染色体病诊断技术

胎儿常见染色体异常与开放性神经管缺陷的产前筛查与诊断技术标准——中孕期母血清学产前筛查１范围WS322的本部分规定了中孕期母血清学产前筛查的工作程序、知情同意书、筛查资料和标本的采集、实验室检测、结果的告知及对高风险孕妇的处理和追踪随访等要求。

本部分适用于对分娩时年龄在35岁以下的中孕期孕妇进行胎儿常见染色体异常（唐氏综合征与18—三体综合征）和开放性神经管缺陷的血清学产前筛查。

２规范性引用文件下列文件对于本标准的应用是必不可少的。

凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。

凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

WS／T247甲型胎儿球蛋白检测产前监测和开放性神经管缺损诊断准则WS／T250临床实验室质量保证的要求。

３术语和定义下列术语和定义适用于本文件。

3.1常见胎儿染色体异常染色体疾病是导致新生儿出生缺陷最多见的一类遗传性疾病。

染色体病约有近400种，其中常见的有60多种，主要的染色体异常为21—三体（唐氏综合征）、18—三体综合征和13—三体综合征以及性染色体的异常，其次为染色体结构的异常。

3.2开放性神经管缺陷孕4周左右胚胎神经管未闭合导致，依据缺陷的部位和严重程度而临床表现不同，开放性神经管缺陷包括无脑儿和开放性脊柱裂，前者为致命性的，可导致流产、死胎或死产，后者可出现瘫痪，二便失禁等症状。

3.3中孕期孕13～20＋６周，中孕期筛查时限通常指孕15～20＋６周。

3.4产前筛查通过简便、经济和较少创伤的检测方法，从孕妇群体中发现某些有先天性缺陷和遗传性疾病胎儿的高风险孕妇，以便进一步明确诊断。

3.5中孕期母血清学产前筛查通过中孕期母体血清甲胎蛋白、血清人绒毛膜促性腺激素、血清人绒毛膜促性腺激素游离p亚基、抑制素Ａ和非结合雌三醇指标结合孕妇的年龄、体重、孕周、病史等进行综合风险评估，得出胎儿罹患唐氏综合征、18三体综合征和开放性神经管缺陷的风险度。

４产前筛查工作程序产前筛查工作应由经过专门培训的并已经取得产前筛查资质的医疗保健机构和医务人员承担。

染色体病快速产前诊断技术的研究进展【摘要】染色体病是由于染色体数目或结构畸变而引起的疾病，目前尚无有效的治疗方法。

产前诊断是防止染色体病患儿出生的有效方法。

为了快速、准确的诊断染色体病，一系列的分子细胞遗传学技术如荧光原位杂交（FISH）、定量荧光聚合酶链式反应（QF-PCR）、多重连接依赖探针扩增（MLPA）、微阵列比较基因组杂交（aCGH）等被广泛应用于产前诊断。

本文主要对这些技术在染色体病快速产前诊断中的研究进展做一综述。

【关键词】染色体病；快速产前诊断; 研究进展【中图分类号】R714.5【文献标识码】A【文章编号】2096-0867（2016）12-189-02产前诊断又称宫内诊断，是指在遗传咨询、诊断基础上，对高风险和严重危害性的胚胎或胎儿，在出生前对可识别的遗传性疾病进行检测，最大限度减少遗传病的出现，做出准确诊断[1]。

产前诊断的范畴包括染色体病、单基因病、多基因病以及各种环境致畸因子所致的先天畸形。

其中染色体病是由于染色体异常所引起的一类遗传性疾病，在新生儿中发病率约占0.5%。

传统的产前诊断方法是对羊膜腔穿刺获得羊水细胞或是绒毛抽吸获得的绒毛细胞进行培养，对染色体有丝分裂期的核分裂相进行核型分析，从而准确地诊断各种染色体数目和结构异常。

但是常规的染色体核型分析方法存在细胞培养时间长、易受培养条件限制、技术难度大等局限性。

随着分子细胞遗传学技术的迅速发展，更快速、高效的分子产前诊断技术正在逐渐应用于临床。

本文就目前临床应用最广泛的荧光原位杂交（FISH）、定量荧光PCR技术（QF-PCR）、多重连接依赖探针扩增技术（MLPA）、微阵列比较基因组杂交（aCGH）等技术的研究进展做一综述。

1 荧光原位杂交技术（fluorescence in situ hybridization，FISH）FISH 技术是细胞遗传学、分子生物学及免疫学相结合的基础上发展起来的一种新技术。

1992年Klinger等[1]首次研究报道使用FISH技术对未培养的羊水间期细胞进行了染色体非整倍性异常检测，将产前诊断时间缩短到24~28h。

*基金项目：广西壮族自治区卫生健康委员会科研课题项目（Z20201084）①梧州市妇幼保健院　广西　梧州　543002染色体核型分析联合CNV-seq技术在NIPT高危孕妇产前诊断中的临床应用研究进展*黎永鉴①　闫丽琼①　朱昭颖① 【摘要】　染色体核型分析联合拷贝数变异测序（CNV-seq）技术对非侵入性产前检测（NIPT）高危孕妇进行产前诊断，检出胎儿的严重遗传缺陷，并在知情同意下行临床干预，是近年临床预防出生缺陷的常用手段。

NIPT 技术由于其敏感性高、特异性高、准确性高及无创性等优势，近年逐渐成为临床产前筛查的主流检测技术。

传统的染色体核型分析技术，在细胞遗传学领域一直是确诊染色体畸变的“金标准”。

长期以来，该技术是染色体病的产前诊断主要方法，染色体核型分析主要局限性是对染色体的微小结构变异和基因变异不能有效检出。

CNV-seq 技术不但能准确检出常规的染色体异常，而且能对未知来源的染色体片段提供更为精准的检测信息，特别是5 Mb 片段以下的染色体微缺失/微重复，但CNV-seq 技术缺点是不能检出平衡易位和倒位等染色体异常，因此两种产前诊断技术的优缺点可互为补充。

染色体核型分析联合CNV-seq 技术进行产前诊断，将会为NIPT 高危孕妇提供更为精确可靠的产前诊断结果，减少出生缺陷。

本文将对染色体核型分析联合CNV-seq 技术在NIPT 高危孕妇产前诊断中的临床应用做简要综述，为临床工作提供参考。

【关键词】　非侵入性产前检测　高危孕妇　染色体核型分析　拷贝数变异　二代测序技术　染色体畸变　产前诊断 doi：10.14033/ki.cfmr.2023.19.046 文献标识码　A 文章编号　1674-6805（2023）19-0180-05 Progress in Clinical Application of Chromosome Karyotype Analysis Combined with CNV-seq Technique in Prenatal Diagnosis of NIPT High-risk Pregnant Women/LI Yongjian, YAN Liqiong, ZHU Zhaoying. //Chinese and Foreign Medical Research, 2023, 21(19): 180-184 [Abstract]　In recent years, chromosome karyotype analysis combined with copy number variation sequencing (CNV-seq) technology is a common means of clinical prevention of birth defects in non-invasive prenatal testing (NIPT) high-risk pregnant women for prenatal diagnosis, detection of fetal serious genetic defects, and clinical intervention after informed consent. Due to its advantages of high sensitivity, specificity, accuracy, and non-invasive, noninvasive prenatal test (NIPT) technology has gradually become the mainstream technology for clinical prenatal screening in recent years. Chromosome karyotype analysis technology has always been considered as the "gold standard" for diagnosing chromosomal aberrations, and is also a first-line method for prenatal diagnosis of chromosomal diseases. The main limitation of chromosome karyotype analysis is that it can not effectively detect the small structural and genetic variations of chromosomes. CNV-seq technology can not only detect conventional chromosome number and structural abnormalities, but also provide more accurate detection information for chromosome fragments from unknown sources. Microdeletion and microduplication of chromosome fragments above 5 Mb can also be detected. However, CNV-seq technology has limitations such as inability to detect balanced translocation and inversion of chromosomes, so the advantages and disadvantages of the two prenatal diagnostic techniques can complement each other. Traditional karyotype analysis combined with CNV-seq technology for prenatal diagnosis will provide more accurate and reliable prenatal diagnosis results for NIPT high-risk pregnant women and reduce birth defects. This article will briefly review the clinical application of chromosome karyotype analysis combined with CNV-seq technology in prenatal diagnosis of NIPT high-risk pregnant women, providing reference for clinical work. [Key words]　Noninvasive prenatal test　High-risk pregnant women　Chromosome karyotype analysis　Copy number variation　Second generation sequencing technology　Chromosome aberration　Prenatal diagnosis First-author's address: Wuzhou Maternal and Child Health Hospital, Wuzhou 543002, China 据《中国出生缺陷防治报告》（2012年）等所示，我国的出生缺陷发生率约为5.6%，每小时就有103例缺陷儿出生[1-3]。

人类遗传疾病的诊断与预防遗传疾病是由遗传因素引起的疾病，包括单基因遗传病、染色体病和多基因遗传病。

人类遗传疾病的诊断与预防是生物学领域的重要研究内容，旨在减少遗传疾病的发生率和减轻患者痛苦。

1.遗传疾病的类型–单基因遗传病：由单个基因突变引起，如囊性纤维化、先天性聋哑等。

–染色体病：由染色体结构或数目异常引起，如唐氏综合症、克里费尔特综合症等。

–多基因遗传病：由多个基因突变引起，如心血管疾病、肿瘤等。

2.遗传疾病的诊断方法–遗传咨询：通过家族史调查，评估遗传疾病风险，提供预防、诊断和治疗建议。

–基因检测：通过分子生物学技术，检测基因突变或染色体异常。

–生物标志物检测：通过检测特定生物标志物，评估遗传疾病风险。

3.遗传疾病的预防策略–避免高风险遗传疾病家族成员的婚配。

–开展遗传疾病筛查，及时发现和干预。

–提高公众对遗传疾病的认识，加强遗传咨询和基因检测。

–实施产前诊断，及时发现胎儿遗传疾病，提供终止妊娠的选择。

–开展新生儿筛查，早期发现遗传疾病，及时进行干预治疗。

4.遗传疾病治疗策略–药物治疗：针对基因突变的药物治疗，如囊性纤维化患者的药物治疗。

–基因治疗：通过基因工程技术，修复或替换异常基因，如镰状细胞贫血的治疗。

–干细胞移植：通过移植正常干细胞，替代异常细胞，如重型地中海贫血的治疗。

–外科手术：针对染色体病，进行染色体核型调整手术，如克里费尔特综合症的手术治疗。

5.我国人类遗传疾病诊断与预防政策–实施《中华人民共和国遗传工程安全管理条例》，规范遗传工程研究和应用。

–开展全国性遗传疾病筛查项目，提高遗传疾病诊断和预防水平。

–加强遗传咨询和基因检测服务，提高公众遗传意识。

–鼓励科研机构开展人类遗传疾病研究，推动新技术研发和应用。

6.人类遗传疾病研究发展趋势–基因测序技术的发展：高通量测序技术逐渐取代传统测序方法，为遗传疾病研究提供更多数据。

–生物信息学的发展：生物信息学手段在遗传疾病研究中的应用，提高遗传疾病诊断和预测准确性。

免疫组织染色体病理检查-概述说明以及解释1.引言1.1 概述免疫组织染色体病理检查是一种重要的实验室技术，用于检测和诊断疾病中的染色体异常。

染色体异常在许多疾病中起着关键作用，包括遗传性疾病、癌症和自身免疫疾病等。

通过观察和分析染色体的结构和数量变化，可以帮助医生准确诊断疾病的类型和病情严重程度。

免疫组织染色体病理检查是一项复杂的技术，需要经过专门训练的技术人员进行操作。

通过染色体分析，可以发现例如三体综合征、爱德华综合征和唐氏综合征等常见的染色体异常。

此外，免疫组织染色体病理检查还可以帮助研究人员探索疾病的发病机制，为疾病的治疗和预防提供重要的参考依据。

在本文中，我们将深入探讨免疫组织染色体病理检查的意义、方法以及在临床中的应用，希望能为读者提供更深入的了解和参考。

1.2 文章结构：本文主要包括以下部分：- 引言：介绍免疫组织染色体病理检查的背景和意义。

- 正文：详细讨论免疫组织染色体病理检查的意义、方法和在临床中的应用。

- 结论：总结本文的主要内容，展望未来免疫组织染色体病理检查的发展方向，提出结论。

构部分的内容1.3 目的：本文的主要目的是探讨免疫组织染色体病理检查在临床诊断中的重要性及应用价值。

通过深入了解该检查方法的意义、具体操作步骤以及在临床实践中的应用案例，旨在为临床医生提供更准确、快速地诊断指导，提高医疗诊断效率和准确性。

同时，本文也希望能够引起更多医学从业者对免疫组织染色体病理检查的重视和关注，促进其在临床实践中的广泛应用和推广。

2.正文2.1 免疫组织染色体病理检查的意义2.2 免疫组织染色体病理检查的方法免疫组织染色体病理检查的方法主要包括以下几个步骤：1. 组织标本制备：首先需要获取患者的组织标本，通常是通过活检或手术获取。

然后将组织标本固定在载玻片或载玻片上，以便后续的染色和观察。

2. 组织切片：将固定的组织标本用微波热处理或酶解等方法处理后，通过旋转刀或切片机将组织切成薄片，通常厚度在3-5微米之间。

·综述·《中国产前诊断杂志（电子版）》　２０１２年第４卷第４期常见染色体病的快速产前诊断方法陶华娟　张艳　郎翠红（潍坊市妇幼保健院遗传科，山东潍坊　２６００１１）【中图分类号】　Ｒ７１４．５５ 【文献标志码】　Ａ１　前　言染色体不分离和结构不平衡在新生儿中的发生率为１／２００［１］，成为发育缺陷和先天畸形的主要原因。

因此，细胞遗传学分析一直被认为是很重要的有创性产前诊断方法。

从１９６６年首次应用孕中期羊水脱落细胞培养或孕早期绒毛采样进行产前检测，到１９世纪７０年代常规应用染色体显带分析（核型分析）以来，此方法已经成为经典的产前诊断技术［２］。

核型分析作为一种可靠的方法，可以诊断染色体数目异常及５００万至１０００万对碱基对的结构重排。

羊水细胞核型分析的准确率为９９．４％～９９．８％，绒毛膜细胞核型分析的准确率为９７．５％～９９．６％［３］。

然而，核型分析的局限性在于必须进行细胞培养，大多数临床实验室出报告的时间为１０～１４天。

近１０年来，２１ 三体综合征及其他染色体疾病的无创筛查技术已有了根本性提高。

为了改善孕期管理和缓解孕妇焦虑的情绪，需要一种快速的方法来确诊这些疾病，且大量临床研究表明这些方法能在产前诊断中检测出大多数的染色体异常。

因此，将传统核型分析作为经典产前诊断方法保留还是被快速的方法所取代还存在争议。

本文将讨论临床上最常用的３种快速诊断非整倍体染色体疾病的方法：分裂相的原位荧光杂交（ｉＦＩＳＨ）、荧光定量聚合酶链反应（ＱＦ ＰＣＲ）、多重连接探针扩增技术（ＭＬＰＡ）。

２　方　法ｉＦＩＳＨ、ＱＦ ＰＣＲ、ＭＬＰＡ和其他一些新的方法可以快速检测（约１～２天）最常见的常染色体异常如１３ 三体（帕塔综合征）、１８ 三体（爱德华综合征）和２１ 三体（唐氏综合征），而性染色体异常如特纳综合征（单体Ｘ）、克兰费尔特综合征（ＸＸＹ）和三倍体，嵌合体和结构重排，包括平衡和不平衡易位、大量的基因缺失和复制、插入和标记染色体等，只有很少一部分能够在产前检测。

Y染色体遗传病应该做哪些检查？*导读：本文向您详细介Y染色体遗传病应该做哪些检查，常用的Y染色体遗传病检查项目有哪些。

以及Y染色体遗传病如何诊断鉴别，Y染色体遗传病易混淆疾病等方面内容。

*Y染色体遗传病常见检查：常见检查：遗传筛查、羊水检查、染色体*一、检查一、系谱分析是遗传病诊断的基础系谱是用以表明某种疾病在患者家族各成员中发病情况的图解。

临床遗传工作者不仅要绘制系谱，熟悉系谱中常用的符号，而且还应掌握根据系谱特点来判断其遗传方式的基本技能。

一个完整、清楚的系谱不仅有利于确定患者所患疾病是否为遗传病，而且还可以依次判断此病属于哪种遗传方式，区分某些表型相似的遗传病，以及同一种遗传病的不同类型。

此外，还可以为此家庭保留一份遗传病的宝贵资料。

为了达到上述目的，必须尽可能地从患者及其家属中获得完整、详细、准确、可靠的资料，以便所绘系谱能准确反映出家系的发病特点。

所以做好家系中系谱分析是诊断遗传病的基础。

二、染色体检查(核型分析)的适应症核型分析是确定染色体病的重要方法。

目前采用的染色体显带技术不仅能准确诊断染色体数目异常(单体型、三体型和多体型)综合症，而且通过显带，特别是高分辨显带技术，可以对各种结构异常，包括微畸变综合症作出准确诊断。

进行染色体检查时必须掌握适应症，才能达到较高的检出率。

一般下列情况之一者，应考虑进行染色体检查：1.有明显的生长、发育异常和多发畸形、智力低下、皮肤纹理异常者;2.可疑为先天愚型的个体及其双亲;3.原因不明的智力低下者;4.家庭中有多个相似的多发畸形的个体;5.原发性闭经和不孕的女性;6.男性不育、无精子症的个体;7.有反复流产、死胎史的夫妇。

三、性染色质检查的意义具有两条X染色体的正常女性，在间期细胞(如口腔粘膜上皮细胞、绒毛细胞、羊水脱落细胞)中，有一条X染色体参加日常的代谢活动;另一条X染色体失活，浓缩形成一个直径为l mm的小体，即称性染色质或称X染色质。

将这些间质细胞制片染色后，即可在许多间期核中看到这种浓染的X染色质。