柴黄颗粒中黄芩苷的含量测定研究

高效液相色谱法测定柴黄口服液中黄芩苷的含量
马纪伟
【期刊名称】《卫生职业教育》
【年(卷),期】2016(034)015
【摘要】目的：建立柴黄口服液中黄芩苷含量的测定方法。

方法选用ZORBAX
SB-C18分析柱（5μm，4.6 mm×150.0 mm），甲醇-0.2%磷酸水溶液（46∶54）为流动相，检测波长276 nm，流速1.2 ml/min。

结果黄芩苷进样量为0.980～2.940μg时与峰面积具有良好的线性关系，回归方程为：Y=3×106X+16310，
r=0.9998，平均回收率为100.45%，相对标准偏差为1.13%。

结论高效液相色谱（HPLC）法简便、准确、灵敏度高、分离效果好，可作为柴黄口服液的质量控制标准。

【总页数】2页(P97-98)
【作者】马纪伟
【作者单位】南阳医学高等专科学校，河南南阳 473058
【正文语种】中文
【中图分类】R284.1
【相关文献】
1.高效液相色谱法测定双黄连口服液中绿原酸、黄芩苷、连翘苷、汉黄芩苷的含量[J], 黄敬群;杨娟;李红
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小柴胡颗粒处方为：柴胡240g，黄芩90g，半夏（姜制）90g，党参90g，生姜90g，甘草90g，大枣90g。

2005《中国药典》新增HPLC含量测定方法，现将有关其含量测定方法作一总结。

色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水-磷酸（47：53：0.2）为流动相；检测波长为315nm。

理论板数按黄芩苷峰计应不低于3000。

供试品溶液的制备：取装量差异项下的本品，研细，取约3g或约1.5g（无蔗糖），精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加70%乙醇50ml，密塞，称定重量，超声处理（功率250W，频率50kHz）30分钟，放冷，再称定重量，用70%乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

沈静等用RP-HPLC法测定小柴胡颗粒中黄芩苷含量。

采用Aettech液相色谱仪，AlltimaC18色谱柱(250mm×4.6mm，5μm)；流动相为甲醇-水-磷酸(60：40：0.2)；流速1.0ml/min；检测波长280nm；柱温室温。

回归方程为Y=14726+2319345.28X,r=0.9999，黄芩苷在0.06～0.60μg显示良好线性关系。

样品以甲醇为溶剂，超声提取。

潘雪英用HPLC法测定小柴胡颗粒中黄芩苷含量。

采用HP1100高效液相色谱仪，AgilentC18色谱柱(150cm×4.6cm)；流动相为0.4%磷酸溶液-甲醇(56：44)；检测波长为280nm；柱温25℃。

样品以75%乙醇为溶剂，超声提取。

赵志军等用HPLC法测定小柴胡颗粒中黄芩苷含量。

采用岛津LC-10ADVP液相色谱仪，色谱柱为USAAgilentZORBAXSB-C18柱(4.6mm×150mm,5μm)；甲醇-水-冰醋酸(46：54：1)为流动相；检测波长为277nm；柱温室温。

样品以50%甲醇为溶剂，超声提取。

张惠萍等用ＲＰ－ＨＰＬＣ法对小柴胡颗粒中的黄芩进行了含量测定。

HPLC法测定小柴胡颗粒剂中黄芩苷的含量广西南宁市红十字会医院药剂科(530012)　李　欣 南宁市药检所(530001)　吴　毅　 摘要　目的:建立小柴胡颗粒剂中黄芩苷的含量测定方法。

方法:采用反相高效液相色谱法。

色谱柱:Inert sil O DS-3 (5L m, 4.6×250m m)柱;流动相:甲醇-水-磷酸(45∶55∶0.2);检测波长:315nm。

结果:黄芩苷在0.2429～1.2144L g/ ml范围内呈现良好的线性关系(r=0.9999),回收率100.0%,RSD=0.96%。

结论:本法可用于测定小柴胡颗粒剂中黄芩苷的含量。

关键词　高效液相色谱法　小柴胡颗粒剂　黄芩苷　含量测定 中图分类号　R943 小柴胡颗粒剂具有解表散热、疏肝和胃的功效,用于寒热往来,胸胁苦满,心烦喜吐,口苦咽干。

由柴胡、黄芩等九味中药组成(1),黄芩是方中主药之一。

黄芩是唇形科植物,其根味苦性寒,含数种黄酮苷类,黄芩苷(baicalin)是其主要有效成分。

黄芩苷具有清热解毒、利胆、降低转氨酶、抑菌、抗炎、抗变态反应等药理作用(2)。

临床上用于治疗上呼吸道感染、急性扁桃腺炎、急性咽炎、肺炎、肝炎、细菌性痢疾等疾病。

因标准中未收载有其含量测定方法,为进一步控制药品的质量,本人采用高效液相色谱法对小柴胡颗粒剂中黄芩苷的含量进行测定,实验结果表明,用本法测定该颗粒剂中黄芩苷的含量结果准确,方法简便易行。

1　仪器与试药1.1　仪器:高效液相色谱仪LC-14A(日本岛津)。

1.2　试药:黄芩苷对照品(中国药品生物制品检定所,9708)。

甲醇(上海陆都化学试剂厂,色谱纯)。

其他均为分析纯。

1.3　药品:小柴胡颗粒剂(广州光华药业股份有限公司,批号:001122、991116、991011、990708、000523)。

2　方法与结果2.1　色谱条件:色谱柱:Inertsil ODS-3(5L m,4.6×250mm)柱;流动相:甲醇-水-磷酸(45∶55∶0.2);流速1.0m l/min;检测波长:315nm;灵敏度: 0.08;柱温:35℃;进样量:20L l。

文章编号：1674-8085(2013)06-0078-03HPLC 法测定小柴胡颗粒中黄芩苷的含量研究*韦国兵，胡奇军，廖夫生（江西中医药大学药学院，江西，南昌 330004）摘 要：目的 建立小柴胡颗粒中黄芩苷的含量测定方法。

方法 采用高效液相色谱法。

色谱柱为Kromasil 100-5 ODS2（5 μm ，250 mm × 4.6 mm ），柱温25 ℃，流动相甲醇—水—0.1 mol/L 磷酸（45:55:0.2），流速为1 mL/min ，检测波长280 nm 。

结果 在上述条件下，黄芩苷在0.00272 μg/mL ~0.0544 μg/mL(r = 0.9997)范围具有良好的线性关系，平均回收率为99.72，RSD = 0.44%。

结论 本方法测定小柴胡颗粒中的黄芩苷含量操作简单、准确且快速，可作为小柴胡颗粒中黄芩苷的含量测定方法。

关键词：HPLC ；小柴胡颗粒；黄芩苷；含量中图分类号：R944.5 文献标识码：B DOI:10.3969/j.issn.1674-8085.2013.06.016DETERMINATION OF BAICALIN IN YINHUANG ORAL LIQUID BY HPLC*WEI Guo-bing ，HU Qi-jun ，LIAO Fu-sheng（Department of Pharmacy, Jiangxi University of Traditional Chinese Medicine, Nanchang, Jiangxi 330004, China ）Abstract Objective ： To establish a HPLC method for determining the amount of baicalin in Xiaochaihu granules. Methods: HPLC analysis was carried out on a Kromasil 100-5 ODS2 (5 μm, 250 mm × 4.6 mm) column with the temperature at 25 ℃. The mobile phase was methanol - water-0.1 mol/L phosphoric acid ( 45: 55: 0.2) with the flow rate of 1.0 mL·min -1, and the detection wavelength was set at 280 nm. Results: The linear range of baicalin was 0.00272~0.0544 μg/mL (r =0.9997), the average recovery was 99.72%, and the RSD was 0.44%. Conclusion: The method is simple, rapid, accurate, and can be used for the quality control of the Xiaochaihu granules and its content determination. Key words: HPLC; Xiaochaihu granules; baicalin; content小柴胡颗粒由柴胡、人参、黄芩、大枣、半夏、生姜、甘草七味药组成，具有解表散热，舒肝和胃之功效。

HPLC法测定大柴胡颗粒中黄芩苷含量刘博,杨向东,史自东(湖北省医药工业研究院,湖北武汉430061)关键词:大柴胡颗粒;黄芩;黄芩苷;高效液相色谱;含量测定中图分类号:R28412文献标识码:A文章编号:1000-0704(2007)03-0051-02大柴胡颗粒是由柴胡、黄芩、白芍、半夏(姜制)、枳实(麸炒)、大黄、生姜、大枣等中药制成的中药颗粒剂(原方大柴胡汤载于汉#张仲景5金匮要略6),用于治疗急性胆囊炎。

黄芩为方中主药,其中黄芩所含主要有效成分为黄芩苷[1]。

笔者采用高效液相色谱法测定黄芩苷含量,为建立大柴胡颗粒科学的质量控制方法提供依据。

1仪器与试药高效液相色谱仪:美国光谱物理公司SP2000泵, U V2000紫外检测器,N2000色谱工作站。

黄芩苷对照品购自中国药品生物制品检定所。

大柴胡颗粒由湖北省医药工业研究院中药室提供。

其他试剂均为分析纯,水为双蒸馏水。

2方法211色谱条件[2-4]Iner tsil ODS-3色谱柱(150mm@416mm,5L m);流动相:甲醇-水-磷酸(46B54B012);检测波长为277nm;流速: 110ml/min;柱温:室温。

212对照品溶液的制备精密称取黄芩苷对照品20mg,加甲醇制成每1ml含40L g的溶液,即得。

213供试品溶液的制备取本品适量,研细,取约012g,精密称定,置100ml量瓶中,加50%甲醇约95ml,超声处理30min,放冷,并稀释至刻度,摇匀。

滤过,弃去初滤液,取续滤液即得。

214标准曲线制备精密称取黄芩苷对照品10117mg,置100ml量瓶中,加甲醇适量,超声使溶解,放冷,并稀释到刻度,分别精密吸取1、2、4、6、8ml至10ml量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀,分别精密吸取20L l注入液相色谱仪中测定,记录色谱图和峰面积。

以各成分峰面积(Y)为纵坐标,质量浓度(X)为横坐标,得黄芩苷线性方程Y=25238206159X-319695112,相关系数r=019999,表明黄芩苷进样量在012~116L g之间范围内与峰面积呈良好的线性关系。

反相高效液相色谱法测定柴黄片中黄芩苷的含量吴小愚，陈儒燕，李丛菊成都中医药大学药学院，成都（611130）E-mail：wxyxiaoyu@摘要：目的建立反相高效液相色谱法测定柴黄片中黄芩苷的含量的方法。

方法采用Alltima C18（5µm, 250×4.6mm）色谱柱，流动相为甲醇-水-磷酸-三乙胺（60：40：0.2：2滴），检测波长为280nm，流速为1.0ml/min，柱温35℃。

结果黄芩苷在0.112～0.784µg范围线性关系良好，r=0.9999,平均回收率为100.03%（n=9）,RSD=0.60%。

结论方法可行，结果可靠，重现性好，可很好的应用于柴黄片中黄芩苷的含量测定。

关键词：柴黄片，黄芩苷，反相高效液相色谱法柴黄片由柴胡、黄芩等提取加工制成的中药片剂，收载于《中华人民共和国卫生部药品标准》中药成方制剂第三册，原标准仅收载了其性状鉴别方法，而无含量测定项，为有效控制其质量，我们采用HPLC法对黄芩主要成分黄芩苷进行含量测定。

经方法学考察，认为本法简便、准确、无干扰，可用于本品质量控制。

1.仪器、试剂与药品Agilent 1100型高效液相色谱仪，可变波长紫外检测器，柱温箱，四元泵，色谱工作站；超声波清洗器，电子分析天平，过滤装置，及微孔滤膜（0.45μm）。

黄芩苷对照品（批号0715-200211、中国药品生物制品检定所，供含量测定用）。

流动相用水为重蒸水，所用甲醇为色谱纯，其余试剂均为分析纯。

柴黄片及其缺黄芩空白样品（自制）。

2.方法与结果2. 1 色谱条件Alltima C18柱（5µm,250×4.6mm）；流动相为甲醇-水-磷酸-三乙胺（60：40：0.2：2滴），检测波长为280nm，流速为1.0ml/min，柱温35℃。

灵敏度0.05AUFS，进样量10µl。

在此条件下，样品中黄芩苷与其他组分峰达到基线分离，理论板数按黄芩苷峰计算为4194，黄芩苷保留时间为4.998min，空白实验表明无干扰。

小柴胡颗粒中黄芩提取物检查项补充检验方法针对小柴胡颗粒中的黄芩提取物的检查项，可以从以下几个方面进行补充检验方法：1.有效成分含量测定：黄芩的有效成分主要是黄芩苷，可以采用高效液相色谱法（HPLC）进行测定。

该方法可以通过对黄芩提取物中黄芩苷的特征峰进行定量，确定其含量是否符合质量标准。

同时，还可以通过比较不同批次样品的含量差异，保证产品质量的一致性。

2.质量控制指标的考察：除了黄芩苷的含量外，还需关注黄芩提取物中的其他成分含量情况。

可以采用质量控制指标中所要求的其他成分的检测方法，如黄芩酮的含量测定、黄酮类成分的含量测定等。

这些成分的含量反映了黄芩提取物的整体质量情况，也是评价小柴胡颗粒的质量的重要依据。

3.农药残留的检测：黄芩作为一种中药材，其种植过程中可能会使用农药，因此需要进行农药残留的检测。

可以采用液相色谱法（LC）或气相色谱法（GC）等方法，通过与农药库标样的比对，检测样品中各种农药的残留情况。

农药残留超标可能会对人体健康产生潜在危害，因此这一项检测非常重要。

4.微生物的检测：黄芩提取物的微生物污染是影响其质量的重要因素之一，因此需要进行微生物的检测。

可以采用菌落计数法、霉菌菌落计数法等方法，检测黄芩提取物中细菌和霉菌的污染情况。

此外，还需要检测沙门氏菌、大肠杆菌等致病菌的存在情况。

5.重金属的检测：黄芩提取物中含有一定量的金属元素，因此需要进行重金属的检测。

可以采用原子吸收光谱法、电感耦合等离子体质谱法等方法，检测黄芩提取物中各种重金属的含量情况。

重金属超标可能对人体健康带来潜在危害，因此这项检测也非常重要。

通过以上补充的检验方法，可以全面地评价小柴胡颗粒中黄芩提取物的质量情况，确保其安全有效。

同时，在实际检验过程中需要注意的是，确保检测方法的准确性和可重复性，对于检测结果的分析和解读要进行科学合理的判断，确保测试结果的可靠性和准确性。

HPLC法测定小柴胡颗粒中黄芩苷的含量【摘要】目的：建立小柴胡颗粒中黄芩苷的的含量测定方法。

方法：采用Phenomenex Synergi C18 (4.6×250 mm，4 μm) 为色谱柱，以甲醇－0.1％磷酸溶液(47：53)为流动相，280 nm为检测波长，柱温为30 ℃。

结果：黄芩苷浓度在0.00308-0.308mg·mL-1范围内线性关系良好（r =0.999946），平均回收率为99.3%，RSD=2.1 %。

结论：该方法简便、准确，分离度好，可用于小柴胡颗粒的质量评价。

【关键词】小柴胡颗粒；黄芩苷；HPLC【Abstract】Objective：TO establish an HPLC method for determination of Baicalain in Xiaochaihu kernel. Method：A Phenomenex C18(4.6×250 mm，4 μm) column was used with a mobile phase of methanol-0.1% phosphoric acid （47：53）,and flow rate of 1.0 mL·min-1 ；The detection wavelength was set at 280 nm and the column temperature was set at 30 ℃.Result: The calibration curves were linear in the range of 0.012~0.60 m g·mL-1 for Baicalain（r =0.999946），The average recovery of Baicalain was 99.3%, RSD=2.1%.Conclusion:It is proved that the method with HPLC is reliable,simple,well separated and precise,that can be used as principles of quantitative analysis. [ Key words ] Xiaochaihu kernel；Baicalain；HPLC前言小柴胡颗粒是《伤寒论》中经典方小柴胡汤的现代制剂，主要成分为柴胡、黄芩、甘草、党参等七味药材，具有解表散热、疏肝和胃等功效，用于寒热往来、胸胁苦满、心烦喜吐、口苦咽干，其临床运用非常广泛。

中药中有效成分黄芩苷含量测定方法研究摘要：黄芩苷是由中药药材中黄芩中分离出的有效成分，这种物质提取于黄芩干燥后的根部，是一种黄酮类化合物。

它对于医治传染性肝炎、急性胆道感染和解铅中毒有很好的效果。

本文中重点介绍了几种最普遍的检测方式，导数光谱法、紫外分光光度法、高效液相色谱法、毛细管电泳法和液质联用法，对比了几种检测方法的优势与使用条件。

关键词：黄芩苷含量检测导数光谱法紫外分光光度法1、引言黄芩是一种双子叶植物唇形科植物的药材。

黄芩苷是由中药药材中黄芩中分离出的有效成分，这种物质提取于黄芩干燥后的根部，是一种黄酮类化合物。

它能够水解出黄芩素和葡萄糖醛酸，构成了黄芩的一个重要的有效成分。

黄芩苷是一种广泛使用的中药成分之一，常用于医治传染性肝炎、急性胆道感染和解铅中毒等疾病。

它具有一定的生物活性，可以抑制细菌，利于排尿，黄芩苷还具有对抗炎症、清火利咽、安胎保胎、止咳等功效。

黄芩苷别名为黄芩甙，分子式为C21H18O11，是一种黄色的结晶物质，它的熔点在223℃到225℃之间，溶于N，N-二甲基甲酰胺，吡啶，在碳酸氢钠、碳酸钠、氢氧化钠等碱性溶液中有良好的溶解度。

在冰醋酸中呈微溶状态，丙酮、甲酸和乙酸中呈现难溶状态。

在水、乙醚、氯仿和苯中基本不溶解，所以实验要避免使用这几种溶液作为溶剂。

图1 黄芩苷化学结构式2、测定的药品的含量与纯度的方法2.1、导数光谱法导数光谱法分为：一阶导数光谱法、二阶导数光谱法和四阶导数光谱法。

用一阶导数光谱法测定的时候最初利用紫外分光光度计分别将预先筹备好的黄芩苷标准品、样本溶液和阴性的对照组溶液进行吸光度的测定，记作A。

用A对测定波长求一阶导数，用求出的一阶导数对应波长作图，得到需要的一阶导数曲线图。

这样我们就可以直接确定出样品与黄芩苷标准品的最大吸收值，除掉阴性的干扰性，可以从图中直观看出对照溶液的波长（平行于基线）。

这样简单提取处理的样品就可以检测出黄芩苷的含量了，具有简单、高效、快捷的优点。

小柴胡颗粒中黄芩提取物检查项补充检验方法小柴胡颗粒是一种常用于治疗中医药中气郁血瘀证的中药制剂。

其中的黄芩提取物是一种重要的活性成分，具有清热解毒、抗菌抗病毒、抗氧化等作用。

为了保证小柴胡颗粒的质量和安全性，需要对黄芩提取物进行检验。

本文将为您介绍小柴胡颗粒中黄芩提取物检查项的补充检验方法。

1.黄芩提取物含量测定黄芩提取物的含量是衡量小柴胡颗粒品质的重要指标。

传统的测定方法是采用高效液相色谱法（HPLC）进行含量分析。

HPLC分析不仅可以准确测定黄芩提取物的含量，还可以同时检测其他成分，为小柴胡颗粒的质量控制提供全面的信息。

2.黄芩提取物的纯度检测黄芩提取物的纯度是指其有效成分在提取物中的相对含量。

保证黄芩提取物的纯度有助于保证小柴胡颗粒的疗效稳定。

传统的纯度检测方法包括薄层色谱法和气相色谱法。

薄层色谱法可以用于检测提取物中的杂质和未去除的溶剂，气相色谱法可以用于检测提取物中的有机残留物。

3.黄芩提取物的微生物检测微生物污染是影响小柴胡颗粒质量的重要因素之一、常规的微生物检测方法包括总菌数、霉菌和酵母菌的测定。

传统的检测方法包括菌落计数法和聚合酶链反应法（PCR）。

近年来，基于PCR技术的快速检测方法逐渐得到应用，可以提高检测的准确性和灵敏度。

4.黄芩提取物的重金属检测重金属是常见的药材污染物之一，其存在可能会对人体健康造成潜在的危害。

因此，对黄芩提取物中重金属的含量进行检测是必要的。

传统的重金属检测方法包括原子吸收光谱法和电感耦合等离子体质谱法。

这些方法可以准确测定提取物中重金属的含量，确保产品的安全性。

5.黄芩提取物的质量评价除了单一成分的检测，还可以通过对黄芩提取物的多成分进行指纹图谱分析来评价其质量。

指纹图谱分析是一种将药材中复杂的化学成分进行综合分析的方法。

通过对提取物中的多个成分进行定量分析和相似度比较，可以评估提取物的质量稳定性和一致性。

总结起来，小柴胡颗粒中黄芩提取物的补充检验方法主要包括含量测定、纯度检测、微生物检测、重金属检测和质量评价。