木材显微切片的制作方法
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山西高校显微镜实验切片制作方法一、材料准备1.细胞或组织样本(动物或植物的骨骼、内脏、血液、细胞等)2.生理盐水或PBS缓冲液3.10%正常缓冲福尔马林4.蜡块(用于包埋)5.切片刀6.显微镜玻片和盖玻片7.高温抗性胶黏剂8.显微镜二、样本处理1.将细胞或组织样本放入生理盐水或PBS缓冲液中,用精细剪刀或组织刀割成适当大小的块状。
2.将样本浸泡在10%正常缓冲福尔马林中,固定样本,一般固定时间为24-48小时。
3.将固定的样本从福尔马林中取出,用流水冲洗掉福尔马林。
4.样本去水化,对于脆弱的样本,可用梯度浓度的酒精(如70%,80%,90%和100%)进行去水化处理。
5.去水化后,将样本置于4%熔点蜡中,尽量避免空气泡。
6.以适当的约束器将样本浸泡在蜡中,冷却固化。
三、切片制备1.将冷却固化的样本切割成薄片,使用切片刀进行切割。
切割时,可根据需要调整切片厚度。
2.将切片用温水浸泡,顺时针或逆时针转动切片刀,使蜡片逐渐脱落。
3.使用镊子或编织纤维棒,将切好的切片转移到显微镜玻片上。
4.将切片平铺在玻片上,用加热器轻轻加热玻片,使蜡片与玻片结合更牢固。
5. 将切片浸泡在xylene中,使用毛刷或精细棉签去除余留的蜡块,并使切片透明化。
6.将切片浸泡在渐变乙醇溶液(如95%,75%,50%,30%乙醇溶液)中,以去除余留的酸性蜡和脱脂。
7.取出切片,用流水清洗背面,并用吹风机将水分吹干。
8.将盖玻片涂上高温抗性胶黏剂,将其覆盖在切片上,并用手轻轻压平,使切片和盖玻片结合更牢固。
四、观察和保存1.将制作好的切片放入显微镜中,使用合适的倍镜进行观察。
2.根据需要进行染色处理,以提高对细胞或组织结构的辨识度。
3.将观察完毕的切片小心地保护起来,以防止损坏。
4.用质量较好的玻片盒保存切片,并在盒子上标明样本名称、切片日期等信息。
制作显微镜实验切片是一个复杂且需要耐心和技巧的过程。
不同类型的样本可能需要不同的处理方法和染色技术,以上方法只是一般的制作流程,具体操作还需根据实际情况进行调整。
木材切片方法与步骤(一)试样制备1.试样截取:试样最好自树干1.3m(胸高)以上正常部位截取。
同时最好在靠近心边材交界处的心材或边材部分,生长轮正常部位截取。
试样最好不要同时具心材和边材,因为二者软化条件与时间不同,材色不一致,心材切片比边材难。
试样截取部位亦可视研究目的而定。
试样尺寸弦、径、高为:20×20×20mm。
2.试样修整编号:试样的弦面、径面、端面必须取正,并且必须刨平,相邻面必须相互垂直。
最好用刻痕的方法编号,亦可用铅笔或号码机编号,避免试样处理后编号不清晰。
(二)试样软化1.试样排气:不管采用哪种软化方法,都要经过排除试样(木材)内的空气。
一般用水煮至试样下沉为止。
2.软化方法:⑴水煮软化法:对于材质比较轻软的木材可直接水煮将其软化。
该法软化木材,耗时太长。
⑵酒精-甘油软化法:试样水煮后用95%酒精、甘油各50%的混合液浸泡至试样软化。
此混合液尚可作软化后试样的贮藏剂。
⑶双氧水-冰醋酸软化法:用工业双氧水和冰醋酸各50%的混合液浸泡至试样软化。
亦可在水浴锅中加热至试样表面材色淡白或边缘开始离析为止。
此法比较快速,是比较常用的软化法。
⑷氟氢酸(HF)软化法:此法有自细胞壁中溶解硅石的作用。
但不侵蚀胞间质。
又不溶解细胞腔内各种晶体。
氟氢酸浸渍木材时间,随各种木材的构造、硬度,试样大小和氟氢酸浓度而不同而异。
氟氢酸的浓度,一般用10%~40%的水溶液,主要根据木材硬度而定。
5O%以上则能溶解胞间质,所以很少使用。
如欲使用,只能浸渍1~2天,否则易破坏木材。
氟氢酸能侵蚀玻璃,经1小时侵蚀,深度约0.2mm。
一般浸渍1~2个星期,很硬的木材,需浸渍1~2个月才软化。
试样软化后要在流水中漂洗2~3天。
此法适用于比较重硬的木材,尤其适合含丰富沉积物的热带木材软化。
(三)切片1.切片刀安装:将切片刀紧旋在切片机的刀架中,并调整切片刀的刀刃与试样切面的角度。
2.试样安装:先将试样紧旋在切片机的试件夹中,然后,转动试件夹的螺旋,使被切的试样切面成水平面,并将螺旋拧紧。
观察木质部薄壁组织的切片混合染色液和切片的制备方法木质部是大多数植物体内的一种组织,它的主要功能是提供支撑和运输水分和营养物质。
在观察木质部的时候,我们通常需要制备切片并对其进行染色。
这篇文档将介绍一种常用的方法,即使用混合染色液制备木质部切片并进行观察。
制备切片的方法:1. 取一棵木质部丰富的植物(例如桉树),用锯子将其干枝段切成薄片。
2. 把薄片置于加热的盛有蒸馏水的玻璃器皿中,让其温度达到70℃以上,持续15分钟以上,以软化细胞。
3. 将软化的薄片取出,用刀片在细胞的衰脆部分将其切成薄片,约1mm左右的厚度。
4. 将切好的薄片放入一瓶中性缓冲液中,用手轻轻晃动瓶子,使缓冲液均匀分散。
5. 把处理好的切片放在切片微调台上,用调节杆先将其压平,再用中小剪刀将其修整为所需的大小。
制备混合染色液的方法:1. 取一小瓶苏木精,加入500ml蒸馏水,摇匀。
2. 取一小瓶伊红,加入500ml蒸馏水,摇匀。
3. 将苏木精溶液和伊红溶液混合,使其比例为3:2,即苏木精液:伊红液=3:2。
摇匀混合液即可得到混合染色液。
使用方法:1. 取出制备好的切片,用滴管滴上少量的混合染色液,并在切片上涂匀。
2. 将切片在盖片中心位置摆放,用镊子把盖玻片放在切片上面,使其压平。
3. 用一块干净的滤纸轻轻地压在盖玻片上,以吸去多余的染色液。
4. 把制作好的切片放入显微镜中,用40倍或100倍物镜下观察即可。
需要注意的是,在制备切片和染色的过程中,一定要注意卫生干净,避免外来微生物的污染。
此外,在染色过程中,要保证染色时间的准确性和染色液的均匀性,以免影响结果的准确度。
总之,观察木质部薄壁组织的切片混合染色液和制备方法是一种常见的、简单易行的方法。
通过这种方法可以有助于对木质部细胞、薄壁组织及其各种特征的了解,为植物学研究提供了方便和支持。
中学显微镜实验切片制作步骤
制作显微镜实验切片是高中生与实验领域的必修实验,主要目的是想要观测细胞的内部结构,学习细胞的有机功能。
显微镜实验切片制作步骤一般分为准备、技术准备、取材部分及显微镜检查部分。
首先是准备,准备部分需要有抗凝剂、备有消毒工具(包括了精馏瓶、人工心跳机等)、仪器刀、细胞切片玻璃片、显微镜放大镜、软膏,以及固定剂、显微增强剂的材料,使实验能顺利、精准进行下去。
接着是技术准备,这部分需要明确实验需要研究的样本,慎重精心挑选实验样本,尤其在野外取材时,要注意样本的新鲜性,有利于实验的准确性。
紧接着是取材部分,在处理样本时,必须使用消毒工具,保证样品严格消毒,以免样品受到外界环境的污染,影响实验结果的准确性。
并且还要严格控制取材时露出的部分,形成高度纯度的实验切片。
在制备好的切片上,把固体样本置于均匀的软膏室中,然后软膏室内加入抗凝剂进行发泡,这样使样本发生固化,能够增加实验的准确度。
最后是显微镜检查部分,在显微镜上放置固定好的切片,并采用依次加入显微增强剂的方法,在不同放大倍数下,观察机体细胞的细胞结构,细胞形貌及细胞内结构变化与其相应的功能。
因此,按以上步骤仔细细致地完成切片制作,可以使我们获得最优质、最准确的实验数据,帮助我们更加深入地理解细胞的有机功能。
木材切片工艺流程引言木材切片工艺是一种重要的木材加工工艺,通过将木材切割成薄片,不仅可以提高木材的利用率,还可以使得木材具备更多的应用场景。
本文将详细介绍木材切片工艺的流程和相关工艺参数,帮助读者更好地了解和掌握这一工艺。
木材切片工艺流程概述木材切片工艺是通过机械设备将原木切割成薄片的加工过程。
整个工艺流程可以分为原料准备、切片加工、干燥处理和质量检验四个主要步骤。
原料准备原料准备是木材切片工艺流程的第一步。
在该步骤中,需要选择合适的木材原料,并对原料进行初步处理。
首先,要选择具有一定经济价值的木材,如松木、橡木、胡桃木等。
其次,要对原料进行去皮、刨平等处理,以确保原料的质量和平整度。
切片加工切片加工是木材切片工艺的核心步骤。
在该步骤中,需要使用专用的机械设备将原料切割成薄片。
常用的切片机械设备有旋转切片机和滑动切片机。
旋转切片机采用回转刀片进行切割,可以实现连续切片;而滑动切片机则采用推刀刀片进行切割,适用于切割较大尺寸的木材。
切片加工过程中,需要根据不同的要求和木材种类,调整切片机的刀片角度、切割速度等参数,以获得理想的切片质量。
干燥处理切片加工完成后,薄片中的水分含量较高,需要进行干燥处理。
干燥处理可以分为自然干燥和人工干燥两种方式。
自然干燥是将切片堆放在通风良好的场地中,利用自然环境的气候条件进行干燥。
人工干燥则是利用热风、蒸汽等辅助设备进行干燥,可以在较短的时间内将木材的水分含量控制在合适的范围内。
干燥处理的目的是提高木材的稳定性和抗菌性能,以延长木材的使用寿命。
质量检验质量检验是木材切片工艺流程中不可或缺的一步。
在该步骤中,需要对切片质量进行检验,以确保其符合相应的质量标准和要求。
常用的检验项目包括切片厚度、平整度、密度等。
通过质量检验,可以及时发现和处理存在的问题,提高切片的质量和市场竞争力。
木材切片工艺流程优化为了提高木材切片工艺的效率和质量,可以采取一些优化措施。
优化原料准备在原料准备阶段,可以通过更好地选择木材原料和增加原料处理工序来提高切片质量。
麻栎(Quercus acutissima)高度木质化雌花石蜡显微制片的软化方法麻栎(Quercus acutissima)是一种常见的乔木植物,也是一种重要的林木资源。
麻栎的木材质地坚硬,木质化程度高,因此在显微制片过程中需要进行软化处理。
本文将介绍一种用于麻栎高度木质化雌花石蜡显微制片的软化方法。
一、样品采集与处理1. 样品采集选择成熟的麻栎雌花作为研究样品,尽量选择完整无损的花朵进行采集。
2. 样品处理将采集到的雌花放入固定液中,进行固定处理。
常用的固定液包括福尔马林、乙醇和醋酸。
二、软化处理1. 软化剂选择对于木质化程度高的麻栎雌花,常用的软化剂包括甲醇、乙醇和双氧水。
甲醇和乙醇可以使细胞透明化,并能逐渐软化细胞壁;双氧水则能有效软化细胞壁和细胞质,使得显微制片更加易于进行。
2. 软化处理步骤(1)将固定好的雌花转移到软化液中,浸泡一定时间。
软化时间因样品的木质化程度而异,通常在12-24小时之间。
(2)根据实际情况,可以进行多次软化处理,以达到理想的软化效果。
三、脱水处理软化处理完成后,需要进行脱水处理,将样品中的水分逐渐替代为透明剂,以便于后续的包埋和切片操作。
1. 逐级脱水将软化后的雌花转移到70%乙醇中浸泡一定时间,随后逐渐转移至80%、90%、95%和100%乙醇中,每个浓度的乙醇中浸泡时间一般为1-2小时。
2. 透明剂处理将脱水后的雌花转移到透明剂中浸泡一定时间,以使样品透明度逐渐提高,为后续的包埋和切片做准备。
四、包埋与切片脱水过程完成后,将样品转移到熔化的石蜡中进行包埋处理。
包埋后,使用旋转式切片机将石蜡包埋块切割成薄片,厚度一般为4-8μm。
五、制片和染色将切好的薄片转移到载玻片上,进行熔蜡固定和染色处理。
常用的染色剂包括伊红、苏木素和甲苯胺蓝等,可根据需要选择适宜的染色方法。
六、显微镜观察和拍摄将制好的玻片放置在显微镜下观察,观察目的细胞结构和细胞器的形态和排布。
根据需要,可以进行数字化拍摄和图像处理。
显微镜切片制作方法一、引言显微镜切片制作是一种常见的组织学研究方法,可以通过切割样本制作薄片以便观察细胞和组织的细节结构。
本文将介绍显微镜切片制作的基本步骤和技巧。
二、材料准备1. 组织样本:可以是动植物组织、细胞培养物等。
2. 甲醇、乙醇和戊醇:用于固定组织样本。
3. 蜡块:用于包埋组织样本。
4. 切片刀:用于切割组织样本。
5. 显微镜载玻片:用于固定切片。
三、步骤详解1. 组织固定:将组织样本放入甲醇中固定,固定时间根据组织样本的大小和类型而定,通常为数小时至过夜。
固定的目的是保持组织样本的形态结构和细胞组织的完整性。
2. 组织脱水:将固定的组织样本转移到乙醇中进行脱水处理。
脱水的目的是逐渐去除甲醇,并使组织样本逐渐适应乙醇的性质。
3. 组织透明化:将脱水后的组织样本转移到戊醇中进行透明化处理。
透明化的目的是使组织样本逐渐适应戊醇的性质,为后续的包埋和切片做准备。
4. 组织包埋:将透明化处理后的组织样本放入蜡块中进行包埋。
包埋的目的是将组织样本固定在一个坚硬的蜡块中,以便进行切割。
5. 切片:用切片刀将包埋好的组织样本切成薄片。
切片时要注意控制切割厚度和角度,以获得清晰的切片。
6. 切片上玻片:将切好的组织片用显微镜载玻片固定。
将载玻片放置在切片上,轻轻按压使其粘合在一起。
7. 去蜡:将载玻片放入去蜡盒中进行去蜡处理。
去蜡的目的是去除切片中的蜡质。
8. 染色:将去蜡后的载玻片放入染色盒中进行染色处理。
染色的目的是增强切片的对比度,使细胞和组织的结构更加清晰可见。
9. 封片:将染色后的载玻片用封片剂封住。
封片的目的是保护切片,防止其受到外界的损害。
10. 干燥:将封好的载玻片放置在通风干燥的环境中晾干。
干燥的目的是使封片剂固化,并使切片逐渐变得坚硬。
四、技巧与注意事项1. 操作中要注意卫生和安全,避免污染和伤害。
2. 操作前要确保所使用的材料和设备都是干净的,并且没有损坏。
3. 在切片过程中,要控制切割的速度和力度,以避免切片的厚度不均匀或切割过多。
木材切片工艺流程一、选材木材切片工艺的第一步是选材。
选材的关键在于选择质量好、纹理美观的木材。
一般来说,常用的木材有柚木、橡木、胡桃木等。
在选材过程中,需要注意木材的湿度和含水率,以及木材的形状和尺寸。
二、修整选好木材后,需要对木材进行修整。
修整的目的是使木材表面光滑、平整,并去除木材表面的瑕疵和杂质。
修整可以使用刨子、砂纸等工具进行,需要注意力度适中,避免损坏木材。
三、切割修整后的木材进行切割。
切割是将木材切成所需的厚度和大小。
切割可以使用锯子、电锯等工具进行,需要注意切割的角度和精度,使得切割后的木材平整、光滑。
四、切片切割后的木材进行切片。
切片是将木材切成薄片,用于制作家具、地板等。
切片可以使用切片机进行,需要注意切片的厚度和尺寸,以及切片时的速度和力度。
五、修整切片后的木材进行修整。
修整的目的是使切片的表面光滑、平整,并去除切片表面的瑕疵和杂质。
修整可以使用砂纸、刮刀等工具进行,需要注意力度适中,避免损坏切片。
六、烘干修整后的切片进行烘干。
烘干是将切片中的水分去除,以提高切片的稳定性和耐久性。
烘干可以使用烘干炉、太阳能等进行,需要注意烘干的温度和时间,以免切片变形或开裂。
七、砂光烘干后的切片进行砂光。
砂光的目的是使切片表面更加光滑、平整,并进一步去除瑕疵和杂质。
砂光可以使用砂纸、砂轮机等工具进行,需要注意砂光的力度和速度,以及砂光后的清洁工作。
八、质检砂光后的切片进行质检。
质检的目的是检查切片的质量和性能是否符合要求。
质检可以包括外观检查、尺寸检查、湿度检查等,需要注意质检的标准和方法,以保证切片的质量。
九、包装质检合格的切片进行包装。
包装的目的是保护切片不受损坏,并方便运输和存储。
包装可以使用纸箱、塑料薄膜等材料进行,需要注意包装的牢固性和密封性,以及包装后的标识和记录。
十、储存包装后的切片进行储存。
储存的目的是保持切片的质量和性能,并防止切片受潮、变形等。
储存可以选择干燥、通风、避光的环境,需要注意储存的温度和湿度,以及储存期限和方法。
木材切片方法与步骤(一)试样制备1.试样截取:试样最好自树干1.3m(胸高)以上正常部位截取。
同时最好在靠近心边材交界处的心材或边材部分, 生长轮正常部位截取。
试样最好不要同时具心材和边材,因为二者软化条件与时间不同,材色不一致, 心材切片比边材难。
试样截取部位亦可视研究目的而定。
试样尺寸弦、径、高为:20×20×20mm。
2.试样修整编号:试样的弦面、径面、端面必须取正,并且必须刨平,相邻面必须相互垂直。
最好用刻痕的方法编号,亦可用铅笔或号码机编号,避免试样处理后编号不清晰。
(二)试样软化1.试样排气:不管采用哪种软化方法,都要经过排除试样(木材)内的空气。
一般用水煮至试样下沉为止。
2.软化方法:⑴水煮软化法:对于材质比较轻软的木材可直接水煮将其软化。
该法软化木材,耗时太长。
⑵酒精-甘油软化法:试样水煮后用95%酒精、甘油各50%的混合液浸泡至试样软化。
此混合液尚可作软化后试样的贮藏剂。
⑶双氧水-冰醋酸软化法:用工业双氧水和冰醋酸各50%的混合液浸泡至试样软化。
亦可在水浴锅中加热至试样表面材色淡白或边缘开始离析为止。
此法比较快速,是比较常用的软化法。
⑷氟氢酸(HF)软化法:此法有自细胞壁中溶解硅石的作用。
但不侵蚀胞间质。
又不溶解细胞腔内各种晶体。
氟氢酸浸渍木材时间,随各种木材的构造、硬度,试样大小和氟氢酸浓度而不同而异。
氟氢酸的浓度,一般用10%~40%的水溶液,主要根据木材硬度而定。
5O%以上则能溶解胞间质,所以很少使用。
如欲使用,只能浸渍1~2天,否则易破坏木材。
氟氢酸能侵蚀玻璃,经1小时侵蚀,深度约0.2mm。
一般浸渍1~2个星期,很硬的木材, 需浸渍1~2个月才软化。
试样软化后要在流水中漂洗2~3天。
此法适用于比较重硬的木材, 尤其适合含丰富沉积物的热带木材软化。
(三)切片1.切片刀安装:将切片刀紧旋在切片机的刀架中,并调整切片刀的刀刃与试样切面的角度。
2.试样安装:先将试样紧旋在切片机的试件夹中,然后,转动试件夹的螺旋,使被切的试样切面成水平面,并将螺旋拧紧。
木材显微切片的制作
(1) 水煮:水煮的目的是软化木材,排出木材内的空气,便于切片。
水煮的时间一般根据木材的 软硬 程度来定,对于轻的、软的木材通常软化 3~4 h,对 于重的、硬的木材通常软化 6~8 h。
这 个软 化的时间也没有严格的规定,通常我们会边煮边试切,如果能切下来就不需要再软化。
(2) 切片:切片过程是一个很重要的过程。
通常我们要做三个面的切片,横切片、径切面以及弦 切面 。
横切面的厚度一般控制在 14~15um,径切面和弦切面的厚度一般控制在 10um 左右。
(3) 染色:染色的目的是便于微观构造的观察。
染色我们通常用浓度为 3%的番红溶液来染色, 染色的 时间通常为 4~6h,这个时间也是没有特别的严格规定,如果我们的切片非常薄,那么可以染上 12h 以 上。
(4) 脱水、脱脂:脱水、脱脂的目的是将切片中的水分以及一些抽提物脱干净,使切片中没有杂 质的 存在,便于微观构造的观察。
脱水我们通常选用不同浓度的酒精从低到高依次脱水,采用的不同 浓度 为 35%、50%、65%、75%、85%、95%、 以及无水乙醇,每个浓度脱水 10min。
脱脂是采用二甲苯 来脱 脂的,脱脂时间 5~10min。
(5) 封片: 封片前我们一定要将盖玻片和载玻片洗干净, 然后用剪刀将三个切面修理得方方正正, 放在 载玻片上,在盖玻片上均匀地涂上一层中性树脂胶,轻轻地压在载玻片上,然后慢慢地将里面的 气泡排 出来。
注意:在整个切片的制作过程中我们的手一定不要触摸到切片,以免有手纹的出现影响其 木材构 造的观察。
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