动物生理学实验三鱼类血液涂片制作与血细胞计数课件

人体血P液PT涂课片件
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血液涂片技术在水产动物疾病检测过程中也有非常 重要的作用，比如细菌感染、病毒感染以及血液寄生虫疾 病的检测。目前该技术已成为水产技术从业人员的必备技 能，也是执业资格考试的重点内容。
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涂片经瑞氏-吉姆萨染色液染色后，相应各类细胞呈 现不同的着色，从而达到辨别其形态特征的目的。一般细 胞的细胞核嗜碱性，能被碱性燃料染成蓝色，而细胞质基 质嗜酸性，能被酸性燃料染成红色。
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血液具有维持生物体内环境稳态的作用，正常情况下血 液中的的各项生理指标处于相对稳定的状态，同时各项指标 也能够反映一个生物个体的健康程度，因而血液检测已成为 疾病检测最基本的技术。
多种多样的血液检测仪
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血液检PP测T课能件够辅助疾病诊断
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血涂片的显微检查是血液细胞学检查的基本方法，也是 生物显微制片的基本方法之一，临床上应用极为广泛，特别 是对于各种血液病的诊断具有重要的价值。制备厚薄适宜， 分布均匀，染色良好的血涂片是血液学检查的重要基本技术。
3、充液 取干净的计数板平放于实验桌上，将盖玻片置 入计数板正中央。用毛细血管吸取已稀释混匀后的血细胞悬 浮液，并将管尖轻轻斜置于盖玻片边缘，让血细胞悬液缓慢 流出，借毛细管现象而自动流入计数室内。
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4、静置 血细胞悬液充入计数室后，静置2～3分钟 ，待细胞不再浮动后，于低倍镜下观察计数室内待计数 的血细胞分布是否均匀，分布均匀者，方可计数。
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（四）外在的动机和内在的动机
根据动机来源分为：
外在动机：在外界的要求与外力的推动下产 生的动机。
如：有的学生为了得到教师的奖励或免受父 母责备才努力学习。
内在动机：个体的内在需要引起的动机。
如：有的学生对知识很感兴趣，能够积极主 动学习。
外在动机和内在动机的划分不是绝对的，外在 要求必须转化成人的内在需要时，才能成为行为的 动力，如果外在存在要求，个体并没有意识到，或 没有当回事，那么也不会产生动机作用。
性动机产生原因：
性荷尔蒙刺激：
个体达到性成熟时，男性脑垂体分泌激素刺激睾 丸分泌男性激素进入血液，提高性驱力。女性脑垂体 分泌激素刺激卵巢分泌雌性荷尔蒙进入血液，提高性 驱力。雌性激素分泌的周期性。
外界刺激和学习等因素对性驱力也有重要的作用。
如由于生活条件改善，青少年的性成熟比以前提 前了好几岁。据统计，在西方从1840年的17岁，提前 到1960年的12.5岁。中国也有提前的现象。
（二）渴
指体内缺乏水分引起的一种生理不平衡状态， 并推动有机体产生找水的行为。
渴的原因：
中枢神经系统和血液中化学成分的变化。
如：在山羊的下丘脑细胞注射食盐水，山羊 会饮大量的水。
吃完饭，血液中盐的含量增加，产生渴的动 机。
（三）性
以性需要为基础，它并不是个体维持生命所必需 的。性动机与性成熟有密切的关系。
如何进行蛙细胞的显微测量？
转动目镜镜筒 短轴
长轴
目镜测微尺
细胞膜 细胞质 细胞核
蛙红细胞示意图
五、实验作业
一张好的血涂片的要求是什么? 绘制鲫鱼和牛蛙的血细胞。
（三）自我功效论
班杜拉提出自我功效理论：人对行为决策是主动的，人 的认知变量如期待、注意和评价等在行为决策中起着 重要的作用。其中期待是决定行为的先行因素。期待 分为结果期待和效果期待。

第三章
血液
第一节 血液的组成和理化特性
一、血液的基本组成和血量
水（90%—92%）
血浆
晶体物质（2%—3%）
（Plasma）
血液
血浆蛋白
（5%—8%）
白蛋白
球蛋白
纤维蛋白原
红细胞
血细胞（40%—50%） 白细胞
血小板
红细胞比容：压紧的血细胞在全血中所占的容积百分比
第一节 血液的组成和理化特性
下阶段：
第二节 血细胞及其功能
（四）红细胞生成及破坏
• 1.红细胞的生成
• ⑶造血原料
• ①初期阶段：细胞有丝分裂，核酸（DNA）合成，
需要叶酸和维生素B12的参与。
• ②后期阶段：需要Fe2+合成Hb，每天需要20 ～
30mg。Fe2+缺乏时患缺铁性贫血。
• Hb的分子结构
• Fe3+需还原成Fe2+才能用于合成Hb。
• 因此，在急性炎症时中性粒细胞会明显增多。
第二节 血细胞及其功能
二、白细胞生理
(二)白细胞的功能
2.单核细胞
• 进入组织转变为巨噬细胞后，溶酶体内颗粒增加，其吞噬力大为增强，
能吞噬较大颗粒。
• ■ 单核－巨噬细胞的主要功能：
• ①吞噬细胞内致病物，如病毒、疟原虫以及真菌、结核分枝杆菌等；
• ②能识别和杀伤肿瘤细胞；
骨髓造血过程
第二节
血细胞及其功能
一、红细胞生理
（四）红细胞生成及破坏
• 1.红细胞的生成
• ⑶造血原料
• ●叶酸：
• 体内过程：食物中的蝶酰单谷氨酸→经肠粘膜吸收入血→四氢叶酸→
多谷氨酸→参与DNA合成。

3.4 Blood group and blood transfusion
3.4.1 Blood group and agglutination of RBC
Blood from certain persons when transfused to other persons may cause a server reaction reaction leading to death. This is because human RBCs contains antigens or agglutinogen that produce actions to antibodies (agglutinin) and agglutination of RBCs when transfused. The serverity of the reaction depends on the blood group types.
3.2.4 Platelet
血小板体积小，无细胞核，呈双面微凸 的圆 盘状，直径2~3 um, 正常成年人血液中的数量为， 100~300 x 109 /L 是从骨髓成熟的巨核细胞胞浆裂解脱落下来 的小块细胞质。有维护血管内皮完整性的功能， 并参与止血反应。
3.3 Hemostasis, blood coagulation and fibrinolysis
History of Blood Groups and Blood Transfusions Experiments with blood transfusions have been carried out for hundreds of years. Many patients have died and it was not until 1901, when the Austrian Karl Landsteiner discovered human blood groups, that blood transfusions became safer. He found that mixing blood from two individuals can lead to blood clumping. The clumped RBCs can crack and cause toxic reactions. This can be fatal.

实验展望与未来发展方向
新技术应用
未来可以将更多新技术引入动物 生理学实验，如虚拟现实技术、 人工智能等，提高实验的智能化
和自动化水平。
实验内容拓展
可以进一步拓展实验内容，研究 动物生理系统的更多细节，更深
入地揭示动物生理机制。
加强跨学科合作
可以加强与其他相关学科的合作 ，如生物化学材料科学等，开展
跨学科的综合性研究。
THANK YOU
感谢聆听
100%
实验图像
拍摄或记录实验过程中的图像或 视频，以便后续分析。
80%
实验表格
整理实验数据，制作清晰明了的 表格，方便查看和对比。
实验结果分析方法
统计分析
运用统计学方法对实验数据进 行处理和分析，如计算平均值 、标准差、相关性分析等。
图表制作
将实验数据以图表形式呈现， 如折线图、柱状图、饼图等， 直观展示数据变化趋势。
手术器械的使用
根据手术需要选择合适的器械，遵循无菌操作原 则，确保手术顺利进行。
实验仪器保养维护
生理信号放大器的保养
定期清洁电路板和外壳，保持干燥，避免潮 湿。
注射器的保养
每次使用后清洗干净，干燥保存，避免锈蚀 。
刺激器的保养
定期检查电极和线路是否完好，避免破损或 老化。
手术器械的保养
每次使用后清洗干净，消毒灭菌，妥善保管 ，避免损坏。
伦理考虑
确保实验动物的福利，遵循伦 理原则，避免不必要的痛苦和 伤害。
法律限制
遵守相关法律法规，确保实验 动物来源合法。
实验动物饲养管理
01 饲养环境 提供适宜的温湿度、光照、通风等环境条件，确保动 物健康。
02 饲料与饮水 提供营养均衡的饲料和清洁饮用水，保持动物良好的 营养状况。

肝脏
参与凝血和纤溶
肝脏
参与机体免疫， 保护机体
二、血量（blood volume）
定义：指机体的血液总量，是血浆量和血细胞量的 总和。正常禽畜的血量约占体重的5-9% （50-90mL/Kg）。
循环血量：血液总量中，在循环系统中不断流动的
部分
储备血量：滞留于肝、脾、肺及皮下，流动缓慢的
部分血量
失血
(二) 生理特性
1.黏附：血小板附着在损伤血管暴露的胶原组织上。 促粘附物质：血小板膜糖蛋白、内皮下组织、血浆成分（vWF 因子和纤维蛋白原）。 2.聚集：血小板相互黏着在一起。 生理致聚剂：ADP（主要，剂量依赖）、血拴烷A2(TXA- 2)、 胶原、凝血酶、5-HT、组胺等。病理致聚剂：细菌、病毒 第一时相：迅速、可逆，外源性ADP； 第二时相：缓慢、不可逆、内源性ADP 3.释放：ADP、ATP、5-HT、血小板因子、Ca2+等
(四) 酸碱度（pH值）
正常值：7.35-7.45（呈弱碱性） 当 pH＜6.9或 pH＞7.8时，将出现酸中毒或碱中毒而危 及生命。
１、血液缓冲物质 血浆
NaHCO3/H2CO3 Na2HPO4/NaH2PO4 蛋白质-钠/蛋白质
红细胞
KHb/HHb
KHb-O2/HHb-O2 KHCO3/H2CO3 Na2HPO4/NaH2PO4
(四) 红细胞的生成及其调节
１、部位：红骨髓
２、原料：蛋白质
珠蛋白
铁
血红素
３、促成熟因子：叶酸、维生素B12、Cu2+ ４、生成的调节
促红细胞生成素：促进晚期红系祖细胞增殖
PO2↓ RBC
↓
Hb↓
―
雄激素
红细胞生成与常见贫血

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c 红细胞的悬浮稳定性与血沉 血沉：放置不动的红细胞〔红血球〕沉
淀的速度(通常以１小时计)。以血沉来衡 量红细胞的悬浮稳定性。 引起血沉的原因： 红细胞比重； 红细胞叠连现象。
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二． 白细胞 按姬姆萨染色进行分类。人的白细胞分为： 有颗粒白细胞：嗜酸性细胞；嗜碱性细胞；
嗜中性细胞 无颗粒白细胞：单核细胞；淋巴细胞 研究发现，嗜中性细胞〔50-70.3%〕和淋
MNSS、P等15个血型系统,还发现一些亚型。 也发现了其他细胞的血型系统，如人白细胞上的抗
原系统〔HAL〕在体内分布广泛，与器官移植的 免役排斥反响密切相关；白细胞和血小板的抗原 在输血时可引起发热反响
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ABO血型系统
(一)分型原那么 以红细胞膜上的 凝集原定型。•
凝集原:指红细 胞膜上的抗原物质
盐、小分子有机物等〕。
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一．血浆ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ化学成分
1．血浆蛋白 白蛋白：维持血浆的胶体渗透压〔80%〕，
调节血浆和组织液间的水平衡，并具有载 体运输〔脂肪酸〕功能，也与代谢、营养 有关。板鳃鱼类无白蛋白。 球蛋白：α，β，γ球蛋白，防御、免疫、运输 〔脂溶性维生素、激素、离子、脂质等〕 功能。幼年抵抗力弱。 纤维蛋白原：血液凝固。
类>淡水硬骨鱼类>淡水，洄游性鱼类 在海水中渗透压大于在淡水中的渗透 压。
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• 生理盐溶液：与动物血浆渗透压相等
的溶液，可维持组住正常兴奋性。各 种淡水硬骨鱼类为0.7-1%。
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• 4．酸碱度：血浆中一套弱酸〔碱〕及其盐
的混合物，包括NaHCO3-H2CO3、 Na2HPO4-NaH2PO4、蛋白酸-蛋白盐； 血细胞中是KHCO3-H2CO3、K2HPO4KH2PO4、KHb-Hb、KHbO2-HbO2。

实验一、血涂片的制备和细胞大小的测量
一、目的要求
1.掌握血涂片的制备方法； 2.认识红细胞及各种白细胞的典型形态； 3.掌握显微测微尺的使用方法。
二、实验原理
涂片技术是制备血液样品最常用的技术。将血液样品制成单层细胞的 涂片标本，染色后可对血液中各种细胞进行形态观察、细胞计数、细胞大 小测量等工作。
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• 目镜测微尺标定完成后，即可用于细胞样品的 测量。
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共分为10格
镜台测微尺
总长1mm
每格又可分为10个小格，每小 格的实际长度为 0.01mm=10µm
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总长 0.1mm
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目镜测微尺
可以通过旋转旋钮 移动目镜测微尺中
交叉线的位置
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使用方法
根据测量结果计算各细胞及细胞核的体积
椭球形：v=4πab2/3 a-长半径 b-短半径
圆球形：v=4πr3/3 r-半径
2019/9圆/20 柱形：v=r2h
r-半径 h-高
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三、实验用品
1.器材:医用一次性采血针、酒精棉球、镊子、经脱脂洗净的载玻片 、 双凹片（推片）。
2.试剂:Wright’s染液：Wright’s色素粉末0.1g，溶于60 ml甲醇。
1.取下目镜,将目镜测微尺的刻度面向下放入目镜中,旋上透镜；
2.将镜台测微尺盖片面朝上放在载物台上,用低倍镜观察, 调节 焦距看清镜台测微尺的刻度；
3.移动镜台测微尺,同时转动目镜,使目镜测微尺与镜台测微尺 平行靠近,并将两尺的“0”点刻度线或某刻度线对齐.然后 从左向右查看两尺刻度线另一重合处,记录重合线间目镜测 微尺与镜台测微尺的格数.按下式计算目镜测微尺每格等于 多少微米。

一、实验目的： 1．正确使用显微镜观察人血涂片； 2．识别几种血细胞，并比较它们的结构和功能。 3．学习使用高倍镜和血涂片的制作方法（选做）
二、实验原理：
血液是人体内物质运输的载体，人的血液是由血浆和血 细胞组成的。血细胞包括红细胞、白细胞和血小板。人的血 细胞在光学显微镜下就能看到（由于血小板是最小的血细胞， 在光学显微镜下一般不易看到）。
江苏省初中生物网络课程模块一
具体内容
描述人体血液循环系 统的组成。
概述血液循环。
活动建议
观察血涂片。 解读血常规化验的主要数据。 模拟“血型鉴定”，有条件的学校观看血型 鉴定的录像，理解血型与输血的关系。
观察小鱼尾鳍内血液流动现象。
本实验为义务教育课程标准实验教材《生物学》八年级上册第5 单元第14章第1节的内容。通过实验观察人血细胞涂片，识别血 细胞。
红细胞
•红细胞的数目最多
•无细胞核、细胞器，胞质内充满 血红蛋白
•体积小而圆、直径7-8μm
•呈红色两面凹的圆饼状，边缘厚， 着色较深，中央薄，着色较浅， 这样的结构增大了红细胞的表面 积，
红细胞的中间为什 么有一个“亮点”？
白细胞
数量较少，有细胞核， 形态有多种，通常呈圆球形， 一般都比红细胞大。
单核细胞
•数量少，约占白细胞总数的2 ％～8％ •是白细胞中提及最大的一种 •细胞核呈肾形、马蹄形，常在 细胞一侧，着色比淋巴细胞浅
血小板
形态不规则，没有细胞核 直径为2～3μm，是具血有细止胞血中、最加小速凝血ห้องสมุดไป่ตู้能
的一种
其周围部分浅蓝色，中央有细小的 紫红色颗粒，常聚集成群，分布在 红细胞之间。
也可以用其他动物的血代替人血制作血涂片。

作用
参与过敏反应
4.单核细胞(monocyte)
直 径:14--20μm,呈圆形或椭圆形。 细胞核：核呈卵圆形,肾形、马蹄形
或不规则形，染色质颗粒细 而松散，故着色浅。 胞 质: 丰富,呈弱嗜碱性(灰蓝色)， 含有许多细小的嗜天青颗粒. 颗粒内含过氧化物酶，酸性 磷酸酶，非特异性酯酶，溶 菌酶。
功能
• 吞噬抗原抗体复合物； • 灭活组织胺，减弱过敏反应， • 抗寄生虫。
嗜硷性粒细胞
(basophilic granulocyte)
• 直 径:10--12μm • 细胞核:分叶或呈S形或不规则形, • 胞质内含嗜硷性颗粒,大小不等，
分布不匀，染成紫蓝色， 颗粒具有异染性。颗粒内 含肝素,组织胺,胞质内 有白三烯。
• 2.保护血管内皮，参与血管内皮修
复，防止动脉粥样硬化。
血小板正常值
10万------40万个/μl
三.骨髓和血发生
• （一）造血器官 胚胎时期造血各器官的演变
6W 4-5M 卵黄囊→→肝→→脾 →→骨髓 • （二）骨髓的结构 红骨髓：造血组织+血窦 黄骨髓: 脂肪组织+少量的幼稚血细胞
红骨髓
血浆
血清 90%的水,余为血
浆蛋白(白蛋白, 球蛋白,脂蛋白), 酶,激素,维生素, 无机盐,代谢产物.
纤维蛋白原
(相当于纤维)
❖血像：血细胞的形态、数量、百 分比和血红蛋白含量的测定。
❖血涂片的常用染色方法
Wright或Gห้องสมุดไป่ตู้emsa染色
血涂片
血细胞
红细胞
350万--550万/μl
白细胞
4000-10000/μl
肺 器官组织
（O2分压高） （CO2分压高）