三聚氰胺检测、奶粉中三聚氰胺、食品中三聚氰胺检测

原料乳及乳制品中三聚氰胺检测方法　楚雪 郑州谱尼测试技术有限公司众所周知，三聚氰胺是一种常见的工业原料，在纺织、橡胶、塑料等行业得到了广泛的应用，而且它的含氮量极高，如果添加到原料乳以及乳制品中，可以造成数据假象，让人们误以为里面含有较多的蛋白质成分。

典型的三聚氰胺检测方法三聚氰胺是一种无色无味的晶体，低毒，微溶于乙醇，可溶于甲醇、甘油、乙酸，不溶于乙醚、苯酚。

目前，三聚氰胺的主要用途是加工塑料、胶水、涂料和阻燃剂。

虽然三聚氰胺毒性较低，但是对于幼儿而言，如果一次性摄入量过多，就会导致肾功能衰竭。

我国明确规定婴幼儿配方奶粉中三聚氰胺的含量不得超过１．０ｍｇ／Ｌ，其他食品中三聚氰胺的含量不得超过２．０ｍｇ／Ｌ。

色谱检测。

第一种，高效液相色谱法。

这种方法简称ＨＰＬＣ法，适用的范围特别广，而且分析速度很快，能够实现自动化检测，是最普遍的检测方法。

目前人们已经加大了研究的力度，并且对检测条件进行了优化，明显缩短了检测时间，而且高效液相色谱法日渐成熟，已经成为了人们检测三聚氰胺的首选方法，具体的检测内容会在本文的第二章节详细介绍。

第二种，气相色谱质谱法。

这种方法简称ＧＣ－ＭＳ法，灵敏度很高，但是由于三聚氰胺的分子质量较小，不容易挥发，所以需要进行衍生处理，提高挥发性，这一过程会造成一定的样品损失。

如果使用硅烷进行衍生处理，可以降低外界环境的干扰，而结合反吹技术，可以省略固相萃取柱净化的环节，这样简化了处理流程。

第三种，液相色谱－串联质谱法。

这种方法使用三氯乙酸溶液对目标分析物进行提取，然后通过离子固相萃取柱净化，在对三聚氰胺进行检测时，方法检测低限为１８μｇ／ｋｇ，与上述两种方法相比，这种方法更加便捷，并且可以使用外标法和内标法进行测量。

光谱检测。

第一种，拉曼法。

ＳＥＲＳ技术可以增强金属表面附着物质的散射信号，并且搜集到具体的结构信息，所以检测人员可以建立一套拉曼光谱扫描系统，对原料乳与三聚氰胺颗粒的混合样本进行检测，就会发现拉曼强度与三聚氰胺的比例存在明显的线性关系。

乳、乳制品及饲料中三聚氰胺的测定一．名词简介1. 三聚氰胺理化性质三聚氰胺：英文名“melamine”，简称三胺，学名三氨三嗪，别名蜜胺、氰尿酰胺、三聚酰胺。

分子式：C3N6H6、C3N3(NH2)3；分子量：126.12；物理性能：白色结晶粉末，无毒，无味；相对密度：1570kg/m³；熔点：在常压下，354℃分解；升华温度：300℃；溶解性：能溶于甲醇、甲醛、乙酸、热乙二醇、甘油、吡啶；微溶于水、乙醇；不溶于乙醚、苯和四氯化碳，水溶液呈弱碱性。

化学性能：三聚氰胺是一种重要的氮杂环有机化工原料，显弱碱性，能够与各种酸反应生成三聚氰胺盐；在强酸或强碱液中，三聚氰胺发生水解，胺基逐步被羟基取代，生成三聚氰酸二酰胺、三聚氰酸一酰胺和三聚氰酸；三聚氰胺与醛类反应生成加成化合物；三聚氰胺与甲醛反应制成树脂，三聚氰胺树脂是一种多种用途的材料，防火耐热且有很高的稳定性，用于生产塑料、地板砖，厨房用具，防火纤维，商业滤膜，胶水和阻燃剂。

2. 乳制品是指以生鲜牛（羊）乳及其制品为主要原料，经加工而制成的各种食品。

本标准所指的乳制品包括液体乳类（杀菌乳、灭菌乳、酸牛乳、配方乳）、乳粉类（全脂乳粉、脱脂乳粉、全脂加糖乳粉和调味乳粉、婴幼儿乳粉、其他配方乳粉）、含乳饮料类、炼乳类（全脂无糖炼乳、全脂加糖炼乳、调味炼乳；配方炼乳）、乳脂肪类（稀奶油、奶油、无水奶油）、干酪类（原干酪；再制干酪）、乳冰淇淋类（乳冰淇淋、乳冰）和其他乳制品类（干酪素、乳糖、乳清粉、浓缩乳清蛋白）等。

二．高效液相色谱法测定1. 原理试样经溶解、超声提取、沉淀蛋白、过滤得到测试液，经高效液相色谱测定，根据保留时间和紫外吸收光谱定性，根据峰面积进行定量。

2 试剂方法中所用试剂，除另有规定外，均为分析纯试剂，水为GB/T 6682-2008中一级用水，溶液为水溶液。

2.1磺基水杨酸。

2.2柠檬酸。

2.3 辛烷磺酸钠：高效液相色谱离子对试剂。

三聚氰胺检测标准ICS 67.100C 53中华人民共和国国家标准GB/T 22388—2008原料乳与乳制品中三聚氰胺检测方法Determination of melamine in raw milk and dairy products2008-10-07 发布2008-10-07 实施中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局中国国家标准化管理委员会发布前言本标准包括三个方法：第一法高效液相色谱法，第二法液相色谱-质谱/质谱法，第三法气相色谱-质谱联用法，检测时，应根据检测对象及其限量的规定，选用与其相适应的检测方法。

本标准的附录A 为资料性附录。

本标准由全国食品安全应急标准化工作组、全国质量监管重点产品检验方法标准化技术委员会提出并归口。

本标准第一法起草单位：中国检验检疫科学研究院、中国疾病预防控制中心、国家食品质量安全监督检验中心、北京市疾病预防控制中心、国家乳制品质量监督检验中心、浙江省质量技术监督检测研究院、国家加工食品质量监督检验中心（广州）。

本标准第一法主要起草人：宋书锋、鲁杰、安娟、杨大进、李淑娟、张晶、刘艳琴、杨红梅、杨金宝、鄂来明、廖上富、陈小珍、蔡依军、郭新东、吴玉銮。

本标准第二法起草单位：中国检验检疫科学研究院、北京市疾病预防控制中心、国家食品质量安全监督检验中心、中国疾病预防控制中心、中华人民共和国江苏出入境检验检疫局。

本标准第二法主要起草人：彭涛、吴永宁、邵兵、王浩、李晓娟、郭启雷、苗虹、赵云峰、丁涛、李立、蒋原。

本标准第三法起草单位：上海市质量监督检验技术研究院、国家食品质量安全监督检验中心、中国检验检疫科学研究院。

本标准第三法主要起草人：巢强国、常宇文、雷涛、陈冬东、赵玉琪、周耀斌、穆同娜、葛宇、曹程明、张辉、麦成华、曹红。

GB/T 22388—20082原料乳与乳制品中三聚氰胺检测方法1 范围本标准规定了原料乳、乳制品以及含乳制品中三聚氰胺的三种测定方法，即高效液相色谱法（HPLC）、液相色谱-质谱/质谱法（LC-MS/MS）和气相色谱-质谱联用法[包括气相色谱-质谱法（GC-MS），气相色谱-质谱/质谱法（GC-MS/MS）]。

2012.10.23-2012.10.25奶粉的理化指标和三聚氰胺的检测姓名（学号）苏州大学材料与化学化工学部09级化学专业摘要:本实验选用高钙奶粉做样品，对其进行简单的预处理，利用凯氏定氮法和分光光度法测定奶粉的理化指标及其氮含量，并通过火焰原子吸收法测定铜含量。

关键词：三聚氰胺、奶粉、检测Abstract：This experiment chooses high calcium milk powder to do samples, with simple pretreatment, then using kjeldahl determination and spectrophotometry to determine the milk powder's physical and chemical parameter and nitrogen content, and use the flame atomic absorption spectrometry to determine the copper content. Keyword：tripolycyanamide、milk powder、detection1.前言乳及乳制品成分复杂，主要包括水、蛋白质、脂肪、乳糖、无机盐、维生素和酶等。

由于在其加工过程中可能受到污染以及不法商人恶意添加三聚氰胺等因素，对乳制品中各种成分和物质的检测分析极为重要。

蛋白质是含氮有机物，乳粉样品与硫酸一同加热消化后，其中有机物会分解为二氧化碳和水，蛋白质分解为氨，滞留在溶液中，然后通过碱化溶液释放氨气，用硼酸溶液吸收，测定其分光光度，乘以其换算系数即为蛋白质含量。

碱性溶液中用次溴酸盐氧化氨为亚硝酸盐，在pH=2溶液中，亚硝酸根与磺胺反应生成重氮化合物，再与萘乙二胺反应生成偶氮染料，呈紫红色，最大吸收波长为543nm，摩尔吸光系数为5×104，浓度在0.1mg•L-1以内符合比尔定律。

奶粉中三聚氰胺的测定方法发布时间：2008年9月22日GC-MS法测定动物食品中的三聚氰胺Spectra-Quad实现三聚氰胺含量在线检测超高效液相色谱—电喷雾串联质谱法测定饲料中残留的三聚氰胺反相高效液相色谱法测定饲料中三聚氰胺的含量高效液相色谱-二极管阵列法测定高蛋白食品中的三聚氰胺高效液相色谱法（HPLC）测定饲料中三聚氰胺的含量高效液相色谱-四极杆质谱联用测定饲料中三聚氰胺含量固相萃取与高效液相色谱联用测定宠物食品中三聚氰胺液相色谱串联质谱法（LC-MSMS）分析宠物食品中三聚氰胺液相色谱-串联质谱法测定饲料中三聚氰胺残留GC-MS法测定动物食品中的三聚氰胺测定方法本实验中综合各方法稳定性进行比较，主要介绍以下三种：• 固相萃取（SPE）方法*HPLC-UV检测方法•LC-MS检测方法（仅供参考）检测中所需的仪器与条件・Agile ntllOO高效液相色谱仪(美国，Agile nt公司)；二极管阵列检测器(DAD)，检测波长240nm,柱温：40C。

(1)AgelaVenusilTMASBC18(4.6 x 250mm);缓冲液：10mM 柠檬酸,10mM 庚烷磺酸钠；流动相：缓冲溶液：乙腈=85: 15;流速：1.0mL/min。

(2)AgelaVenusilTMASBC8(4.6 x 250mm);流动相：缓冲液：乙腈=85 : 15;缓冲液：10mM 柠檬酸，10mM辛烷磺酸钠，调pH为3.0;流速：1.0mL/min ;*离子交换固相萃取柱AgelaClearnertTMPCX(北京艾杰尔科技有限公司)混合型的阳离子交换柱(Cleanert PCX 60mg/3mL)50支*台式高速(微量)离心机TG16-WS/TG16-W (湖南湘仪离心机仪器有限公司)(1)角转子：12* 1.5ml; 12* 10ml 转速》8000rpm/min，微机控制可定时；常温(2)离心管：10ml.或1.5ml (一套)*三聚氰胺标准品1瓶(250mg, > 99.5%)*三聚氰胺分析方法手册1份其他试剂饲料/奶粉样品；甲醇、乙腈；氨水、乙酸铅、三氯乙酸、柠檬酸、庚烷磺酸钠、辛烷磺酸钠(Sigma公司)；甲醇为色谱纯，其他均为化学纯。

食品中三聚氰胺的检测方法进展摘要:三聚氰胺是一种用途十分广泛的有机化工产品,由于其含氮量高达66%,因此近年来被不法商家利用。

国内外三聚氰胺的分析方法很多,本文综述了三聚氰胺的各种检测方法,并且比较了不同方法的优缺点及其实用性,意在找出最快速、便捷、成本低的检测方法。

关键词:三聚氰胺检测食品方法三聚氰胺作为一种重要的化工原料,常用于制造三聚氰胺树脂该物质,是建筑业中常用的防火阻燃燃料[1]。

三聚氰胺既不是食品原料,也不是食品添加剂,但与蛋白质相比其含氮量更高,并且价格较蛋白质便宜很多,因此一些不法商家将其添加在食品或饲料中,钻国家目前蛋白质检测方法的空子,以形成产品中蛋白质含量高的假象[2],从而获得更高的利益。

这种手段造成了极其恶劣的社会影响,也给国家带来了严重的经济损失。

如今三聚氰胺的分析检测问题已成为一个热点问题,受到广泛的关注。

本文对三聚氰胺的各种检测方法进行归纳总结,为三聚氰胺的快速检测提供理论依据。

近几年三聚氰胺的检测方法发展迅速,已经由早期的苦味酸法和升华法到后来的高效液相色谱法、液相色谱法-质谱联用法、气相色谱-质谱联用法,到现在的酶联免疫法、金纳米粒子光度法和胶体金免疫层析法等。

三聚氰胺的分析检测方法在仪器上不断提高,在精确度上也是逐步提升,时间上不断缩短。

1 重量法重量法包括苦味酸法和升华法,其反应原理简单,但精确度不高。

苦味酸法方法原理是将水加入试样,加热溶解后,加人苦味酸溶液,称量所生成的苦味酸三聚氰胺沉淀的质量,即测得三聚氰胺纯度含量。

升华法测定原理是在升华装置中将试样在负压下进行加热,让三聚氰胺完全升华后,称其残渣量,即测得三聚氰胺纯度[3]。

2 高效液相色谱法(HPLC)国家标准GB/T 22400-2008[4]公布了原料乳中三聚氰胺快速检测的高效液相色谱法,采用乙腈作为原料乳中的蛋白质沉淀剂和三聚氰胺提取剂,0.2μm微孔滤膜过滤后供HPLC测定。

采用紫外/二极管阵列检测器检测,该方法的检出限为0.05 mg/kg,重复性好,再现性强。

中华人民共和国质量监督检验检疫ICS 67.100.10 X 82中华人民共和国国家标准中华人民共和国质量监督检验检疫总局 乳与乳制品中三聚氰胺残留的测定—高效液相色谱法Milk and Milk Product Detection ofMelamine Residues —HPLCA.1乳与乳制品中三聚氰胺残留的测定—高效液相色谱法1 范围本方法规定了用HPLC与GC-MS测定三聚氰胺的方法。

本方法适用于乳与乳制品中三聚氰胺含量的测定。

本方法三聚氰胺的最低检出限为1.0mg/kg。

1 规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。

凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。

凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。

NY/T 1372-2007 饲料中三聚氰胺的测定GB5009.1 食品卫生检验方法理化部分总则GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法2 原理试样中的三聚氰胺用乙腈、水的混合溶液萃取，乙酸锌溶液沉淀蛋白质后，提取液经混合型阳离子交换固相萃取柱净化，净化液用高效液相色谱进行测定，外标法定量。

3 试剂与材料：除另有规定外，试剂为分析纯，水符合GB/T6682规定的三级水，色谱用水符合一级水的规定。

3.1 乙腈：色谱纯3.2 甲醇：色谱纯3.3 氨水：浓度25%～28%3.4混合型阳离子交换固相萃取小柱：60mg/3mL3.5 三氯乙酸溶液10g/L ：称取10g三氯乙酸加水至1000mL。

3.6 乙腈水溶液：乙腈:水为50：503.7 盐酸溶液：0.1mol/L3.8 氨水-甲醇溶液：量取5mL 氨水，溶解于100mL 甲醇中。

3.9 乙酸锌溶液219 g/L：取219g乙酸锌用300mL 水溶解后，定溶至1L。

3.10 20%甲醇溶液：200mL 甲醇，溶解于800mL 水中。