红景天甙通过抑制肿瘤坏死因子-a表达对帕金森模型小鼠多巴胺能神经元的保护作用

一、实验背景随着全球气候变化和人类活动的影响，高海拔地区缺氧问题日益严重，导致许多高海拔相关疾病的发生。

急性暴露于高海拔地区由于缺氧导致认知功能障碍，且重度缺氧性脑损伤（HHBI）可引起一系列病理反应，如不及时治疗，会迅速发展并危及生命。

因此，迫切需要进一步研究高海拔相关疾病的预防和治疗措施。

红景天作为一种著名的藏药，在高海拔缺氧疾病治疗中具有脑保护作用。

然而，它对高海拔缺氧脑损伤（HHBI）的代谢影响仍不完全清楚。

本研究旨在探讨红景天抗缺氧作用及相关机制。

二、实验目的1. 通过体内和体外实验，研究红景天提取物（RCE）和红景天苷（Sal）对HHBI小鼠模型的保护作用。

2. 分析RCE和Sal对HHBI小鼠脑组织损伤、血脑屏障功能障碍的影响。

3. 探讨RCE和Sal的抗缺氧作用及相关机制。

三、实验材料与方法1. 实验动物：清洁级HHBI小鼠，雌雄各半，体重18-22g，由成都中医药大学实验动物中心提供。

2. 实验药物：红景天提取物（RCE）、红景天苷（Sal）、RCE标准品、Sal标准品，均由成都中医药大学药学院提供。

3. 实验仪器：荧光显微镜、图像分析系统、酶标仪、液相色谱-质谱联用仪、凝胶成像系统等。

4. 实验方法：（1）分组与处理：将HHBI小鼠随机分为4组，分别为正常组、HHBI组、RCE组、Sal组。

RCE组和Sal组分别给予RCE和Sal干预，剂量分别为100mg/kg和50mg/kg，连续给药7天。

（2）脑组织损伤检测：采用H&E染色和TUNEL染色观察HHBI小鼠脑组织损伤情况。

（3）血脑屏障功能障碍检测：采用EB染色法检测血脑屏障通透性。

（4）代谢组学分析：采用液相色谱-质谱联用技术对HHBI小鼠脑组织进行代谢组学分析。

（5）相关机制研究：通过Western blot技术检测HHBI小鼠脑组织中相关蛋白的表达水平。

四、实验结果1. RCE和Sal改善HHBI小鼠脑组织损伤：H&E染色结果显示，HHBI组脑组织切片有严重病理损伤，神经元核固缩、深染并形成空泡。

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201810939560.1(22)申请日 2018.08.17(71)申请人 温州医科大学附属第二医院、温州医科大学附属育英儿童医院地址 325027 浙江省温州市鹿城区学院西路109号(72)发明人 张小磊　章增杰　丁远哲　王向阳　(74)专利代理机构 苏州彰尚知识产权代理事务所(普通合伙) 32336代理人 潘剑(51)Int.Cl.A61K 31/7032(2006.01)A61P 25/28(2006.01)A61P 19/08(2006.01)A61P 21/00(2006.01)(54)发明名称红景天苷在制备Parkin蛋白激动剂药物中的应用(57)摘要本发明具体公开了一种红景天苷的新用途，红景天苷在制备Parkin蛋白激动剂药物中的应用。

红景天苷作为Parkin蛋白激动剂，通过促进parkin蛋白的表达，促进线粒体自噬以及线粒体稳态，抑制细胞凋亡，从而可用于治疗神经退行性疾病以及骨骼肌肉系统退行性疾病。

权利要求书1页 说明书6页 附图3页CN 108743597 A 2018.11.06C N 108743597A1.红景天苷或其衍生物在制备Parkin蛋白激动剂药物中的应用。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述药物为治疗退行性疾病的药物。

3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于：所述退行性疾病为神经退行性疾病或骨骼肌肉系统退行性疾病。

4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：红景天苷或其衍生物通过促进parkin蛋白的表达，促进线粒体自噬以及线粒体稳态，抑制细胞凋亡，从而用于治疗神经退行性疾病以及骨骼肌肉系统退行性疾病。

5.一种Parkin蛋白激动剂药物，其特征在于：含有治疗有效量的红景天苷或其衍生物。

6.根据权利要求5所述的Parkin蛋白激动剂药物，其特征在于：所述药物中红景天苷或其衍生物的含量为10-1000μM。

第19卷 第4期 2017 年 4 月辽宁中医药大学学报JOURNAL OF LIAONING UNIVERSITY OF TCMVol. 19No. 4Apr .，2017DOI：10.13194/j.issn.1673-842x.2017.04.001红景天为景天科红景天属草本植物，主产于我国东北、四川、西藏等地。

本草纲目记载红景天具有“祛邪恶气，补诸不足”之功效。

在中药药典中隶属于补虚药物，性味甘寒，具有健脾益气、清肺止咳、活血化瘀的功效，擅治脾气虚衰的气喘乏力、阴虚咳嗽或咳血。

红景天中提取物成分有红景天苷、红景天素、苷元酪醇、二苯甲基六氢吡啶等[1]，起主要活性作用的是红景天苷。

红景天苷分子式C17H20O7，是一种从红景天中分离出的苯丙素苷。

目前已有大量实验研究表明红景天苷具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤、抗病毒、保护神经元细胞、保肝、免疫调节[2-4]等广泛药理作用。

恶性肿瘤是导致死亡的三大杀手之一，据统计截止到2015年，中国恶性肿瘤新发病例约为310万，占全球恶性肿瘤新发病例的22%，且中国恶性肿瘤死亡人数约为200万，占全球恶性肿瘤死亡人数的27%[5]，考虑病死率高、复发率高、预后差等特点，寻找恶性肿瘤的特异性，有效地靶向治疗显得尤为重要。

目前，肿瘤治疗手段主要为手术、放疗、化疗、生物治疗、中药联合等方法，虽然前3种传统治疗方法疗效显著，但手术相关风险和并发症以及抗肿瘤药物不可忽视的毒副作用等问题给肿瘤患者心理和生理造成了巨大痛苦。

目前国内外研究都积极寻找能够减低化疗药物毒副作用、协同化疗疗效、降低化疗耐药的有效辅助用药。

中药不仅能提高机体免疫力而且毒副作用低，可与多种化疗药物协同应用，不易产生耐药性，被人们广泛关注并深入研究。

早在20世纪末就有研究小组报道了红景天苷在动物模型中的抗癌作用[6]。

本文就近年来红景天苷抗肿瘤作用机制研究所取得的进展进行综述。

1 红景天苷抗肿瘤作用的现代研究进展1.1 对肝癌细胞的影响 刘翠杰等[7]研究结果表明红景天苷可通过上调p53和Bax的表达，下调Bcl-2的表达起到诱导HepA种鼠肝癌细胞凋亡的作用，同时激活线粒体途径诱导细胞凋亡。

红景天苷体外诱导小鼠骨髓间充质干细胞向神经细胞的分化及其分子机制红景天苷体外诱导小鼠骨髓间充质干细胞向神经细胞的分化及其分子机制摘要：干细胞是一类有着自我更新和多向分化潜能的细胞，广泛应用于组织工程和再生医学领域。

本研究旨在探究红景天苷在体外诱导小鼠骨髓间充质干细胞髓样细胞发展为神经细胞的作用机制。

实验结果显示，红景天苷能够促进骨髓间充质干细胞增殖和神经分化，并且通过转录因子的调控和信号途径的激活参与这一过程。

这一研究对于深入了解细胞发育和神经分化机制具有重要意义，并为干细胞研究以及神经修复治疗提供了新思路。

关键词：红景天苷；骨髓间充质干细胞；神经细胞；分化；分子机制引言：干细胞是一类特殊的细胞，具有自我更新和多向分化潜能，能够分化成各种细胞类型，引起广泛的关注。

骨髓间充质干细胞是一种重要的干细胞种类，具有良好的增殖能力和多向分化潜能，可用于组织再生和修复等领域。

因此，研究干细胞的分化机制对于促进组织工程和再生医学的发展具有重要意义。

红景天苷是红景天草药中的有效成分，已被证实具有多种生物活性。

研究发现红景天苷具有促进神经细胞分化的潜能，但其作用机制尚未完全阐明。

因此，本研究旨在探究红景天苷在体外诱导小鼠骨髓间充质干细胞向神经细胞分化的分子机制。

材料与方法：1. 实验动物：使用小鼠骨髓作为实验动物。

2. 细胞培养：将小鼠骨髓间充质细胞分离，并进行培养。

3. 实验组设：将小鼠骨髓间充质细胞分为红景天苷处理组和对照组。

4. 细胞分化检测：利用免疫荧光染色和实时荧光定量PCR技术检测细胞分化情况。

5. 分子机制探究：通过Western blot和实时荧光定量PCR技术检测关键转录因子和信号途径的表达。

结果与讨论：实验结果显示，红景天苷处理组的骨髓间充质干细胞分化为神经细胞的速度明显加快，且分化效率较对照组显著提高。

进一步的实验发现，红景天苷显著促进了神经分化相关基因的表达，如神经元特异性标志物β-III-tubulin和神经营养因子BDNF的表达。

红景天苷的药理作用研究进展Advances on the pharmacology of the study of Salidroside摘要：当前，研究者们对红景天苷的药理作用的研究仍然处于不断地研究阶段。

近年来，得益于分析技术的进步以及研究思路的开拓和国内外先进仪器的使用,对红景天苷药理作用的研究也愈发细化，同时也取得了一些举世瞩目的成果。

本文综述了红景天苷的一些已经取得的药理作用研究概况，并简单的介绍了其在人们生活中可能会用到的各种情况。

关键词:红景天苷药理作用进展前言：景天科红景天属植物在我国种类多、分布广、资源丰富, 是具有特殊适应性的植物，为珍稀药用植物之一，被誉为“高原人参”[1]；其安全性、有效性、及适应原性作用愈来愈被人们所重视。

红景天( Rho diola) 具有多种药理作用, 发挥其作用的主要有效成份是其中的苯基烷类化合物如红景天苷( Salidroside) 及其苷元酪醇、酪萨维等。

红景天苷及其苷元酪醇是存在于红景天属、越桔属、杜鹃花属、女贞属等植物中的天然抗氧化剂。

红景天苷通过提高细胞的抗氧化能力，清除活性氧，调控炎性细胞因子表达和抑制炎症介质合成，从而产生抗炎作用和防止癌变的发生。

红景天苷能上调几种细胞周期蛋白依赖激酶抑制因子表达，减少细胞周期蛋白依赖激酶Cdc2 和细胞周期蛋白B1 表达，使癌细胞周期滞留在G2期，抑制癌细胞生长；红景天苷对非特异性免疫、体液免疫和细胞免疫均有提高作用，也能对抗免疫抑制剂对骨髓造血功能的抑制[2]，等等。

目前以红景天为主要原料的中成药已成为许多药厂的主要产品, 此外还有红景天酒、红景天饮料、红景天茶、红景天保健食品、红景天系列化妆品等新型产品的开发应用,红景天在医药工业和食品工业方面具有广泛的开发前景。

近年来研究证明红景天苷具有抗疲劳、抗衰老、免疫调节，清除自由基，增强记忆，改善睡眠等多种药理作用[3]，现综述如下。

1 对心脑血管系统的保护1.1对心血管的保护作用1.1.1 抗心肌缺血作用红景天苷对心肌缺血再灌注损伤有一定的保护作用。

红景天甙对小鼠免疫功能的影响及杀瘤效应谢乐斯;刘艳丽;董丹;崔守仁;金冬;朴花;孙长凯【期刊名称】《大连医科大学学报》【年(卷),期】2003(025)001【摘要】[目的] 探讨高山红景天甙对正常小鼠免疫功能的影响.[方法] 用高山红景天甙腹腔注射免疫小鼠,剂量为800 ìg/d,采用四唑蓝比色法检测体内外的脾淋巴细胞转化反应和巨噬细胞的细胞毒效应.[结果] 高山红景天甙在体外显示了显著的丝裂原样效应且该效应存在明显的剂量依赖性(P<0.01);刺激高山红景天甙免疫组小鼠的脾淋巴细胞时,脾淋巴细胞的转化反应未见进一步增强;巨噬细胞能明显杀伤HCa-F小鼠肝癌细胞,杀瘤率达2.3%(P<0.01).[结论] 高山红景天甙具有丝裂原效应;能通过非特异性免疫功能的调节促进PEM?的杀瘤效应;高山红景天甙可能是介导双向免疫调节作用的有效成分之一.【总页数】3页(P22-24)【作者】谢乐斯;刘艳丽;董丹;崔守仁;金冬;朴花;孙长凯【作者单位】大连医科大学,医疗系1999级,辽宁,大连,116027;大连医科大学,医疗系1999级,辽宁,大连,116027;大连医科大学,医疗系1999级,辽宁,大连,116027;大连医科大学,医疗系1999级,辽宁,大连,116027;大连医科大学,医疗系1999级,辽宁,大连,116027;大连医科大学,脑疾病研究所,辽宁,大连,116027;大连医科大学,脑疾病研究所,辽宁,大连,116027【正文语种】中文【中图分类】R285.5【相关文献】1.红景天和党参合剂对小鼠免疫功能的影响 [J], 马天宇;姜国哲;韩春姬;刘丽萍;俞笃文2.红景天甙对帕金森病模型小鼠PI3K/蛋白激酶B信号转导途径的影响 [J], 张宇红;叶民;汪锡金;王刚;杨红旗;马建芬;王志全;陈生弟3.X线对小鼠脂质及细胞表面电荷的影响和红景天甙的防护作用 [J], 邓伟国;傅艳4.红景天当归不同配伍对免疫低下小鼠免疫功能的影响 [J], 史顶聪; 赵宏宇; 佟晓乐; 张凤清5.红景天甙对间歇性低压低氧诱导的ApoE^(-/-)小鼠动脉粥样硬化的影响 [J], 张立平;郑曦;马双陶;杨大春;李德;王强;张彦;杨永健因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

红景天苷对小鼠帕金森模型的保护作用及机制周瑞;罗芬;刘静妍;张凯;朱凌鹏;王秋娟;颜天华【期刊名称】《药学与临床研究》【年(卷),期】2017(025)003【摘要】目的:研究红景天苷对百草枯(paraquat,PQ)所诱导的帕金森病(Parkinson's disease,PD)小鼠模型的神经保护作用及其机制.方法:采用雄性ICR 小鼠腹腔注射百草枯制成PD小鼠模型,给予红景天苷治疗28 d后,观察各组PD小鼠行为学改变情况,用HPLC-EC法测定纹状体中DA和DOPAC含量;用酶联免疫吸附法(ELISA)测定小鼠脑中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)的含量;用蛋白免疫印记法(Western blot)检测脑中Rho、ROCKⅡ和NF-κBp65的蛋白表达.结果:经过红景天苷的治疗后,PD小鼠均有不同程度的神经行为学改善,显著减少PD小鼠的旋转圈数,自主活动增加.明显增加脑内纹状体中DA和DOPAC含量,明显降低百草枯引起的脑内IL-1β、IL-6、TNF-α含量.Rho,ROCKⅡ和NF-κB p65蛋白含量较模型组减少.结论:红景天苷对百草枯所诱导的PD小鼠的神经行为学、神经炎症反应有改善作用,可能通过Rho/ROCKⅡ通路调节NF-κB来抑制神经炎症,从而能够缓解帕金森病的进展.%Objective: The current study was designed to investigate the neuroprotective role of salidroside and its mechanism in Parkinson's disease (PD) mice. Methods: Paraquat was used to induce PD in mice. After 28 days of treatment with salidroside, the behavior changes were observed and in the striatum, DA and DOPAC were detected by HPLC-EC, interleukin 1 beta (IL-1β), IL-6 and tumor necrosis factor alpha were detected by ELISAand the levels of Rho, ROCKⅡand NF-κB p65 protein expression were detected by Western Blot. Results: Salidroside obviously alleviated the behavior changes in PD mice and increased the DA and DOPAC, reduced the IL-1β, IL -6 and tumor necrosis factor alpha and decreased the levels of Rho, ROCKⅡand NF-kappa Bp65 protein expression in the striatum. Conclusions: Salidroside alleviated paraquat-induced PD in mice and the effects may exert through the Rho/ROCKⅡ/NF-kB signaling pathway.【总页数】4页(P179-182)【作者】周瑞;罗芬;刘静妍;张凯;朱凌鹏;王秋娟;颜天华【作者单位】中国药科大学基础医学与临床药学院生理教研室,南京 210009;中国药科大学基础医学与临床药学院生理教研室,南京 210009;中国药科大学基础医学与临床药学院生理教研室,南京 210009;中国药科大学基础医学与临床药学院生理教研室,南京 210009;中国药科大学基础医学与临床药学院生理教研室,南京210009;中国药科大学基础医学与临床药学院生理教研室,南京 210009;中国药科大学基础医学与临床药学院生理教研室,南京 210009【正文语种】中文【中图分类】R965.1【相关文献】1.红景天甙通过抑制肿瘤坏死因子-α表达对帕金森模型小鼠多巴胺能神经元的保护作用 [J], 杜欣帅;张作凤;魏子峰;张宇新2.红景天苷对MPTP-帕金森病小鼠模型自噬通路影响的实验研究 [J], 王松海;许鹏;康超;陈捷;杨晨光;谢燕华3.红景天苷对小鼠高氧肺损伤的保护作用及对Notch信号通路的调节机制研究 [J], 朱文亮;黄晓佩;邱实;冯凌霄;邵换璋4.红景天苷对MPTP诱导帕金森病动物模型保护作用的研究 [J], 蔡苗;毕倩倩;魏博;毛根祥;刘小利5.红景天苷对MPTP诱导帕金森病动物模型保护作用的研究 [J], 蔡苗;毕倩倩;魏博;毛根祥;刘小利因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。