兽药三黄散超微粉中黄芩苷和盐酸小檗碱含量的高效液相色谱法测定

HPLC 法测定三黄片中盐酸小檗碱的含量收稿日期:2002-02-07作者简介:李小燕(1961~),女,广西陆川县人,副主任技师,主要从事药品检验及仪器分析工作。

电话:(0771)3132340.李小燕(南宁市药品检验所,广西南宁530001)关键词:HPLC;三黄片;盐酸小檗碱摘要:目的:建立三黄片(大黄、黄芩浸膏和盐酸小檗碱)中盐酸小檗碱的含量测定方法。

方法:采用高效液相色谱法,用K F -C 18色谱柱(250mm @4.6mm,10L m),以乙腈-0.05mol #L -1三乙胺溶液(用磷酸调节pH 至3.0)(35B 65)为流动相,流速为1.0mL #min -1,检测波长347nm 。

结果:本法线性关系良好,平均加样回收率为98.21%,RSD 1.01%(n =9)。

结论:本法操作简便,结果准确,分离效果好,可用于三黄片的质量控制。

中图分类号:R927.11 文献标识码:A 文章编号:1001-1528(2002)09-0679-02Assay of berberine hydrochloride in Sanhuang Tablets by HPLCLI Xiao -y an(Nanning I nstitute f or Dr ug Contr ol,Nanning 530001,China )Key words :H PLC;Sanhuang Tablets;berberine hydrochlorideAbstract :Objective :To establish the assay of berberine hydrochloride for Sanhuang T ablets (Radix et Rhizoma Rhei ,Extractum Scutellariae and berberine hydrochloride ).Methods :The HPLC w ith a KF -C 18column (250mm @4.6mm,10L m)w as used.Acetonitrile-0.05mol #L -1triethylamine buffer solution (adjusted pH to 3.0with conc.H 3PO 4)(35B 65)w as used as mobile phase.The flow rate was 1.0mL #min -1,and the detec -tion wavelength w as at 347nm.Results :The method has a good linear dependuce.T he average recovery of loading sample w as 98.21%with RSD 1.01%.(n =9).Conclusion :The method is convenient for a good res -olution and can be used for the quality control of Sanhuang Tablets. 三黄片由大黄、黄芩浸膏和盐酸小檗碱组成,是一种具有清热泻火、消炎利便功效的常用中成药。

高效液相色谱法测定三颗针药材中盐酸小檗碱的含量高效液相色谱法测定三颗针药材中盐酸小檗碱的含量摘要：三颗针为小檗科植物的干燥根，具有清热燥湿，泻火解毒之功效。

其活性成分主要为盐酸小檗碱、药根碱、巴马亭等。

本文应用RIGOL L‐3000高效液相色谱系统，采用药典规定的方法测定了三颗针药材中盐酸小檗碱的含量。

实验证明L‐3000高效液相色谱系统全面满足药典方法及系统适应性的要求，分析结果准确可靠。

一、引言三颗针药材为小檗科植物拟豪猪刺。

小黄连刺、细叶小檗，或匙叶小檗等同属数种植物的干燥根。

具有清热燥湿，泻火解毒之功效，主治湿热泻痢，黄疸，湿疹，咽痛目赤等症。

其主要活性成分为盐酸小檗碱、药根碱、巴马亭等。

三颗针药材是中国药典（2010版）新增品种，对其鉴别与分析限定了严格的方法和标准。

本文参照中国药典（2010版）中规定的方法，应用RIGOL L‐3000高效液相色谱系统分析三颗针药材中盐酸小檗碱的含量，得到了较为理想的实验结果。

二、实验部分2.1 仪器及试剂高效液相色谱仪：RIGOL L-3000高效液相色谱系统（配L-3300自动进样器）（北京普源精仪科技有限责任公司）；超纯水纯化系统：milli-Q（美国Millipore）；天平：BT 124S （德国塞多利斯）；粉碎机:天津泰斯特 FW80；酸度计：PHSJ-4A(上海雷磁)；移液枪： 10-100 μl，100-1,000 μl(eppendorf)；盐酸小檗碱对照品：中国药品生物制品检定所，纯度﹥98%（A0151）；三颗针药材：市售；其余试剂均为市售HPLC级或分析纯。

2.2 色谱条件色谱柱: Rigol：Compass , C18, 5 μm，4.6 x 250mm id，柱温：30℃；进样量:10μL；流动相：乙睛-0.02M磷酸二氢钾溶液（24:76）流速: 1.0ml/min检测波长：265 nm2.3试样准备2.3.1对照品溶液的制备取盐酸小檗碱对照品2.0mg，精密称定，甲醇为溶剂配制浓度为20μg/mL的溶液，备用。

HPLC 法测定三黄中空栓剂中小檗碱的含量程晓华;姜华;王晓琳;蒋振兴【摘要】Objective: To determine the content of berberine in SanHuang hollow suppository with HPLC. Method: C18 Column (4.6 mm×200 mm, 5μm), acetonitrile : water(l:l), the mobile phase was the solution of 1000ml water adding in 3.4g potassium dihydrogen phosphate and 1.7g Sodium dodecylsulfate, the detection wavelength was 265nm, flow rate was 1ml/min, column temperature: room temperature. Under the condition the content of berberine in SanHuang hollow suppository was detected through methodological study and the content of berberine was detectedin the sample. Result: RSD of repeatability was 1.02%; RSD of stability test was 1.85%; the average recovery rate of berberine was 98.92%, RSD was2.09%; The contents of berberine in three batches of samples were respectively 10.39, 10.38 and 10.40 mg/suppository. Conclusion: HPLC, accurate and reliable to determine the content of berberine in SanHuang hollow suppository, could be tasken as a way of quantitative analysis for SanHuang hollow suppository.%目的采用HPLC 法对三黄中空栓中小檗碱的含量进行测定.方法在C18 柱(4.6mm×200mm,5μm),乙腈∶水(1∶1),在每1 000 mL 中加入磷酸二氢钾3.4 g 和十二烷基硫酸钠1.7 g 为流动相的条件下,检测波长为265 nm,流速为1 mL/min,柱温为室温的条件下对三黄中空栓中小檗碱的含量并进行方法学考察,测定样品中小檗碱的含量.结果重复性试验中RSD 为1.02%;稳定性试验中盐酸小檗碱面积稳定,RSD 为1.85%;加样回收率试验中盐酸小檗碱的平均回收率为98.92%,RSD 为2.09%;3 批样品测定盐酸小檗碱的含量分别为10.39、10.38、10.40 mg/ 枚.结论 HPLC 法测定三黄中空栓中小檗碱的含量准确可靠,可用于三黄中空栓剂的定量分析.【期刊名称】《西部中医药》【年(卷),期】2012(025)004【总页数】3页(P21-23)【关键词】HPLC;三黄栓;中空栓;小檗碱【作者】程晓华;姜华;王晓琳;蒋振兴【作者单位】甘肃中医学院,甘肃兰州730000;甘肃省中医院;甘肃省中医药研究院;甘肃省中医院;甘肃省中医院【正文语种】中文【中图分类】R285.5三黄栓是甘肃省中医院自主研制的药品，由黄芩、黄连、黄柏等组成，具有抗炎消肿，止血止痛等功效，广泛使用于痔疮的治疗并取得良好的疗效［1-2］。

高效液相色谱法测定三黄乳膏中黄芩苷的含量【摘要】目的建立高效液相色谱法测定三黄乳膏中黄芩苷含量的方法。

方法采用Dikma C18(5μm，250 mm×4．6 mm)色谱柱;流动相为甲醇-水-磷酸(47∶53∶0．2);检测波长为277 nm。

结果黄芩苷在0．40~2．40 μg/ml浓度范围内与峰面积呈良好的线性关系(r=0．999 8 n=6)，精密度高，RSD＝0．66%,平均回收率98．34%。

结论该方法简便，结果准确，重现性好，可作为三黄乳膏的质量控制方法。

【Abstract】Objective To establish a method on high performance liquid chromatography the amount of baicalin inSanhuang cream．Methods The Dikma C18(5μm，250 mm×4．6 mm) was used．The mobile phase consisted of methanol-water-phosphoric acid solution(47∶53∶0．2) ．The UV detection wavelength was 277 nm．Results The linear response range of baicalin was 0．40~2．40μg/ml (r=0．999 8 n=6),the precision was high with RSD=0．66%．The average recovery was 98．34%．Conclusion The method is simple,accurate,reliable and can be applied to the quality control of the preparation．【Key words】HPLC;Baicalin; Sanhuang Cream;Determination of content三黄乳膏是我院自制制剂，由生大黄、黄柏、黄芩、五倍子四味中药分别提取、浓缩、精制，再加樟脑和乳膏基质制成的乳膏。

高效液相色谱法同时测定清新灵微丸中盐酸小檗碱和黄芩摘要本实验采用高效液相色谱法同时测定清新灵微丸中盐酸小檗碱和黄芩的含量。

通过调节不同流动相、柱温、检测波长等实验条件，建立了最佳分离条件：色谱柱使用Agilent Waters XSelect HSS T3色谱柱（150mm×4.6mm，3.5μm）；流动相为乙腈-0.1%甲酸溶液（75:25，V/V）；流速为0.8mL/min；柱温为30℃；检测波长为345nm。

结果表明，盐酸小檗碱和黄芩在本条件下能够得到良好的分离和准确的测定值。

介绍清新灵微丸是一种中药制剂，经常用于治疗各种感冒症状。

其中盐酸小檗碱和黄芩是其中的两种有效成分，对于评价药品的质量具有重要意义。

高效液相色谱法是现代药物分析中常用的分析方法，具有分离度高、分析速度快、检测灵敏度高等优点，因此也被广泛应用于药品中成分的分析测定中。

本文旨在建立一种高效液相色谱法，同时测定清新灵微丸中盐酸小檗碱和黄芩的含量，并通过优化实验条件，获得最佳分离和准确的测定值。

实验方法仪器和试剂•高效液相色谱仪（Agilent 1260）•色谱柱（Agilent Waters XSelect HSS T3色谱柱，150mm×4.6mm，3.5μm）•称量器（0.1mg）•称量瓶及注射器•常压瓶•盐酸小檗碱、黄芩药材（上海测量与测试中心药品控制所提供品牌）•水（色谱级）•乙腈（色谱级）•甲酸（色谱级）样品制备将清新灵微丸粉末取1.0g，精确称量并放入50mL量瓶中，加入70%乙醇约30mL，振摇均匀，体积定容至50mL，摇匀后过滤，取5.0mL稀释至10mL，即得待测液。

色谱条件•色谱柱：Agilent Waters XSelect HSS T3色谱柱（150mm×4.6mm，3.5μm）•流动相：乙腈-0.1%甲酸溶液（75:25，V/V）•流速：0.8mL/min•柱温：30℃•检测波长：345nm标准曲线的建立将盐酸小檗碱和黄芩分别精密称量加入50mL量瓶中，各加入70%乙醇约30mL，振摇均匀，体积定容至50mL。

HPLC 法同时测定复方三黄酊中黄芩苷及盐酸小檗碱的含量丁长玲;崔俊凤;赵永德;高华;丁召兴;成文娜【摘要】目的：建立测定复方三黄酊中2组分含量的高效液相色谱法。

方法色谱柱：Thermo，ODS-2HYPERSIL，Dim（ mm）250×4.6。

流动相：甲醇-乙腈-0.025 mol/L磷酸溶液（用三乙胺调节pH为3.0）（15：15：70）；流速：1．0ml/min；检测器：DAD检测器；检测波长：280 nm和345 nm；柱温：25℃。

结果黄芩苷在0.06862 ug～0.6862 ug之间进样量与峰面积积分值呈良好的线性关系，平均加样回收率为99.42％， RSD＝0.4％（ n＝6）；盐酸小檗碱在0.0198～0.198 ug之间进样量与峰面积积分值呈良好的线性关系，平均加样回收率100.6％，RSD＝1.9％（ n＝6）。

结论本法简单易行，可用于复方三黄酊的含量测定。

%Objective To establish the method for determination of the Baicalin and berberine Hydrochloride in Compound San -huang Tincture by HPLC.Methods HPLC chromat ographic condition:Thermo,ODS-2HYPERSIL,Dim( mm)250 ×4.6.The mobile phase consisted of methanol-acetonitrile -0.025 mol /L phosphoric acid solution ( adjusted with triethylamine to pH 3.0) (15:15:70) at a f low rate of 1.0 ml· min-1 .The DAD detection wavelength was 280nm and 235nm.The column temperature was 25℃.Re-sults The Baicalin was in good linearity over the range of0.06862~0.6862 ug.The average recovery was 99.42%, with RSD of0.4%(n=6).The berberine hydrochloride was in good linearity over the range of 0.0198 ~0.198 ug.The average recovery was 100.6%, with RSD of 1.9%(n=6).Conclusion This method is accurate,simple and can be used for the determination of Com-pound Sanhuang Chloramphenicol .【期刊名称】《滨州医学院学报》【年(卷),期】2014(000)001【总页数】4页(P12-14,18)【关键词】高效液相色谱法;复方三黄酊;黄芩苷;盐酸小檗碱【作者】丁长玲;崔俊凤;赵永德;高华;丁召兴;成文娜【作者单位】青岛大学青岛 266021; 滨州医学院附属医院药学部;滨州市药品检验所;滨州医学院附属医院药学部;青岛大学青岛 266021;滨州医学院附属医院药学部;滨州医学院附属医院药学部【正文语种】中文【中图分类】R286复方三黄酊是我院研制的一种治疗褥疮和外科创伤感染的特色药物，有清热、解毒、抗菌消炎，消肿、祛腐生肌、清凉止痛作用，对创面愈合具有很好的临床疗效。

高效液相法测定三黄片中盐酸小檗碱和黄芩苷的含量摘要：建立测定三黄片中盐酸小檗碱和黄芩苷含量的高效液相色谱方法。

采用Agilent Eclipse XDB-C18色谱柱(4. 6 mm ×150 mm, 5 μm)；流动相为0. 1 %磷酸(A) -乙腈(B)；梯度洗脱；流速为1.0 mL·min-1；检测波长为333 nm。

小檗碱在0.0061~ 0.0243 mg·mL-1范围内，黄芩苷在0.038 ~ 0.152mg·mL-1范围内线性关系良好。

本文中所建立的色谱方法可以简便、准确同时测定三黄片中盐酸小檗碱和黄芩苷的含量。

关键词: 三黄片；盐酸小檗碱；黄芩苷；高效液相色谱法ABSTRACT: To establish a HPLC method for the simultaneously determination of berberine hydrochloride and baicalin in Sanhuang tablet.The determination was performed on a Agilent Eclipse XDB-C18(4.6 mm ×150 mm, 5 μm) with mobile phase(using gradient) consisted acetonitrile-0.1%H3PO4 at flowing rate 1.0 mL•min–1. The detection wavelength was at 333 nm. The method had good linear relationship within the range of 0.0061~ 0.0243 mg·mL-1for berberine hydrochloride and within the range of 0.038 ~ 0.152 mg·mL-1for baicalin.The chromatographic method established can be used simply and accurately to simultaneously determine berberine hydrochloride and baicalin in Sanhuang tablet.KEY WORDS: Sanhuang tablet; berberine hydrochloride；baicalin；HPLC三黄片由大黄、黄芩浸膏和盐酸小檗碱组成，具有清热燥湿、泻火解毒等功效，主治热毒内盛、高热烦躁、湿热黄疸、下痢。

三黄实验法方法名称：三黄片—盐酸小檗碱的测定—高效液相色谱法应用范围：该方法采用高效液相色谱法测定三黄片中盐酸小檗碱的含量。

该方法适用于由大黄、盐酸小檗碱和黄芩浸膏等组成的片剂。

方法原理：三黄片由大黄、黄芩浸膏和盐酸小檗碱组成，是一种具有清热泻火、消炎利便功效的常用中成药。

收载于《中国药典》2000年版一部。

其中盐酸小檗碱的含量测定标准未作规定。

目前文献报道的测定方法有薄层扫描法、脉冲极谱法、分光光度法、示波极谱法和离子选择电极法等。

该方法为高效液相色谱法，紫外吸收检测器于波长347nm处检测盐酸小檗碱的吸收值，外标法计算含量。

本法操作简便、精密度高、分离效果良好。

试剂：盐酸小檗碱对照品（中国药品生物制品检定所，713 9204）；乙腈为色谱纯，水为高纯水，甲醇、三乙胺、磷酸为分析纯；三黄片为市售品。

仪器设备：1 仪器1.1仪高效液相色谱仪，紫外检测器，色谱工作站1.2 色谱柱色谱柱：KF C18（250mm×4.6mm,10μm,中国科学院大连化学物理研究所），柱温：室温1.3 紫外吸收检测器2 色谱条件2.1 流动相：乙腈 0.05mol·L-1三乙胺溶液（用磷酸调节pH 至3.0)=35 65；流速：1.0mL·min-12.2 检测波长：347nm，进样量：20μL。

试样制备：1. 对照品溶液的制备精密称取盐酸小檗碱对照品适量，加流动相制成36μg·ml-1的对照品溶液。

2.供试品溶液的制备取该品20片，除去包衣，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于盐酸小檗碱1.8mg），置50ml量瓶中，加流动相适量，超声处理5min，加流动相稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，再经0.45μm的微孔滤膜滤过后，即得。

取大黄粉、黄芩浸膏和其它辅料，按处方比例同法制得三黄片阴性空白溶液。

操作步骤：1. 标准曲线的绘制分别吸取上述对照品溶液1，2，3，4，5，6ml，分别置10ml容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，进样10μl测定，以盐酸小檗碱的进样量（μg) 为横坐标，峰面积为纵坐标，得回归方程2. 供试品的测定精密吸取供试品溶液10μL注入高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器，于波长347nm处测定吸收值，计算出其含量。

HPLC法同时测定复方三黄酊中盐酸小檗碱和黄芩素的含量董宁霞;边瑞民;成植温;宋德海;卢立明【摘要】目的:建立复方三黄酊中盐酸小檗碱和黄芩素的含量测定方法.方法:采用反相高效液相色谱法,选择Agilent ZORBAXSB-C18柱(4.6mm×250mm,5μm),以乙腈-0.1％磷酸水溶液为流动相梯度洗脱,检测波长265nm.结果:盐酸小檗碱、黄芩素均得到较好分离,分别在0.092～2.3mg/mL,0.064～1.6 mg/mL范围内呈良好的线性关系,平均回收率为98.96％、98.18％.结论:该方法简便、准确,可用于复方三黄酊中盐酸小檗碱和黄芩素的含量测定.【期刊名称】《江西中医药》【年(卷),期】2015(000)001【总页数】2页(P68-69)【关键词】复方三黄酊;盐酸小檗碱;黄芩素;高效液相色谱【作者】董宁霞;边瑞民;成植温;宋德海;卢立明【作者单位】滨州医学院附属医院山东滨州256603;滨州医学院附属医院山东滨州256603;滨州医学院附属医院山东滨州256603;滨州医学院附属医院山东滨州256603;滨州医学院附属医院山东滨州256603【正文语种】中文【中图分类】R284.1复方三黄酊由黄连、黄芩、黄柏、冰片等药材组成，具有抗菌消炎、止痛消肿、祛腐生肌的功效，用于治疗各期褥疮和慢性皮肤溃疡、软组织损伤、Ⅱ度以下烧烫伤等［1］，在我院应用20多年，临床疗效显著。

本实验采用高效液相色谱法同时测定复方三黄酊中盐酸小檗碱和黄芩素的含量，为工艺改进和质量控制提供科学的方法依据。

Agilent 1260（DAD检测器）；KQ-300V台式超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）。

乙腈为色谱纯，磷酸、乙醇、十二烷基硫酸钠等均为分析纯；复方三黄酊由滨州医学院附属医院药学部制剂室提供（批号20130422、20131007、20140307）；盐酸小檗碱对照品（批号110713-20121 2）、黄芩素对照品（批号111595-201306）均购于中国食品药品检定研究院。

三黄片中黄芩苷和盐酸小檗碱的含量测定（作者:___________单位: ___________邮编: ___________）【摘要】目的：观察高效液相色谱法(HPLC)测定三黄片中黄芩苷和盐酸小檗碱的含量。

方法：采用HPLC法对方中黄芩苷和盐酸小檗碱同时测定。

结果：采用波长265nm可同时测定两种组分。

结论：本法测定结果准确，操作简便。

【关键词】 HPLC法 @三黄片黄芩苷盐酸小檗碱三黄片中含有大黄、盐酸小檗碱、黄芩浸膏等成分。

黄芩苷、盐酸小檗碱是处方中起主要药理作用的成分，药典标准中对黄芩苷和盐酸小檗碱只作了定性鉴别。

我们用HPLC法同时测定了三黄片中黄芩苷和盐酸小檗碱的含量，方法准确、简便，可用于本品质量控制。

1 仪器与试剂HP1100高效液相色谱仪(美国)，SB5200超声振荡器，TU1200紫外分光光度计；黄芩苷对照品和盐酸小檗碱对照品均由中国药品生物制品检定所提供；三黄片(河南三门峡门第三制药厂)；甲醇、乙腈为色谱纯，其它试剂均为分析纯。

2 方法与结果2.1 色谱条件大连依利特产Hypersil C18色谱柱，4.6mm×150mm,5μm；流动相：甲醇乙腈0.025mol/L磷酸溶液(用三乙胺调节PH3.0±0.1)=25：20：55，流速0.8ml/min；紫外检测波长为265nm；柱温35℃。

2.2 供试品溶液及对照品溶液的制备供试品溶液的制备：取本品20片，除去包衣，精密称定，研细，精密称取1.8g，置100ml量瓶中，加50%甲醇适量，超声处理25min，用50%的甲醇稀释至刻度，摇匀，即得供试品溶液。

对照品溶液的制备：精密称取黄芩甙和盐酸小檗碱对照品适量，用50%的甲醇溶解并定容，制成含黄芩甙130μg/ml，盐酸小檗碱32μg/ml的混合对照品溶液。

2.3 线性关系的考察分别精密量取对照溶液5，10，15，20，25μl过样，以进样量X(μg)为横坐标，以对照品峰面积积分值Y为纵坐标绘制标准曲线。

小柴胡散中黄芩苷含量测定HPLC法研究
刘素梅;宋志超;贾振民;郭芙蓉;陈蔷;杜红鸽
【期刊名称】《中国兽药杂志》
【年(卷),期】2008(42)3
【摘要】建立了测定小柴胡散中黄芩苷含量的高效液相色谱法.采用Hypersil BDS C18柱(5 μm,4.6 mm×200 mm),以甲醇-0.025%磷酸溶液(55∶ 45,V/V)为流动相,紫外检测器检测波长为280 nm.对照品在0.038 6～0.617 0 μg/mL的浓度范围内呈现良好的线性关系(R2=0.998 5),黄芩苷加样平均回收率为 98.61%,RSD为2.64%.该方法简便、准确、快速,适合于小柴胡散的质量控制检测.
【总页数】3页(P20-22)
【作者】刘素梅;宋志超;贾振民;郭芙蓉;陈蔷;杜红鸽
【作者单位】河南省兽药监察所,河南郑州,450008;河南省兽药监察所,河南郑州,450008;河南省兽药监察所,河南郑州,450008;河南省兽药监察所,河南郑
州,450008;河南省兽药监察所,河南郑州,450008;河南省兽药监察所,河南郑
州,450008
【正文语种】中文
【中图分类】R927.2
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