品的称重 (6)3.4样品的吸光度值及维生素含量 (7)3.5热破坏研究 (7)3.6新鲜度比较研究： (8)实验结论 (10)结束语 (12)参考文献 (14)1 前言1.1 维生素C的性质维生素C（Vitamin C ，AsCorbiC ACid）又叫L-抗坏血酸，是一种水溶性维生素。

果蔬中维生素C含量的测定维生素C 又名抗坏血酸, 是维持机体正常生理功能的重要维生素之一, 而人体不能自身合成, 只能从食物和药物中摄取, 因此, 食品、药物中维生素C的分析具有重要意义。

蔬菜水果中维生素C（抗坏血酸）含量的测定方法有很多，常用的方法有荧光比色法、光度比色法、电化学法、滴定法、酶法、色谱法等。

辣椒中的维生素C的含量较高，有些品种理论值可高达198mg/100g，橙子中维生素C的含量也达70 mg/100g，西红柿中维生素C的含量也约20 mg/100g，但品种不同差别较大。

本实验利用荧光法和固蓝盐B比色法分别测定西红柿和橙子中维生素C的含量。

固蓝盐B比色法是利用在乙酸溶液中，抗坏血酸与固蓝盐B反应生成黄色的草酰肼-2-羟基丁酰内酯衍生物，可在其最大吸收波长（420nm）处测定吸光度，与标准系列比较定量。

荧光比色法是基于维生素C 被氧化剂如活性炭或Cu2+氧化为脱氢抗坏血酸（DHAA），DHAA 进一步与苯甲酸及十六烷基三甲基溴化铵产生荧光协同增敏作用, 通过对体系荧光强度的测定进行维生素C的定量分析。

本实验选取Cu2+做氧化剂，该法样品处理简单、快速, 体系的稳定性好。

2% 乙酸的配制：量取20.0mL冰醋酸，加水稀释至1000mL。

西红柿样品处理：准确称取80g 左右西红柿，剪碎放入榨汁机中（榨汁机中预先加入50mL 2%乙酸），搅成匀浆，用布氏漏斗抽滤，滤液转移到250mL棕色容量瓶，用蒸馏水定容。

橙子样品处理：将橙子去皮和籽后，准确称取50g左右，剪碎放入榨汁机中（榨汁机中预先加入50mL 2%乙酸），搅成匀浆，匀浆液转移到250mL棕色容量瓶定容。

定容液用漏斗过滤，干滤法（漏斗、滤纸承接烧杯干燥）,注意每次过滤前摇匀容量瓶溶液再过滤，过滤滤液约60mL左右备用。

Vc储备液配制：准确称取0.2g左右维生素C溶解于蒸馏水中，并转移到100mL棕色容量瓶里，定容，放在暗处保存。

果蔬维生素C含量测定及其分析摘要本次实验我们测定了橘子中的维生素c含量;试验中;通过2;6-二氯酚靛酚对维生素C的滴定从而测定了橘子所含的维生素C含量;我们测得橘子的维C的含量是20.46mg/100g;相对较低..经查阅资料;讨论后发现维生素C在空气中易氧化;而且不同成熟程度、品种、新鲜程度、生长地、测定温度等客观因素也会对其有很大的影响..一、前言实验目的：测定橘子中的维生素c含量;从而进行分析..实验原理：维生素C是人类营养中最重要的维生素之一;缺少它时会产生坏血病;因此又称为抗坏血酸ascorbic acid..它对物质代谢的调节具有重要的作用..近年来;发现它还有增强机体对肿瘤的抵抗力;并具有化学致癌物的阻断作用..维生素C主要存在于新鲜水果及蔬菜中..水果中以猕猴桃含量最多;在柠檬、桔子和橙子中含量也非常丰富；蔬菜以辣椒中的含量最丰富;在番茄、甘蓝、萝卜、青菜中含量也十分丰富;野生植物以刺梨中的含量最丰富;每100克中含2800毫克;有“维生素C王”之称..维生素C为无色晶体;味酸;溶于水及乙醇;不耐热;在碱性溶液中极不稳定;日光照射后易被氧化破坏;有微量铜、铁等重金属离子存在时更易氧化分解;干燥条件下较为稳定..故维生素C制剂应放在干燥、低温和避光处保存；在烹调蔬菜时;不宜烧煮过度并应避免接触碱和铜器维生素C具有很强的还原性..它可分为还原性和脱氢型..还原型抗坏血酸能还原染料2;6-二氯酚靛酚DCPIP;本身则氧化为脱氢型..在酸性溶液中;2;6-二氯酚靛酚呈红色;还原后变为无色..因此;当用此染料滴定含有维生素C的酸性溶液时;维生素C尚未全部被氧化前;则滴下的染料立即被还原成无色..一旦溶液中的维生素C已全部被氧化时;则滴下的染料立即使溶液变成粉红色..所以;当溶液从无色变成微红色时即表示溶液中的维生素C刚刚全部被氧化;此时即为滴定终点..如无其它杂质干扰;样品提取液所还原的标准染料量与样品中所含还原型抗坏血酸量成正比..试剂和器材错误!试剂2%草酸溶液: 草酸2g溶于100mL蒸馏水中..1%草酸溶液: 草酸1g溶于100mL蒸馏水中..标准抗坏血酸溶液1mg/mL: 准确称取100mg纯抗坏血酸应为洁白色;如变为黄色则不能用溶于1%草酸溶液中;并稀释至100mL;贮于棕色瓶中;冷藏..最好临用前配制..0.1% 2;6-二氯酚靛酚溶液: 250mg 2;6-二氯酚靛酚溶于150mL含有的热水中;冷却后加水稀释至250mL;贮于棕色瓶中冷藏4℃约52mg NaHCO3可保存一周..每次临用时;以标准抗坏血酸溶液标定..错误!材料橘子1只错误!器材锥形瓶100mL2；移液管10mL2；容量瓶100mL1；250mL1；50mL5；微量滴定管5mL1；研钵；漏斗；纱布..操作方法错误!提取水洗干净整株新鲜蔬菜或整个新鲜水果;用纱布或吸水纸吸干表面水分..然后称取20g;加入20mL 2%草酸;根据实验设计需要处理样品;然后用研钵研磨;四层纱布过滤;滤液备用..纱布可用少量2%草酸洗几次;合并滤液;滤液总体积定容至50mL..错误!标准液滴定准确吸取标准抗坏血酸溶液1mL置100mL锥形瓶中;加9mL 1%草酸;用微量滴定管以0.1% 2;6-二氯酚靛酚溶液滴定至淡红色;并保持15s不褪色;即达终点..由所用染料的体积计算出1mL染料相当于多少毫克抗坏血酸取10mL 1%草酸作空白对照;按以上方法滴定..错误!样品滴定准确吸取滤液两份;每份10mL; 分别放入2个锥形瓶内;滴定方法同前..另取10mL 1%草酸作空白对照滴定..数据记录与处理1、标准滴定结果用0.1%的2;6-二氯酚靛酚溶液滴定抗坏血酸溶液;得到以下数据表一：表一 0.1%2;6-二氯酚靛酚的标准滴定表二多种蔬果的维生素C含量测定数据处理：由结果得1ml 抗坏血酸需要的染料0.1%的2;6-二氯酚靛酚溶液的体积为V=5.30+5.45/2-0.10=5.275ml1ml 染料能氧化抗坏血酸质量为T=11/5.275=0.19mg2、多种水果蔬菜的维生素C 含量测定结果本组试验我们选取了橘子作为材料;并对其进行了维生素C 含量测定..同标准滴定操作相似;用0.1%的2;6-二氯酚靛酚溶液对样品进行滴定;得到以下数据表二;图一;并由公式得样品中维生素C 的含量100mg/100g 样品： 附公式：(-)100C mg/100g A B V V C T D W⨯⨯⨯⨯维生素含量（样品）＝ 式中：V A 为滴定样品所耗用的染料的平均毫升数；V A =4.41mLV B 为滴定空白对照所耗用的染料的平均毫升数；V B =0.10mL C 为样品提取液的总毫升数；C =50mLD 为滴定时所取的样品提取液毫升数；D=10mLT 为1mL 染料能氧化抗坏血酸毫克数由操作二计算出；T=0.19mg W 为待测样品的重量..W=20.012g注意事项1 某些水果、蔬菜如橘子、西红柿等浆状物泡沫太多;可加数滴丁醇或辛醇..2 整个操作过程要迅速;防止还原型抗坏血酸被氧化..滴定过程一般不超过2min..滴定所用的染料不应小于1mL或多于4mL;如果样品含维生素C太高或太低时;可酌情增减样液用量或改变提取液稀释度..3提取的浆状物如不易过滤;亦可离心;留取上清液进行滴定..五、讨论与误差分析通过查阅资料;我们了解到;我组测得的桔肉维生素C含量为20.46mg/100g;相对偏低;分析其原因为：1、研磨时;研磨的不完全;过滤使得纱布上有残余；2、滴定时;滴定管有微小漏液;导致结果数据有误差；3、可能受到橘子成熟程度、品种、新鲜程度、生长地、测定温度等客观因素；4、由于操作不熟练;整个操作不够迅速;滴定过程超过了2min;导致还原型抗坏血酸被氧化;从而测定的结果偏小..六、思考题1．为了测得准确的维生素C含量;实验过程中都应注意哪些操作步骤为什么(1)过滤后纱布尽量用少量2％草酸多洗几次以保证维生素c基本析出；若泡沫太多;可加数滴丁醇或辛醇..(2)为了防止还原型抗坏血酸被氧化;滴定过程一般不超过2min..(3)滴定所用的染料不应小于1mL或多于4mL;如果样品含维生素C太高或太低时;可酌情增减样液用量或改变提取液稀释度..2．试简述维生素C的生理意义..维生素C参与体内的众多氧化还原反应..可促进细胞间质的完整;保持细胞间质的完整;增加毛细血管壁致密度;降低其通透性及脆性；具有抗炎抗过敏作用；具有还原性;有保护酶系的巯基以避免被毒物破坏的作用;可用于铅、汞、砷、苯等的慢性中毒和放射线病；大量维生素C有中和细菌内毒素;促进抗体合成;增强白细胞吞噬功能；促进铁在肠内吸收;对血红蛋白的合成和红细胞的成熟有影响；维生素C对增强鱼的抗病力有重要作用..本品蛋白结合率低..少量贮藏于血浆和细胞;以腺体组织内的浓度为最高..肝内代谢..极少数以原形物或代谢物经肾排泄;可经血液透析清除..维生素C主要用于由维生素C缺乏引起的全身淤点;齿龈、肌肉、关节囊及浆膜腔等出血症状的坏血病..同时可增强机体对传染病的抵抗力;用于结核病、急性或慢性传染病、感染性休克的辅助治疗；缓解应激、解暑热；改善种公畜精液质量；防治代谢性酸中毒、高血钾症的治疗以及氨基甙类对第8对脑神经的损害..此外还可用于各种贫血、肝胆疾病的辅助治疗；促进创伤愈合；缓解砷、汞、铅、苯等慢性中毒..。

实验四果蔬维生素C (抗坏血酸)的测定（荧光法）抗坏血酸溶于水，稍溶于丙酮与低级醇类。

结晶抗坏血酸稳定，水溶液易氧化，遇空气中氧、热、光、碱性物质，特别是在有氧化酶及痕量铜、铁等重金属离子存在时，可促进其氧化破坏进程。

酸性、冷藏、隔氧，可延缓食品中抗坏血酸的破坏。

国内外用于食物中维生素C含量测定的主要方法有三种，即荧光法、2，4二硝基苯肼法、2，6二氯酚靛酚滴定法。

2，6二氯酚靛酚滴定法只能测定食物中还原型抗坏血酸。

由于脱氢型抗坏血酸在人体内与还原型抗坏血酸具有同样的生理功能。

在一般情况下，测定食物中总抗坏血酸。

2，4二硝基苯肼法和荧光法都是测定食物中总抗坏血酸含量的方法。

2，4二硝基苯肼法是比色法，易受杂质干扰，灵敏度较低，而荧光法的灵敏度高于比色法2～3个数量级。

另外，2，4二硝基苯肼法采用85％的浓硫酸作溶剂，实验时不易操作。

荧光法利用硼酸对脱氢抗坏血酸的掩蔽作用可测出杂质的荧光值，从而提高方法的专一性。

因此，荧光法具有灵敏度较高、选择性好、易于操作等优点，但此方法易受仪器条件的限制，所以国标方法中选用荧光法为测定食物中维生素C含量的第一标准方法，而将2，4二硝基苯肼法作为第二法。

一、实验目的与要求1 理解食物中维生素C的分布规律以及维生素C的理化特性。

2 学会用常规的比色法测定食物中维生素C的操作技巧。

3 理解测定维生素C的基本原理。

二、实验原理1 样品中还原型抗坏血酸经活性炭氧化成脱氢型抗坏血酸后，与邻苯二胺（OPDA）反应生成具有荧光的喹喔啉（quinoxaline），其荧光强度与脱氢抗坏血酸的浓度在一定条件下成正比，以此测定食物中抗坏血酸和脱氢抗坏血酸的总量。

2 脱氢抗坏血酸与硼酸可形成复合物而不与OPDA反应，以此排除样品中荧光杂质所产生的干扰。

本方法的最小检出限为0.22g/ml。

3 适用范围根据GB 12392—1990进行检测，本方法适用于蔬菜、水果及其制品中总抗坏血酸的测定。

几种果蔬中维生素C含量的测定参考资料被检测样品的选择被检测的果蔬组织应当尽量选择颜色较浅的样品，但下列两类果蔬不宜选择：第一类是含色素多的果蔬，如青椒、胡萝卜等。

因为过多的色素会遮盖或影响碘与淀粉发生的颜色反应。

如果被检测的果蔬组织颜色较深，可在被检测的果蔬提取液中加一勺白陶土，充分振荡5 min，过滤后再滴定。

第二类是提取液不易过滤的果蔬，如香蕉。

制备果蔬组织提取液应注意的问题第一，尽量除去皮、核等部分，保留可食用的部分。

第二，将果蔬组织彻底粉碎，使组织中的维生素C充分溶解出来，以免造成所测定出的维生素C含量与实际含量有较大误差。

因此，建议使用多功能食物粉碎机粉碎果蔬组织。

第三，粉碎果蔬组织时，可以先加入40 mL蒸馏水，余下的10 mL蒸馏水用来冲洗粉碎机内残存的果蔬组织，以减少组织提取液的损失。

第四，标准维生素C溶液和被检测的果蔬组织提取液的pH，必须调至3左右，以保持溶液的酸性环境，防止维生素C被破坏。

滴定果蔬组织提取液的准备工作第一，滴定前必须将酸式滴定管冲洗干净，可以先用蒸馏水冲洗2～3次，再用碘溶液冲洗2次。

第二，滴定前，还应当严格检查酸式滴定管是否漏水，否则滴定结果会不准确。

第三，将碘溶液倒入酸式滴定管中时，液面应超过刻度0。

在滴定管下方放一烧杯，然后缓缓转动旋栓，排除滴定管下端的气泡，并使碘溶液的液面处于0刻度处。

滴定过程中应注意的问题第一，滴定过程中，要保持缓慢滴定，同时要晃动锥形瓶。

这样既可以防止碘溶液过量，又可以使碘溶液与被滴定溶液充分混合。

第二，滴定标准维生素C溶液时，碘溶液的用量较大，当锥形瓶内的溶液出现棕红色时，已接近氧化还原反应的终点，此时，更要放慢滴定的速度。

第三，每次实验前，都要重新滴定标准维生素C溶液，得出所用的碘溶液量。

因为不同的维生素C药片之间，以及每次所配制的碘溶液（或可溶性淀粉溶液）之间，可能存在着微量的差异，这种差异将导致所用的碘溶液的量不同。

第四，有时仅仅通过观察颜色，不容易确定氧化还原反应是否达到终点。