口蹄疫病毒细胞受体的研究进展

口蹄疫研究进展司宁宁1,2,苏艳1(1.新疆农业大学动物医学学院830000;2.新疆裕民县畜牧兽医站830000)摘要:口蹄疫是由口蹄疫病毒引起的一种传染病,主要危害牛羊等家畜,一旦发病产生疫情,会对当地畜牧业造成重大经济损失,并引发政治相关问题,在我国被列为一类动物疫病。

近年来,我国兽医体系建设不断完善,对口蹄疫的防控措施落实严格,采取强制免疫的方式,极大减少了该病的危害。

同时,关于口蹄疫防控生物技术的不断发展,针对口蹄疫诊断和防控的相关医药制品发展迅速,也为防控该病提供了重要支撑。

本文就口蹄疫相关研究进行综述,希望为防控该病提供参考。

关键词:口蹄疫;研究;防控口蹄疫(foot-and-mouth disease,FMD)是由口蹄疫病毒引起的一种急性、热性、高度接触性动物传染。

口蹄疫病毒可以随着风向快速长途传播,传染性极强,对牛羊等偶蹄动物危害最大,也可感染猪等其他畜种,全世界共有70多种动物均易感该病毒。

感染口蹄疫病毒后,主要临床症状是鼻子、口腔部位、蹄子和乳头部位有水泡发生,水泡破裂后会形成明显的斑痂或溃疡,发病后的牲畜因疼痛会跛行和卧地,口腔部位有流涎表现。

受该病影响,发病动物的生产能力大幅度下降。

口蹄疫病毒是一种传染性极强的病毒,感染后发病率几乎100%。

口蹄疫会造成极大的经济损失,是国际兽医卫生组织(OIE)要求世界各国必须上报的动物传染病,关系到一个国家的政治、经济等各个方面,是名副其实的“政治经济病”。

各国高度重视该病的危害,为了控制该病的发生,将口蹄疫作为国际畜产品及活畜通关贸易必检的一类疫病。

1病原学特性及分布口蹄疫的病原为口蹄疫病毒(foot-and-mouthdisease virus, FMDV),有O、A、C、SAT1、SAT2和SAT3、Asia1共7个血清型。

不同类型口蹄疫病毒引起的临床症状基本相同,但不同型病毒之间没有交叉免疫,因此感染过一种类型病毒康复后的动物或者是免疫过一种抗体的动物对其他型号的病毒没有免疫力,这也是口蹄疫防控工作面临的难点。

口蹄疫病毒样颗粒研究进展魏婕*,魏玉荣,易忠(新疆畜牧科学院兽医研究所,新疆乌鲁木齐830000)摘要:病毒样颗粒(VLP)具有与真实病毒粒子大小相似的结构,能引起免疫应答但不具有感染性。

口蹄疫病毒是无囊膜的RNA病毒,其结构蛋白可组装成VLP,且具有良好的免疫原性。

本文对口蹄疫病毒VLP的免疫机制、表达系统及应用、口蹄疫病毒VLP作为抗原在诊断和疫苗中的应用进行了综述。

关键词:蹄疫病毒;病毒样颗粒;疫苗中图分类号:S852.65文献标识码:A文章编号:1003-6377(2015)04-0006-05许多病毒的结构蛋白在不同的培养系统中具有组装成重复序列或者病毒样颗粒(virus-like particles,VLPs)的能力。

这种VLPs大小一般为22~150nm,由于他们不携带遗传物质,因此不具有感染性。

VLPs能够重复并且高密度的展示抗原位点,能引起强烈的免疫反应,因此为该病毒疫苗研究提供了极具潜力的方法。

某些病毒的VLPs与病毒的亚病毒粒子(subviral particles,SVPs)相似,这些VLP能直接作为疫苗使用。

除此之外,VLP还能作为载体,插入外源的抗原位点形成嵌合型的VLP。

VLPs是目前FMDV研究的热点之一,本文将从以下几方面对VLP在口蹄疫病毒中的应用进行综述。

1VLP的免疫机制VLPs比亚单位蛋白或者重组蛋白具有更好的免疫原性,它能引起体液免疫以及免疫系统的细胞集合。

VLPs为构象抗原的展示提供了空间结构骨架,使得构象更接近于天然的病毒结构,刺激产生更多的中和抗体。

一般来说,蛋白抗原会被MHC II类分子加工并递呈给CD4+T细胞。

而VLP被APCs加工后不仅递呈给CD4+T细胞,也会递呈给MHC I分子介导途径的CD8+T细胞。

在某些情况下,VLP不需要佐剂就能够刺激潜在免疫。

这种VLPs的自我辅助的特点是固有的,存在于刺激先天免疫所必要的过程中,如在递呈给树突状细胞加工、被MHC II类分子展示以及直接引起树突状细胞成熟和迁移的过程中,VLP会被APCs识别并递呈,从而体现其免疫原性[1]。

口蹄疫疫苗研究进展口蹄疫疫苗的研究进展【综述】【摘要】口蹄疫是被列为A类疫病的家畜传染病之一，接种疫苗是防止该病流行的有效措施。

本文就口蹄疫灭活疫苗、基因工程亚单位疫苗、转基因植物可饲疫苗、合成肽疫苗、蛋白质载体疫苗、基因工程弱毒疫苗、活载体疫苗、核酸疫苗及空病毒衣壳蛋白疫苗的最新研究进展作一综述。

【关键词】 I=1蹄疫；疫苗Progress in Research on Foot--and．-M outh Disease VaccineCHEN Li—xin，JIN Yu—zhu，HU Rong—liang(Department of印idemiology，Institute of Military Veterinary Medicine，Academy ofMilitary Medicine，Changchun 130062，China)【Abstract】 Foot．and．mouth disease is one of the infectious disease class A in animals．Vaccination is an effective measure forprevention of epidemic of the disease． This paper reviewed the development in research on inactivated vaccine，recombinant subunitvaccine，edible transgenic plant vaccine，synthetic peptide vaccine，protein vector-based vaccine，recombinant attenuated vaccine，livevector-based vaccine，DNA vaccine and empty capsid protein vaccine against foot—and-mouth disease．【Key words】 Foot—and—mouth disease；Vaccine口蹄疫(Foot．and—mouth disease，FMD)是由口蹄疫病毒(Foot．and．mouth disease virus，FMDV)引起的偶蹄动物烈性接触性传染病，主要危害牛、羊、猪等，发病率极高，传播速度极快。

口蹄疫病毒受体的结构与功能研究进展
尹革芬;金宁一
【期刊名称】《生物技术通讯》
【年(卷),期】2002(013)006
【摘要】口蹄疫病毒(FMDV)感染过程中的特异性受体是FMDV识别、结合宿主细胞的分子基础,研究FMDV受体的结构与功能对防治口蹄疫具有重要的理论意义和应用价值.本文论述了近年来关于整联蛋白αvβ3、αvβ6和硫酸乙酰肝素(HS)三种FMDV受体的结构与功能的研究进展.
【总页数】4页(P469-472)
【作者】尹革芬;金宁一
【作者单位】解放军军需大学基因工程重点实验室,长春,130062;解放军军需大学基因工程重点实验室,长春,130062
【正文语种】中文
【中图分类】Q26;Q939.4
【相关文献】
1.口蹄疫基因组结构和功能及相关疫苗研究进展 [J], 潘德敏;彭瀚生;江经纬
2.口蹄疫病毒基因组结构及功能最新研究进展 [J], 张克山;刘永杰;卢国栋;刘湘涛
3.口蹄疫病毒3C蛋白酶结构与功能及应用研究进展 [J], 姚怀兵;赵毅;刘梦丽;朱妍;刘宏;任方;黄炯
4.口蹄疫病毒前导蛋白结构及功能研究进展 [J], 杜平;贺延玉;尚友军;孙晓林;马军
武
5.口蹄疫病毒3C蛋白酶的结构及功能研究进展 [J], 杨彬;柳纪省
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【动科前沿】⼝蹄疫检测技术新进展⼝蹄疫检测技术新进展⼝蹄疫诊断检测技术正在不断改进和创新，已从细胞培养、⾎清学诊断技术扩展到分⼦⽣物学诊断技术领域。

这些新技术不仅敏感、特异、⽽且简便、快速、经济、⾼通量化。

⼀、病原学检测技术1新的敏感细胞系因⽜甲状腺原代细胞和羔⽺原代细胞在⽣产上存在问题，尤其是很少进⾏⼝蹄疫诊断的实验室及因⼝蹄疫呈地⽅流⾏性的地区，很难得到⼝蹄疫阴性的动物。

⽽现有的细胞系对⼝蹄疫敏感性存在局限性，因此，研究者对⼝蹄疫毒更加敏感的细胞系的进⾏了研究。

Brehm等建⽴了⾼敏感⼭⽺胎⼉细胞系，结果表明，在分离7个⾎清型的⼝蹄疫病毒更加敏感。

并且该细胞还可以分离猪⽔泡病毒和⽔疱性⼝炎病毒。

LaRocco(2013)年将αv亚基和β6亚基同时导⼊到⽜肾细胞系中构建稳定表达细胞系LFBK-αvβ6,结果表明β6亚基⾄少在100代可以稳定表达，且增强了对⼝蹄疫病毒的易感性。

2分⼦⽣物学诊断技术2.1环介导转录等温扩增技术⼝蹄疫的传统诊断⽅法是由特异性病毒抗原的酶联免疫吸附试验检测所介导的，通过观察细胞培养中的病变效应。

另外，常规反转录聚合酶式反应和实时定量聚合酶式反应⽤来补充⼝蹄疫病毒感染的最初诊断⽅法。

然⽽，这些检测⽅法⽐较费⼒，并且需要昂贵的试验室设备。

为解决这些问题，Yamazaki等⼈建⽴了⼀个简单、快速和实⽤的反转录的环介导等温扩增⽅法鉴定动物及其产物中的⼝蹄疫病毒。

反转录环介导等温扩增⽅法⾸先是由Notomi等⼈报道的，并且成功应⽤于许多病毒的检测，李健等利⽤环介导等温扩增技术建⽴了⼝蹄疫快速检测⽅法，同时评价了该⽅法的灵敏性和特异性。

该检测⽅法检测体系具有极⾼的特异性，只能检测到⽬标病毒，与其他类病毒物较差反应，灵敏性较⾼。

2.2实时荧光定量反转录聚合酶链式反应荧光实时定量聚合酶链式反应就是通过对聚合酶链式反应扩增反应中的每⼀个循环产物荧光信号的实时监测，从⽽实现对起始模板定量及定性分析。

口蹄疫病毒受体猪源整联蛋白基因的克隆及表达的开题报告一、研究背景和意义口蹄疫是一种由口蹄疫病毒引起的急性传染病，对家畜畜群和养殖业造成严重危害。

其中猪是其中一种重要的感染动物。

研究表明，病毒在感染猪时需要结合宿主细胞表面的受体分子，如CD46、CD155等。

其中，整联蛋白（integrin）也被证实是病毒感染的重要受体分子。

研究口蹄疫病毒在猪体内的感染机制及受体分子对控制疾病的传播具有重要意义。

目前的研究表明，口蹄疫病毒受体猪源整联蛋白基因的克隆及表达对于口蹄疫的研究和防治具有重要的意义。

因此，本研究旨在对口蹄疫病毒受体猪源整联蛋白基因进行克隆和表达，并对其功能进行初步验证，为寻求口蹄疫防治措施提供理论基础。

二、研究内容和方法本研究将采用以下方法对口蹄疫病毒受体猪源整联蛋白基因进行克隆和表达：1.基因克隆。

从猪的RNA样品中提取总RNA，通过反转录酶逆转录得到cDNA；利用PCR扩增整联蛋白基因，并通过克隆和测序得到完整的基因序列。

2.构建表达载体。

利用PCR扩增整联蛋白基因，并将其连接至表达载体中，构建表达载体。

3.细胞培养和转染。

选择合适的细胞系进行细胞培养，将构建好的表达载体转染至细胞中，利用Western blot进行蛋白表达检测。

4.功能验证。

利用ELISA方法进行功能验证，对得到的蛋白进行体外结合实验、抵抗病毒感染实验等，验证该蛋白作为口蹄疫病毒受体的能力。

三、预期结果和意义本研究预期得到口蹄疫病毒受体猪源整联蛋白基因的完整序列，并成功进行表达和功能验证。

该结果将进一步加深人们对口蹄疫病毒感染机制和受体分子的认识，有助于制定更为有效的防治方式，提高疾病的防治水平。