普通光学显微镜的结构与使用方法
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实验一普通光学显微镜的结构与使用方法一、光学显微镜的基本构造(一)机械部分1、镜筒:为安装在光镜最上方或镜臂前方的圆筒状结构,其上端装有目镜,下端与物镜转换器相连。
2、物镜转换器:是安装在镜筒下方的一圆盘状构造。
其上均匀分布有3~4个圆孔,用以装载不同放大倍数的物镜。
3、镜臂:为支持镜筒和镜台的弯曲状构造,是取用显微镜时握拿的部位。
在使用临时装片时,千万不要倾斜镜臂,以免液体或染液流出,污染显微镜。
4、粗/细准焦螺旋:为调节焦距的装置,位于镜臂的上端或下端。
粗准焦螺旋可使镜筒或载物台以较快速度或较大幅度的升降,能迅速调节好焦距使物像呈现在视野中,适于低倍镜观察时的调焦。
而细准焦螺旋只能使镜筒或载物台缓慢或较小幅度的升降(升或降的距离不易被肉眼观察到),适用于高倍镜观察,一般在粗调螺旋调焦的基础上再使用细调焦螺旋,精细调节焦距。
5、载物台:是放置被观察的玻片标本的地方。
平台的中央有一圆孔,称为通光孔,来自下方光线经此孔照射到标本上。
在载物台上通常装有标本移动器(也称标本推进器),移动器上安装的弹簧夹可用于固定玻片标本,另外,转动与移动器相连的两个螺旋可使玻片标本前后左右地移动,这样寻找物像时较为方便。
6、镜柱:为镜臂与镜座相连的短柱。
7、镜座:位于显微镜最底部的构造,为整个显微镜的基座,用于支持和稳定镜体。
(二)光学系统部分光镜的光学系统主要包括物镜、目镜和照明装置(反光镜、聚光器和光圈等)。
1、目镜:又称接目镜,安装在镜筒的上端,起着将物镜所放大的物像进一步放大的作用。
常见的有5×、10×和15×(×表示放大倍数)的目镜,可根据不同的需要选择使用,最常使用的是10×目镜。
目镜的长度与放大倍数成反比。
2、物镜:也称接物镜,安装在物镜转换器上。
常用物镜的放大倍数有10×、40×和100×等几种。
物镜的放大倍数与其工作距离成反比。
【高中生物】普通光学显微镜的使用方法(一)显微镜的主要构造普通光学显微镜的结构主要分为三部分:机械部分、照明部分和光学部分。
1.机械部分(1)显微镜的底座用于支撑整个镜体。
(2)镜柱:是镜座上面直立的部分,用以连接镜座和镜臂。
(3)镜臂:一端连接镜柱,另一端连接镜筒。
它是取放显微镜时的手持部件。
(4)镜筒:连在镜臂的前上方,镜筒上端装有目镜,下端装有物镜转换器。
(5)物镜转换器(旋转器):连接在棱镜壳体下部,可自由旋转。
光盘上有3-4个圆孔,这些圆孔是安装物镜的部件。
旋转转换器,更换不同倍数的物镜。
只有在听到敲击声时才能进行观察。
此时,物镜的光轴刚好与光孔的中心对准,光路连接。
(6)镜台(载物台):在镜筒下方,形状有方、圆两种,用以放置玻片标本,中央有一通光孔,我们所用的显微镜其镜台上装有玻片标本推进器(推片器),推进器左侧有弹簧夹,用以夹持玻片标本,镜台下有推进器调节轮,可使玻片标本作左右、前后方向的移动。
(7)调节器:安装在镜柱上的两种尺寸的螺钉,用于在调整过程中使镜台上下移动。
①粗调节器(粗螺旋):大螺旋称粗调节器,移动时可使镜台作快速和较大辐度的升降,所以能迅速调节物镜和标本之间的距离使物象呈现于视野中,通常在使用低倍镜时,先用粗调节器迅速找到物象。
② 精细调节器(精细螺丝):小螺丝称为精细调节器,它可以使舞台在移动时缓慢上升和下降。
它主要用于使用大功率反射镜时,以获得更清晰的物体图像,并观察试样不同层次和深度的结构。
2.照明部分安装在镜台下,包括反射器和采光器。
(1)反光镜:装在镜座上面,可向任意方向转动,它有平、凹两面,其作用是将光源光线反射到聚光器上,再经通光孔照明标本,凹面镜聚光作用强,适于光线较弱的时候使用,平面镜聚光作用弱,适于光线较强时使用。
(2)集光器(集中器)位于镜台下方的集光器框架上,由聚光镜和光圈组成。
其功能是将光线集中在待观察的样本上。
①聚光镜:由一片或数片透镜组成,起汇聚光线的作用,加强对标本的照明,并使光线射入物镜内,镜柱旁有一调节螺旋,转动它可升降聚光器,以调节视野中光亮度的强弱。
生物学:普通光学显微镜的使用方法普通光学显微镜的构造主要分为三部分:机械部分、照明部分和光学部分。
机械部分镜座:是显微镜的底座,用以支持整个镜体。
镜柱:是镜座上面直立的部分,用以连接镜座和镜臂。
镜臂:一端连于镜柱,一端连于镜筒,是取放显微镜时手握部位。
镜筒:连在镜臂的前上方,镜筒上端装有目镜,下端装有物镜转换器。
物镜转换器(旋转器):接于棱镜壳的下方,可自由转动,盘上有3-4个圆孔,是安装物镜部位,转动转换器,可以调换不同倍数的物镜,当听到碰叩声时,方可进行观察,此时物镜光轴恰好对准通光孔中心,光路接通。
镜台(载物台):在镜筒下方,形状有方、圆两种,用以放置玻片标本,中央有一通光孔,我们所用的显微镜其镜台上装有玻片标本推进器(推片器),推进器左侧有弹簧夹,用以夹持玻片标本,镜台下有推进器调节轮,可使玻片标本作左右、前后方向的移动。
调节器:是装在镜柱上的大小两种螺旋,调节时使镜台作上下方向的移动。
粗调节器(粗螺旋):大螺旋称粗调节器,移动时可使镜台作快速和较大辐度的升降,所以能迅速调节物镜和标本之间的距离使物象呈现于视野中,通常在使用低倍镜时,先用粗调节器迅速找到物象。
照明部分装在镜台下方,包括反光镜,集光器。
反光镜:装在镜座上面,可向任意方向转动,它有平、凹两面,其作用是将光源光线反射到聚光器上,再经通光孔照明标本,凹面镜聚光作用强,适于光线较弱的时候使用,平面镜聚光作用弱,适于光线较强时使用。
集光器(聚光器)位于镜台下方的集光器架上,由聚光镜和光圈组成,其作用是把光线集中到所要观察的标本上。
聚光镜:由一片或数片透镜组成,起汇聚光线的作用,加强对标本的照明,并使光线射入物镜内,镜柱旁有一调节螺旋,转动它可升降聚光器,以调节视野中光亮度的强弱。
光学部分目镜:装在镜筒的上端,通常备有2-3个,上面刻有5*、10*或15*符号以表示其放大倍数,一般装的是10*的目镜。
物镜:装在镜筒下端的旋转器上,一般有3-4个物镜,其中最短的刻有“10*”符号的为低倍镜,较长的刻有“40*”符号的为高倍镜,最长的刻有“100*”符号的为油镜,此外,在高倍镜和油镜上还常加有一圈不同颜色的线,以示区别。
一、光学显微镜的组成结构光学显微镜包括光学系统和机械装置两大部分,而数码显微镜还包括数码摄像系统,现分述如下:(一)机械装置1.机架显微镜的主体部分,包括底座和弯臂。
2.目镜筒位于机架上方,靠圆形燕尾槽与机架固定,目镜插在其上。
根据有否摄像功能,可分为双目镜筒和三目镜筒;根据瞳距的调节方式不同,可分为铰链式和平移式。
3.物镜转换器它是一个旋转圆盘,上有3~5个孔,分别装有低倍或高倍物镜镜头。
转动物镜转换器就可让不同倍率的物镜进入工作光路。
4.载物台是放置玻片的平台,其中央具有通光孔。
台上有一个弹性的标本夹,用来夹住载玻片。
右下方有移动手柄,使载物台面可在XY双方向进行移动。
5.调焦机构利用调焦手轮可以驱动调焦机构,使载物台作粗调和微调的升降运动,从而使被观察物体对焦清晰成像。
6.聚光器调节机构聚光器安装在其上,调节螺旋可以使聚光器升降,用以调节光线的强弱。
(二)光学系统1.目镜它是插在目镜筒顶部的镜头,由一组透镜组成,可以使物镜成倍地分辨、放大物像,例如10X、15X等。
按照所能看到的视场大小,目镜可分为视场较小的普通目镜,和视场较大的大视场目镜(或称广角目镜)两类。
较高档显微镜的目镜上还装有视度调节机构,操作者可以方便快捷地对左右眼分别进行视度调整;此外,在这些目镜上可以加装测量分划板,测量分划板的象总能清晰地调焦在标本的焦面上;并且,为了防止目镜被取走以及减少运输中被损坏的可能性,这些目镜可以被锁定。
2.物镜它安装在转换器的孔上,也是由一组透镜组成的,能够把物体清晰地放大。
物镜上刻有放大倍数,主要有10X、40X、60X、100X等。
高倍物镜中多采用浸液物镜,即在物镜的下表面和标本片的上表面之间填充折射率为1.5左右的液体(如杉木油),它能显著的提高显微观察的分辨率。
3.光源有卤素灯、钨丝灯、汞灯、荧光灯、金属卤化物灯等。
4.聚光器包括聚光镜、孔径光阑。
聚光镜由透镜组成,它可以集中透射过来的光线,使更多的光能集中到被观察的部位。
实训三普通光学显微镜的结构与使用方法一、实验目的1、熟悉普通光学显微镜的主要构造及其性能;2、掌握低倍镜及高倍镜的使用方法;3、初步掌握油镜的使用方法;二、实验原理普通光学显微镜要由机械系统和光学系统两部分构成(图2-1)。
机械装置包括镜座、镜筒、物镜转换器、载物台、升降手轮、微调焦手轮、光圈等部件;光学系统由物镜、目镜、聚光镜、下聚光镜等组成。
(一)机械装置主要部件介绍1、镜座镜座是显微镜底座,用以支撑全镜。
其上装有电源开关、照明光源、保险丝、光源滑动变阻器等。
2、镜筒镜筒连接目镜和转换器,使光线从筒中通过。
安装目镜的镜筒分为可调式的单筒和固定式的双筒两种。
从镜筒上缘到物镜转换器螺旋口之间的距离称为筒长。
国际上将显微镜的标准筒长定为160mm,此数字标在物镜的外壳上。
3、物镜转换器转换器上可安装3-5个物镜,一般是3个物镜(低倍镜、高倍镜、油镜)。
转动转换器时,可以按需要调换各种物镜,推到使用位置上。
4、载物台载物台呈长方形,中央有一孔,为光线通路。
在台上装有弹簧标本夹和推进器。
5、推进器推进器由一横一纵两个推进齿轴和齿条构成,转动其上螺旋,可使标本片向前、后、左、右移动。
研究型显微镜的纵横架杆上刻有刻度标尺,构成精密的平面坐标系。
6、升降手轮又称为粗调螺旋,用于粗放调节物镜和标本之间的距离。
使用显微镜观察标本时,主要使用粗调螺旋调节。
7、微调焦手轮又称为微调螺旋,用粗调螺旋只能粗放地调节焦距,难于观察到清晰的物象,因而需要用微调螺旋做进一步调节。
每转动一周,镜筒移动0.1mm。
原则上,微调螺旋每次旋转不超过一周。
8、光圈在聚光器下方,可任意开闭,用来调节射入聚光器光线强弱。
(二)光学系统部件介绍1、接物镜简称物镜,安装于转换器上,入射光线通过物镜时使被检物象形成第一次放大的实像。
在光系统中,物镜的性能最为关键,它直接影响着显微镜的分辨率。
普通显微镜装有低倍镜(10×)、高倍镜(40×)和油镜(100×)三种消色差物镜。
光学显微镜的结构与使用方法一、光学显微镜的结构:光源系统:光源系统是为了将光源产生的光线引导到样品上,并提供足够的亮度,使样品上的细小结构清晰可见。
常见的光源有白炽灯、氙气灯、LED灯等。
在光源系统中还有反光镜(凹面镜),反光镜用于反射光源产生的光线。
光学系统:光学系统主要由物镜和目镜构成。
物镜是用来形成物体的放大影像的光学元件,通常有多种倍率可供选择。
目镜是用来接收形成的物体放大影像进行观察的光学元件。
物镜和目镜之间通过内管相互连接,形成光路系统。
调焦系统:调焦系统是用来调节物镜与样品之间的距离,以便获得更清晰的图像。
常见的调焦系统有粗调焦和细调焦。
粗调焦用于快速调节焦距,而细调焦用于微调焦距。
在调焦系统中,还常常有一个旋转的镜筒,用来装配和固定物镜和目镜,也可以根据需要旋转以换取不同的物镜。
图像形成和观察系统:图像形成和观察系统主要由目镜和眼睛组成。
物体放大后的图像通过目镜传送到眼睛进行观察。
通常显微镜上有两个目镜,可以使用双目观察,提高观察舒适度。
支撑结构:支撑结构用于固定和支撑光源系统、光学系统和调焦系统。
支撑结构通常由底座、支柱、臂和台面等组成,保证整个显微镜的稳定性。
二、光学显微镜的使用方法:1.准备工作:将显微镜稳固地放在台面上,将光源系统调整到合适的亮度。
检查物镜和目镜是否清洁,如果有污迹可以使用适当的清洁布小心地将其擦拭干净。
2.样品准备:准备好待观察的样品,确保样品干燥、清洁,可以使用盖玻片或载玻片将样品封装起来。
3.调焦:先使用粗调焦将物镜与样品保持适当的距离,然后通过旋转调焦手柄使物镜逐渐靠近样品,直到样品变得清晰可见。
接下来使用细调焦进行微调,以获得更清晰的图像。
4.观察:通过目镜或双目镜仔细观察样品,可以使用移动台面或显微镜的移动装置调整样品的位置,使观察到的部分处于视野的中央位置。
5.重点调焦:如果需要观察样品的不同部分,可以使用旋转镜筒换取不同倍率的物镜,并重新调焦。
光学显微镜的构造和使用一、光学显微镜的构造1. 物镜(Objective Lens):物镜是显微镜最重要的部分之一,它位于底部并接近被观察的物体。
物镜由多个透镜组成,通常有多个放大倍数可供选择。
2. 目镜(Eyepiece Lens):目镜是显微镜上方的镜头,人眼通过它观察被物镜放大的物体。
目镜通常有10倍的放大倍数。
3. 轴(Axis):显微镜的轴是连接物镜和目镜的部分,它允许光线在两个镜头之间传播。
轴还含有位于特定焦距位置的光阑(Aperture),用于控制光线的数量和角度,以增加图像的清晰度和对比度。
4. 支架(Stage):支架是物体放置平台,通常位于物镜下方。
样本可以放置在支架上,并通过微动装置(Coarse/Fine Adjustment Knobs)控制上下运动。
5. 照明系统(Illumination System):照明系统通常由一个光源和一组透镜组成,用于照亮样本。
光源可以是白炽灯、荧光灯或LED等。
二、光学显微镜的使用方法使用光学显微镜需要一定的技巧和步骤,下面是一般的使用方法:1.调整光源:首先,打开光源,并调整照明系统以获得所需的亮度和对比度。
可以使用光源控制旋钮或切换按钮进行调整。
2.放置样本:将样本放置在支架上,并使用微动装置将其调整到物镜直接下方。
确保样本位于轴上的中心位置。
3. 调整目镜:通过观察目镜,使用调焦轮(Fine Adjustment Knob)和粗调焦轮(Coarse Adjustment Knob)来将样本初步聚焦。
4.调整物镜:选择较低的放大倍数的物镜,通过调整物镜旁边的切换钮或旋钮来切换物镜。
随后,使用调焦轮进行细调,使图像逐渐变得清晰。
5.调整光阑:在确定最佳清晰度后,可以尝试使用光阑来控制被观察物体的角度和数量。
适当调整光阑可以增加图像的对比度和细节。
6.观察和记录:通过目镜观察样本,记录感兴趣的结构和现象。
可以使用标尺或目镜上的刻度来测量样本的尺寸。
普通光学显微镜的结构及使用光源是显微镜中用于照明样本的光源,常见的光源主要有白炽灯、汞灯、钨丝灯等。
光源通过一系列透镜和光学器件进入同轴光学系统。
同轴光学系统是显微镜中光学部分的核心,包括几组透镜和光学器件,用于采集、聚焦和放大样本的光线。
这些透镜和光学器件包括凹透镜、凸透镜、控制光的光阑等,它们的作用是对通过的光线进行调节,以获得清晰的像。
物镜是显微镜中放置在样本下方的透镜,用于放大样本的细节。
根据放大倍数的不同,物镜可分为低倍物镜、中倍物镜和高倍物镜。
常用的物镜有4倍、10倍、40倍和100倍等。
目镜是显微镜中放置在镜筒顶部的透镜,用于观察物镜放大的图像。
目镜常用的放大倍数一般为10倍。
镜筒是显微镜中光学装置的保护部分,通常由金属或塑料制成。
镜筒内部装有目镜和物镜,并且可通过调节装置进行上下调节。
台架是显微镜的支撑结构,通常由金属材料制成,具有稳定性和可移动性。
在台架上还可以放置样本盘,以放置样本。
调节装置是用于调节镜筒和物镜相对位置的装置,以实现对样本的清晰观察和对焦调节。
通常包括粗调节和细调节两个部分。
使用普通光学显微镜时,首先将样本放置在样本盘上,并调节样本位置使其位于镜筒下方。
然后,打开光源,通过同轴光学系统调节光线的方向和强弱,使其能够照亮样本。
接着,通过调节装置将物镜逐渐移到样本上方,观察和调节目镜,直到得到所需放大倍数的清晰图像。
最后,通过调节装置对焦,使得样本的细节能够清晰可见。
使用过程中,可以通过调节光源、物镜和调节装置等来获得不同的观察效果。
总体来说,普通光学显微镜的结构相对简单,使用也相对容易。
它可以提供高分辨率和大视野的图像,可以帮助我们更好地观察和研究微小世界,从而深入了解物质的微观结构和性质。
实验一普通光学显微镜的结构与使用方法【目的要求】1、熟悉普通光学显微镜的主要构造及其性能。
2、掌握低倍镜及高倍镜的使用方法。
3、初步掌握油镜的使用方法。
4、了解光学显微镜的维护方法。
【实验原理】光学显微镜(light microscope)是生物科学和医学研究领域常用的仪器,它在细胞生物学、组织学、病理学、微生物学及其他有关学科的教学研究工作中有着极为广泛的用途,是研究人体及其他生物机体组织和细胞结构强有力的工具。
光学显微镜简称光镜,是利用光线照明使微小物体形成放大影像的仪器。
目前使用的光镜种类繁多,外形和结构差别较大,有些类型的光镜有其特殊的用途,如暗视野显微镜、荧光显微镜、相差显微镜,倒置显微镜等,但其基本的构造和工作原理是相似的。
一台普通光镜主要由机械系统和光学系统两部分构成,而光学系统则主要包括光源、反光镜、聚光器、物镜和目镜等部件。
光镜是如何使微小物体放大的呢?物镜和目镜的结构虽然比较复杂,但它们的作用都是相当于一个凸透镜,由于被检标本是放在物镜下方的1~2倍焦距之间的,上方形成一倒立的放大实相,该实相正好位于目镜的下焦点(焦平面)之内,目镜进一步将它放大成一个虚像,通过调焦可使虚像落在眼睛的明视距离处,在视网膜上形成一个直立的实像。
显微镜中被放大的倒立虚像与视网膜上直立的实像是相吻合的,该虚像看起来好像在离眼睛25cm处。
分辨力是光镜的主要性能指示。
所谓分辨力(resolving power)也称为辨率或分辨本领,是指显微镜或人眼在25cm的明视距离处,能清楚地分辨被检物体细微结构最小间隔的能力,即分辨出标本上相互接近的两点间的最小距离的能力。
据测定,人眼的分辨力约为100 µm。
显微镜的分辨力由物镜的分辨力决定,物镜的分辨力就是显微镜的分辨力,而目镜与显微镜的分辨力无关。
光镜的分辨力(R)(R值越小,分辨率越高)可以下式计算:这里n为聚光镜与物镜之间介质的折射率(空气为1、油为1.5);θ为标本对物镜镜口张角的半角,sin的最大值为1;λ为照明光源的波长(白光约为0.5m)。
放大率或放大倍数是光镜性能的另一重要参数,一台显微镜的总放大倍数等于目镜放大倍数与物镜放大倍数的乘积。
【器材与试剂】普通光学显微镜、擦镜纸、香柏油或液体石蜡(石蜡油)、羊毛交叉装片、英文字母或数字的装片、清洁剂(乙醚7份 + 无水乙醇3份)、二甲苯。
【内容与方法】一、光学显微镜的基本构造及功能(一)机械部分1、镜筒:为安装在光镜最上方或镜臂前方的圆筒状结构,其上端装有目镜,下端与物镜转换器相连。
根据镜筒的数目,光镜可分为单筒式或双筒式两类。
单筒光镜又分为直立式和倾斜式两种。
而双筒式光镜的镜筒均为倾斜的。
镜筒直立式光镜的目镜与物镜的中心线互成45度角,在其镜筒中装有能使光线折转45度的棱镜。
2、物镜转换器:又称物镜转换盘。
是安装在镜筒下方的一圆盘状构造,可以按顺时针或反时针方向自由旋转。
其上均匀分布有3~4个圆孔,用以装载不同放大倍数的物镜。
转动物镜转换盘可使不同的物镜到达工作位置(即与光路合轴)。
使用时注意凭手感使所需物镜准确到位。
3、镜臂:为支持镜筒和镜台的弯曲状构造,是取用显微镜时握拿的部位。
镜筒直立式光镜在镜臂与其下方的镜柱之间有一倾斜关节,可使镜筒向后倾斜一定角度以方便观察,但使用时倾斜角度不应超过45度,否则显微镜则由于重心偏移容易翻倒。
在使用临时装片时,千万不要倾斜镜臂,以免液体或染液流出,污染显微镜。
4、调焦器:也称调焦螺旋,为调节焦距的装置,位于镜臂的上端(镜筒直立式光镜)或下端(镜筒倾斜式光镜),分粗调螺旋(大螺旋)和细调螺旋(小螺旋)两种。
粗调螺旋可使镜筒或载物台以较快速度或较大幅度的升降,能迅速调节好焦距使物像呈现在视野中,适于低倍镜观察时的调焦。
而细调螺旋只能使镜筒或载物台缓慢或较小幅度的升降(升或降的距离不易被肉眼观察到),适用于高倍镜和油镜的聚焦或观察标本的不同层次,一般在粗调螺旋调焦的基础上再使用细调焦螺旋,精细调节焦距。
有些类型的光镜,粗调螺旋和细调螺旋重合在一起,安装在镜柱的两侧。
左右侧粗调螺旋的内侧有一窄环,称为粗调松紧调节轮,其功能是调节粗调螺旋的松紧度(向外转偏松,向内转偏紧)。
另外,在左侧粗调螺旋的内侧有一粗调限位环凸柄,当用粗调螺旋调准焦距后向上推紧该柄,可使粗调螺旋限位,此时镜台不能继续上升但细调旋仍可调节。
5、载物台:也称镜台,是位于物镜转换器下方的方形平台,是放置被观察的玻片标本的地方。
平台的中央有一圆孔,称为通光孔,来自下方光线经此孔照射到标本上。
在载物台上通常装有标本移动器(也称标本推进器),移动器上安装的弹簧夹可用于固定玻片标本,另外,转动与移动器相连的两个螺旋可使玻片标本前后左右地移动,这样寻找物像时较为方便。
在标本移动器上一般还附有纵横游标尺,可以计算标本移动的距离和确定标本的位置。
游标尺一般由主标尺(A)和副标尺(B)组成。
副标尺的分度为主标尺的9/10。
使用时先看到标尺的0点位置,再看主副标尺刻度线的重合点即可读出准确的数值.图1-2 游标尺的使用方法示意图6、镜柱:为镜臂与镜座相连的短柱。
7、镜座:位于显微镜最底部的构造,为整个显微镜的基座,用于支持和稳定镜体。
有的显微镜在镜座内装有照明光源等构造。
(二)光学系统部分光镜的光学系统主要包括物镜、目镜和照明装置(反光镜、聚光器和光圈等)。
1、目镜:又称接目镜,安装在镜筒的上端,起着将物镜所放大的物像进一步放大的作用。
每个目镜一般由两个透镜组成,在上下两透镜(即接目透镜和会聚透镜)之间安装有能决定视野大小的金属光阑——视场光阑,此光阑的位置即是物镜所放大实像的位置,故可将一小段头发粘附在光阑上作为指针,用以指示视野中的某一部分供他人观察。
另外,还可在光阑的上面安装目镜测微尺。
每台显微镜通常配置2~3个不同放大倍率的目镜,常见的有5×、10×和15×(×表示放大倍数)的目镜,可根据不同的需要选择使用,最常使用的是10×目镜。
2、物镜:也称接物镜,安装在物镜转换器上。
每台光镜一般有3~4之个不同放大倍率的物镜,每个物镜由数片凸透镜和凹透镜组合而成,是显微镜最主要的光学部件,决定着光镜分辨力的高低。
常用物镜的放大倍数有10×、40×和100×等几种。
一般将8×或10×的物镜称为低倍镜(而将5×以下的叫做放大镜);将40×或45×的称为高倍镜;将90×或100×的称为油镜(这种镜头在使用时需浸在镜油中)。
在每个物镜上通常都刻有能反映其主要性能的参数,主要有放大倍数和数值孔径(如10/0.25、40/0.65和100/1.25),该物镜所要求的镜筒长度和标本上的盖玻片厚度(160/0.17,单位 mm)等,另外,在油镜上还常标有“油”或“Oil”的字样。
油镜在使用时需要用香柏油或石蜡油作为介质,这是因为油镜的透镜和镜孔较小,而光线要通过载玻片和空气才能进入物镜中,玻璃与空气的折光率不同,使部分光线产生折射而损失掉,导致进入物镜的光线减少,而使视野暗淡,物像不清。
在玻片标本和油镜之间填充折射率与玻璃近似的香柏油或石蜡油时(玻璃、香柏油和石蜡油的折射率分别为1.52、1.51、1.46,空气为1),可减少光线的折射,增加视野亮度,提高分辨率。
物镜分辨力的大小取决于物镜的数值孔径(numerial aperture,N.A.),N.A.又称为镜口率,其数值越大,则表示分辨力越高。
图1-3 物镜的性能参数及工作距离C 线为盖玻片的的上表面,10⨯物镜的工作距离为7.63mm;40⨯物镜的工作距离为0.198mm;10/0.25、40/0.65、100/1.25表示镜头的放大倍数和数字孔径。
160/0.17表示显微镜的机械镜筒长度(标本至目镜的距离)和盖玻片的厚度。
即镜筒长度为160mm,盖玻片厚度为0.17mm。
不同的物镜有不同的工作距离。
所谓工作距离是指显微镜处于工作状态(焦距调好、物像清晰)时,物镜最下端与盖玻片上表面之间的距离。
物镜的放大倍数与其工作距离成反比。
当低倍镜被调节到工作距离后,可直接转换高倍镜或油镜,只需要用细调螺旋稍加调节焦距便可见到清晰的物像,这种情况称为同高调焦。
不同放大倍数的物镜也可从外形上加以区别,一般来说,物镜的长度与放大倍数成正比,低倍镜最短,油镜最长,而高倍镜的长度介于两者之间。
表1-1 标准物镜的性质3、聚光器:位于载物台的通光孔的下方,由聚光镜和光圈构成,其主要功能是光线集中到所要观察的标本上。
聚光镜由2~3个透镜组合而成,其作用相当于一个凸透镜,可将光线汇集成束。
在聚光器的左下方有一调节螺旋可使其上升或下降,从而调节光线的强弱,升高聚光器可使光线增强,反之则光线变弱。
光圈也称为彩虹阑或孔径光阑,位于聚光器的下端,是一种能控制进入聚光器的光束大小的可变光阑。
它由十几张金属薄片组合排列而成,其外侧有一小柄,可使光圈的孔径开大或缩小,以调节光线的强弱。
在光圈的下方常装有滤光片框,可放置不同颜色的滤光片。
4、反光镜:位于聚光镜的下方,可向各方向转动,能将来自不同方向的光线反射到聚光器中。
反光镜有两个面,一面为平面镜,另一面为凹面镜,凹面镜有聚光作用,适于较弱光和散射光下使用,光线较强时则选用平面镜(现在有些新型的光学显微镜都有自带光源,而没有反光镜;有的二者都配置)。
二、光学显微镜的使用方法(-)准备将显微镜小心地从镜箱中取出(移动显微镜时应以右手握住镜壁,左手托住镜座),放置在实验台的偏左侧,以镜座的后端离实验台边缘约6~10cm为宜。
首先检查显微镜的各个部件是否完整和正常。
如果是镜筒直立式光镜,可使镜筒倾斜一定角度(一般不应超过45度)以方便观察(观察临时装片时禁止倾斜镜臂)。
(二)低倍镜的使用方法1、对光:打开实验台上的工作灯(如果是自带光源显微镜,这时应该打开显微镜上的电源开关),转动粗调螺旋,使镜筒略升高(或使载物台下降),调节物镜转换器,使低倍镜转到工作状态(即对准通光孔),当镜头完全到位时,可听到轻微的扣碰声。
打开光圈并使聚光器上升到适当位置(以聚光镜上端透镜平面稍低于载物台平面的高度为宜)。
然后用左眼向着目镜内观察(注意两眼应同时睁开),同时调节反光镜的方向(自带光源显微镜,调节亮度旋钮),使视野内的光线均匀、亮度适中。
2、放置玻片标本:将玻片标本放置到载物台上用标本移动器上的弹簧夹固定好(注意:使有盖玻片或有标本的一面朝上),然后转动标本移动器的螺旋,使需要观察的标本部位对准通光孔的中央。
3、调节焦距:用眼睛从侧面注视低倍镜,同时用粗调螺旋使镜头下降(或载物台上升),直至低倍镜头距玻片标本的距离小于0.6cm(注意操作时必须从侧面注视镜头与玻片的距离,以避免镜头碰破玻片)。