色谱分析中各种图谱现象的判断

色谱测纯度的依据-概述说明以及解释1.引言1.1 概述色谱测纯度是一种常用的分析方法，广泛应用于化学、生物、药学等领域。

通过色谱技术，可以快速、准确地分离和分析混合物中的组分，进而评估样品的纯度和质量。

色谱测纯度的依据主要是基于分离原理和分析结果的解读。

色谱技术的基本原理是利用样品中组分在固定相和流动相之间的差异，通过分离过程获得纯度信息。

在色谱柱中，通常有一相是固定的，如固定在柱内壁上的固定相；另一相是流动的，如流经柱内的溶剂。

当样品通过色谱柱时，不同组分会因其与固定相的相互作用力不同而以不同的速率运动，从而达到了分离的目的。

色谱测纯度的方法主要包括定性分析和定量分析两个方面。

定性分析主要通过比对待测样品与已知标准样品的色谱图谱或数据，通过比对特征峰的保留时间和形状来判断样品中是否存在特定的化合物。

而定量分析则是通过测定特定峰的高度或面积，与已知浓度的标准曲线进行对比，从而计算出样品中目标物质的含量。

在色谱测纯度的分析中，一般会引入一些依据进行验证和判定。

常用的依据包括对比样品的单一组分，峰形的对称性和尖峰度，保留时间的稳定性，以及重测结果的一致性等。

这些依据可以帮助分析人员判断样品中是否存在杂质，以及样品的纯度程度。

总之，色谱测纯度是一种基于分离技术的分析方法，通过分析样品中不同组分在色谱柱中的运动差异，实现对混合物的分离和纯度评估。

在分析过程中，我们可以依靠一系列的依据来验证样品的纯度程度，以获得准确可靠的结果。

1.2文章结构文章结构部分的内容可以按照以下方式编写：文章结构部分的目的是介绍整篇文章的组织结构，以帮助读者更好地理解文章的内容和思路。

本文以色谱测纯度的依据为主题，共分为引言、正文和结论三个部分。

引言部分将概述本文的主题和内容，并介绍文章的结构。

首先，我们将对色谱技术的基本原理进行简要介绍，包括不同类型的色谱技术及其原理。

接下来，我们将重点探讨色谱测定纯度的方法，包括色谱图的解读、峰定量和标准曲线的建立等。

异常峰分析异常的色谱峰指的是色谱图中的无峰或出现负峰、宽峰、双峰、肩峰、峰形不对称等情况。

异常峰是色谱实验工作中最棘手的问题。

这些峰严重影响色谱分析的结果。

色谱图中不可能有纯正的高斯对称峰 , 轻微的拖尾是正常的 , 这是由分离系统所决定的。

在此仅对几种异常峰进行分析。

1.峰前或峰后有小峰的分析产生原因大致分为以下几种情形(1) 样品不纯。

可改变不同的流动相和色谱柱 ,对样品进行分离比较 , 选择合适的分离条件。

(2) 分析柱或保护柱柱头塌陷。

此情况较常见 ,可更换分析柱或保护柱后对峰形进行比较。

柱头塌陷时往往所有的峰都会出现峰分裂。

对色谱柱再生和清洗可以改善分离效果。

(3) 色谱柱柱容量下降。

当长时间使用后 , 有一些强保留组分吸附在柱子中 , 不大的进样量往往就会出现峰分裂。

用强洗脱能力的溶剂清洗色谱柱 , 或更换色谱柱可使问题得到改善。

(4) 样品溶剂与流动相不匹配或进样体积过大。

当样品溶剂比流动相极性大时 , 有时即使进样体积很小 , 也容易出现峰变形和裂分现象。

建议用流动相溶解样品。

(5) 流动相不恰当。

此情况较罕见 , 有些样品在特定的色谱条件下可能存在结构的动态平衡 , 而出双峰 , 这种双峰是无法分离完全的 , 改变色谱条件尤其是p H 值会使峰形正常。

(6) 样品分解。

不稳定的样品在色谱分离过程中变成其他物质而出现双峰。

这时需改变样品处理方法或色谱分离条件。

2.负峰分析在色谱分析中有时会出现负峰或倒峰 , 如图 3 中的大峰的左下就有一负峰。

出现这种现象可能是由以下几种原因引起的 , 可针对不同情况进行排除 , 进而使问题得到解决。

(1) 流动相吸收本底值过高。

此时可适当改变检测波长。

(2) 进样过程中进入空气。

进行排气处理 , 直到基线平稳再进样。

(3) 样品组分的吸收低于流动相。

可改变流动相或改变检测波长。

(4) 配制样品的溶液与流动相不一样。

重新配制样品 , 用与流动相一样的溶剂配制或稀释样品。

FID 气相色谱仪异常图谱分析张　敏/上海市质量监督检验技术研究院0　引言氢火焰离子化检测器(简称FID)是一个质量型检测器，它具有灵敏度高、检测限小、线性范围广等特点，现已广泛地应用于各大领域，成为分析多组分混合物最为有效的手段之一，但其结构复杂，条件设置多，在使用过程中会出现各种故障，影响正常的检测分析结果，因此，如何迅速、准确地判断故障原因并及时予以排除，是仪器操作人员经常面临和急需解决的问题。

1　FID气相色谱仪原理气相色谱是一种物理分离方法。

利用被测物质各组分在不同两相间分配系数（溶解度）的微小差异，当两相作相对运动时，这些物质在两相间进行反复多次的分配，原来只有微小的性质差异产生很大的效果，而使不同组分得到分离, 进而加以定性和定量测定。

气相色谱仪有气路系统、进样系统、分离系统以及检测和记录系统组成。

在分离分析方面，具有如下特点：1）高灵敏度。

可检出10 mg-10 g的物质，可作超纯气体、高分子单体的痕量杂质分析和空气中微量毒物分析。

2）高选择性。

可有效地分离性质极为相近的各种同分异构体和各种同位素。

3）高效能。

可把组分复杂的样品分离成单组分。

4）速度快。

一般分析只需几分钟即可完成，有利于指导和控制生产。

5）应用范围广。

可分析低含量的气、液体，亦可分析高含量的气、液体，且不受组份含量的限制。

6）所需试样量少。

一般气体样品用几亳升，液体样用几微升或几十微升。

样品和载气经过柱子后进入FID的氢气－空气火焰中发生电离产生离子，极化电压把这些离子吸引到火焰附近的收集极上，产生的电流与燃烧的样品量成正比。

用一个电流计检测电流并转换成数字信号，送到输出装置得到样品浓度。

它只对含有C-H键的化合物有响应。

因此FID灵敏度高，其检测限最小可至1 pg/s，线性范围约为107。

2　异常图谱分析一般在日常使用中，FID气相色谱仪异常色谱图如表1、表2所列。

3　讨论综上所述，FID气相色谱仪作为一种高精密的分析仪器，影响基线与图谱的异常因素有许多，要准确判断出异常现象的所在，就必须完全了解FID气相色谱的各组成部分及工作原理，面对不同的故障现象，既要考虑到局部又要考虑到整体，有“果”必有“因”，逐步排除产生故障的“因”，把范围缩小。

实验三__纸色谱实验三纸色谱一、实验原理、方法、注意事项1、原理纸层色谱为在纸上将混合物进行分离的色谱方法，分为分析型和制备型纸层色谱。

多数情况下，纸层色谱的原理属于分配色谱原理，色谱滤纸为支持剂，滤纸纤维可以吸附25%,30%的水分，其中6,7%的水分和滤纸结构中的羟基以氢键结合，为固定相。

其他溶剂可自由通过，为流动相。

流动相流经支持物时，与固定相之间连续抽提，使物质在两相间不断分配而得到分离。

物质被分离后在纸色谱图谱上的位置用Rf值(比移值)来表示:R值 = 原点到色谱点中心的距离/ 原点到溶剂前沿的距离 f在一定条件下某种物质的R值是常数，其大小受物质的结构、性质、溶剂系统物质组f成与比例、pH值、选用滤纸质地和温度等多种因素影响。

此外，样品中的盐分、其他杂质以及点样过多均会影响的有效分离。

但由于影响比移值的因素较多，因而一般采用在相同实验条件下与对照物质对比以确定其异同。

作为药品的鉴别时，供试品在色谱中所显主斑点的颜色(或荧光)与位置，应与对照品在色谱中所显的主斑点相同。

作为药品的纯度检查时，可取一定量的供试品，经展开后，按各药品项下的规定，检视其所显杂质斑点的个数或呈色(或荧光)的强度。

作为药品的含量测定时，将主色谱斑点剪下洗脱后，再用适宜的方法测定。

无色物质的纸色谱图谱可用光谱法(紫外光照射)或显色法鉴定，氨基酸纸色谱图谱常用茚三酮显色法鉴定。

纸层色谱适用于极性较大的亲水性化合物或极性差别较小的化合物的分离。

2、实验方法(1) 下行法将供试品溶解于适当的溶剂中制成一定浓度的溶液。

用微量吸管或微量注射器吸取溶液，点于点样基线上，溶液宜分次点加，每次点加后，俟其自然干燥、低温烘干或经温热气流吹干，样点直径为2,4mm，点间距离约为1.5,2.0cm，样点通常应为圆形。

将点样后的色谱滤纸上端放在溶剂槽内并用玻棒压住，使色谱纸通过槽侧玻璃支持棒自然下垂，点样基线在支持棒下数厘米处。

展开前，展开室内用各品种项下规定的溶剂的蒸气使through the "scorecard" on borrowers ' scores. 24th account manager in the personal lending survey returns (4) fill out the survey, along with other loan information to review. And common findings include the borrower repayment of basic information, income 之饱和，一般可在展开室底部放一装有规定溶剂的平皿或将浸有规定溶剂的滤纸条附着在展开室内壁上，放置一定时间，俟溶剂挥发使室内充满饱和蒸气。

仪器分析中各分析定量定性的依据定量分析是依据统计数据，建立数学模型，并用数学模型计算出分析对象的各项指标及其数值的一种方法。

定性分析则是主要凭分析者的直觉、经验，凭分析对象过去和现在的延续状况及最新的信息资料，对分析对象的性质、特点、发展变化规律作出判断的一种方法。

1、气相色谱：色谱峰保留值和面积，这样气相色谱可根据这两个数据进行定性定量分析。

色谱峰保留值是定性分析的依据，而色谱峰面积则是定量分析的依据。

2、紫外光谱：最大吸收波长λ、摩尔吸收系数ε及吸收曲线的形状不同是进行物质定性分析的依据。

进行定量分析依据朗伯-比耳定律：A=εbc3、核磁：定量分析以结构分析为基础，在进行定量分析之前，首先对化合物的分子结构进行鉴定，再利用分子特定基团的质子数与相应峰谱的峰面积之间的关系进行定量测定。

定量分析的根据：吸收能量的大小取决于核的多少。

以磁场强度为横坐标提供定性分析所依据的参数，以吸收能量为纵坐标，纵坐标对应于不同H0的出峰面积就是定量分析参数。

4、质谱：利用电磁学原理，对物质气相离子依其质荷比（m/e)进行分离和分析的方法。

被分析的样品首先离子化，然后利用离子在电场或磁场中的运动性质，将离子按质荷比(m/e)分开并按质荷比大小排列成谱图形式，根据质谱图可确定样品成分、结构和相对分子质量。

5、原子吸收：原子吸收光谱法进行定量分析的依据是：试样中待测元素的浓度与待测元素吸收辐射的原子总数成正比，即A＝k'C 。

定量分析方法有标准曲线法和标准加入法两种。

6、红外：红外光谱的定性主要根据图谱中的：基团的特征吸收频率红外光谱的定量是根据图谱中的：特征峰的强度7、离子：利用离子交换的原理，连续对多种阴离子进行定性和定量的分析。

保留时间定性，峰高或峰面积定量。

8、荧光：物质吸收的光，称为激发光；物质受激后所发射的光，称为发射光或荧光。

根据荧光的光谱和荧光强度，对物质进行定性或定量测定9、差热：定性分析：定性表征和鉴别物质依据：峰温、形状和峰数目方法：将实测样品DTA曲线与各种化合物的标准（参考）DTA曲线对照。

异常峰分析异常得色谱峰指得就就是色谱图中得无峰或出现负峰、宽峰、双峰、肩峰、峰形不对称等情况。

异常峰就就是色谱实验工作中最棘手得问题。

这些峰严重影响色谱分析得结果。

色谱图中不可能有纯正得高斯对称峰, 轻微得拖尾就就是正常得, 这就就是由分离系统所决定得。

在此仅对几种异常峰进行分析。

1、峰前或峰后有小峰得分析产生原因大致分为以下几种情形(1)样品不纯。

可改变不同得流动相与色谱柱,对样品进行分离比较，选择合适得分离条件。

(2) 分析柱或保护柱柱头塌陷。

此情况较常见,可更换分析柱或保护柱后对峰形进行比较。

柱头塌陷时往往所有得峰都会出现峰分裂。

对色谱柱再生与清洗可以改善分离效果。

ﻫ(3) 色谱柱柱容量下降。

当长时间使用后, 有一些强保留组分吸附在柱子中, 不大得进样量往往就会出现峰分裂。

用强洗脱能力得溶剂清洗色谱柱，或更换色谱柱可使问题得到改善。

(4) 样品溶剂与流动相不匹配或进样体积过大。

当样品溶剂比流动相极性大时,有时即使进样体积很小, 也容易出现峰变形与裂分现象。

建议用流动相溶解样品。

(5)流动相不恰当。

此情况较罕见, 有些样品在特定得色谱条件下可能存在结构得动态平衡,而出双峰, 这种双峰就就是无法分离完全得, 改变色谱条件尤其就就是p H值会使峰形正常。

(６) 样品分解。

不稳定得样品在色谱分离过程中变成其她物质而出现双峰。

这时需改变样品处理方法或色谱分离条件。

２、负峰分析在色谱分析中有时会出现负峰或倒峰, 如图 3 中得大峰得左下就有一负峰。

出现这种现象可能就就是由以下几种原因引起得, 可针对不同情况进行排除,进而使问题得到解决。

（１）流动相吸收本底值过高。

此时可适当改变检测波长。

(2) 进样过程中进入空气。

进行排气处理, 直到基线平稳再进样。

（３）样品组分得吸收低于流动相。

可改变流动相或改变检测波长。

(4)配制样品得溶液与流动相不一样。

重新配制样品, 用与流动相一样得溶剂配制或稀释样品。

3、前沿、拖尾峰分析拖尾:1 干扰峰,优化条件分离；2色谱柱塌陷,更换色谱柱; 3 流动相pH不合适,调节ｐH值;4 管路没有接好,存在较大得死体积，可以重新接一下。

圆二色谱分析结果怎么看？圆二色谱是一种常用的生物制药分析技术，它可以用来研究生物大分子的结构和构象变化。

通过测量样品对不同波长的左旋光和右旋光的吸收情况，我们可以得到圆二色谱图谱。

本文将详细介绍如何解读圆二色谱分析结果。

一、圆二色谱图谱的基本结构圆二色谱图谱通常由两个曲线组成：正旋光曲线和负旋光曲线。

正旋光曲线表示样品对右旋光的吸收情况，而负旋光曲线表示样品对左旋光的吸收情况。

这两个曲线的形状和峰值位置可以提供关于样品的结构和构象信息。

图1。

二、峰值位置的解读圆二色谱图谱中的峰值位置可以告诉我们样品的二级结构信息。

一般来说，α-螺旋结构在190-200 nm处会出现负峰，而β-折叠结构在210-220 nm处会出现正峰。

通过观察峰值位置的变化，我们可以推断样品的二级结构变化。

三、峰值强度的解读除了峰值位置，圆二色谱图谱中的峰值强度也是解读样品结构的重要指标。

峰值强度反映了样品对旋光的吸收程度，强度越高表示吸收越强。

通过比较不同样品的峰值强度，我们可以判断它们的结构差异。

四、色谱图形的解读除了峰值位置和峰值强度，圆二色谱图谱的整体形状也提供了有关样品结构的信息。

例如，如果图谱呈现出对称的双峰形状，那么可能存在一种手性结构。

而如果图谱呈现出单峰形状，那么样品可能是非手性的。

五、结构变化的解读通过比较不同条件下的圆二色谱图谱，我们可以观察到样品结构的变化。

例如，当样品在不同温度下进行测量时，我们可以观察到峰值位置的变化，从而推断样品的热稳定性。

类似地，通过比较不同pH值下的圆二色谱图谱，我们可以了解样品的酸碱稳定性。

圆二色谱分析结果的解读需要考虑峰值位置、峰值强度、峰形、色谱图形和对比分析等因素。

通过综合分析这些指标，我们可以得出关于样品结构特征、纯度和质量变化情况的重要信息。

圆二色谱作为一种重要的分析技术，在生物制药领域具有广泛的应用前景。

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