下载文档原格式
实验四茶叶中茶多酚含量的测定——高锰酸钾直接滴定法一、目的：掌握高锰酸钾直接滴定法测定茶叶中茶多酚含量的原理及操作二、原理茶叶中茶多酚易溶于热水，在用靛红作指示剂的情况下，样液中能被高锰酸钾氧化的物质基本上都属于茶多酚物质。
根据消耗1mL 0.318g/mL的高锰酸钾相当于5.82mg茶多酚的换算系数，可计算茶多酚的含量。
三、仪器与试剂仪器：分析天平、电动磁力搅拌器、电热水浴锅、500mL白瓷皿。
试剂：1、0.1%靛红溶液：称取靛红1g加入少量水搅匀后，再慢慢加入相对密度为1.84的浓硫酸50mL，冷却后用蒸馏水定容至1000mL，如果靛红不纯，可下法磺化处理是：称取靛红1g，加浓硫酸50mL，在80℃烘箱或水浴中加热磺化4~6h，用蒸馏水定容至1000mL，过滤后贮于棕色瓶中。
2、0.630%草酸溶液：准确称取草酸6.3034g，用蒸馏水溶解后定容至1000mL。
3、高锰酸钾标准溶液：称取AR的高锰酸钾1.27g，用蒸馏水溶解后定容至1000mL。
准确吸取0.630%草酸溶液10mL，放入250ml锥形瓶中（平行3份），加入蒸馏水50mL，再加入相对密度为1.84的浓硫酸10mL，摇匀，在70~80℃水浴中保温5分钟，取出后用高锰酸钾进行滴定。
开始慢滴，待红色消失后再滴第二滴，以后可逐渐加快，边滴边摇，待溶液出现淡红色保持1分钟不变即为终点。
计算高锰酸钾溶液的百分比浓度。
四、测定步骤1、供测试液的准备：准确称取茶叶磨碎样品1g，放在250mL锥形瓶中，加入沸蒸馏水80mL，在沸水浴中浸提30分钟，然后抽滤、洗涤，滤液倒入100mL容量瓶中，冷至室温，最后用蒸馏水定容至100mL，摇匀。
2、测定：取200ml蒸馏水放入白瓷皿中，加入0.1%靛红溶液5mL，再加入供测试液5mL，开动磁力搅拌器，用已标定的高锰酸钾溶液边搅拌边滴定，滴定速度以1滴/s为宜，接近终点时应慢滴。
直到溶液由深蓝色转变为亮黄色为止，记下消耗的高锰酸钾毫升数。
实验四茶叶中茶多酚含量的测定——高锰酸钾直接滴定法一、目的：掌握高锰酸钾直接滴定法测定茶叶中茶多酚含量的原理及操作二、原理茶叶中茶多酚易溶于热水，在用靛红作指示剂的情况下，样液中能被高锰酸钾氧化的物质基本上都属于茶多酚物质。
根据消耗1mL 0.318g/mL的高锰酸钾相当于5.82mg茶多酚的换算系数，可计算茶多酚的含量。
三、仪器与试剂仪器：分析天平、电动磁力搅拌器、电热水浴锅、500mL白瓷皿。
试剂：1、0.1%靛红溶液：称取靛红1g加入少量水搅匀后，再慢慢加入相对密度为 1.84的浓硫酸50mL，冷却后用蒸馏水定容至1000mL，如果靛红不纯，可下法磺化处理是：称取靛红1g，加浓硫酸50mL，在80℃烘箱或水浴中加热磺化4~6h，用蒸馏水定容至1000mL，过滤后贮于棕色瓶中。
2、0.630%草酸溶液：准确称取草酸6.3034g，用蒸馏水溶解后定容至1000mL。
3、高锰酸钾标准溶液：称取AR的高锰酸钾1.27g，用蒸馏水溶解后定容至1000mL。
准确吸取0.630%草酸溶液10mL，放入250ml锥形瓶中（平行3份），加入蒸馏水50mL，再加入相对密度为1.84的浓硫酸10mL，摇匀，在70~80℃水浴中保温5分钟，取出后用高锰酸钾进行滴定。
开始慢滴，待红色消失后再滴第二滴，以后可逐渐加快，边滴边摇，待溶液出现淡红色保持1分钟不变即为终点。
计算高锰酸钾溶液的百分比浓度。
四、测定步骤1、供测试液的准备：准确称取茶叶磨碎样品1g，放在250mL锥形瓶中，加入沸蒸馏水80mL，在沸水浴中浸提30分钟，然后抽滤、洗涤，滤液倒入100mL容量瓶中，冷至室温，最后用蒸馏水定容至100mL，摇匀。
2、测定：取200ml蒸馏水放入白瓷皿中，加入0.1%靛红溶液5mL，再加入供测试液5mL，开动磁力搅拌器，用已标定的高锰酸钾溶液边搅拌边滴定，滴定速度以1滴/s为宜，接近终点时应慢滴。
直到溶液由深蓝色转变为亮黄色为止，记下消耗的高锰酸钾毫升数。
茶叶茶多酚含量的测定茶叶茶多酚含量的测定方法（以农贸一班2组数据为例）一、以没食子酸含量做标准曲线进行计算：上图中的横坐标为每25ml没食子酸标准液中没食子酸的含量，纵坐标为吸光度值。
样品待测液含量对应关系：25ml待测液中茶多酚含量=10ml1/10=0.2g茶叶中茶多酚总含量的1/100。
由对应关系进行公式推导：茶叶样品中茶多酚含量（%）=浸提液中茶多酚的含量/（样品质量*干物质含量）浸提液中茶多酚的含量=1ml中茶多酚含量*10ml=10ml稀释液中茶多酚的含量*10*10ml=25ml待测液中茶多酚的含量*10*10ml茶多酚含量（%）=A*V*d/(L*m*m1*(10^6)),稀释因子d应该为10。
同时由于：A=K*X+b,所以此公式应该调整为：茶多酚含量（%）=[(A-b)*V*d/(L*m*m1*(10^6))]*100A----待测液平均吸光度b----标准曲线公式中的常量，本实验为-0.0134V----浸提液体积本实验为10mld----稀释因子，在以没食子酸含量为横坐标的计算方法中，d=10L----标准曲线斜率m----样品质量，本实验为0.2m1----样品干物质含量，本实验为80%详细过程如下：A1=0.885 A2=0.822 A3=0.784平均光度值A=（A1+A2+A3）/3=0.830将A值带入公式:茶多酚含量（%）= [( A-b)*V*d/(L*m*m1*(10^6))]*100,可以求得茶叶样品中茶多酚的含量=13.5%二、以没食子酸浓度作标准曲线上图中的横坐标为没食子酸标准溶液的浓度，纵坐标吸光度A此时的计算公式推导过程为：茶叶样品中茶多酚含量（%）=0.2g茶叶中茶多酚含量/（0.2*干物质含量）0.2g茶叶中茶多酚的含量为=浸提液浓度*10浸提液浓度=10ml稀释液浓度*10010ml稀释液浓度=25ml待测液浓度*25ml/10ml25ml待测液浓度可以由标准曲线公式：A=L*X+b测得。
方法一：酒石酸亚铁法测定茶多酚1.适用范围：茶叶、茶粉及其制品，茶饮料等。
2.原理：在茶叶水浸出物中与亚铁离子产生络合反应的酚性化合物，均称茶多酚。
茶叶中多酚类物质能与亚铁离子形成紫蓝色络合物，可用分光光度法测定其含量。
3.试剂：所用试剂应为分析纯，水为蒸馏水或去离子水。
3.1酒石酸亚铁溶液：称取1g（准确至0.0001）硫酸亚铁，5g酒石酸钾钠（准确至0.0001），用水溶解并定容至1L（低温保存，有效期10天）。
3.2 pH7.5磷酸缓冲溶液：3.2.1 1/15 mol/L磷酸氢二钠：称取23.87g十二水磷酸氢二钠，加水溶解后定容至1L。
3.2.2 1/15 mol/L磷酸二氢钾：称取磷酸二氢钾9.08g，加水溶解后定容至1L。
3.2.3 取上述1/15mol/L的磷酸氢二钠溶液85ml和1/15mol/L的磷酸二氢钾15ml混合均匀，混合后以pH计测定其pH值，若有偏差，以上述两溶液进行调节至pH7.5。
4.仪器及用具：4.1分光光度计4.2磨碎机：由不吸收水分的材料制成；死角尽可能小，易于清扫；使磨碎样品能完全通过孔径841um的筛子。
4.3 胖肚移液管：5ml，20ml。
本实验进行过程不得使用移液枪，以降低检测误差。
4.4密度计，精确到0.001g/ml4.5电热恒温水浴锅（不得使用电炉、电磁炉等热源加热）5.操作步骤：5.1茶叶：5.1.1试样的制备：（紧压茶以外的各类茶）先用磨碎机将少量试样磨碎，弃去，再磨碎其余部分，使磨碎样品能完全通过孔径841um的筛子。
如果水分含量太高，不能磨到以上规定的细度，必须将样品预先干燥（烘箱不超过100℃为宜）。
待试样冷却后（置干燥器内），再进行磨碎。
5.1.2试液的制备：（1）称取3g（精确至0.001g）磨碎试样于500ml锥形瓶中。
（2）加沸蒸馏水450ml，加盖，立即移入电热恒温沸水浴中，水浴锅中的水位不小于1/2锥形瓶中的水位，浸提45min。
茶叶中茶多酚含量的测定高锰酸钾直接滴定法实验四茶叶中茶多酚含量的测定——高锰酸钾直接滴定法一、原理茶叶中茶多酚易溶于热水，在用靛红作指示剂的情况下，样液中能被高锰酸钾氧化的物质基本上都属于茶多酚物质。
根据消耗1ml0.318g/ml的高锰酸钾相当于5.82mg茶多酚的换算系数，可计算茶多酚的含量。
二、试剂1、0.1%靛红溶液:称取靛红1g加入少量水搅匀后，再慢慢加入相对密度为1.84的浓硫酸50ml，冷却后用蒸馏水定容至1000ml，如果靛红不纯，可下法磺化处理是:称取靛红1g，加浓硫酸50ml，在80?烘箱或水浴中加热磺化4~6h，用蒸馏水定容至1000ml，过滤后贮于棕色瓶中。
2、0.630%草酸溶液:准确称取草酸6.3034g，用蒸馏水溶解后定容至1000ml。
3、高锰酸钾标准溶液:称取AR的高锰酸钾1.27g，用蒸馏水溶解后定容至1000ml。
准确吸取0.630%草酸溶液10ml，放入250ml锥形瓶中(平行2份)，加入蒸馏水50ml，再加入相对密度为1.84的浓硫酸10ml，摇匀，在70~80?水浴中保温5分钟，取出后用高锰酸钾进行滴定。
开始慢滴，待红色消失后再滴第二滴，以后可逐渐加快，边颠边摇，待溶液出现淡红色保持1分钟不变即为终点。
按下式计算高锰酸钾溶液的浓度: 100.63ω(kMnO4浓度，%)= 4 kMnO三、仪器分析天平、电动磁力搅拌器、电热水浴锅、500ml白瓷皿。
测定步骤11、供测试液的准备:准备称取茶叶磨碎样品1g，放在200ml三角烧瓶中，加入沸蒸馏水80ml，在沸水浴中浸提30分钟，然后抽滤、洗涤，滤液倒入100ml容量瓶中，冷至室温，最后用蒸馏水定容至100ml，摇匀。
2、测定:取200ml蒸馏水放入白瓷皿中，加入0.1%靛红溶液5ml，再加入供测试液5ml，开动磁力搅拌器，用已标定的高锰酸钾溶液边搅拌边滴定，滴定速度以1滴/s为宜，接近终点时应慢滴。
直到溶液由深蓝色转变为亮黄色为止，记下消耗的高锰酸钾毫升数。
茶多酚的检测方法茶多酚是指茶叶中的一类重要营养成分，具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤、降低胆固醇等多种保健作用。
茶多酚的检测方法可以分为传统方法和现代方法两种。
1. 传统方法：传统方法主要是基于化学反应原理进行测定，如铁离子还原法、显色法、比色法和滴定法等。
铁离子还原法：茶多酚具有还原性，可以通过与铁离子反应生成蓝色络合物的程度来测定其含量。
该方法操作简单，但结果受干扰较大，准确性较差。
显色法：茶多酚可以与某些试剂发生着色反应，形成显色产物，如费林试剂、氢氧化钠等。
该方法操作简单，但灵敏度较低。
比色法：茶多酚可以通过与某种标准溶液进行比色来测定其含量。
这种方法简单易行，但需要标准溶液的配制和标定。
滴定法：通过滴定法测定茶多酚的总酚含量，常用的滴定剂有高锰酸钾溶液、亚硫酸钠溶液和硫酸铁溶液等。
这种方法操作简单，但耗时较长，准确性受到影响较大。
2. 现代方法：现代方法主要是基于仪器分析的方法，如色谱法、质谱法、光谱法和电化学法等。
色谱法：茶多酚可以通过色谱柱进行分离，然后使用紫外光检测器进行测定。
常用的色谱方法有高效液相色谱法（HPLC）和气相色谱法（GC）。
这些方法操作复杂，但精确度和灵敏度较高。
质谱法：茶多酚可以通过质谱仪进行分析鉴定，如气质联用质谱（GC-MS）和液质联用质谱（LC-MS）。
质谱方法准确性高，但设备成本较高。
光谱法：茶多酚的检测可以通过紫外-可见光谱法（UV-Vis）进行，茶多酚在紫外光区域有特征吸收峰，可以通过测定吸光度来定量。
该方法快速、简单，但对样品的要求较高。
电化学法：茶多酚可以通过电化学方法进行检测，如循环伏安法、方波伏安法和电化学阻抗法等。
这些方法操作相对简单，较具灵敏度和准确性。
无论是传统方法还是现代方法，茶多酚的检测都需要一定的样品处理过程，如提取茶多酚、去除干扰物、浓缩和分离等。
不同的检测方法在选择上需要考虑实验条件、设备要求、样品种类和检测精度等因素。
目前，现代方法在茶多酚检测上具有准确性高、快速性好、灵敏度高的特点，逐渐取代了传统方法成为主流。
植物生理学模块实验指导李玲主编科学出版社茶多酚含量的测定方法（分光光度计法）【实验目的】学习用酒石酸铁比色法测定茶多酚含量的方法，了解茶多酚在植物抗氧化活性中的作用。
【实验原理】茶多酚是一类儿茶素为主体的类黄酮化合物，具有C6—C3—C6碳骨架结构，是一种重要的天然抗氧化性物质。
它是超氧阴离子自由基和羟自由基的强捕获剂，能清除自由基。
本实验介绍用酒石酸铁比色法测定植物组织中的茶多酚含量。
【器材与试剂】1.实验仪器与用具分光光度计、离心机、研钵、水浴锅、移液管、烘箱、具塞三角瓶2.实验试剂0.1mol/L磷酸缓冲液（pH6.8）100μg/ml儿茶素标准液：称取10mg儿茶素，用蒸馏水定容至100ml。
1.5%酒石酸钾铁3.实验材料同抗坏血酸。
【实验操作】1. 称取1g样品，研磨成粉末。
用50ml沸蒸馏水将粉末洗入三角瓶，于沸水浴中浸提20min，过滤，滤渣用50ml蒸馏水同样提取一次，合并上清液，5000g离心15min，取上清液待用。
2.将儿茶素标准溶液稀释成0、20、40、60、80、100μg/ml，分别吸取1ml，加0.1mol/L 磷酸缓冲液3ml，混匀，加1.5%酒石酸钾铁1ml，用分光光度计测定540nm处的OD值，并绘制浓度-OD标准曲线。
3.取样品提取液1ml，按上述同意方法测定540nm处的OD值。
【实验作业】根据公式，计算植物幼叶和成熟叶中茶多酚的含量，分析原因。
茶多酚含量（μg/g鲜重）=C×（提取液总体积×体积稀释倍数）式中，C为从标准曲线中查得提取液中茶多酚含量（μg/ml）。
【注意事项】提取时间过长，所提的茶多酚会发生氧化反应，转化成其他物质，致使一部分茶多酚丢失。
提取时间在1~2h对茶多酚含量的影响不大。
【实验扩展】1.可以从提取容积的选择以及萃取环节等方面，优化从植物组织高效率提取茶多酚含量的方法。
2.根据茶多酚易溶于水、乙醇、乙酸乙酯等性质，本实验用溶剂萃取法从茶叶制备多酚标准品，其方法是：取茶叶粉末，加6倍量沸水提取30min，不断搅拌，过滤。
茶多酚的测定方法茶多酚（tea polyphenols）是指茶叶中所含的一类天然化合物，属于类黄酮类化合物，具有很强的抗氧化和抗癌作用。
茶多酚在茶叶中的含量与茶叶品种、制作工艺、生长环境等因素有关，因此，需要进行茶多酚的测定来评估茶叶的品质和营养价值。
目前常用的茶多酚测定方法主要包括显色法、比色法、高效液相色谱法（HPLC）和紫外分光光度法。
下面将详细介绍这些方法的原理和操作步骤。
1. 显色法：显色法是一种简单快速测定茶多酚含量的方法。
其原理是茶多酚与铁离子（Fe3+）在酸性条件下形成可见光吸收的蓝色络合物，通过检测吸光度来测定多酚的含量。
操作步骤：a. 将茶叶样品加入酸性溶液中（如硫酸）。
b. 加入一定浓度的铁离子。
c. 加热反应液，在紫外可见光谱仪上设置波长（一般为760 nm）进行吸光度检测。
d. 通过标准曲线法计算样品中茶多酚的含量。
2. 比色法：比色法是一种简化的茶多酚测定方法，它使用标准化学品来检测茶叶中的茶多酚含量，适用于快速测定大批量样品。
操作步骤：a. 将茶叶样品加入醇/酸混合溶液中，并进行超声处理，使茶多酚溶解。
b. 加入一定量的比色试剂（如费尔林试剂）。
c. 在紫外可见光谱仪上设置波长（一般为760 nm）进行吸光度检测。
d. 通过标准曲线法计算样品中茶多酚的含量。
3. 高效液相色谱法（HPLC）：HPLC是一种常用的茶多酚测定方法，它通过分离和定量各种茶多酚组分，能够提供更准确的结果。
操作步骤：a. 提取茶叶样品中的茶多酚。
b. 茶多酚提取物通过色谱柱进行分离，选择合适的流动相体系（如乙腈-水溶液），并设定合适的流速。
c. 通过检测波长（一般为280 nm）对各组分进行定量。
d. 通过标准曲线法计算茶叶样品中茶多酚的含量。
4. 紫外分光光度法：紫外分光光度法是一种通过茶多酚在紫外光区域（200-400 nm）的吸光特性来测定茶多酚含量的方法。
操作步骤：a. 将茶叶样品提取得到茶叶样品溶液。
茶多酚的含量测定
高锰酸钾直接滴定法
目的：掌握高锰酸钾直接滴定法测定茶叶中茶多酚含量的原理及操作
原理
茶叶中茶多酚易溶于热水，在用靛红作指示剂的状况下，样液中能被高锰酸钾氧化的物质基本上都属于茶多酚物质。
依据耗费1mLmL的高锰酸钾相当于茶多酚的换算系数，可计算茶多酚的含量。
仪器与试剂
仪器：剖析天平、电动磁力搅拌器、电热水浴锅、500mL 白瓷皿。
试剂：
1、%靛红溶液：称取靛红1g加入少许水搅匀后，再慢慢加入相对密度为的浓硫酸50mL，冷却后用蒸馏
水定容至1000mL ，假如靛红不纯，可下法磺化办理是：称取靛红1g，加浓硫酸50mL，在80℃烘箱或
水浴中加热磺化4~6h ，用蒸馏水定容至1000mL ，过滤后贮于棕色瓶中。
2、%草酸溶液：正确称取草酸，用蒸馏水溶解后定容至1000mL。
3、高锰酸钾标准溶液：称取AR的高锰酸钾，用蒸馏水溶解后定容至1000mL。
正确汲取%
草酸溶液10mL，放入250ml锥形瓶中（平行3份），加入蒸馏水50mL，再加入相对密度为的浓硫酸10mL，摇匀，在70~80℃水浴中保温5分钟，拿出后用高锰酸钾进行滴定。
开始
慢滴，待红色消逝后再滴第二滴，此后可渐渐加速，边滴边摇，待溶液出现淡红色保持 1 分钟不变即为终点。
计算高锰酸钾溶液的百分比浓度。
测定步骤
1、供测试液的准备：正确称取茶叶磨碎样品 1g，放在250mL锥形瓶中，加入沸蒸馏水
80mL，
在开水浴中浸提30分钟，而后抽滤、清洗，滤液倒入100mL容量瓶中，冷至室温，最后用
蒸馏水定容至100mL，摇匀。
2、测定：取200ml蒸馏水放入白瓷皿中，加入%靛红溶液5mL，
再加入供测试液5mL，开动磁力搅拌器，用已标定的高锰酸钾溶液边搅拌边滴定，滴定速度
以1滴/s为宜，靠近终点时应慢滴。
直到溶液由深蓝色转变成亮黄色为止，记下耗费的高锰
酸钾毫升数。
同时做空白测定。
五、结果计算
式中：X—茶多酚的含量，%，B—空白耗费的高锰酸钾毫升数，mLA—样品耗费的高锰酸钾毫升数，mLω--高锰酸钾的浓度，%，m—样品的质量g，V1—测定用供测试液的体积，mL，V2--供
测试液的体积，mL 酒石酸铁比色法
原理：
茶叶中多酚类物质占茶嫩梢干重的20％～35％，由约30种以上的酚类物质所构成，通称茶
多酚。
按其化学构造分为四类：（1）儿茶素类，属黄烷醇类；（2）黄酮及黄酮醇类；（3）花白素及花青素，即羟基-［4］-黄烷醇及其钾盐；（4）醋酸及缩酚酸类。
此中以黄烷醇类化
合物最重要（占多酚的80％左右）。
纯儿茶素一般为白色无定形粉末，在空气中极易氧化成棕色物，能溶于水、乙醇、甲醇、丙酮、乙酸乙酯等有机溶剂中。
茶多酚能溶于水、乙醇、
甲醇、丙酮、乙酸乙酯，微溶于油脂。
对热、酸较稳固，2%的溶液加热至120℃并保持30min，无显然变化。
在碱性条件下易氧化变质。
酒石酸铁能与茶多酚生成紫褐色络合物，络合物溶液颜色的深浅与茶多酚的含量成正比。
所以能够用比色方法测定。
该法可防止高锰酸钾滴定法所产生的人为视觉偏差。
茶多酚的测定方法有高锰酸钾直接滴定法和酒石酸铁比色法，因为高锰酸钾直接滴定法操作比较复杂，且靠肉眼察看颜色判断终点，假如样品溶液颜色较深时，可能影响测定结果。
本实验将应用酒石酸铁比色法测定茶多酚的含量。
仪器与试剂
仪器：分光光度计
试剂：（1）酒石酸铁溶液：称取FeSO4·7H2O，含4个结晶水的酒石酸钾钠，加蒸馏水溶
解后，用蒸馏水稀释至1000mL（2）的磷酸缓冲液：Na2HPO4·12H2O，·2H2O，加蒸馏水溶解后．用蒸馏水稀释至1000mL．
步骤
（l）样品溶液的制备方法：正确称取茶叶磨碎样品1g于200mL三角烧瓶中，加入开水80mL，在开水浴中浸提30min，而后过滤、清洗，滤液倒人100mL容量瓶中，冷至室温，最后用蒸馏水定容至刻度，摇匀，备用。
摇匀，再加入磷酸缓冲液稀释至刻度。
以蒸馏水取代样品溶液加入相同的试剂作空白。
选择540nm波长和1cm的比色杯测定吸光度。
计算
式中：ω—茶多酚的含量，%，A—样品溶液的吸光度值，T—样品溶液的整体积，mLV—测
定用样品溶液的量，mL，m—样质量量，g—用1cm比色杯，当吸光度为时，试液中茶多酚的浓度为mL
说明及注意事项
1、、磷酸盐缓冲液在常温下简单生长霉菌，放冰箱中保留或临用时现配。
2、样品溶液制备中的注意事项：
（1）较透明的样液，假如味茶饮料，将样液充足摇匀后，直接取样测定
（2）较污浊的样液，假如汁茶饮料、奶茶饮料等，称取充足混匀的样液
50mL容量
25mL于瓶中，加95%的乙醇15mL充足混匀，搁置15min，用水定容至刻度，
过滤。
（3）含有碳酸气的样液，如农民汽茶，量取充足混匀的样液 100mL于250mL的烧杯中，称
取其总量，于电炉上加热至沸，在微沸状态下加热10min，以将二氧化碳清除，放冷，用水
补足本来的质量，摇匀，备用。
测定
正确汲取试液1ml，注人25mL的容量瓶中，加水4ml和酒石酸亚铁溶液5ml，充足混淆，
再加pH7.5磷酸盐缓冲液至刻度，用10mm比色杯，在波长
540nm处，以试剂空白溶液作参比，测定吸光度(A)
高效液相色谱
采纳高效液相色谱法测定绿茶中茶多酚的含量。
在色谱柱为KromasilC18、流动相为乙酸：
甲醇：N,N-二甲基甲酰胺：水=1：1：40：58（V/V）、色谱柱温30℃、进样量10μL、检测
器为紫外检测器、检测波长的色谱条件下对绿茶中茶多酚含量进行测定。
