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胶体金免疫层析测试条快速诊断鼠疫应用研究

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滴加样品 200 滋l 至检测孔袁10 耀 30 min 观察结果遥
1 颐 81 920 的滴度呈现阳性反应外袁 而且 11 份 IHA
1.2.4 结果判定院淤阳性院可见 2 条紫红色线条渊质 阴性的样品用胶体金方法也检出了阳性结果渊表 1冤遥
控线和检测线冤曰于阴性院仅见 1 条紫红色线条渊质 从检出时间上看袁 高滴度的血清一般在 1 耀 3 min即
IHA 131 120 11 91.6 8
6
8
18
10
22
14
16
11
4
2
/
1
GICA 131 131 0 100.0 +
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
/
+
注院* 在所检测的样品中袁未出现该滴度阳性血清曰GICA 为定性实验
2.1.2 疫源地内不同染疫动物血清抗体的检测院自 青海省疫源地采集各种动物血清 53 份袁 胶体金测 试条阳性率亦高于 IHA袁见表 2遥
表 2 疫源地染疫动物血清抗体的检测 Table 2 Serum antibody of infected animals in plague foci
动物 名称
例数
旱獭
11
狗
20
藏系绵羊 14
牛
8
合计
53
阳性 渊例冤
4 16
0 0 20
IHA 阴性 阳性率 渊例冤 渊%冤
7 36.4 4 80.0 14 0 80 33 37.7
gold immunochromatographic assay method
阳性 阴性 阳性
滴度分布
方法 例数
数 数 率渊%冤 1 颐 20 1 颐 40 1 颐 80 1 颐 160 1 颐 320 1 颐 640 1 颐 1 280 1 颐 2 560 1 颐 5 120 1 颐 10 240 1 颐 20 480 1 颐 40 960* 1 颐 81 920
表 3 1 例腺鼠疫患者血清抗体动态的检测 Table 3 Dynamic test of serum antibody on
one thyroid plague patient
方法 7
时间渊d冤
14
30
90
180
210
IHA 1 颐 1 280 1 颐 10 240 1 颐 10 240 1 颐 20 480 1 颐 40 960 1 颐 10 240
通信作者院李敏渊Email院qdblimin@冤
1 材料与方法 1.1 材料 1.1.1 免 疫 层 析 测 试 条 院 分 别 用 于 检 测 抗 原 渊RGICA冤及抗体渊GICA冤袁由云南省地方病防治所与 北京庄笛浩禾生物医学科技有限公司联合研制遥 1.1.2 检测样品院 实验用人和各类动物血清 254 份袁强毒鼠疫菌感染的实验动物渊新西兰兔冤血清 131 份袁共计 385 份曰脏器等材料 11 份渊其中 1 例鼠 疫尸体的淋巴结尧肝尧脾尧肺尧心血共 5 份曰5 例肺鼠 疫患者的血痰 5 份曰旱獭皮 1 份冤袁采集于青海省各 鼠疫疫源县曰均由青海省地方病预防控制所提供遥 1.1.3 鼠疫间接血凝试剂院由青海省地方病预防控 制所鼠疫防治科制备袁批号 05-2遥 1.2 方法 1.2.1 实验动物血清的制备院将强毒鼠疫菌 141 株 37 益 24 h 培养物袁用灭菌生理盐水制成菌悬液袁比浊 稀释菌个数为 20 亿 辕 ml袁取 1 ml 接种于新西兰兔鼠鼷 部皮下袁于感染后第 22 天采血袁分离血清保存备用遥 1.2.2 鼠疫间接血凝试验渊IHA冤和反向间接血凝试
阳性 渊例冤
4 18 8 5 35
GICA 阴性 阳性率 渊例冤 渊%冤
7 36.4 2 90.0 6 57.1 3 62.5 18 66.0
2.1.3 鼠疫患者血清抗体的检测院 对 2004 年乌兰 县 1 例腺鼠疫患者 7 d 耀 7 个月血清采用胶体金和 IHA 两种方法平行检测袁结果见表 3袁可以看出两种 方法的阳性检出数相同遥 对囊欠县 9 例肺鼠疫患者 血清同样进行两种方法平行检测袁 结果胶体金和 IHA 的符合率为 100%遥 2.1.4 鼠疫疫源地内藏族牧民血清学检测院2005 年 对青海省地方病预防控制所在共和尧刚察两县进行 棘球蚴病调查时所采集的血清进行了鼠疫 FI 抗体 的检测袁对 94 份 IHA 阳性者均用胶体金进行验证袁 结果符合率亦为 100%遥
【Key words铱 Gold immunochromatographic assay曰 Diagnosis曰 Plague
免疫金标记技术是以胶体金作为示踪标志物袁 应用于抗原抗体反应的一种新型免疫标记技术遥 Beggs 等咱1暂1990 年首次报道了斑点免疫层析试验 渊dot immunochromatographic assay袁DICA冤袁2003 年 法国巴斯德研究所研制出鼠疫快速诊断试纸条袁证 实其敏感性和特异性都超过了 ELISA 等现有的诊 断方法咱2暂遥 近年来在国外又推荐免疫层析法渊gold immunochromatography assay袁GICA冤袁这种快速诊断 技术具有检测速度快尧灵敏度高尧特异性好尧操作简 便尧适合于现场应用等特点袁已在医学检验中广为 应用袁为此袁本实验应用胶体金测试条检测鼠疫抗 原和抗体袁以全面评价其快速诊断的效果遥
长期以来袁鼠疫实验室最常用的诊断方法是细 菌分离法和间接血凝试验渊IHA 或 RIHA冤袁因所需 时间相对较长袁常使疫情的判定拖延袁因此袁研究快 速的诊断方法十分必要遥 王鹏等咱3暂研究了鼠疫 FI 单 克隆抗体的胶体金标记技术袁并对其敏感性和特异 性进行了试验遥 对胶体金测试条用于鼠疫患者渊尸 体冤的诊断进行了初步尝试袁 对 2004 年 5 例肺鼠疫 患者血痰中鼠疫 FI 抗原进行检测袁RGICA 和 RIHA 均出现阳性结果袁符合率为 100%袁但 RGICA 仅用 几分钟时间遥 特别是 2005 年青海湟源发生的一起 鼠疫袁在未行尸体解剖前袁采取心脏穿刺血液袁应用 胶体金测试条进行检测袁该方法比 RIHA 要提早 2 h袁 比细菌分离提早 1 ~ 2 d 出结果袁 大大缩短了试验 时间袁且结果直观袁因此袁非常适合于现场应用遥 对 所取鼠疫尸体的材料如淋巴结尧肝尧脾尧肺尧心血等 用 RGICA 均可迅速检测出鼠疫 FI 抗原遥
窑570窑
中国地方病学杂志 2006 年 9 月 20 日第 25 卷第 5 期 Chin J Endemiol袁 Sep 20袁 2006袁Vol 25袁 No.5
测袁结果均呈现阳性反应遥 其中 1 例患者分离到鼠 疫菌袁4 例因进行过特效治疗虽未能分离到鼠疫菌袁 但血清鼠疫 FI 抗体检测阳性遥 2.2.3 旱獭皮院取待检獭皮血管比较丰富的组织以 1 颐 10 稀释后浸泡过夜袁 次日分别进行 RIHA 和胶 体金试验袁结果 RIHA 滴度为 1 颐 3 200袁胶体金于 5 min 内出现阳性结果遥 3讨论
见到液体爬行袁10 耀 30 min 观察结果遥 于鼠疫抗原 测试条的阳性率为 100%袁 胶体金测试条检测的阳
胶体金测试条检测方法院取 1 颐 10 待检脏器渊或皮 性率高于 IHA遥 通过对不同滴度实验感染动物血清
张等材料冤悬液渊可用 1%兔血清盐水稀释冤袁用滴管 的检测可以看出袁胶体金测试条除对 IHA 在 1 颐 20 耀
基金项目院国家自然科学基金资助项目渊30160078冤曰云南省重 大攻关课题资助项目渊2002NG17冤
作者单位院811602 西宁袁 青海省地方病预防控制所鼠疫预防控 制科渊杨晓艳尧李敏尧王丽尧慕有尧谢辉尧王梅尧杨永海尧崔百忠尧戴瑞 霞尧辛有全尧张青雯冤曰云南省地方病防治所渊于国林冤
作者简介院杨晓艳渊1979-冤袁女袁青海省西宁市人袁检验师袁主要 从事鼠疫病原学工作
控线冤曰盂无效院无任何线条出现或仅有检测线袁应 可出现阳性结果袁血清滴度较低者则需 15 耀 30 min遥
表 1 IHA 和 GICA 两种方法检测实验感染动物血清的比较
Table 1 Comparison of serum result of infected animals in lab using IHA method and
揖Abstract】 Objective To observe the effectiveness of gold immunochromatographic assay for the detection of Yersinia pestis. Methods The antigen and antibody of Yersinia pestis are tested with both gold immunochromatographic assay and indirect hemagglutination assay 渊IHA冤 or reverse indirect hemagglutination assay 渊RIHA冤 at the same time. Results The two testing methods showed a consistency of 100% in 396 samples袁 either from infected animals in lab or in Qinghai plague foci袁 or from the infected patients渊including corpse冤. Conclusions The method of gold immunochromatographic assay is simple袁 convenient and fast袁 which can be used for field application and rapid diagnosis of plague.

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胶体金免疫层析试纸条在临床诊断中的研究进展

胶体金免疫层析试纸条在临床诊断中的研究进展

Hans Journal of Nanotechnology纳米技术, 2019, 9(2), 55-59Published Online May 2019 in Hans. /journal/nathttps:///10.12677/nat.2019.92006Colloidal Gold ImmunochromatographyStrip Technique and Its Applicationin Clinical DiagnosisPing MengLaboratory of Nephrology, Huadu District People’s Hospital of Guangzhou, Huadu Hospital of Southern Medical University, Guangzhou GuangdongReceived: Apr. 9th, 2019; accepted: Apr. 23rd, 2019; published: May 6th, 2019AbstractColloidal gold immunochromatography strip (CGIS) is a new immunoassay technique in clinic. It combines the visualization of colloidal gold technique and the specificity of immunochromatography.It has been extensively applied in clinic, laboratory and family with its excellent features at present.It has good prospects for development especially in infectious diseases and autoimmune diseases.This paper will introduce and summarize the development of CGIS technique in the disease diagno-sis. Research and development of CGIS will be in the direction of more sensitive specificity and mul-tiplexed detection in the future.KeywordsColloidal, Colloidal Gold Immunochromatography Strip, Disease Diagnosis胶体金免疫层析试纸条在临床诊断中的研究进展孟萍南方医科大学附属花都医院，广州市花都区人民医院肾病实验室，广东广州收稿日期：2019年4月9日；录用日期：2019年4月23日；发布日期：2019年5月6日摘要胶体金免疫层析试纸条技术(colloidal gold immunochromatography strip, CGIS)作为近年来临床上兴孟萍起的新的免疫检验技术，结合了胶体金检测的可视化和免疫层析检测特异性强等特点，因其操作简单迅速、成本较低等特点，适合于临床、实验室、现场及家庭的快速诊断，是目前应用广泛的检验方法，在感染性疾病、自身免疫性疾病等疾病诊断中具有良好的发展前景。

免疫胶体金快速诊断技术的临床应用研究

免疫胶体金快速诊断技术的临床应用研究

免疫胶体金快速诊断技术的临床应用研究摘要：免疫胶体金快速诊断技术是在免疫荧光、放射性免疫和酶联免疫吸附法之后逐渐发展起来的免疫测定技术，在临床诊断中的应用，能够缩短临床诊断的速度，解决临床诊断中的问题，提升临床诊断的质量与效果，降低误诊、漏诊等问题的发生几率。

本篇文章主要从免疫胶体金技术的基本原理以及免疫胶体金快速诊断技术的临床应用等方面进行分析，结合当前临床诊断技术的发展，对免疫胶体金快速诊断技术进行研究。

关键词：免疫胶体金；快速诊断技术免疫胶体金技术（Immune colloidal gold technique，ICGT）是以胶体金作为示踪标志物，在抗原抗体反应中应用的新型免疫标记技术。

胶体金能够通过氯金酸在抗坏血酸、白磷等作用下，聚合形成一定大小的金颗粒，从而成为胶体金。

免疫胶体金快速诊断技术在临床诊断中的应用，能够有效提升临床诊断的质量，并逐渐发展成为一种临床检验的有效方式。

本篇文章主要结合临床诊断实际应用情况，对免疫胶体金快速诊断技术进行分析和研究，希望能够对临床诊断技术的不断发展以及患者的全面治疗产生一定的积极影响，以下为本次临床应用实践研究的具体内容。

1. 免疫胶体金技术的基本原理免疫胶体金技术（Immune colloidal gold technique，ICGT）主要是在还原剂的作用下，凝合而成的金颗粒，在弱碱的条件中带负电荷，进而和蛋白质分子中的正电荷基团组成较为坚固的结合体。

在这种静电结合下，不会影响蛋白质生物的特性。

除此之外，胶体金还能够和一些生物大分子相组合，例如能够和葡萄球菌A 蛋白（Staphylococcal protein A,SPA）、免疫球蛋白（immunoglobulin）以及抗生素（antibacterial）等进行结合，进而成为免疫的优良标记物[1-2]。

当前，免疫胶体金技术已经逐渐应用于临床诊断当中，并取得了较好的临床诊断应用效果，在被动凝集试验、光镜染色以及免疫印迹等多种临床诊断中应用。

鼠疫F1抗原胶体金试纸条的研制及初步应用的开题报告

鼠疫F1抗原胶体金试纸条的研制及初步应用的开题报告

鼠疫F1抗原胶体金试纸条的研制及初步应用的开题报告一、研究背景和意义鼠疫是一种由鼠疫杆菌引起的传染病，其传播途径主要是老鼠、跳蚤等小动物媒介。

一旦发生鼠疫疫情，对人们的生命和资产都会造成严重的危害。

因此，对鼠疫的快速准确检测和诊断显得尤为重要。

目前，传统的鼠疫检测方法主要是采用文化和血清学检测方法，但这些方法存在着操作繁琐、耗时长、检测灵敏度低等问题。

因此，开发一种快速、准确、便捷的鼠疫检测方法显得尤为迫切和必要。

本研究基于胶体金技术，使用鼠疫F1抗原作为检测对象，开发了一种鼠疫F1抗原胶体金试纸条，该试纸条具有操作简单、检测时间短、灵敏度高等优点，可以为鼠疫的快速诊断和防控提供有力的支持。

二、研究内容和方法本研究的主要内容是开发一种鼠疫F1抗原胶体金试纸条，并对其进行初步应用。

具体方法如下：1.制备鼠疫F1抗原胶体金试纸条（1）制备金纳米颗粒按照标准操作流程制备金纳米颗粒，调整金纳米颗粒的浓度和粒径以达到最佳反应条件。

（2）免疫反应将鼠疫F1抗原与金纳米颗粒共同免疫，使鼠疫F1抗原与金纳米颗粒充分结合，形成鼠疫F1抗原胶体金纳米复合物。

（3）制备试纸条将具有吸液性的纸条（如滤纸）浸泡在胶体金溶液中，静置干燥后制备出鼠疫F1抗原胶体金试纸条。

2.对鼠疫F1抗原胶体金试纸条进行检测（1）样品处理收集鼠疫阳性和阴性样品，取出样品上清液。

（2）检测操作将样品上清液滴加到鼠疫F1抗原胶体金试纸条上，待10分钟后观察试纸条的反应情况，根据结果进行判断。

三、预期成果及意义1.制备出一种鼠疫F1抗原胶体金试纸条，具有操作简单、检测时间短、灵敏度高等优点。

2.对所制备的试纸条进行初步应用，验证其准确性和可行性。

3.为鼠疫的快速诊断和防控提供了一种新的检测方法，具有广阔的应用前景和社会意义。

四、进度安排1.前期工作（1周）（1）查阅相关文献，了解胶体金技术在鼠疫检测中的应用研究。

（2）收集鼠疫样品，进行初步处理和贮存。

胶体金免疫层析技术在动物疫病诊断中的应用

胶体金免疫层析技术在动物疫病诊断中的应用

2021年第03期胶体金在抗原抗体反应中用作示踪剂,用于白磷,硼氢化钠,乙醇,过氧化氢,抗坏血酸,柠檬酸钠,单宁酸。

胶体金可以直接制备,这种方法处理的玻璃器皿不需要硅化。

还可以在玻璃器皿的表面上用相同粒径的金溶液涂覆玻璃,然后丢弃,然后清洗2次。

使用前应使用蒸馏水,这样效果更好,因为它减少了金颗粒的吸附。

1层析技术沙门氏菌抗血清与胶体金颗粒结合使用直接免疫,细胞化学检测沙门氏菌的表面抗原,为胶体金标记技术在免疫分析中的应用指明了方向。

在过去的30年中,免疫胶体金快速诊断技术已广泛用于人类医学和其他领域的临床试验中,例如妊娠试验、感染等,鼠疫耶尔森氏菌的快速诊断技术也已广泛应用于人类医学领域。

G I CA 是一种简单而快速的检测方法。

无需复杂的操作技术和专用设备,结果可由肉眼判断。

灵敏度高,无污染,携带方便。

与其他检测技术相比,胶体金快速检测技术的应用不需要对样品和试剂进行特殊处理。

体积很小,样本量可低至1-2m L ,可长期用于抗原检测、抗体检测和检测结果的保存。

这项新兴技术已成为医学方面临床快速诊断领域的一个全新的方向,并在很多科技发达国家中广泛应用。

2反应模式以最常用的双抗体夹心试验A I V 为例,阐述了胶体金免疫层析法的反应原理。

首先,将两种病原体抗体包被在N C 膜上并用胶体金标记。

导致质量控制线上的胶体金染色,并获得了阳性结果。

当检测产物中无致病菌时,胶体金标记抗体不能通过病原体与检测线连接,不能与兔抗小鼠多克隆抗体连接。

人体结合后,胶体金标记抗体中具有小鼠抗原性的单克隆抗体可以连接到质量控制材料,结果是负面的。

如果测试线和质量控制线未着色,则说明测试条不合格。

3在动物诊断中的应用程安春等应用银加强胶体金探针检测减蛋下降综合症的应用研究。

病毒抗原的最低可检测量为0.11719g/m L ,其实验结果表明,CPV 在卵巢、输卵管峡部、喉和软壳卵中的阳性率分别为100%和92%,对纯化的犬细小病毒单克隆抗体进行了标记和纯化。