《微生物工程》复习题.

《微生物工程》复习题

一、名词解释：

互变异构效应：是指一种小分子物质与一种蛋白质分子发生可逆的相互作用，导致这种蛋白质的构象发生改变，从而改变这种蛋白质与第三分子的相互作用。

全挡板条件：在一定转速下再增加附件而轴功率保持不变。挡板宽度一般取0.1~0.2D，装设4-6块挡板即可满足全挡板条件。满足全挡板条件的挡板数及宽度可由（b/D）n=（0.1~0.12）D/D·n=0.5 或W/D·mb=0.4 来计算。

营养缺陷型：是指通过诱变而产生的缺乏合成某些营养物质，如氨基酸、维生素和碱基等的能力，必须在其基本培养基中加入相应的营养成分才能正常生长的变

原生质体融合：通过人为的方法，使遗传性状不同的的两个细胞的原生质体进行融合，借以获得兼有双亲遗传性状的稳定重组子的过程。

局限性转导：前噬菌体从宿主菌染色体上脱落时发生偏差，将前噬菌体两侧的宿主染色体基因转移给受体菌，使受体菌的遗传性状发生改变的过程。

种龄：是指种子罐中培养的菌体开始移入下一级种子罐或发酵罐时的培养时间，较好的种龄应使菌体处于对数生长期。

同步培养法：培养细胞达到生理活性一致的方法，可通过调整生理条件和用机械或物理手段分离细胞的方法。

产量常数：稳定期时，菌体产量达到最高点，而且菌体产量与营养物质间呈现出有规律的比例关系，这一关系就用产量常数来表示。

渗漏缺陷型：是一种特殊的营养缺陷型，是遗传性状代谢障碍不完全的突变型，其特点是酶活力下降而不完全丧失，并能在基本培养基上少量生长。

倍增时间td：细胞质量每增加一倍所需的时间，成为倍增时间

摄氧率（r）：单位时间内单位体积的发酵液所需的氧气量。

反复半分批操作：半分批操作完成后，不全部取出反应物料，剩余部分重新加入一定量的基质，再按照半分批操作方式进行，反复进行操作。

分批发酵：在一封闭系统内含有初始限量基质的发酵方式，在这一过程中，除了氧气、消泡剂及控制pH的酸或碱外，不再加入任何其他物质，发酵过程中培养基成分减少，微生物得到繁殖。

能荷：指细胞中ATP、ADP、AMP系统中可为代谢反应供能的高能磷酸键的量度。

能荷=（[ATP]+1/2[ADP]）/([ATP]+[ADP]+[AMP])*100%

变色圈法：对于不易产生透明圈的产生菌，可在底物平板中加入指示剂或显色剂，所需微生物能被快速鉴别出来。

半分批操作：又称流加操作，是指先将一定量基质加入反应器内，在适宜条件下将微生物菌种接种到反应器中，反应开始，反应过程中将特定的限制性基质按照一定的要求加入到反应器内，以控制限制性基质保持一定，当反应终止时取出反应物料的操作方式。

普遍性转导：通过噬菌体将供体菌的任意DNA片段转移至受体菌的转导现象。 抑菌圈法：常用于抗生素生产菌的分离筛选，工具菌采用抗生素的敏感菌。若被检菌能分泌某些抑制工具菌生长的物质，如抗生素等，便会在该菌落周围形成工具菌不能生长的抑菌圈，很容易被鉴别出来。

加速限速反应：在合成某种产物时，存在某一中间体，若在发酵过程中发现这一中间体积累，则下一步酶反应是该产物合成的限速步骤。如：青霉素N是头孢霉素合成的中间体，用顶头孢发酵时发现青霉素N的积累，下一步酶反应是头孢霉素的限速步骤。

透明圈法：在固体培养基中渗入溶解性差、可被特定菌利用的营养成分，造成浑浊、不透明的培养基背景。待筛选在菌落周围就会形成透明圈，透明圈的大小反映了菌落利用此物质的能力。常作为初步筛选菌落的快速方法。

能荷调节：也称腺苷酸调节，细胞通过改变ATP、ADP、AMP 三者的比例来调节其代谢活动。

蒸发热：被排出的水蒸气和空气夹带着部分显热（Q显）散失到罐外的热量称为蒸发热。

二、填空

1从自然界中分离筛选菌种的方法步骤为（采样）、（增殖培养）、（纯种分离）和（毒性试验）。

2淘汰野生型菌株的方法有（抗生素法）和（菌丝过滤法）两种。

3准性杂交分为（异核体的形成）（杂合二倍体的形成）（染色体交换 ）和（ 染色体单倍化 ）四个过程。

4原生质体的电融合过程分为两个阶段：一个是（原生质体在电场作用下，产生极化，排列成串球状，细胞间两两相互粘连）、另一个是（在高压电场力的作用下，粘连成串的原生质体的细胞膜磷脂双分子层发生微团化，使生物膜自然的融合）。

5菌种的保藏必要条件是（低温）、（干燥）和（缺氧）三个。

6发酵泡沫的类型有（上面泡沫）、（流态泡沫）两种。

7影响泡沫稳定的因素有（与通气量、通气速度和搅拌速度等有关）、（与所用培养基的成分有关）、（与培养基的灭菌方法、灭菌温度和时间有关）等。

8准性杂交的过程分为（异核体的形成）（杂合二倍体的形成）（体细胞重组）三步。

9富集培养的关键是（移种的时间），应在所需菌种确已占优势的情况下进行。

10菌种的分离筛选分为（采样）、（增殖培养）、（纯种分离）和（生产性能测定）四个步骤。

11小曲酒生产的典型工艺是（先培菌糖化后发酵的半固态发酵法）和（边糖化边发酵的半固态发酵法）。

12啤酒贮酒(即后发酵)的作用是：（为了使嫩啤酒后熟）、（为了使啤酒逐渐澄清）、（为了使CO2在酒内饱和，口味醇和，适于饮用）。

13空气除菌常用（过滤除菌）的方法。

14泡沫形成的必要条件（通气搅拌的剧烈程度）、（培养基中的配比与原料组成）。

15全挡板条件是指在一定转数下再增加罐内附件而轴功率保持不变，要达到全挡板条件必需满足下式（（b／D）·n=[（0.1~0.12）D／D]·n=0.5）。

三、选择题

1基因工程育种技术的重组体的筛选方法有：（ ABCDE ）

A抗药性变化的检测 B噬菌斑的形成 C功能互补

D单菌落快速电泳 E原位杂交或区带杂交

2以下图示，哪个表示了半分批及连续操作时菌体及底物浓度随时间变化的情况。（ B ）

3谷氨酸发酵属于（ B ）类型的发酵。

A生长相关型 B生长部分相关型 C生长不相关型

4pH值对菌体生长和产物合成的影响有以下几个方面：（ ABCE ）。

A 影响酶的活性 B 影响微生物细胞膜所带电荷的状态

C 影响某些组分和中间代谢产物的离解 D影响菌体的代谢过程

E影响代谢产物的质量和比例发生改变

5用微生物工程的方法生产的具有临床实用价值的青霉素是（ A ）。

A青霉素G B青霉素X C青霉素F D青霉素K E青霉素V

6微生物生长最适pH值和产物形成的最适pH值的相互关系有四种情况：如图所示：哪两种发酵须严格控制pH值。（ BC ）

7转化作用的发生要求受体细胞只有处于（ B ）阶段才能吸收供体的 DNA。

A 敏感态 B感受态 C 衰颓态 D A B C

生长态

8下面哪种物质可产生分解代谢物的阻遏作用？( A )

A 乳糖 B 麦芽糖 C 葡萄糖 D淀粉

9下面哪种物质只能在辅阻遏物存在时才能与操纵基因结合？( A )

A阻遏物蛋白 B阻遏物 C诱导物 D启动子

10菌体在以下哪个生长时期比生长速率不断下降，其长短取决于菌体对底物的亲和力的大小（ B ）。

A 加速期 B 减速期 C 稳定期 D死亡期

11柠檬酸和某些氨基酸的发酵属于（ B ）类型的发酵。

A生长相关型 B生长部分相关型 C生长不相关型 D生长偶联型

12冻干保藏法中国内常使用的保护剂是（ C ）。

A动物血清 B牛奶 C10％甘油 D脱脂乳和蔗糖

13下列哪种不是补料的正确方式？（ C ）

A一次性补料或间歇补料 B连续恒速补料 C差速补料 D变速补料（指数流加）

14保证施加选择压力的分离操作过程成功的方法是？（ C ）

A添加氮源 B添加无机盐 C定时移种 D添加碳源

四、判断改错题

1使pH值上升的因素有：培养基中碳、氮比例不当，碳源过多；生理碱性物质存在，中间补料时氨水或尿素加入过多。（ × ）

2最适氧浓度与临界氧浓度是不同的。为避免生物合成处于氧限制的条件之下，需考察产物的临界氧浓度和最适氧浓度，并使发酵过程保持在临界氧浓度范围内。（ × ）

3 GP的亲水性差，在发泡介质中溶解度小，抑泡能力比消泡强，适合在配制培养基时加入，抑制整个发酵过程中泡沫的产生；GPE的亲水性强，在发泡介质中易铺展，消泡能力强，溶解度也大，消泡活性维持时间短，在粘稠发酵液中比稀薄发酵液中的效果好。（ √ ）

4装甑用汽调节要做到“两大一小”，开始汽要大，防止跑酒，随着料层加厚，用汽量要小，最后上下汽路已通，应大气追尾。（ × ）

5在施加选择压力法分离时，应注意的是：所需菌株生长的结果有时会改变培养基的性质，从而改变选择压力。（ √ ）

6连续培养的条件是培养基加入或流出速度F与发酵罐中培养液体积V呈正比，即稀释率D等于微生物的比生长速率μ。（ × ）

7恒化式富集培养是通过改变限制性基质浓度，来控制两种不同菌株的生长速率的。（ × ）

8诱变育种的中间培养的原因是在发生了突变尚未表现出来之前，有一个表现延迟的过程，即细胞内原有酶量的稀释过程(生理延迟)，需3代以上的繁殖才能将突变性状表现出来。（ √ ） 9同工酶（isoenzyme）调节是指某一分支途径中的第一步反应可由多种酶催化，但这些酶受相同的终产物的反馈调节。（ × ）

10使pH值上升的因素有：培养基中碳、氮比例不当，碳源过多；生理碱性物质存在，中间补料时氨水或尿素加入过多。（ × ）

11最适温度选择要根据菌种与发酵阶段做试验，应满足菌种的最适生长温度和最适产物积累温度的要求。（ √ ）

12在发酵过程中，菌体利用培养基中的营养物质，将其分解氧化而产生的能量，其中一部分用于合成高能化合物，其余一部分以热的形式散发出来，这散发出来的热就叫发酵热。（ × ）

13灭菌是指用物理或化学方法杀死物料、容器、器具内外的病原微生物。（ × ）

五、简答题

1简述液氮超低温保藏法？真空冷冻保藏法的原理？

液氮超低温保藏法是以甘油、二甲基亚砜、血清蛋白、糊精、聚乙烯氮戊环、吐温80等作为保护剂，在液氮超低温（-196℃）下保藏的方法。其主要原理是菌种细胞从常温过渡到低温，并在降到低温之前，使细胞内的自由水通过细胞膜外渗出来，以免膜内因自由水凝结成冰晶而使细胞损伤。保藏的操作过程：①选择安瓿管②加保护剂③冻结：把菌悬液或带菌丝的琼脂块经控制致冷速度，以每分钟下降1℃的速度从零度直降到-35℃，然后保藏在-150℃~-196℃液氮冷箱中。