下载文档原格式
抗鸭病毒性肝炎卵黄抗体提取方法探究张桂荣;王振辉;刘玉梅;刘军【摘要】为了探究抗鸭病毒性肝炎卵黄抗体的最佳提取方法.采用泊洛沙姆法卵黄抗体的脱脂方法试验.通过对浓度、蛋白质含量、效价等结果进行比较.试验结果显示:由泊洛沙姆作为脂肪沉淀剂,其泊洛沙姆浓度为1.2%、辛酸浓度为0.2%时制得的抗体物理性状好,抗体收率最高,效价高,抗体效价为1:64.【期刊名称】《兽医导刊》【年(卷),期】2015(000)018【总页数】2页(P46-47)【关键词】雏鸭病毒性肝炎;卵黄抗体;脱脂【作者】张桂荣;王振辉;刘玉梅;刘军【作者单位】吉林农业科技学院,吉林吉林 132101;吉林农业科技学院,吉林吉林132101;吉林省白山市松树镇畜牧站,吉林吉林 134704;吉林正业生物制品股份有限公司,吉林吉林 132101【正文语种】中文1.1 免疫鸡蛋收集与蛋黄的分离取收集的鸡蛋，浸入42℃的0. 1%新洁尔灭水溶液中消毒15 min；随后将鸡蛋浸入温度为95℃以上的水中消毒5 s，取出后于无菌条件下晾干或吹干；打蛋分离蛋清与卵黄，充分除去蛋清和卵黄系膜，将卵黄收集于一容器中，搅拌均匀，然后分别装在三个容器内。
1.2 泊洛沙姆法雏鸭病毒性肝炎卵黄抗体去脂试验[1]泊洛沙姆法提卵黄抗体步骤1.2.1 泊洛沙姆浓度的优化分别取卵黄液20ml，用去离子水做4倍稀释，加入泊洛沙姆，使其终浓度分别为0.6%、0.8%、1%、1.2%、1.4%、1.6%、1.8%。
静置后用纱布过滤，取上清。
1.2.2 pH值的优化分别取卵黄液20ml，用去离子水做4倍稀释，加入泊洛沙姆，使其终浓度为上步所得的最佳浓度。
用稀盐酸调pH值，使pH值分别为5.2、5.7、6.2、6.7、7.2、7.7。
静置后用纱布过滤，取上清。
1.2.3 辛酸浓度的优化分别取卵黄液20ml，用去离子水做4倍稀释，加入泊洛沙姆，使其终浓度为上步所得的最佳浓度和pH。
鸭病毒性肝炎的流行病学实验室诊断及防控措施鸭病毒性肝炎（Duck viral hepatitis，DVH）是由鸭病毒性肝炎病毒（Duck hepatitis virus，DHV）引起的一种急性传染病，主要感染家禽类动物，尤其是鸭子。
在鸭子养殖业中，鸭病毒性肝炎是一种较为常见的疾病，对鸭子的生产和发展造成了很大的危害。
为了及时诊断和控制鸭病毒性肝炎的流行，实验室诊断是非常重要的手段之一。
鸭病毒性肝炎的实验室诊断主要包括病毒检测和血清学检测。
1. 病毒检测：主要采用病毒分离和鉴定的方法。
通过采集病鸭的肝脏组织或者血液样本，在细胞培养物中进行病毒分离，并观察是否形成病毒性病变。
然后通过电镜观察病毒的形态特征，或者进行病毒核酸的检测和测序来鉴定病毒菌株的类型。
2. 血清学检测：通过血清中抗体的检测来诊断鸭病毒性肝炎。
常用的方法有：(1) 中和试验：采集疑似病鸭的血清，与已知含有鸭病毒性肝炎抗体的血清混合。
观察混合液在细胞培养上的效应，如有中和效应，则说明该病鸭体内存在鸭病毒性肝炎抗体。
(3) ELISA检测：通过人工合成的鸭病毒性肝炎抗原来检测血清中的鸭病毒性肝炎抗体。
ELISA检测方法简单、快速，且具有较高的敏感性和特异性，是常用的检测方法之一。
在防控鸭病毒性肝炎方面，主要采取以下措施：1. 隔离病鸭：发现病鸭后，及时将其隔离，并采取相应的治疗措施。
避免病鸭与健康鸭接触，防止病毒的传播。
2. 确保饮水和环境的清洁：及时清理饮水设施和鸭舍，保持环境的清洁和卫生，减少病毒的滋生和传播。
3. 加强饲养管理：合理调整饲养密度，加强营养管理，提高鸭群的抵抗力和免疫力，降低发病率。
4. 进行疫苗接种：根据病情和流行病学调查结果，选择合适的疫苗进行接种，提高鸭群对鸭病毒性肝炎的抵抗能力。
鸭病毒性肝炎的流行病学实验室诊断和防控措施是非常重要的，可以有效地减少疫情的发生和传播，维护鸭子养殖业的可持续发展。
鸭病毒性肝炎高免抗体不同使用途径攻毒保护试验冯永胜;衣服德;兰信海【摘要】将实验室制备的3批鸭病毒性肝炎高免抗体,分别皮下和肌肉注射4日龄和7日龄雏鸭.4日龄0.5ml/只,7日龄1.0ml/只.注射后24h用0.2ml(含100LD50)SD株强毒进行攻击.结果表明,3批抗体皮下和肌肉注射4日龄和7日龄雏鸭,攻毒保护率均为100%;攻毒对照组90%～100%死亡,健康对照组100%健活;证明鸭病毒性肝炎高免黄抗体皮下和肌肉2种途径注射的雏鸭,均可达到良好的预防效果.【期刊名称】《山东畜牧兽医》【年(卷),期】2011(032)003【总页数】1页(P1-1)【关键词】高免抗体;不同途径;攻毒【作者】冯永胜;衣服德;兰信海【作者单位】山东省青岛市畜牧兽医研究所,266100;山东省青岛市畜牧兽医研究所,266100;山东省青岛市畜牧兽医研究所,266100【正文语种】中文【中图分类】S858.32为了验证鸭病毒性肝炎高免抗体不同注射途径对雏鸭的预防效果，将实验室制备的3批鸭病毒性肝炎高免抗体分别按不同注射途径接种易感雏鸭，通过攻毒试验来验证不同注射途径对雏鸭的预防保护效果。
（1）3批鸭病毒性肝炎高免抗体：批号为201001、201002和201003，由青岛宝依特生物制药有限公司制备。
（2）4日龄和7日龄易感雏鸭：未注射过鸭肝炎疫苗；未发生过鸭病毒性肝炎；蛋黄中和抗体效价<1:4的种鸭孵化的雏鸭。
（3）检验用强毒SD株F3代由青岛青岛市畜牧兽医研究所分离、保管。
1.2.1 注射途径皮下和肌肉。
1.2.2 试验设计及分组将3批鸭病毒性肝炎高免抗体每批任取5瓶，中和效价稀释为1:512，等量混合。
每批分别经肌肉和皮下注射4日龄和7日龄易感雏鸭各10只，4日龄雏鸭注射剂量为0.5ml/只，7日龄雏鸭注射剂量为1.0ml/只，同时设攻毒对照各10只。
在注射抗体后24h，每组雏鸭各皮下注射鸭病毒性肝炎强毒SD株病毒液0.2ml(含100LD50)，同时设4日龄、7日龄健康对照各10只，肌肉注射生理盐水0.2ml/只。
Ⅲ型鸭病毒性肝炎蛋黄抗体检测方法（试行）1 目的建立Ⅲ型鸭病毒性肝炎蛋黄抗体的效力检验标准操作规程，规范检验过程，保证检验结果准确、可靠。
2 适用范围检测鸭病毒性肝炎高免蛋、半成品、成品。
3 试验材料3.1 毒种SDNR-3株（鸭胚毒）本公司种毒室提供。
SDN-3株（雏鸭毒）本公司种毒室提供。
3.2 试验动物易感鸭胚4～7日龄雏鸭购自无鸭病毒性肝炎抗体的鸭场。
3.3 试剂及材料0.85%生理盐水、孵化机、隔离器、照检灯、移液器、枪头、西林瓶及瓶塞、卵锥、恒温箱。
4 试验方法4.1 中和试验将抗体作2倍系列稀释，取合适稀释度分别与鸭肝炎病毒SDNR-3株病毒液（200ELD50/0.1mL）等量混合，置37℃中和1小时，每个稀释度尿囊腔接种10日龄鸭胚5枚，每胚0.2mL；设病毒对照5枚，每枚接种同条件处理的病毒与生理盐水混合液0.2mL，空白对照5枚，每胚注射生理盐水0.2mL。
置37℃继续孵育，培养观察168小时，记录每组鸭胚死亡情况。
24小时前死亡的鸭胚弃去不计，24～168小时死亡的鸭胚，随时取出，计算其半数保护量（PD50）。
病毒对照组应全部死亡，空白对照组全部健活，能使50%鸭胚保护的最高稀释倍数即为该抗体的中和效价。
4.1.1 高免蛋效价：目前可暂定为每毫升中和抗体效价不低于1：4096。
4.1.2 半成品：目前可暂定为每毫升中和抗体效价不低于1：4096。
4.1.3 成品：目前可暂定为每毫升中和抗体效价不低于1：256。
4.2 攻毒保护试验（成品检测）4.2.1 前处理抗体稀释方法：将鸭病毒性肝炎冻干蛋黄抗体按说明书稀释至1羽份/mL。
病毒稀释方法：将SDN-3株稀释至100LD50/0.2mL。
4.2.2 用4～7日龄健康易感雏鸭30只，随机分成3组，10只/组（见表1）。
第1组为健康对照组，不注射任何药品，单独隔离饲养；第2组为接种抗体组，每只肌肉注射1.0mL （含1羽份），第3组为病毒对照组，每只肌肉注射生理盐水1.0mL。
鸭病毒性肝炎的流行病学实验室诊断及防控措施【摘要】鸭病毒性肝炎是一种严重危害鸭只健康的传染病，对养殖业造成了严重经济损失。
本文通过对鸭病毒性肝炎的流行病学特点、实验室诊断方法、防控措施建议以及防控措施实施效果评估等方面进行综合分析。
在实验室诊断方面，建议采用PCR技术和ELISA等方法进行快速准确的诊断。
防控措施方面建议加强鸭只的免疫防治和定期消毒养殖环境等措施，有效控制疫情的传播。
也提出了加强监测和疫苗研发等方面的展望。
鸭病毒性肝炎的实验室诊断和防控具有重要意义，需要进一步加强实验室技术和防控措施的研究，以提高防疫水平，保障养殖业的健康发展。
【关键词】鸭病毒性肝炎、流行病学、实验室诊断、防控措施、评估、挑战、展望、重要意义、技术研究、加强、文章。
1. 引言1.1 研究背景鸭病毒性肝炎是由鸭病毒性肝炎病毒(DHAV)引起的一种急性传染病，主要发生在鸭群中。
该病主要通过经口途径传播，感染后可导致鸭类的急性肝病或严重肝功能损伤，严重影响鸭的生长和生产性能。
随着鸭养殖业的发展，鸭病毒性肝炎的发病率逐渐升高，给养殖业带来了严重的经济损失。
目前，鸭病毒性肝炎的诊断主要依靠实验室检测方法，包括病毒分离、血清学检测和分子生物学检测等。
目前对于该病的流行病学特点、实验室诊断方法和防控措施仍存在一定的研究空白，亟需进一步深入研究。
本研究旨在探讨鸭病毒性肝炎的流行病学特点，总结实验室诊断方法，并提出防控措施建议，以期为鸭病毒性肝炎的防控工作提供科学依据和技术支持。
通过本研究，将有助于更好地理解和防控鸭病毒性肝炎这一严重传染病，减少鸭类的发病率和死亡率，提高鸭类的养殖效益和生产质量。
1.2 研究目的研究目的：鸭病毒性肝炎是一种严重危害鸭群健康的传染病，造成了严重的经济损失。
本研究的目的是通过对鸭病毒性肝炎流行病学特点、实验室诊断方法和防控措施进行系统性研究，为提高鸭群健康水平和生产效率提供科学依据。
具体目的包括：1.探讨鸭病毒性肝炎的流行病学特点，分析其传播规律和危害程度，为病毒的防控提供基础数据；2.总结和比较目前常用的实验室诊断方法，验证其准确性和可靠性，为病毒的早期筛查和确诊提供技术支持；3.提出科学有效的防控措施建议，包括加强鸭群的生物安全管理、疫苗接种和药物防治等方面，为疫情的有效控制提供方向指导。
