大肠菌群检验原始记录(第二法)

大肠菌群测定原始记录
时间：检验地点：本厂化验室
检测样品名称：来源：
生理盐水的配制：8.5g氯化钠加1000ml蒸馏水溶解待用。
1.取225ml生理盐水于标签为1:10的300ml锥形瓶中，
取9ml生理盐水于标签为1:100的50ml锥形瓶中。
2.LST溶液的配制：取LST7.1g加水100ml（双料），溶解至透明，
取1:100的稀释样1ml于标有0.01g的3只试Байду номын сангаас中，
5．培养：放入36℃的培养箱中培养48h。时间起始：
24h产气管数：
48h产气管数：
6．BGLB溶液复发酵试验：配制BGLB溶液，称取BGLB4g溶液100ml水中，均分倒入对应产气标号的标有标示并放有聚气管的试管中，放入灭菌锅灭菌15min。用接种针粘一环产气管液于标有对应的以灭菌的BGLB溶液的试管中，于36℃的培养箱中培养48h。
倒入10ml于3只标有1g的并放有聚气管的试管中;剩余溶液加一倍水配成单料倒入标有0.01g，0.001ml的6只试管中，每只10ml,并放有聚气管(试管要求180×18mm)。
放入灭菌锅灭菌15min.
以上1；2；同时一起灭菌，灭菌起始时间(喷气开始计时)：
压力表指针回零后打开放气阀，开盖取出，冷至常温。
培养起始时间：
48h产气管数：
7.检索MPN表结论：
备注：
3.样品稀释：于225ml灭菌的生理盐水中加入样品25g，混匀，配成1:10的稀释样；
从1:10的稀释样中取1ml到入标有1:100的9ml灭菌的生理盐水中混匀，配成1:100稀释样;
4.初发酵试验：取1:10的稀释样10ml于标有1g的3只试管中，
取1:10的稀释样1ml于标有0.1g的3只试管中，

检验员：审核员：
样品编号
LST肉汤初发酵试验培养温度℃，培养开始时间年月日点分，培养结束时间年月日点分。
用接种环从产气的LST肉汤管中分别取培养物1环，接种于煌绿乳糖胆盐肉汤（BGLB）管中，培养观察。
样
品
编
号
BGLB肉汤复发酵试验
培养温度℃，培养开始时间年月日点分，培养结束时间年月日点分。
结果报告
MPN/mL
备注：+：阳性-：阴性
绥芬河出入境检验检疫局综合技术中心密山实验室
ZJ-03-107大肠菌群检验原始记录
样品名称：样品号：
检验日期：验讫日期：标准物质Biblioteka 号检验依据设备编号
大肠菌群计数
第一法大肠菌群MPN计数法：取检样25g(ml)+225ml，用均质器均质1min，制成1:10的样品匀液。按10倍递增稀释，选取6个适宜的稀释倍数，接种LST肉汤管，每个稀释度接种三管，培养观察。

菌落总数与大肠菌群检验原始记录共页第页样品名称样品编号仪器设备名称仪器设备编号检验依据检验环境温度：湿度：一、菌落总数cfu/ml(g) 培养基名称：培养温度：培养时间：年月日时--- 年月日时稀释倍数空白∕稀释液对照-1 10-2 10-3 10-4原液10平板1平板2平均值检测结果：二、大肠菌群MPN/100ml （g）培养基名称：培养温度：培养时间：年月日时--- 年月日时LST 发酵1ml × 3 0.1ml × 3 0.0 1ml × 3初发酵结果复发酵试验检测结果主检：年月日校核：年月日菌落总数和大肠菌群检测原始记录共页第页样品名称样品编号仪器设备名称仪器设备编号检验环境温度：湿度：检验依据GB4789.2-2010 GB4789.3-2010一、菌落总数cfu/ml(g) 培养基名称：培养温度：36±1℃培养时间：年月日时--- 年月日时样品数样1 样2 样3 样4 样5稀释倍数平板 1 平板 2 平板 1 平板 2 平板1 平板2 平板1 平板 2 平板1 平板2原液-110-210-310-410空白对照检验结果二、大肠菌群cfu/ml(g) 培养基名称：培养温度：36±1℃培养时间：年月日时--- 年月日时样1 样2 样3 样4 样5 样品数平板 1 平板 2 平板 1 平板 2 平板1 平板2 平板1 平板 2 平板1 平板2 稀释倍数原液-110-210-310-410空白对照验证试验检验结果主检：年月日校核：年月日XXXX检测有限公司水质微生物检验原始记录共页第页样品名称样品编号设备名称检验环境温度：湿度：检验依据一、菌落总数cfu/ml(g) 培养温度：36±1℃-1 10-2 10-3 10-4 10-5 稀释倍数原液10平板 1平板 2平均值检测结果：二、总大肠菌群MPN/100ml （g）培养温度：36±1℃培养时间：LST 培养基10ml ×1ml ×0.1ml ×0.01m l×发酵结果验伊红美蓝琼脂平板证试革兰氏染色乳糖复发酵验检测结果三、大肠埃希氏菌MPN/100ml （g）验自总大肠菌群乳糖发酵试样中的阳性管中取一滴转接伊红美蓝琼脂平板证种与EC 培养基中置44.5℃培养24 小时观察试验四、耐热大肠菌群MPN/100ml （g）将总大肠菌群多管发酵法初发酵或产气的管中验培养后的EC-MUG 管在暗处用用无菌金属接种环将试液接种到EC-MUG 管中波长366nm 功率为6W 的紫外光证置44.5℃培养24 小时观察灯照射试验主检：年月日校核：年月日乳酸菌与大肠菌群检测记录共页第页样品名称样品编号仪器设备名称检验环境温度：湿度：检验依据一、乳酸菌cfu/ml(g) 培养温度：36±1℃培养时间：稀释倍数原液10-3 10-4 10-5 10-6 10-7平板1平板2平均值检测结果：二、大肠菌群MPN/100ml （g）培养温度：培养时间：年月日时--- 年月日时LST 发酵1ml × 3 0.1ml × 3 0.0 1ml × 3发酵结果伊红美蓝琼脂平板验证试验革兰氏染色乳糖复发酵检测结果主检：年月日校核：年月日致病菌检验原始记录共页第页样品名称 样品编号 仪器设备名称 仪器设备编号检验环境 温度： 湿度： 致病菌 培养温度： 培养时间：年 月 日时 ---年 月日时金黄色葡萄球菌 25g 样品+225ml7.5% （定性检验） 氯化钠肉汤，均质 检验依据：将上述培养物，分别 划线接种到涂片染色观察溶血血浆凝固酶试验Baird-Parker 和血平板实验现象 检测结果前增菌增菌分离沙门氏菌将上述培养物， 25g样品检验依据：+225mlBPW ， 均质分别取 1ml 转接 种于 10mlTTB 与 10mlSC 内，进行 前增菌再次将上述培养 物，分别划线接种 于 BS 琼脂平板 XLD 琼脂平板生化试验实验现象 检测结果 志贺氏菌 检验依据：25g 样品+225ml GN 增菌液将上述培养物 分别划线接种于HE 平板和 EMB 平板划线接种 TSI, 葡萄糖半固体生化试验实验现象 检测结果25g 样品+225ml 生理溶血性链球菌盐水，吸取 5ml 接种 于50ml 葡萄糖肉汤曾涂片染色观察溶血 血浆凝固酶试验检验依据：菌，划线接种于血平板实验现象 检测结果主检：年月日校核：年月日霉菌和酵母菌检验原始记录共页第页样品名称样品编号仪器设备名称仪器设备编号检验依据检验环境温度：湿度：培养基名称培养温度：28±1℃培养时间：年月日时--- 年月日时：观察培养培养温度观察时间观察结果第1 天第2 天第3 天第4 天第5 天观察结论：菌落计数：培养温度：28±1℃培养时间：年月日时--- 年月日时-1 稀释倍数空白∕稀释液对照原液10-210-310-410平板 1平板 2平均值检测结果主检：年月日校核：年月日商业无菌检验原始记录共页第页样品名称样品编号仪器名称检验环境温度：湿度：仪器编号检验依据1、保温试验：将完整试样一份置于36±1℃培养箱保温十天，每天观察胖听、泄漏现象。

食品中大肠菌群平板计数检验原始记录表
样品名称
样品编号
检验项目
大肠菌群平板计数法
检验日期
检验地点
□BSL-2实验室
□洁实验净室
检验依据
判定依据
检验仪器
□生化培养箱□均质器□菌落计数仪
□生物安全柜□超净台□电子天平
□恒温振荡器□冰 箱□冰 箱
检验试剂
VRBA琼脂、BGLB肉汤、磷酸盐缓冲液或无菌生理盐水等。
h
稀释度
空白
2
25g(mL)样品+225mL稀释液均质（或原液直接检验）；
平板A1
平板A2
3
10倍系列稀释；
结果
平板B1
4
选2-3个适宜稀释度样品匀液；每梯度接种VRBA平板2个；
平板B2
结果
5
36±1℃，18-24h培养，计数典型和可疑菌落；
平板C1
平板C2
6
挑10个可疑菌落接种于BGLB肉汤管36±1℃，24-48h；
结果
平板D1
7
若BGLB肉汤管产气则阳性；
平板D2
结果
8
按比例记录结果，报告。
平板E1
平板E2
温度（℃）
相对湿度（％RH）
结果
证实实验比例
结果
报告
检验员： 审Βιβλιοθήκη 员：样品制备□固体和半固体样品：无菌称取25g，置于盛有225mL磷酸盐缓冲液或无菌生理盐水的无菌灭菌袋内，进行均质处理。
□液体样品：吸取25mL于样品于225mL磷酸盐缓冲液或无菌生理盐水中，混匀。
检验程序
大肠菌群计数[ CFU/g (mL ) ]
1
实验采集抽样方案来自GB4789.1；

原始记录
共页；第页项目名称大肠菌群样品编号
使用设备名称电热恒温培养箱手提式压力蒸汽消毒器
试验方法标准GB 4789.3-2010(第二
法)
环境条件温度℃，相对湿度 %
以无菌操作将检样25g置于225mL灭菌生理盐水中，混匀后，做成检验所用稀释液：分别将待检样品稀释液接种于2个VRBA平板混匀，待琼脂凝固后，再加3mL-4mLVRBA覆盖平板表层。

翻转平板，置于36℃±1℃温箱内，培养18h-24，计数典型和可疑菌落。

选取典型菌落或可疑菌落进行证实试验，观察产气情况。

稀释度
典型菌落总数cfu/ml n 1
n 2
n 3
n 4
n 5
证实试验从VRBA平板上挑取10个典型菌落或可疑菌落，分别移种于BGLB肉汤管，36℃±1℃温箱内，培养24h-48h.凡BGLB肉汤管产气，即可报告为大肠菌群阳性。

检测结果
备注n为同一批次产品应采集的样品件数；c为最大可允许超出m值的样品数；m为致病菌指标可接受水平的限量值;M为致病菌指标的最高安全限量值
检验人员校核人员检验日期校核日期。

菌落总数与大肠菌群检验原始记录
主检：年月日校核：年月日
菌落总数和大肠菌群检测原始记录
主检：年月日校核：年月日
水质微生物检验原始记录
主检：年月日校核：年月日
乳酸菌与大肠菌群检测记录
主检：年月日校核：年月日
致病菌检验原始记录
主检：年月日校核：年月日
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霉菌和酵母菌检验原始记录
菌落计数：
培养温度：28±1℃培养时间：年月日时--- 年月日时
主检：年月日校核：年月日
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商业无菌检验原始记录
共页第页
主检：日期：校核：日期：。

微生物检测原始记录(总7页)
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菌落总数与大肠菌群检验原始记录
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月日
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共
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月日
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培养温度：28±1℃培养时间：年月日时 --- 年月
菌落计数：
培养温度：28±1℃培养时间：年月日时 --- 年
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主检：日期：校核：日期：。

吉林省昱普检测技术有限公司控制编号：YPJC-JJLS002-2016-1/0 第1页共1页
食品用水中大肠菌群检验原始记录
第页共页基本信息
报告编号：__________ 检验日期：_____________
检验依据：食品微生物学检验大肠菌群计数GB 4789.3—2010
环境温度：__________℃相对湿度：_____________%
培养温度：__________℃
实验操作
平板计数法：将样品稀释液接种到VRBA平板培养基上，置电热恒温培养箱中，培养温度℃，（应为36±1℃），培养时间至（应为24h ），计数典型和可疑菌落总数并将其接种在BGLB肉汤中，置电热恒温培养箱中，培养温度℃，（应为36±1℃），培养时间
检测人：复核人：完成日期：20 年月日。

四、根据证实为大肠菌群的阳性管数，查MPN检索表，报告大肠菌群的最可能数。
初发酵（月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤，）支）
产气管数（支）
复发酵(煌绿乳糖胆盐
肉汤，
37℃，,48h)
产气管数（支）
10-1
10-2
10-3
检验结果
（MPN/100g）
检验人：复核人：
大肠菌群检验检验原始记录
样品名称
明胶
样品编号
样品状态
生产日期
检验依据
GB4789.3-2010
检验日期
大肠菌群检验过程：
1、称取样品25g样品放入盛有225ml灭菌的生理盐水中，制成1：10的样品匀液，用1ml无菌吸管吸取1：10的样品匀液1ml，沿管壁缓缓注入盛有9ml生理盐水的无菌试管中，制成1：100的样品均液，用1ml无菌吸管吸取1：100的样品匀液1ml，沿管壁缓缓注入盛有9ml生理盐水的无菌试管中，制成1：1000的样品均液。
2、初发酵试验：大肠菌群每个样品，选择3个适宜的连续稀释度的样品匀液，每个稀释度接种3管月桂基硫酸盐胰蛋白胨（LST）肉汤（大肠菌群测定：如果超过1ml，则用双料LST肉汤），36℃±1℃培养24h±2h，观察倒管内产气情况。如未产气，培养至48h±2h，如产气着进行复发酵试验。
三、复发酵试验：（大肠菌群的测定）用接种环从产气的LST肉汤管中分别取培养物1环，移种于煌绿糖胆盐肉汤（BGLB）管中，36℃±1℃培养48h±2h，，观察产气情况。

菌落总数与大肠菌群检验原始记录样品名称仪器设备名称检验依据一、菌落总数cfu/ml(g)培养温度：培养时间：空白∕稀释稀释倍数原液液对照平板 1平板 2平均值检测结果：二、大肠菌群MPN/100ml （ g）培养基名称：培养温度：培养时间：共页第页样品编号仪器设备编号检验环境温度：湿度：培养基名称：年月日时 ---年月日时10-110-210-310-4年月日时---年月日时LST 发酵1ml × 30.1ml × 30.0 1ml × 3初发酵结果复发酵试验检测结果主检：年月日校核：年月日菌落总数和大肠菌群检测原始记录共页第页样品名称样品编号仪器设备名称仪器设备编号检验环境温度：湿度：检验依据GB4789.2-2010 GB4789.3-2010一、菌落总数 cfu/ml(g)培养基名称：培养温度： 36±1℃培养时间：年月日时---年月日时样品数样 1样 2样 3样 4样 5稀释倍数平板 1平板 2平板 1平板 2平板 1平板 2平板 1平板 2平板 1平板 2原液10-110-210-310-4空白对照检验结果二、大肠菌群 cfu/ml(g)培养基名称：培养温度： 36±1℃培养时间：年月日时---年月日时样品数样 1样 2样 3样 4样 5稀释倍数平板 1平板 2平板 1平板 2平板 1平板 2平板 1平板 2平板 1平板 2原液10-110-210-310-4空白对照验证试验检验结果主检：年月日校核：年月日XXXX检测有限公司水质微生物检验原始记录共页第页样品名称样品编号设备名称检验环境温度：湿度：检验依据一、菌落总数 cfu/ml(g)培养温度： 36± 1℃稀释倍数原液10-110-210-310-410-5平板 1平板 2平均值检测结果：二、总大肠菌群MPN/100ml （g）培养温度： 36± 1℃培养时间：LST 培养基10ml ×1ml ×0.1ml ×0.01ml ×发酵结果验伊红美蓝琼脂平板证革兰氏染色试验乳糖复发酵检测结果三、大肠埃希氏菌MPN/100ml （ g）验自总大肠菌群乳糖发酵试样中的阳性管中取一滴转接伊红美蓝琼脂平板证种与 EC 培养基中置44.5℃培养 24 小时观察试验四、耐热大肠菌群MPN/100ml （ g）验将总大肠菌群多管发酵法初发酵或产气的管中培养后的 EC-MUG 管在暗处用EC-MUG 管中波长 366nm 功率为 6W 的紫外光证用无菌金属接种环将试液接种到试置 44.5℃培养 24 小时观察灯照射验主检：年月日校核：年月日XXXX检测有限公司乳酸菌与大肠菌群检测记录共页第页样品名称样品编号仪器设备名称检验环境温度：湿度：检验依据一、乳酸菌 cfu/ml(g)培养温度： 36± 1℃培养时间：稀释倍数原液10-310-410-510-610-7平板 1平板 2平均值检测结果：二、大肠菌群MPN/100ml （ g）培养温度：培养时间：年月日时 ---年月日时LST 发酵1ml × 30.1ml × 30.0 1ml × 3发酵结果伊红美蓝琼脂平板验证试验革兰氏染色乳糖复发酵检测结果主检：年月日校核：年月日XXXX检测有限公司致病菌检验原始记录共页第页样品名称样品编号仪器设备名称仪器设备编号检验环境温度：湿度：致病菌培养温度：培养时间：年月日时 ---年月日时金黄色葡萄球菌25g 样品 +225ml7.5%（定性检验）氯化钠肉汤，均质检验依据：将上述培养物，分别观察溶血血浆凝固酶试验划线接种到涂片染色Baird-Parker 和血平板实验现象检测结果前增菌增菌分离沙门氏菌将上述培养物，25g样再次将上述培养生化试验品检验依据：+225mlBPW ，分别取 1ml 转接种于 10mlTTB 物，分别划线接种均质与于 BS 琼脂平板10mlSC 内，进行XLD 琼脂平板前增菌实验现象检测结果志贺氏菌25g 样品 +225ml检验依据：GN 增菌液实验现象检测结果25g 样品 +225ml 生理溶血性链球菌盐水，吸取5ml 接种于 50ml 葡萄糖肉汤曾检验依据：菌，划线接种于血平板实验现象检测结果主检：年月将上述培养物分别划线接种于划线接种 TSI,生化试验HE 平板和 EMB 平板葡萄糖半固体涂片染色观察溶血血浆凝固酶试验日校核：年月日霉菌和酵母菌检验原始记录共页第页样品名称样品编号仪器设备名称仪器设备编号检验依据检验环境温度：湿度：培养基名称培养温度： 28±1℃培养时间：年月日时---年月日时：观察培养培养温度观察时间观察结果第 1 天第 2 天第 3 天第 4 天第 5 天观察结论：菌落计数：培养温度： 28±1℃培养时间：年月日时---年月日时稀释倍数空白∕稀释液对照原液10-110-2-3-41010平板 1平板 2平均值检测结果主检：年月日校核：年月日商业无菌检验原始记录共页第页样品名称样品编号仪器名称检验环境温度：湿度：仪器编号检验依据1、保温试验：将完整试样一份置于36± 1℃培养箱保温十天，每天观察胖听、泄漏现象。

微生物检验原始记录(大肠菌群)检验原始记录编号：报告类别：微生物共页项目：大肠菌群coliforms 检验地点：样品名称：样品编号：样品状态：符合检验要求；其他境条件：实验依据及步骤GB4789.3-2016样品稀释固体和半固体样品：称取25g样品置盛有225ml生理盐水或磷酸盐缓冲液的无菌均质容器内均质，或放入盛有225ml稀释液的无菌均质袋中拍击式均质器拍打，制成为1:10样品匀液。

依次进行10倍递增稀释。

液体样品：以无菌吸管吸取25ml样品置盛有225ml磷酸盐缓冲液或生理盐水的无菌锥形瓶（瓶内预置适当数量的无菌玻璃珠）中混匀，为1:10样品匀液。

样品匀液的ph应在6.5-7.5之间，必要时分别用1mol/lNaOH或1mol/lHcL调节。

取1mL1∶10稀释匀液沿管壁缓缓注入9ml磷酸盐缓冲液或生理盐水的无菌试管中（注意吸管或吸头尖端不要触及稀释液面），振摇试管或换用一支无菌吸管反复吹打，使其混合均匀，制成1:100样品匀液。

按上述操作顺序做10倍递增稀释液，每稀释一次，换用一支1mL灭菌吸量管。

从样品匀液制备到样品接种完毕，全过程不得超过15min。

初发酵试验（9管法）每个样品，选择3个适宜的连续稀释度的样品匀液（液体样品可以选择原液），每个稀释度接种3管月桂基硫酸盐胰蛋白胨（LST）肉汤（大肠菌群测定：如果超过1ml，则用双料LST肉汤）36℃±1℃培养24h±2h，观察倒管内是否有气泡产生。

产气者进行复发酵试验，未产气则继续培养至48±2h，产期进行复发酵试验。

未产气者为大肠菌群阴性。

复发酵试验（证实试验）用接种环从产气的LST肉汤管中分别取培养物1环，移种于煌绿糖胆盐肉汤（BGLB）管中，36℃±1℃培养48h±2h，，观察产气情况。

数据分析与结果一、菌落计数根据证实为大肠菌群的阳性管数，查MPN检索表，报告大肠菌群的最可能数。

检测起止日期
检 测 依 据 □GB 4789.3-2010 第一法
□GB 4789.3-2010 第二法 □GB14934-94 次/秒 时间□1min□2min□3min mL □BGLB mL □VRBA □生化培养箱 36±1℃
检 测 仪 器 □电子天平 □拍击式无菌均质器 培 养 基
□LST（双料） mL □LST（单料）
大肠菌群计数原始记录
样 品 名 称 样 品 状 态 检 测 环 境 检 测 地 点
□常温 □冷藏 □ 第1页
样 品 编 号 样 品 数 量 接 样 日 期
月 250g 年 日～ 月 月 日 日
温度（T） ： □净化室 1
℃ ；相对湿度（RH） ：
□净化室 2 □BSL-2
检验 结果
样品中大肠菌群计数结果为：
纸片颜色及结果 均匀紫色 未检出 黄色背景上红点或红晕 检出
。
餐 饮 具
检测者： 日 期：
可以结果确证（发酵法） 异常颜色反应 需确证 未检出 检 出
复核者： 日 期：
审核者： 日 期：
mL □测试纸片
固体和半固体样品：无菌称取 25g，放入盛有 225ml□生理盐水/□磷酸盐缓冲液的无菌均质袋内，进 行均质处理。 液体样品：吸取 25ml 样品置盛有 225ml□生理盐水/□磷酸盐缓冲液的无菌丝口试剂瓶（含适量无菌 玻璃珠）中，混匀。 样 品 制 备 液体样品：直接吸混匀后的原液检验。 冷冻样品：45℃， min 解冻。 调节 pH。 餐饮具 检样量
10
1
0.1
0.01
0.001
0.0001
第 一 法
初发酵
阳性管数目 （24h） 阳性管数目 （48h） 阳性管数目

菌落总数与大肠菌群检验原始记录
主检：年月日校核：年月日
菌落总数和大肠菌群检测原始记录
主检：年月日校核：年月日
水质微生物检验原始记录
主检：年月日校核：年月日
乳酸菌与大肠菌群检测记录
主检：年月日校核：年月日
致病菌检验原始记录
主检：年月日校核：年月日
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霉菌和酵母菌检验原始记录
菌落计数：
培养温度：28±1℃培养时间：年月日时--- 年月日时
主检：年月日校核：年月日
XXXX检测有限公司
商业无菌检验原始记录
共页第页
主检：日期：校核：日期：。