高效液相色谱法测定黄芩中黄芩苷含量
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一、实验目的1. 学习掌握黄芩中黄芩苷的提取和测定方法。
2. 掌握高效液相色谱(HPLC)技术的基本操作。
3. 通过实验,了解黄芩苷在黄芩中的含量,为黄芩的质量控制和药效评价提供依据。
二、实验原理黄芩苷(Baicalin)是黄芩的主要有效成分,具有抗菌、抗炎、抗氧化等多种生物活性。
本实验采用高效液相色谱法(HPLC)测定黄芩中黄芩苷的含量。
HPLC法是一种高效、灵敏、准确的分离分析方法,适用于中药有效成分的含量测定。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:黄芩药材(市售)、甲醇、乙腈、水(均符合色谱分析要求)、黄芩苷标准品。
2. 仪器:高效液相色谱仪、紫外检测器、色谱柱、超声波清洗器、电子天平、移液器、样品处理装置等。
四、实验方法1. 样品制备(1)称取黄芩药材粉末约1.0g,置于100ml具塞锥形瓶中。
(2)加入甲醇50ml,超声提取30分钟。
(3)过滤,滤液于60℃水浴中浓缩至近干。
(4)加入水5ml,溶解残渣,转移至10ml容量瓶中,定容至刻度,摇匀,作为供试品溶液。
2. 标准曲线制备(1)精密称取黄芩苷标准品10.0mg,置于100ml容量瓶中,加甲醇溶解并定容至刻度,得100μg/ml的标准溶液。
(2)分别取标准溶液0.5ml、1.0ml、1.5ml、2.0ml、2.5ml,置于10ml容量瓶中,加甲醇定容至刻度,摇匀,得浓度分别为5μg/ml、10μg/ml、15μg/ml、20μg/ml、25μg/ml的标准溶液。
(3)分别取上述标准溶液各10μl,注入高效液相色谱仪,测定峰面积,以浓度C 为横坐标,峰面积A为纵坐标,绘制标准曲线。
3. 供试品溶液测定(1)分别取供试品溶液和标准溶液各10μl,注入高效液相色谱仪,测定峰面积。
(2)根据标准曲线,计算供试品溶液中黄芩苷的含量。
五、实验结果与分析1. 标准曲线线性关系良好,线性范围为5μg/ml~25μg/ml,相关系数R²=0.999。
黄芩苷含量测定实验报告
黄芩苷(baicalin)是一种天然的药用成分,属于黄芩属植物中的一种黄酮苷类化合物。
黄芩苷具有抗氧化、抗炎、抗菌、抗肿瘤等多种药理活性,被广泛应用于中药和保健品领域。
因此,对黄芩苷含量的测定具有重要的意义。
黄芩苷的含量测定通常采用高效液相色谱法(HPLC)进行。
在本实验中,我们使用HPLC法对黄芩苷含量进行了测定。
首先,我们准备了黄芩苷的标准溶液,然后通过HPLC仪器进行色谱分析。
在色谱图上,黄芩苷会表现出特定的峰形,通过峰面积与浓度的关系,可以计算出样品中黄芩苷的含量。
实验结果显示,我们所测定的样品中黄芩苷的含量为XX%,符合预期范围。
这表明我们所使用的方法准确可靠,可以用于对黄芩苷含量进行快速测定。
在进行黄芩苷含量测定时,有几点需要注意。
首先,样品的制备要尽量避免污染和损失,以确保测定结果的准确性。
其次,色谱条件的选择对测定结果也有重要影响,需要根据实际情况进行合理调整。
最后,在进行测定时要注意仪器的操作规范,确保实验过程的准确性和可重复性。
总的来说,通过本次实验,我们成功地测定了黄芩苷的含量,为进一步研究和应用黄芩苷提供了可靠的数据支持。
希望在未来的研究
中,可以进一步完善测定方法,提高测定精度,为黄芩苷的应用提供更多有益信息。
黄芩有效成分的含量测定技术黄芩素是黄芩的主要活性成分,通常作为评价黄芩质量的指标之一。
目前,对于黄芩素的含量测定方法主要有光谱法、色谱法、生物学法等,下面将就几种常用的测定技术进行简要介绍。
一、紫外-可见分光光度法紫外-可见分光光度法是一种常用的测定黄芩素含量的方法。
此方法利用黄芩素在特定波长下的吸收特性进行测定,一般选择的检测波长为260nm。
该方法简便易行,对样品预处理要求不高,但是在实际应用中往往受到样品基质的干扰,因此在测定时通常需要进行样品前处理和基质干扰的消除。
二、高效液相色谱法高效液相色谱法(HPLC)是目前应用最为广泛、准确性最高的测定黄芩素含量的方法之一。
该方法通常采用反相色谱柱进行分离,以乙腈-水混合溶剂为流动相,并通过梯度洗脱或等温洗脱的方法进行测定。
在检测方面,一般采用紫外检测器进行检测,选取的检测波长为254nm。
HPLC法测定结果准确可靠,适用范围广,但相对来说对设备和实验者的操作要求较高,在测定过程中需要严格控制各种因素的影响,确保测定结果的准确性和可靠性。
三、质谱法质谱法是一种基于物质的分子结构和质荷比特性的测定方法,目前在测定黄芩素含量方面也得到了广泛应用。
该方法通常采用质谱联用技术,如LC-MS/MS、GC-MS等进行测定。
通过质谱法可以直接检测黄芩素的分子信息,对于复杂样品的分析能力强,不受基质干扰,测定结果准确可靠。
质谱法设备和操作要求较高,成本也较高,一般在一般实验室中并不常用。
在进行黄芩素含量测定时,需要结合实际情况选择合适的测定方法,并在测定过程中严格按照要求操作,确保测定结果的准确性和可靠性。
除了黄芩素的含量测定外,黄芩苷作为黄芩的另一重要有效成分的测定也是十分重要的。
目前,对于黄芩苷的测定主要采用色谱法,如HPLC法等进行测定。
在实际应用中,对于黄芩有效成分含量的测定,一般需要结合多种方法进行综合分析,确保测定结果的准确性和可靠性。
黄芩素和黄芩苷的含量测定是保证黄芩质量的重要保证,目前有多种技朋可以选择,但在选择测定方法时需要考虑实际情况,并在测定过程中严格操作,以确保测定结果的准确性和可靠性。
高效液相色谱法测定黄芩颗粒剂中黄芩苷的含量
陈晓城;韩安榜;陈凌云;林崇良
【期刊名称】《江西中医学院学报》
【年(卷),期】2004(016)004
【摘要】目的:应用高效液相色谱法测定黄芩颗粒饮片中黄芩苷的含量.方法:色谱柱为Alltech色谱柱(4.6 mm×150 mm,5 μm),流动相为甲醇-水-磷酸
(50∶50∶0.2),检测波长为274 nm,流速为1.0 ml/min,柱温:30 ℃.结果:黄芩苷在0.094~0.564 μg范围内进样量与峰面积呈良好线性关系(r=0.999 6);平均加样回收率为97.63%,RSD=0.45%(n=5).结论:本方法测定结果准确、灵敏、重现性好.【总页数】2页(P48,65)
【作者】陈晓城;韩安榜;陈凌云;林崇良
【作者单位】浙江省温州医学院附属第一医院,温州,325000;浙江中医学院,杭州,310053;浙江省温州市药检所,温州,325000;浙江省温州医学院附属第一医院,温州,325000
【正文语种】中文
【中图分类】TQ461
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黄芩提取物黄芩苷高效液相法概述黄芩(Scutellaria baicalensis Georgi)是一种传统的中药材,广泛用于治疗炎症、感染和肿瘤等疾病。
黄芩提取物中的黄芩苷(baicalin)是其主要活性成分之一,具有抗氧化、抗菌、抗炎和抗肿瘤等多种药理作用。
因此,开发一种高效的液相色谱法用于测定黄芩提取物中的黄芩苷含量具有重要意义。
实验方法仪器设备•高效液相色谱仪(HPLC)•色谱柱:C18色谱柱•注射器:10μL固定体积注射器•色谱检测器:紫外检测器(UV)•称量仪:电子天平色谱条件•流动相:甲醇 - 水(含0.1%三氟乙酸)•流速:1.0 mL/min•柱温:30°C•紫外检测波长:280 nm样品制备将黄芩提取物粉末取约1 g,加入20 mL甲醇中,用超声波溶解10分钟,然后离心10分钟,取上清液并过滤。
取适量上清液进一步稀释。
校准曲线制备准备一系列浓度不同的黄芩苷标准溶液,分别为0.1 mg/mL、0.5 mg/mL、1 mg/mL、2.5 mg/mL、5 mg/mL。
以10 μL为一次注射量进行色谱分析。
色谱分析将样品和标准溶液以10 μL固定体积注射器注入HPLC系统中进行色谱分析。
记录峰面积,并根据标准曲线计算黄芩苷的含量。
结果与讨论校准曲线根据不同浓度的黄芩苷标准溶液进行HPLC分析,并绘制出峰面积与浓度的关系曲线。
通过回归分析得到拟合方程,并计算相关系数(R^2)来评估拟合效果。
方法验证对黄芩提取物样品进行重复性实验和稳定性实验,评估该方法的重复性和稳定性。
另外,还可以比较该方法与传统方法的结果,评估其准确性和精确度。
样品分析将不同来源的黄芩提取物样品进行HPLC分析,测定其中黄芩苷的含量。
对不同样品的结果进行比较和统计分析,评估不同来源黄芩提取物中黄芩苷的差异性。
结论通过该高效液相色谱法,可以准确、快速地测定黄芩提取物中的黄芩苷含量。
该方法具有较好的重复性、稳定性和准确度,适用于黄芩提取物质量控制和药理研究中的应用。
HPLC法测定川黄芩中黄芩苷的含量摘要】目的探讨高效液相色谱法测定川黄芩中的黄芩苷含量的方法学特点。
方法取川黄芩样品粉末(共5批),比较70%乙醇、稀乙醇、甲醇、50%甲醇对其黄芩苷的提取效率。
取黄芩苷对照品溶液10ul,连续5次注入液相色谱仪,研究黄芩苷进样量与峰面积的线性关系,并进行精密度试验、重复性试验、加样回收实验、耐用性实验,最后进行样品测定。
结果测定波长选定为277nm,选用甲醇-水-磷酸(47:53:0.2)作为测定流动相,70%乙醇为本品的提取溶剂,以回流提取3小时为提取方法。
黄芩苷在进样量为30.31~1212.4μg之间时,与峰面积线性关系良好。
结果表明,该法精密度、重现性、准确度及耐用性均较好。
结论高效液相色谱法定量测定川黄芩中的黄芩苷,方法简单、准确度高。
【关键词】川黄芩黄芩苷含量测定【中图分类号】R927.2 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752(2012)01-0109-02川黄芩系常用药材,为唇形科黄芩属植物滇黄芩Scutellaria amoenaC.H.Wright,连翘叶黄芩Scutellaria hypericifolia Levl.或韧黄芩展毛变种Scutellaria tenax W. W.Smith var.patentipilosa(Hand.-Mazz.)C. Y.Wu的干燥根。
主产于四川西南部、西部、西北部,云南及贵州等省[1]。
川黄芩主要含黄芩苷和黄芩素、汉黄芩素、滇黄芩素和汉黄芩苷等[3、4]。
黄芩苷为川黄芩中含量较高的成分。
已有文献报道黄芩苷可采用高效液相法进行含量测定[2]。
本研究在充分参考上述文献的基础上,采用高效液相谱法测定川黄芩中黄芩苷的含量。
研究内容如下:一、仪器与试药仪器:w a t e r s515泵、2478检测器。
试剂:甲醇为色谱纯,水为超纯水,其余试剂均为分析纯。
对照品:黄芩苷为中国生物制品检定所提供(批号110715-200815 。
不同产地黄芩中黄芩苷的含量分析
张根荣
【期刊名称】《中国中医药咨讯》
【年(卷),期】2010(002)035
【摘要】目的:对不同产地黄芩中黄芩苷含量进行比较.方法:运用高效液相色谱法,ODS2 C18柱,流动相为甲醇-水-磷酸(47:53:0.2),柱温为25℃,流速1ml·min-1,检测波长为280nm.结果:黄芩苷在5~60μg/ml呈良好线性关系,r=0.9999.平均回收率为98.7%,RSD=4.5%(n=5).不同产地黄芩饮片中黄芩苷的含量在8.9~15.8%之间,以河北黄芩中的黄芩苷含量最高.结论:不同产地的黄芩中黄芩苷的含量存在一定的差异,临床用药应可根据不同产地调整药物剂量.
【总页数】2页(P32,34)
【作者】张根荣
【作者单位】苏州木渎人民医院药剂科,江苏,徐州,215101
【正文语种】中文
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反相高效液相色谱法测定黄芩苷固体分散体中黄芩苷的含量目的建立反相高效液相色谱法测定黄芩苷固体分散体中黄芩苷含量的测定方法。
方法采用Diamonsil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),以甲醇-0.1%磷酸溶液(55∶45)为流动相,柱温为30℃,流速为1.0 ml/min,检测波长280 nm,进样量为10 μl。
结果黄芩苷浓度在29.0~174.0 μg/ml的范围内与峰面积呈良好的线性关系,线性方程为A=21.809C-17.243(r=1.0000,n=7);黄芩苷的平均回收率为100.9%,RSD值为1.18%。
该方法的精密度、重复性良好,RSD 值均小于2.00%。
结论该方法简便、快捷、准确度高,能有效控制黄芩苷固体分散体胶囊中黄芩苷的质量。
标签:黄芩苷固体分散体;高效液相色谱法;含量测定黄芩苷(Bacialin,分子式:C21H18O11)是从唇形科植物黄芩(Scutellaria baicalensis georgi)根部提取分离出来的一种黄酮类化合物。
黄芩苷具有广谱抗菌、抗病毒和解热作用[1],能明显减轻肝细胞变性和坏死,对抗结核药物致肝细胞损伤具有保护作用[2],对四氯化碳诱发的急性肝损伤小鼠有保护作用[3]。
此外,黄芩苷以抑制兴奋性氨基酸毒性、抗自由基的毒性损伤、干预细胞内钙超载等多种机制对缺血性脑损伤有明显保护作用[4]。
多项药理学研究表明,黄芩苷还具有抗炎、抗细胞凋亡、抗氧化、降压、镇静、调节免疫功能,抗心律失常、抑制脂加氧酶而对人类哮喘有效等作用[5-7],临床上用于感染、肺炎、肝炎、高血压和先兆流产等疾病[8]。
本试验以泊洛沙姆188为载体,采用熔融法制备黄芩苷-泊洛沙姆188固体分散体,所建立的反相高效液相色谱法能准确、快速测定黄芩苷-泊洛沙姆188固体分散体的含量,选择性好,准确度高,可用于控制黄芩苷-泊洛沙姆188固体分散体的质量,对于建立质量标准有重大意义。
高效液相色谱法测定消炎片中黄芩苷的含量目的:建立测定消炎片中黄芩苷含量的高效液相色谱法。
方法:采用Diamonsil C18色谱柱(200 mm×4.6 mm,5 μm),流动相为乙腈-水-磷酸溶液(32∶68∶0.2),检测波长为280 nm,流速为1.0 ml/min,柱温为室温。
结果:得回归方程为Y=114 166.67X+462 893.57,r=0.999 8(n=6), 表明进样量在0.40~2.40 μg范围内有良好的线性关系,平均回收率为(99.51±0.67)%,RSD为0.67%。
结论:本方法简便、准确、重现性好,可用于消炎片的质量控制。
[Abstract] Objective: An HPLC method for the content determination of baicalin in Xiaoyan Tablets was established. Methods: A Diamonsil C18 column(200 mm×4.6 mm, 5 μm) was used with acetonitrile-water-phosphate acid(32∶68∶0.2) as the mobile phase. The flow rate was 1.0 ml/min, the detection wavelength was 280 nm, the column temperature was room temperature. Results: The liner range was 0.40-2.40 μg(r=0.999 8, n=6), and the regression equation was Y=114 166.67X+462 893.57, the average recovery was (99.51±0.67)% with a RSD of 0.67%. Conclusion: The method is simple, accurate and repeatable, and it can be used in the quality control of Xiaoyan Tablets.[Key words] HPLC; Xiaoyan Tablets; Baicalin; Content determination消炎片主要由蒲公英、紫花地丁、野菊花、黄芩四味中药组成,具有抗菌消炎、清热解毒的作用,用于治疗呼吸道感染、发热、肺炎、支气管炎、咳嗽有痰、疖肿等。
高效液相色谱法测定咽炎茶中黄芩苷含量[摘要] 目的建立咽炎茶中黄芩苷含量测定的高效液相色谱法。
方法色谱柱为ods柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),流动相为甲醇-水-磷酸(30∶70∶1),流速为1.0 ml/min,检测波长为280 nm,进样10 μl。
结果黄芩苷在0.198 8~1.192 8 μg范围内线性关系良好,r = 0.999 7,平均回收率为97.4%,rsd = 1.1%。
结论本方法稳定可行,结果准确可靠,可作为咽炎茶质量标准中黄芩苷的含量测定方法。
[关键词] 咽炎茶;黄芩;黄芩苷;高效液相色谱法determination of baicalin in yanyan tea by hplccai tao sun lanzhen qin xinggui yuan yuan chen mingdepartment of pharmacy, the 82st hospital of pla, jiangsu province, huaian 223001, china[abstract] objective to estabilsh hplc method for determination of baicalin in yanyan tea. methods the chromatography column was the ods column (4.6 mm×250 mm, 5 μm), the mobile phase was methanol-water- phosphoric acid (30∶70∶1). the flow rate was 1.0 ml/min and the detection wavelength was 280 nm, sample introduction was 10 μl. results the calibration curve of baicalin was in good linearity over the range of 0.198 8 - 1.192 8 μg, r = 0.9997, and the average recovery rate was 97.4% with an rsd of 1.1%. conclusion the method is simple, reliable, accurate and can be applied to the quality control of the yanyan tea.[key words] yanyan tea; baicalensis; baicalin; hplc咽炎茶由玄参、南沙参、黄芩、生地、麦冬等11味中药组成,具养阴、降火、清热、理气等作用。
黄芩提取物黄芩苷高效液相法
黄芩提取物中的主要有效成分是黄芩苷。
黄芩苷是一种黄酮类化合物,具有抗炎、抗氧化、抗菌等多种药理活性。
为了准确、快速地检测和确定黄芩提取物中黄芩苷的含量,可以使用高效液相法(HPLC)进行分析。
高效液相法是一种基于液相色谱技术的分析方法,具有分离效果好、分析速度快、柱寿命长等优点。
在使用HPLC对黄芩
提取物中的黄芩苷进行分析时,首先需要准备样品溶液,即将黄芩提取物溶解在适当的溶剂中,并通过滤膜处理使溶液中无杂质。
然后,将样品溶液注入HPLC仪器的进样口,通过进样口将
溶液送入色谱柱进行分离。
选择适当的色谱柱和流动相,以达到黄芩苷与其他组分之间的有效分离。
在分离过程中,可以通过检测器对出口流动相进行监测,并记录所得到的吸光度或荧光强度。
最后,根据黄芩苷的特征峰的保留时间和峰面积,进行定量分析。
可以通过比较待测样品中黄芩苷的峰面积与标准品的峰面积之比,来确定黄芩提取物中黄芩苷的含量。
需要注意的是,在进行HPLC分析时,应选择合适的检测波长、色谱柱和流动相条件,并确保仪器的稳定性和准确性。
此外,为了提高分析结果的可靠性,建议进行重复测定,并通过实验室校准曲线等方法进行验证和确认。
一、实验目的1. 学习高效液相色谱法(HPLC)在中药质量检测中的应用。
2. 掌握黄芩苷含量的测定方法。
3. 了解色谱仪的操作步骤。
二、实验原理黄芩苷是黄芩中的主要有效成分,具有清热解毒、消炎、抗病毒等作用。
本实验采用高效液相色谱法(HPLC)测定黄芩苷的含量。
HPLC是一种高效、灵敏、快速的分析方法,广泛应用于中药质量检测。
三、实验仪器与试剂1. 仪器:高效液相色谱仪、色谱柱、紫外检测器、色谱工作站、电子天平、超声波清洗器、移液器、容量瓶、试管等。
2. 试剂:黄芩苷对照品、甲醇、乙腈、水、磷酸等。
四、实验步骤1. 样品制备:称取黄芩粉末约0.5g,加入适量甲醇,超声提取30min,过滤,取滤液定容至10ml,备用。
2. 标准品溶液制备:称取黄芩苷对照品10mg,加入甲醇溶解,定容至10ml,制成浓度为1mg/ml的黄芩苷对照品溶液。
3. 色谱条件:- 流动相:乙腈-0.1%磷酸(75:25)- 检测波长:280nm- 柱温:30℃- 流速:1.0ml/min4. 样品测定:- 将制备好的样品溶液进行0.45μm微孔滤膜过滤,取20μl进样。
- 同时取黄芩苷对照品溶液20μl进样,记录峰面积。
5. 计算结果:- 根据样品溶液和对照品溶液的峰面积,计算黄芩苷含量。
五、实验结果1. 黄芩苷对照品溶液色谱图(见图1)图1 黄芩苷对照品溶液色谱图2. 样品溶液色谱图(见图2)图2 样品溶液色谱图3. 样品中黄芩苷含量计算结果:0.082mg/g六、实验讨论1. 本实验采用高效液相色谱法测定黄芩苷含量,方法简单、快速、准确。
2. 实验过程中,应注意样品的制备、溶液的配制、进样等操作步骤,以确保实验结果的准确性。
3. 在色谱条件的选择上,流动相、检测波长、柱温、流速等因素对实验结果有较大影响,应进行优化。
4. 本实验结果表明,黄芩苷在样品中的含量为0.082mg/g,符合质量要求。
七、实验结论1. 本实验采用高效液相色谱法测定黄芩苷含量,方法可行、准确。