色谱图
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循序渐进学色谱-认识并解读色谱图如果你是一名初学者,下面的文章对你来说是最重要的,而且如果你想正确地维护在线色谱,下面的文章将引导你走向正确的方向。
那么,这是为什么呢?首先,我们先弄清楚一个概念,什么叫色谱图。
色谱图:由色谱柱流出物通过检测器及信号处理系统产生连续的响应信号在记录仪上体现出随时间和信号强度不同而变化的轨迹。
完整的一个运行周期所产生的轨迹集合就是一个运行周期的色谱图。
在线色谱的色谱图是全面体现色谱柱效、柱切阀动作状态、载气控制系统、柱温控制系统、检测器灵敏度、信号处理系统、分析方法设定、积分事件设定等重要标志。
如同心电图,可通过图上的特征来判断心脏和血液循环系统的健康状态。
那么,色谱图的正确解读就可以判断色谱整机的工作状态是否正常。
接下来,继续对色谱图上的一些基本概念做一个介绍。
了解它们将有助于深入解读色谱图与色谱硬件之间的相互关系。
基线:在无样品注入色谱柱时,检测器的输出信号随时间变化的曲线轨迹。
稳定的基线近似为一条直线,它一般应平行于时间轴。
基线噪音:指基线的随机波动性。
基线信号所产生的波动,通常是因为电子板卡的规律性和随机性扰动;检测器敏感元件规律性和随机性扰动;色谱柱固定相和流动相不稳定性等所致。
基线噪音是永远存在且要保持相对稳定性的,若基线噪音过大,表明色谱主机的某些系统状态异常。
基线漂移:基线偏离相对零点并随时间而产生的缓慢变化。
主要由于操作条件如电压、温度、流动相及流量的不稳定所引起,柱内的污染物或固定相不断被洗脱下来也会产生漂移。
最小检测质量:检测器恰能辨识出区别于基线噪音的最小进样质量。
对于在线色谱来说,进样量的多少正比于定量管容积和待测组份浓度。
最小检测浓度:在进样量不变的情况下,检测器恰能辨识出区别于基线噪音的某一个样品最低浓度。
新的标准规定,峰高要等于基线噪音的3倍,我们可以用信噪比来描述它。
峰:组份流经检测器时其对应的连续信号产生类似三角形的曲线。
正常色谱峰近似于对称性正态分布曲线。
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色谱图:由色谱柱流出物通过检测器及信号处理系统产生连续的响应信号在记录仪上体现出随时间和信号强度不同而变化的轨迹。
完整的一个运行周期所产生的轨迹集合就是一个运行周期的色谱图。
在线色谱的色谱图是全面体现色谱柱效、柱切阀动作状态、载气控制系统、柱温控制系统、检测器灵敏度、信号处理系统、分析方法设定、积分事件设定等重要标志。
如同心电图,可通过图上的特征来判断心脏和血液循环系统的健康状态。
那么,色谱图的正确解读就可以判断色谱整机的工作状态是否正常。
接下来,继续对色谱图上的一些基本概念做一个介绍。
了解它们将有助于深入解读色谱图与色谱硬件之间的相互关系。
基线:在无样品注入色谱柱时,检测器的输出信号随时间变化的曲线轨迹。
稳定的基线近似为一条直线,它一般应平行于时间轴。
基线噪音:指基线的随机波动性。
基线信号所产生的波动,通常是因为电子板卡的规律性和随机性扰动;检测器敏感元件规律性和随机性扰动;色谱柱固定相和流动相不稳定性等所致。
基线噪音是永远存在且要保持相对稳定性的,若基线噪音过大,表明色谱主机的某些系统状态异常。
基线漂移:基线偏离相对零点并随时间而产生的缓慢变化。
主要由于操作条件如电压、温度、流动相及流量的不稳定所引起,柱内的污染物或固定相不断被洗脱下来也会产生漂移。
最小检测质量:检测器恰能辨识出区别于基线噪音的最小进样质量。
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最小检测浓度:在进样量不变的情况下,检测器恰能辨识出区别于基线噪音的某一个样品最低浓度。
新的标准规定,峰高要等于基线噪音的3倍,我们可以用信噪比来描述它。
峰:组份流经检测器时其对应的连续信号产生类似三角形的曲线。
正常色谱峰近似于对称性正态分布曲线。
第一章色谱图概述第一节色谱图的获得色谱法(!"#$%&’$(#&)"*)是一种目前使用最广泛的和有效的分离、分析方法。
色谱(!"#$%&’$(#&%)这一概念最早是由俄国植物学家+,-.’’提出,/012年他在一根细长的玻璃管中装入碳酸钙粉末,然后把植物绿叶的石油醚的萃取液倒入管中的碳酸钙上,萃取液的色素就被吸附在管上部的碳酸钙上,再用纯净的石油醚洗脱这些被吸附的色素,于是在碳酸钙上形成了一圈一圈的色带(图34/4/),这些色带被称为色谱,这就是世界上得到的最早的色谱图。
柱中的碳酸钙被称为固定相(,’&’5$6&#*)"&,.),而用作洗脱液的石油醚则被称为流动相(%$758.)"&,.),流动相可以是气体、液体和超临界流体。
将欲被分离的混合物放在固定相上,然后用流动相去洗脱放在固定相上的混合物,这一过程称为洗脱(.89’5$6)。
在洗脱过程中混合物中的不同组分得到分离,陆续从固定相中洗脱下来。
记录这一分离和洗脱过程的图谱就是色谱图34/4/+,-.’’色谱分离示意图(&)刚刚加入萃取液;(7)已加入部分溶剂淋洗图(!"#$%&’$(#&%)。
色谱方法种类很多,分类的方法也很多。
根据流动相是气体还是液体,色谱可分为气相色谱((&,!"#$%&’$(#&)"*)和液相色谱(85:95;!"#$%&’$(#&)"*)。
当流动相是在接近它的临界温度和压力下工作的液体,而这种液体在常温和常压下是气体时,这种流动相就不能简单地说是气体或液体了,这种色谱就称为超临界流体色谱(,9).#!#5’5!&8<895;!"#$%&’$(#&)"*)。
Named Numeric Color Name Hex RGB Decimal LightPink浅粉红#FFB6C1255,182,193Pink粉红#FFC0CB255,192,203Crimson猩红/深红#DC143C 220,20,60LavenderBlush淡紫红#FFF0F5 255,240,245PaleVioletRed弱紫罗兰红#DB7093219,112,147HotPink热情的粉红#FF69B4 255,105,180DeepPink深粉红#FF1493255,20,147MediumVioletRed中紫罗兰红#C71585 199,21,133Orchid兰花紫#DA70D6218,112,214Thistle蓟#D8BFD8 216,191,216Plum李子紫#DDA0DD221,160,221Violet紫罗兰#EE82EE238,130,238Magenta洋红/玫瑰红#FF00FF 255,0,255Fuchsia灯笼海棠/紫红#FF00FF255,0,255DarkMagenta深洋红#8B008B 139,0,139Purple紫色#800080 128,0,128MediumOrchid中兰花紫#BA55D3186,85,211DarkViolet暗紫罗兰#9400D3 148,0,211DarkOrchid暗兰花紫#9932CC 153,50,204 Indigo靛青/紫兰色#4B008275,0,130 BlueViolet蓝紫罗兰#8A2BE2 138,43,226 MediumPurple中紫色#9370DB 147,112,219 MediumSlateBlue中板岩蓝#7B68EE123,104,238 SlateBlue板岩蓝#6A5ACD106,90,205 DarkSlateBlue暗板岩蓝#483D8B 72,61,139 Lavender熏衣草淡紫#E6E6FA 230,230,250 GhostWhite幽灵白#F8F8FF 248,248,255Blue纯蓝#0000FF 0,0,255MediumBlue中蓝色#0000CD0,0,205 MidnightBlue午夜蓝#191970 25,25,112 DarkBlue暗蓝色#00008B 0,0,139Navy海军蓝#000080 0,0,128RoyalBlue皇家蓝/宝蓝#4169E1 65,105,225 CornflowerBlue矢车菊蓝#6495ED100,149,237 LightSteelBlue亮钢蓝#B0C4DE 176,196,222 LightSlateGray亮石板灰#778899 119,136,153 SlateGray石板灰#708090 112,128,144DodgerBlue道奇蓝#1E90FF30,144,255AliceBlue爱丽丝蓝#F0F8FF 240,248,255SteelBlue钢蓝/铁青#4682B4 70,130,180 LightSkyBlue亮天蓝色#87CEFA135,206,250 SkyBlue天蓝色#87CEEB135,206,235 DeepSkyBlue深天蓝#00BFFF0,191,255 LightBlue亮蓝#ADD8E6173,216,230 PowderBlue火药青#B0E0E6 176,224,230 CadetBlue军服蓝#5F9EA0 95,158,160 Azure蔚蓝色#F0FFFF240,255,255 LightCyan淡青色#E0FFFF224,255,255 PaleTurquoise弱绿宝石#AFEEEE175,238,238 Cyan青色#00FFFF0,255,255 Aqua水色#00FFFF0,255,255 DarkTurquoise暗绿宝石#00CED10,206,209 DarkSlateGray暗石板灰#2F4F4F47,79,79 DarkCyan暗青色#008B8B 0,139,139 Teal水鸭色#0080800,128,128 MediumTurquoise中绿宝石#48D1CC72,209,204 LightSeaGreen 浅海洋绿#20B2AA32,178,170 Turquoise绿宝石#40E0D064,224,208 Aquamarine宝石碧绿#7FFFD4127,255,212 MediumAquamarine 中宝石碧绿#66CDAA 102,205,170 MediumSpringGreen中春绿色#00FA9A 0,250,154 MintCream薄荷奶油#F5FFFA245,255,250 SpringGreen春绿色#00FF7F0,255,127 MediumSeaGreen中海洋绿#3CB37160,179,113 SeaGreen海洋绿#2E8B5746,139,87 Honeydew蜜瓜色#F0FFF0240,255,240 LightGreen淡绿色#90EE90144,238,144 PaleGreen弱绿色#98FB98152,251,152 DarkSeaGreen暗海洋绿#8FBC8F 143,188,143 LimeGreen闪光深绿#32CD32 50,205,50 Lime闪光绿#00FF00 0,255,0 ForestGreen森林绿#228B2234,139,34 Green纯绿#008000 0,128,0 DarkGreen暗绿色#0064000,100,0 Chartreuse**查特酒绿#7FFF00 127,255,0 LawnGreen草坪绿#7CFC00 124,252,0 GreenYellow绿黄色#ADFF2F173,255,47 DarkOliveGreen暗橄榄绿#556B2F85,107,47 YellowGreen黄绿色#9ACD32154,205,50OliveDrab橄榄褐色#6B8E23 107,142,35 Beige米色/灰棕色#F5F5DC245,245,220 LightGoldenrodYellow亮菊黄#FAFAD2250,250,210 Ivory象牙#FFFFF0255,255,240 LightYellow浅黄色#FFFFE0255,255,224 Yellow纯黄#FFFF00255,255,0 Olive橄榄#808000 128,128,0 DarkKhaki深卡叽布#BDB76B189,183,107 LemonChiffon柠檬绸#FFFACD255,250,205 PaleGoldenrod灰菊黄#EEE8AA 238,232,170 Khaki卡叽布#F0E68C 240,230,140 Gold金色#FFD700 255,215,0 Cornsilk玉米丝色#FFF8DC255,248,220 Goldenrod金菊黄#DAA520218,165,32 DarkGoldenrod暗金菊黄#B8860B184,134,11 FloralWhite花的白色#FFFAF0 255,250,240 OldLace旧蕾丝#FDF5E6 253,245,230 Wheat小麦色#F5DEB3245,222,179 Moccasin鹿皮靴#FFE4B5255,228,181 Orange橙色#FFA500255,165,0 PapayaWhip番木瓜#FFEFD5255,239,213 BlanchedAlmond发白的杏仁色#FFEBCD255,235,205 NavajoWhite土著白#FFDEAD 255,222,173 AntiqueWhite古董白#FAEBD7250,235,215 Tan茶色#D2B48C210,180,140 BurlyWood硬木色#DEB887222,184,135 Bisque 陶坯黄#FFE4C4255,228,196 DarkOrange深橙色#FF8C00255,140,0 Linen亚麻布#FAF0E6250,240,230 Peru秘鲁#CD853F205,133,63 PeachPuff桃肉色#FFDAB9255,218,185 SandyBrown沙棕色#F4A460244,164,96 Chocolate巧克力#D2691E210,105,30 SaddleBrown马鞍棕色#8B4513 139,69,19 Seashell海贝壳#FFF5EE 255,245,238 Sienna黄土赭色#A0522D160,82,45 LightSalmon浅鲑鱼肉色#FFA07A255,160,122 Coral珊瑚#FF7F50 255,127,80 OrangeRed橙红色#FF4500255,69,0 DarkSalmon深鲜肉/鲑鱼色#E9967A233,150,122Tomato番茄红#FF6347255,99,71 MistyRose薄雾玫瑰#FFE4E1 255,228,225 Salmon鲜肉/鲑鱼色#FA8072250,128,114 Snow雪#FFFAFA 255,250,250 LightCoral淡珊瑚色#F08080 240,128,128 RosyBrown玫瑰棕色#BC8F8F188,143,143 IndianRed 印度红#CD5C5C 205,92,92 Red纯红#FF0000 255,0,0 Brown棕色#A52A2A 165,42,42 FireBrick耐火砖#B22222178,34,34 DarkRed深红色#8B0000139,0,0 Maroon栗色#800000128,0,0 White纯白#FFFFFF255,255,255 WhiteSmoke白烟#F5F5F5245,245,245 Gainsboro庚斯博罗灰色#DCDCDC220,220,220 LightGrey浅灰色#D3D3D3 211,211,211 Silver银灰色#C0C0C0192,192,192 DarkGray深灰色#A9A9A9169,169,169 Gray灰色#808080128,128,128 DimGray暗淡的灰色#696969 105,105,105 Black纯黑#000000 0,0,0。
怎样分析气相色谱图 The manuscript was revised on the evening of 2021在实际工作中,当我们拿到一个样品,我们该怎样定性和定量,建立一套完整的分析方法是关键,下面介绍一些常规的步骤:1、样品的来源和预处理方法GC能直接分析的样品通常是气体或液体,固体样品在分析前应当溶解在适当的溶剂中,而且还要保证样品中不含GC不能分析的组分(如无机盐),可能会损坏色谱柱的组分。
这样,我们在接到一个未知样品时,就必须了解的来源,从而估计样品可能含有的组分,以及样品的沸点范围。
如果样品体系简单,试样组分可汽化则可直接分析。
如果样品中有不能用GC直接分析的组分,或样品浓度太低,就必须进行必要的预处理,如采用吸附、解析、萃取、浓缩、稀释、提纯、衍生化等方法处理样品。
2、确定仪器配置所谓仪器配置就是用于分析样品的方法采用什么进样装置、什么载气、什么色谱柱以及什么检测器。
一般应首先确定检测器类型。
碳氢化合物常选择FID检测器,含电负性基团(F、Cl等)较多且碳氢含量较少的物质易选择ECD检测器;对检测灵敏度要求不高,或含有非碳氢化合物组分时,可选择TCD检测器;对于含硫、磷的样品可选择FPD检测器。
对于液体样品可选择隔膜垫进样方式,气体样品可采用六通阀或吸附热解析进样方法,一般色谱仅配置隔膜垫进样方式,所以气体样品可采用吸附-溶剂解析-隔膜垫进样的方式进行分析。
根据待测组分性质选择适合的色谱柱,一般遵循相似相容规律。
分离非极性物质时选择非极性色谱柱,分离极性物质时选择极性色谱柱。
色谱柱确定后,根据样本中待测组分的分配系数的差值情况,确定色谱柱工作温度,简单体系采用等温方式,分配系数相差较大的复杂体系采用程序升温方式进行分析。
常用的载气有氢气、氮气、氦气等。
氢气、氦气的分子量较小常作为填充柱色谱的载气;氮气的分子量较大,常作为毛细管气相色谱的载气;气相色谱质谱用氦气作为载气。
3、确定初始操作条件当样品准备好,且仪器配置确定之后,就可开始进行尝试性分离。
通信电缆色谱组成分序始终共有10种颜色组成,由5种主色和5种次色;5种主色和5种次色又组成25种色普,不管通信电缆对数多大,通常大对数通信电缆都是按25对色为一小把标识组成。
通常HYA通信电缆分为:10对,20对,30对,50对,100对,200对,300对。
2400对。
5种主色:白色、红色、黑色、黄色、紫色5种次色:兰色、桔色、绿色、棕色、灰色通信电缆线序色谱认识举例说明:10对通信电缆色谱线序表1对—白兰2对—白桔3对—白绿4对—白棕5对—白灰6对—红兰7对—红桔8对—红绿9对—红棕10对—红灰20对通信电缆色谱线序表1对—白兰2对—白桔3对—白绿4对—白棕5对—白灰6对—红兰7对—红桔8对—红绿9对—红棕10对—红灰11对—黑兰12对—黑桔13对—黑绿14对—黑棕15对—黑灰16对—黄兰17对—黄桔18对—黄绿19对—黄棕20对—黄灰30对通信电缆色谱线序说明:30对的通信电缆要注意了,30对通信电缆里有2种白色的主色,大于25对了就一定要看标识线了!!有一小把是用“白兰”标识线缠着的,另有5对线用“白桔”标识缠着!(注意:这25对用“白兰”色环标识线缠着)1对—白兰2对—白桔3对—白绿4对—白棕5对—白灰6对—红兰7对—红桔8对—红绿9对—红棕10对—红灰11对—黑兰12对—黑桔13对—黑绿14对—黑棕15对—黑灰16对—黄兰17对—黄桔18对—黄绿19对—黄棕20对—黄灰21对—紫兰22对—紫桔23对—紫绿24对—紫棕25对—紫灰(注意:这5对有”白桔”标识缠着)21对—白兰22对—白桔23对—白绿24对—白棕25对—白灰50对通信电缆色谱线序:说明:50对的通信电缆要注意了,50对通信电缆里有2种标识线,前25对是用“白兰”标识线缠着的!!后25对是用“白桔”标识线缠着的!!(注意:这25对用“白兰”标识线缠着)1对—白兰2对—白桔3对—白绿4对—白棕5对—白灰6对—红兰7对—红桔8对—红绿9对—红棕10对—红灰11对—黑兰12对—黑桔13对—黑绿14对—黑棕15对—黑灰16对—黄兰17对—黄桔18对—黄绿19对—黄棕20对—黄灰21对—紫兰22对—紫桔23对—紫绿24对—紫棕25对—紫灰(用“白桔”标识线缠着)26对—白兰27对—白桔28对—白绿29对—白棕30对—白灰31对—红兰32对—红桔33对—红绿34对—红棕35对—红灰36对—黑兰37对—黑桔38对—黑绿39对—黑棕40对—黑灰41对—黄兰42对—黄桔43对—黄绿44对—黄棕45对—黄灰46对—紫兰47对—紫桔48对—紫绿49对—紫棕50对—紫灰100对通信电缆色谱线序表说明:100对的通信电缆里有4种标识线,第一的25对是用“白兰”标识线缠着的!!第二的25对是用“白桔”标识线缠着的!第三的25对是用“白绿”标识线缠着的!第四的25对是用“白棕”标识线缠着的!(注意:用“白兰”标识线缠着)1对—白兰2对—白桔3对—白绿4对—白棕5对—白灰6对—红兰7对—红桔8对—红绿9对—红棕10对—红灰11对—黑兰12对—黑桔13对—黑绿14对—黑棕15对—黑灰16对—黄兰17对—黄桔18对—黄绿19对—黄棕20对—黄灰21对—紫兰22对—紫桔23对—紫绿24对—紫棕25对—紫灰(注意:用“白桔”标识线缠着)26对—白兰27对—白桔28对—白绿29对—白棕30对—白灰31对—红兰32对—红桔33对—红绿34对—红棕35对—红灰36对—黑兰37对—黑桔38对—黑绿39对—黑棕40对—黑灰41对—黄兰42对—黄桔43对—黄绿44对—黄棕45对—黄灰46对—紫兰47对—紫桔48对—紫绿49对—紫棕50对—紫灰(注意:用“白绿”标识线缠着)51对—白兰52对—白桔53对—白绿54对—白棕55对—白灰56对—红兰57对—红桔58对—红绿59对—红棕60对—红灰61对—黑兰62对—黑桔63对—黑绿64对—黑棕65对—黑灰66对—黄兰67对—黄桔68对—黄绿69对—黄棕70对—黄灰71对—紫兰72对—紫桔73对—紫绿74对—紫棕75对—紫灰(注意:用“白棕”标识线缠着)76对—白兰77对—白桔78对—白绿79对—白棕80对—白灰81对—红兰82对—红桔83对—红绿84对—红棕85对—红灰86对—黑兰87对—黑桔88对—黑绿89对—黑棕90对—黑灰91对—黄兰92对—黄桔93对—黄绿94对—黄棕95对—黄灰96对—紫兰97对—紫桔98对—紫绿99对—紫棕100对—紫灰200对通信电缆色谱线序表(大对数电缆)说明:100对的通信电缆里有4种标识线,第一的25对是用“白兰”标识线缠着的!!第二的25对是用“白桔”标识线缠着的!第三的25对是用“白绿”标识线缠着的!第四的25对是用“白棕”标识线缠着的!第五的25对是用“白灰”标识线缠着的!第六的25对是用“红兰”标识线缠着的!第七的25对是用“红桔”标识线缠着的!第八的25对是用“红绿”标识线缠着的!。
气相色谱谱图分析气相色谱主要是利用物质的沸点、极性以及吸附性质差异来实现混合物的分离,气相色谱仪由六大系统组成,分别是:载气系统、进样系统、分离系统、温度控制系统、检测系统、数据处理系统。
气相分析过程如图所示:GC基本工作原理是利用试样中各组份在气相和固定相间的分配系数不同,当样品在气化室气化后被载气带入色谱柱,由于固定相对各组份的吸附或溶解能力不同进行分离,分离后的物质进入检测器后转化为信号,在数据处理系统中以色谱峰的显示体现,根据色谱图对物质进行定性和定量分析。
在气相色谱分析时,经常会因为很多问题导致谱图出现异常,到底是什么原因呢?1.在溶剂验收时,纯溶剂进样后出现杂峰,就一定是溶剂有杂质?如果进空白针后也存在杂峰,连续进针后,峰面积逐渐减少,优先考虑仪器系统流路问题出现的杂峰。
可以从以下几个方面逐一排查:1)气源是否有问题;2)进样针,洗针瓶,隔垫,衬管,分流平板是否有污染;3)色谱柱是否有污染;4)检测器是否有污染等。
2.出现前沿峰1)样品过载,需稀释样品,减少进样量;2)载气流速过高;3)柱温太低,升高柱温;4)气化室温度太低;5)可能存在干扰峰,需要优化色谱条件;6)色谱柱选型错误,老化程度不够等。
3.出现拖尾峰1)衬管、分流平板或色谱柱被污染,或色谱柱安装不当,存在死体积;2)柱温或进样器温度低,升高温度;3)载气流量偏低;4)进样量大,减少进样量货增大分流比;5)进样器或气化室被高沸点杂质或残留污染等。
4.出现鬼峰1)色谱柱有残留,未完全老化;2)气化室、注射针等被污染或载气纯度不够;3)气化温度过高使样品某些组分分解;4)样品中有空气或TCD、ECD等密封性差(有漏气)等。
5.操作条件不变,原来可以分离的峰不见了?1)色谱柱被污染或者失效;2)载气系统被污染(载气纯度低或过滤器失效);3)注射垫或注射针漏气等。
6.进样后不出峰或者峰很小?1)检查检测器的信号值,信号值正常时,优先考虑进样口问题;2)进样针漏气或者堵塞;3)进样温度太低导致样品不能气化或柱温太低,导致样品在柱中冷凝;4)如果是FID,需要检查FID火焰是否点燃等。
chromatogram
样品流经色谱柱和检测器,所得到的信号-时间曲线,又称色谱流出曲线(elution profile)。
色谱图是指被分离组分的检测信号随时间分布的图象。
色谱图形状随色谱方法和检测记录的方式不同而不同,迎头色谱和顶替色谱的色谱图为一系列台阶;在洗脱法色谱中,若采用微分型检测器时,分离组分的检测信号随时间变化的图形为近似于高斯分布的一组色谱峰群,色谱图的纵坐标为检测器的响应信号,横坐标为时间、体积或距离。
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相关术语
⊕色谱图(chromatogram)--样品流经色谱柱和检测器,所得到的信号-时间曲线,又称色谱流出曲线(elution profile).
⊕基线(base line)--流动相冲洗,柱与流动相达到平衡后,检测器测出一段时间的流出曲线。
一般应平行于时间轴。
⊕噪音(noise)――基线信号的波动。
通常因电源接触不良或瞬时过载、检测器不稳定、流动相含有气泡或色谱柱被污染所致。
⊕漂移(drift)基线随时间的缓缓变化。
主要由于操作条件如电压、温度、流动相及流量的不稳定所引起,柱内的污染物或固定相不断被洗脱下来也会产生漂移。
⊕色谱峰(peak)--组分流经检测器时相应的连续信号产生的曲线。
流出曲线上的突起部分。
正常色谱峰近似于对称性正态分布曲线(高斯Gauss曲线)。
不对称色谱峰有两种:前延峰(leading peak)和脱尾峰(tailing peak ).前者少见。
⊕拖尾因子(tailing factor,T)--T=B/A,用以衡量色谱峰的对称性。
也称为对称因子(symmetry factor)或不对称因子(asymmetry factor)《中国药典》规定T
应为0.95~1.05。
T<0.95为前延峰,T>1.05为拖尾峰。
⊕峰底――基线上峰的起点至终点的距离。
⊕峰高(Peak height,h)――峰的最高点至峰底的距离。
⊕峰宽(peak width,W)--峰两侧拐点处所作两条切线与基线的两个交点间的距离。
W=4σ。
⊕半峰宽(peak width at half-height,Wh/2)--峰高一半处的峰宽。
W h/2=2. 355σ。
⊕标准偏差(standard deviation, σ)--正态分布曲线x=±1时(拐点)的峰宽之半。
正常峰宽的拐点在峰高的0.607倍处。
标准偏差的大小说明组分在流出色谱柱过程中的分散程度。
σ小,分散程度小、极点浓度高、峰形瘦、柱效高;反之,σ大,峰形胖、柱效低。
⊕峰面积(peak area,A)――峰与峰底所包围的面积。
A=×σ×h=2.507σh=1.064Wh/2h
1、色谱分离基本原理:
在色谱法中存在两相,一相是固定不动的,我们把它叫做固定相;另一相则不断流过固定相,我们把它叫做流动相。
色谱法的分离原理就是利用待分离的各种物质在两相中的分配系数、吸附能力等亲和能力的不同来进行分离的。
使用外力使含有样品的流动相(气体、液体)通过一固定于柱中或平板上、与流动相互不相溶的固定相表面。
当流动相中携带的混合物流经固定相时,混合物中的各组分与固定相发生相互作用。
由于混合物中各组分在性质和结构上的差异,与固定相之间产生的作用力的大小、强弱不同,随着流动相的移动,混合物在两相间经过反复多次的分配平衡,使得各组分被固定相保留的时间不同,从而按一定次序由固定相中先后流出。
与适当的柱后检测方法结合,实现混合物中各组分的分离与检测。