血球计数板的使用(有图指导)

血球计数板‎-基本构造血球计数板‎是一块特制‎的厚型载玻‎片，载玻片上有‎四个槽构成‎三个平台。

中间的平台‎较宽，其中间又被‎一短横槽分‎隔成两半，每个半边上‎面各刻有一‎小方格网，每个方格网‎共分九个大‎格，中央的一大‎格作为计数‎用，称为计数区‎。

计数区的刻‎度有两种：一种是计数‎区分为16‎个大方格（大方格用三‎线隔开），而每个大方‎格又分成2‎5个小方格‎；另一种是一‎个计数区分‎成25个大‎方格（大方格之间‎用双线分开‎），而每个大方‎格又分成1‎6个小方格‎。

但是不管计‎数区是哪一‎种构造，它们都有一个‎共同特点，即计数区都‎由400个‎小方格组成‎。

计数区边长‎为1mm，则计数区的‎面积为1m‎m2，每个小方格‎的面积为1‎/400mm‎2。

盖上盖玻片‎后，计数区的高‎度为0.1mm，所以每个计‎数区的体积‎为0.1mm3，每个小方格‎的体积为1‎/4000m‎m3。

使用细胞计‎数板计数时‎，先要测定每‎个小方格中‎微生物的数‎量，再换算成每‎毫升菌液（或每克样品‎）中微生物细‎胞的数量。

细胞计数板‎-使用方法1．视待测菌悬‎液浓度，加无菌水适‎当稀释（斜面一般稀‎释100倍‎？），以每小格的‎菌数可数为‎度。

2．取洁净的细‎胞计数板一‎块，在计数区上‎盖上一块盖‎玻片。

3．将菌悬液摇‎匀，用滴管吸取‎少许，从计数板中‎间平台两侧‎的沟槽内沿‎盖玻片的下‎边缘滴入一‎小滴（不宜过多），让菌悬液利‎用液体的表‎面张力充满‎计数区，勿使气泡产‎生，并用吸水纸‎吸去沟槽中‎流出的多余‎菌悬液。

也可以将菌‎悬液直接滴‎加在计数区‎上（不要使计数‎区两边平台‎沾上菌悬液‎，以免加盖盖‎玻片后，造成计数区深度‎的升高），然后加盖盖‎玻片（勿使产生气‎泡）。

4．静置片刻，使细胞沉降‎到计数板上‎，不再随液体‎漂移。

将细胞计数‎板放置于显‎微镜的载物‎台上夹稳，先在低倍镜‎下找到计数‎区后，再转换高倍‎镜观察并计‎数。

血球计数板的使用方法
一、注意事项
1. 血球计数板只能用于血液检查，不能用于测量其他物质；
2. 将血球计数板放置于平面上，确保平稳，防止晃动和碰撞；
3. 在开始测定之前，要根据靶点的电极安装完整；
4. 滴血时要涂抹几种抗凝剂，防止血液沉淀。

如果血液较深，可在计数前用刨子将血液挖出。

二、步骤
1. 将血液精确滴在血球计数板上；
2. 连接血球计数板上的接头，打开电源；
3. 根据靶点调整电位器；
4. 将光学镜头的焦距调节到节点最佳状态；
5. 通过镜头观察血液样本，一次性计数红细胞、白细胞和血小板的数量；
6. 通过刀片移动的方式，进行血球的细致观察和计数；
7. 计数结束后，关闭电源，清理血球计数板上的血液，清洗各个部分，涂抹上抗菌剂。

血球计数板及其使用方法1、血球计数板的构造血球计数板是一种生物学或医学仪器，用以对人体血液中红细胞、白细胞进行显微计数，也常用于一些细菌、真菌、酵母菌等较大细胞或微生物的计数。

血球计数板的形状如图1所示，血球计数板是一块特制的厚载玻片，载玻片上由4个槽构成3个平台。

中间的平台较宽，其中间又被一短横槽分隔成两半，每个半边上面各刻有一方格网，每个方格网共分9个大方格（大方格用三线隔开），中央的一大方格作为计数用，称为计数室，如图2所示。

计数室的规格常有两种:一种叫XXX式（16×25型），是一个计数室分为16个中方格（中方格之间用双线分开），而每个中方格又分成25个小方格;另一种叫汤麦式(25×16型），是一个计数室分成25个中方格，而每个中方格又分成16个小方格。

可是不管计数室是哪种构造，它们都有一个配合特点，即计数室都由400个小方格组成。

计数室的边长常为1mm,则计数室的面积为1mm2，盖上盖玻片后，计数室的高度为0.1mm，所以每个计数室的容积为0.1mm3,每个小方格的边长为0.05mm,每个小方格的容积为边长为0.25mm，每其中方格的容积为长为0.2mm，每其中方格的容积为12、血球计数板的使用方法（以计数酵母菌为例）(1)用血球计数板计数培养液中的酵母菌个数。

(2)样品稀释的目的是便于酵母菌的计数，以每小方格内含有45个酵母菌为好，一般稀释10倍即可。

(3)将血球计数板用擦镜纸擦净，在中央的计数室盖上专用的盖玻片。

(4)将稀释后的培养液，用吸管吸取一滴置于盖玻片的边缘，使菌液缓缓渗人，多余的菌液用吸水纸吸取，稍待片刻使酵母菌全部沉到计数室内。

(5)计数时，如果使用16×25型的计数室，要按对角线位，取左上，左下，右上，右下4个中方格（即100个小方格）的酵母菌个数3如果为25×16型的计数室，除了取其4个对角方位外，还需再数屮央的一个中方格（即80个小方格）的酵母菌个数。

血球计数板的使用方法
血球计数板是一种用于测量血液中各种血球数量的实验室工具。

下面是使用血球计数板的一般步骤：
1. 准备工作：
- 清洁血球计数板：使用酒精或其他适当的清洁剂将血球计
数板彻底清洁，并确保完全干燥。

- 准备血液样本：采集血液样本，并将其置于抽血管中。

2. 充填血液样本：
- 将橡胶管连接至抽血管的一端，并将另一端放入含有适当
稀释液（例如乙醇，盐水等）的试管中。

- 轻轻压抽血管，让血液与稀释液混合，确保样本适当稀释。

3. 填充计数室：
- 将计数室的一角放入混合好的血液样本液中。

- 逐渐放松手指，使液体自然充满整个计数室。

4. 观察计数室：
- 使用显微镜，在10倍或40倍放大倍数下观察计数室的血
球图像。

- 记录计数室内的血球数量。

5. 计算血球数量：
- 将计数室中各种血球的数量进行计算和统计。

- 根据计数室内的面积和深度，计算总血球数量。

- 可以使用计数室所覆盖的血球数量与已知的面积，以得出
总血球数量的近似值。

6. 清洗和储存：
- 使用适当的清洁剂彻底清洗计数室，确保无血液残留。

- 将计数室储存在干燥，洁净的地方，以防止污染和损坏。

请注意，使用血球计数板可能需要一定的实验室训练和技巧，以确保准确性和可靠性。

在进行血液分析时，应遵循实验室的操作指南和安全规定。

血细胞计数板计数法
血球计数板是一种特制玻片，厚度比普通载玻片厚。

玻片中有四条下凹的槽，构成三个平台。

中间平台较宽，被一短横槽隔为两半，每半边上面刻有一个方格网。

方格网上刻有9个大方格，其中只有中间的一个大方格为计数室，供微生物计数使用。

计数室通常有两种规格，分别是16×25型和25×16型。

不管是哪一种构造，每一大方格都是由400个小方格组成。

16×25型的计数板将计数室放大，可见它含16中格。

一
般取四角（1、4、13、16）四个中方格（100个小方格）计数。

细胞个数／1mL＝100个小方格细胞总数/ 100×400××稀释倍数。

25×16型的计数板中央大方格以双线等分成25个中方格，每个中方格又分成16个小方格，供细胞计数使用。

一般计数
四个角和中央的五个中方格（80个小方格）的细胞数。

细胞
个数／1mL＝80个小方格细胞总数/ 80×400××稀释倍数。

注意事项：从培养瓶中取培养原液计数必须摇匀培养液后再取样，培养后期的样液稀释后再计数。

血球计数板介绍血球计数板介绍用优质厚玻璃制成。

每块计数板由H 形凹槽分为2个同样的计数池。

计数池两侧各有一支持柱，将特制的专用侧各有一支持柱，将特制的专用盖玻片盖玻片覆盖其上，形成高0.10mm 的计数池。

计数池画有长、宽各3.0mm 的方格，分为9个大方格，每个大格面积为1.0mm.容积为0.1mm （ul ），其中，中央大方格用双线分成25个中方格，位于正中及四角5个中方格是红细胞计数区域，用单线划分为16个小方格。

四角的4个大方格是白细胞计数区域，用单线划分为16个中方格。

根椐国际标准局（NBS ）规定，大方格每边长度允许误差为±1%。

使用方法使用方法1．视待测菌悬液浓度，加无菌水适当稀释（斜面一般稀释100倍），以每小格的菌数可数为度。

的菌数可数为度。

2．取洁净的血球计数板一块，在计数区上盖上一块．取洁净的血球计数板一块，在计数区上盖上一块盖玻片盖玻片。

3．将菌悬液摇匀，用．将菌悬液摇匀，用滴管滴管吸取少许，从计数板中间平台两侧的沟槽内沿盖玻片的下边缘摘入一小滴（不宜过多），让菌悬液利用液体的表面张力充满计数区，勿使气泡产生，并用并用吸水纸吸水纸吸去沟槽中流出的多余菌悬液。

也可以将菌悬液直接滴加在计数区上滴加在计数区上（不要使计数区两边平台沾上菌悬液，（不要使计数区两边平台沾上菌悬液，（不要使计数区两边平台沾上菌悬液，以免加盖以免加盖以免加盖盖玻片盖玻片后，造成计数区深度的升高），然后加盖盖玻片（勿使产生气泡）。

计数区深度的升高），然后加盖盖玻片（勿使产生气泡）。

4．静置片刻，使细胞沉降到计数板上，不再随液体漂移。

将血球计数板放置于显微镜的载物台上夹稳，先在低倍镜下找到计数区后，再转换高倍镜观察并计数。

由于生活细胞的折光率和水的由于生活细胞的折光率和水的折光率折光率相近，观察时应减弱光照的强度。

相近，观察时应减弱光照的强度。

5．计数时若计数区是由16个大方格组成，按对角线方位，数左上、左下、右上、右下的4个大方格（即100小格）的菌数。

血球计数板介绍用优质厚玻璃制成。

每块计数板由H形凹槽分为2个同样的计数池。

计数池两侧各有一支持柱，将特制的专用盖玻片覆盖其上，形成高0.10mm的计数池。

计数池画有长、宽各3.0mm的方格，分为9个大方格，每个大格面积为1.0mm.容积为0.1mm（ul），其中，中央大方格用双线分成25个中方格，位于正中及四角5个中方格是红细胞计数区域，用单线划分为16个小方格。

四角的4个大方格是白细胞计数区域，用单线划分为16个中方格。

根椐国际标准局（NBS）规定，大方格每边长度允许误差为±1%。

使用方法1．视待测菌悬液浓度，加无菌水适当稀释（斜面一般稀释100倍），以每小格的菌数可数为度。

2．取洁净的血球计数板一块，在计数区上盖上一块盖玻片。

3．将菌悬液摇匀，用滴管吸取少许，从计数板中间平台两侧的沟槽内沿盖玻片的下边缘摘入一小滴（不宜过多），让菌悬液利用液体的表面张力充满计数区，勿使气泡产生，并用吸水纸吸去沟槽中流出的多余菌悬液。

也可以将菌悬液直接滴加在计数区上（不要使计数区两边平台沾上菌悬液，以免加盖盖玻片后，造成计数区深度的升高），然后加盖盖玻片（勿使产生气泡）。

4．静置片刻，使细胞沉降到计数板上，不再随液体漂移。

将血球计数板放置于显微镜的载物台上夹稳，先在低倍镜下找到计数区后，再转换高倍镜观察并计数。

由于生活细胞的折光率和水的折光率相近，观察时应减弱光照的强度。

5．计数时若计数区是由16个大方格组成，按对角线方位，数左上、左下、右上、右下的4个大方格（即100小格）的菌数。

如果是25个大方格组成的计数区，除数上述四个大方格外，还需数中央1个大方格的菌数（即80个小格）。

为了保证计数的准确性，避免重复计数和漏记，在计数时，对沉降在格线上的细胞的统计应有统一的规定。

如菌体位于大方格的双线上，计数时则数上线不数下线，数左线不数右线，以减少误差。

即位于本格上线和左线上的细胞计入本格，本格的下线和右线上的细胞按规定计入相应的格中。

耶赛明（南通）保健有限公司目的 Purpose规范计数板的标准操作，确保设备的操作有章可循。

范围 Scope适用于计数板的日常使用。

职责 Responsibility质检部的检验员负责遵守该规程，质检部负责人负责监督与管理。

内容Procedure1 概述1.1 测定微生物细胞和动物细胞数量的方法很多，通常采用的有显微直接计数法和平板计数法。

1.2 显微直接计数法：将小量待测样品悬浮液置于计菌器上，于显微镜下直接计数的一种简便、快速、直观的方法。

显微计数法适用于各种含单细胞菌体的纯培养悬浮液，如酵母、细菌、霉菌孢子等1.3 血球计数板1.3.1 是一块特制的厚型载玻片，载玻片上有4条槽而构成3个平台。

1.3.2 中间平台较宽，其中间又被一短横槽分隔成两半，每个半边上面各有一个方网格（图1）。

图1：血细胞计数板构造（一） 图2：血细胞计数板构造（二）1.3.3 每个方网格分为9个大方格，正中间的大方格为计数室，计数室内的刻度有两种：一种是每个计数室内分为16个中方格（中方格用三线隔开），而每个中方格又分成25个小方格（图2）；另一种是每个计数室内分成25个中方格（中方格之间用双线分开），而每个中方格又分成16个小方格。

但是不管计数区是哪一种构造，它们都有一个共同特点，即计数室内都由400个小方格组成。

1.3.4 计数室边长为1mm，则计数室的面积为lmm2，每个小方格的面积为1/400mm2。

盖上盖玻片后，计数室的高度为0.1mm，所以每个计数区的体积为0.1mm3，每个小方格的体积为1/4000mm3。

1.3.5 使用血球计数板计数时，先要测定每个小方格中微生物或细胞的数量，再换算成每毫升样液（或每克样品）中微生物或细胞的数量。

已知：1cm3体积=10mm×10mm×10mm=1000mm3=1ml；所以：1cm3体积应含有小方格数为1000mm3/1/4000mm3=4×106个小方格，即系数K=4×106。