兼性厌氧菌

答案一、名词解释：1、L型细菌：亦称细菌细胞壁缺陷型，是由于细菌胞壁的肽聚糖结构受理化因素或生物因素的破坏或合成被抑制所致。

此种细菌在普通环境下会死亡，但在高渗环境下仍可存活。

2、中介体：为细菌部分细胞膜内陷、折叠、卷曲形成的囊状结构，多见与革蓝染色阳性菌。

其功能类似于真核细胞的线粒体，故又称为“拟线粒体”。

3、质粒：是存在于细菌细胞质中的染色体以外的遗传物质，为闭合环状的双链DNA，它控制细菌的某些特定的遗传性状（如耐药、毒力等）。

4、芽胞：是细菌体在特定的情况下脱水形成的一个空泡，具有多层致密的结构，抵抗力特别强。

杀灭芽孢最有效的方法是高压蒸汽灭菌法。

5、热原质：又称为致热原，将它注入动物或人的机体可引起发热，它的成分是革蓝染色阴性菌的LPS。

热原质耐热，但不易挥发，可用蒸馏的方法祛除。

6、消毒：是指杀灭病原微生物的方法。

7、溶原性转换：细菌从温和噬菌体获得新的遗传性状。

8、转导：以温和噬菌体为载体，将供体菌的遗传物质转移到受体菌中去，使受体菌获得新的遗传性状。

可分为普遍性转导和局限性转导。

9、正常菌群：指定居于人的体表及与外界相通的腔道中微生物群，在一般情况下，对机体有益无害。

10、败血症：是指病原菌侵入血流，并在其中大量生长繁殖，产生毒性代谢产物，引起严重的全身性中毒症状。

11、人工自动免疫：用人工接种的方法给机体输入抗原性物质（如疫苗、类毒素等），使机体免疫系统因受抗原刺激而产生体液和/或细胞免疫应答的过程。

12、SPA：存在于90%金黄色葡萄球菌表面，可与人及多种哺乳动物IgG分子的Fc段非特异性结合。

SPA的这一特点可增强葡萄球菌的抗吞噬能力。

13、肥达试验：利用已知的伤寒沙门菌的O、H抗原和甲、乙型副伤寒沙门菌的H抗原，分别与不同稀释度的患者血清作定量凝集试验，根据抗体含量的多少和早期及恢复期抗体的动态变化，辅助临床诊断肠热症。

14、霍乱肠毒素：是霍乱弧菌的主要致病物质，为不耐热外毒素。

严格厌氧菌菌种保藏方法发表人：吴小月，发布时间：10-01-11以下为本实验严格厌氧细菌的保藏方法，如果是兼性厌氧菌可参照好氧菌保藏方法保藏。

一、厌氧细菌的甘油保藏方法：1.厌氧甘油的制备：在厌氧瓶或厌氧管中加入一定量的甘油。

甘油的用量可根据需要添加，无需使用要多加，因为厌氧甘油制备好以后不能反复灭菌，反复灭菌甘油会变性而呈黄色，且有一股芳香味道。

加入终浓度为0.04%的l-cysteine和1%的5%的n2s母液。

往厌氧瓶中通n2，通气时间和配制培养基时时间相同。

盖上塞子和盖子。

121℃，20min灭菌后备用。

2.取新鲜菌液（对数相），在N2条件下，用针筒和针筒将最终溶液加入含菌液的厌氧管中浓度为15-20%的厌氧甘油，再通一会n2，目的是赶走在转移甘油过程中带进去的o2。

盖上塞子和盖子，混匀，冻于-80℃。

3.活化：用针和针吸取一定量的甘油保存菌液，加入培养基中。

添加量通常超过1%，因为厌氧菌的生物量比较小，一般2到5%左右。

目测加完甘油菌液的培养基是否浑浊，并作记录。

如果加入的菌液太多，造成一开始培养基就比较浑浊，会干扰我们对菌是否生长的判断，而且甘油太多也会抑制菌的生长。

二、厌氧菌冷冻干燥保存方法：1、厌氧牛奶的制备：先配置10%difcoskimmilk（bd）的母液。

和厌氧甘油配制方法一样，转移到厌氧瓶中，加入加入终浓度为0.04%的l-cysteine和1%的5%的n2s母液。

通n2，盖上塞子和盖子。

113℃，15min灭菌后放置过夜，于4℃放置备用。

放置过夜后牛奶不结块，溶液均匀，不沉淀才可以用，否则牛奶变性，需要重新配制。

同样，厌氧牛牛奶只能消毒一次。

反复消毒会使牛奶变性。

2、准备冷冻干燥用的安瓿管，管口要用棉花封住，棉花缠在牙签上，这样拔出比较方便，灭菌并烘干后备用。

3.将新鲜菌液离心，尽可能去除上清液，根据菌量加入10%厌氧牛奶。

一般来说，拇指盖大小的细菌可以制成15-20支安瓿管。

微生物：微生物是一切肉眼看不见或看不清微小生物的总称。

微生物化：利用小体积大面积系统的微生物在体制和培养方面的优越性，促进高等动植物的组织培养和培养技术发展的方法，称为微生物化。

比面值：某一物体单位体积所占有的表面积称为比面值。

微生物五大共性：体积小，面积大；吸收多，转化块；生长旺，繁殖快；适应强，易变异，分布广，种类多。

微生物多样性：物种多样性，生理代谢类型多样性，代谢产物多样性，遗传基因多样性，生态类型多样性。

革兰氏染色法：是细菌学中广泛使用的一种鉴别染色法，1884年由丹麦医师Gram创立。

未经染色之细菌，由于其与周围环境折光率差别甚小，故在显微镜下极难观察。

染色后细菌与环境形成鲜明对比，可以清楚地观察到细菌的形态、排列及某些结构特征，而用以分类鉴定。

肽聚糖：是真细胞细胞壁中的特有成分。

分为肽和聚糖磷壁酸：是结合在G+细菌细胞壁上的一种酸性多糖，主要成分为甘油磷酸或糖醇磷酸外膜：是G-细菌细胞壁所以特有的结构，位于壁的最外层，化学成分为脂多糖、磷脂和若干种外膜蛋白脂多糖：是位于G-细菌细胞壁最外层的一层较厚的类脂多糖类物质，由类脂A、核心多糖和O-特异侧链3部分组成抗酸细菌：是一类细胞壁中含有大量分枝菌酸等蜡质的特殊G+细菌缺壁细菌：由于人工方法，或自然发生的缺少细胞壁的细菌，主要有L型细菌，原生质体，球状体和支原体等L型细菌：由英国李斯特研究所的学者于1935年发现，故称L型细菌原生质体：指在人为条件下，用溶菌酶除尽原有细胞壁或用青霉素抑制新生细胞壁合成后，所得到的仅有一层细胞膜包裹的圆球状渗透敏感细胞，他们只能用等渗或高渗培养液保存或维持生长球状体：又称原生质球，指还残留了部分细胞壁的圆球形原生质体聚—β—羟丁酸PHB：是一种存在于许多细菌细胞质内属于脂质的碳源贮藏物，不溶于水，而溶于氯仿，可用尼罗蓝或苏丹黑染色，具有贮藏能量、碳源和降低细胞内渗透压等作用荚膜：有些细菌在一定的营养条件下，向细胞壁外分泌出一种粘性胶状物质，相对稳定的附着在细胞壁外，具有一定形态，称为荚膜芽孢：某些细菌在其生长发育后期，在细胞内形成一个圆形或椭圆形、厚壁、含水量低、抗逆性强的休眠构造，称为芽孢渗透调节皮层膨胀学说：芽孢的耐热性在于芽孢衣对多价阳离子和水分的透性很差以及皮层的离子强度很高，这就使皮层产生了极高的渗透压去夺取芽孢核心中的水分，其结果造成皮层的充分膨胀和核心的高度失水，正是这种失水的核心才赋予了芽孢极强的耐热性伴孢晶体：又称δ内毒素。

第4章抗菌药物敏感试验一、需氧菌和兼性厌氧菌的体外抗菌药物敏感试验1.扩散法（K-B法）（1）原理将含有定量抗菌药物的纸片贴在接种有待检菌的琼脂平板上，该点称为抗菌药源。

药物向周围扩散，形成了随着药源距离增加，琼脂中药物浓度递减的浓度梯度。

在药源周围可抑菌浓度范围内待检菌的生长被抑制，形成无菌生长的透明圈即抑菌圈，其大小可以反映待检菌对测定药物的敏感性，并与该药对待检菌的最低抑菌浓度（MIC）呈负相关，即抑菌圈愈大，MIC愈小。

（2）实验材料①培养基：采用水解酪蛋白（M-H）琼脂，pH为7.2，琼脂厚度4mm。

对生长条件要求高的细菌，如链球菌属细菌需加入5%脱纤维羊血，嗜血杆菌属细菌需加入1%血红蛋白（含Ⅴ因子）和1%Ⅹ因子复合物。

②抗菌药物纸片：选用直径为6.35mm，吸水量20μl的专用药敏纸片。

制备时取灭菌药敏纸片，经加样或浸泡药物溶液后冷冻干燥，置4℃保存备用，在有效期内使用。

③接种菌液挑取平板上形态相同的菌落4～5个，接种于3～5ml M-H肉汤中，于35℃中培养2～8h。

嗜血杆菌属和链球菌属细菌需用加血肉汤培养过夜。

用生理盐水或肉汤校正菌液至0.5麦氏比浊标准（相当于1.5×109/ml的含菌量）后在15min内接种。

（3）试验方法以无菌棉拭蘸取已制备好的菌液（其浊度为0.5麦氏比浊标准），在M-H琼脂表面均匀涂布接种3次，每次平板旋转60°，最后沿平板内缘涂抹１周。

平板置室温干燥3～5min，后用无菌镊子或专用纸片分配器将含药纸片贴于琼脂表面。

纸片应贴得均匀，各纸片中心相距＞24mm，纸片距平板内缘＞15mm。

直径为90mm的平板可贴6张纸片。

纸片贴牢后应避免再移动。

平板室温放置15min后倒置于35℃培养箱中培养16～18h后读取结果。

（4）结果解释平板置黑色背景上，从背面量取包括纸片直径在内的抑菌圈直径，单位为mm。

培养基中如果加有血液须打开皿盖从正面测量抑圈菌。

1、微生物:形体微小，结构简单，大多数肉眼看不到，必须借助显微镜才能观察到的一类低等生物的总称。

2、细菌:以二等分裂为主单细胞原核生物。

无典型细胞核，只有核质体，无核膜、核仁、细胞器，不进行有丝分裂。

3、放线菌：是一类呈丝状生长以孢子繁殖的革兰氏阳性细菌。

4、支原体：无细胞壁的原核微生物。

因其细胞膜中含有一般原核生物所没有的甾醇，其细胞膜仍有较高的机械强度。

5、病毒：一类超显微的、结构极简单的、专性活细胞内寄生的、在活体外能以无生命的化学大分子状态长期存在，并保持其感染活性的非细胞生物。

6、噬菌体：寄生于微生物体内并引起寄主菌(细菌、放线菌、蓝细菌等原核微生物)裂解的一种病毒。

7、毒性噬菌体：感染寄主细胞后进行大量增殖并最终引起细菌裂解。

8、温和噬菌体：温和噬菌体感染寄主菌后不立即增殖，而是将其基因组整合到寄主菌的核酸中，并随寄主菌核酸的复制而复制，即为溶原状态。

9、溶源性细菌：染色体上带有温和噬菌体基因组的细菌，称为溶源性细菌10、溶源性转变：噬菌体DNA整合到细菌基因组中而改变了细菌的基因型，使溶源性细菌相应性状发生改变。

11、酵母菌：是一类以出芽繁殖为主要特征的单细胞真菌的统称。

12、霉菌：是一些丝状真菌的统称。

13、L型细菌：指那些在实验室或宿主体内通过自发突变而形成的遗传性稳定的细胞壁缺损菌株。

14、原生质体：指在人工条件下用溶菌酶除尽原有细胞壁或用青霉素等抑制新生细胞壁合成后，所留下的仅由细胞膜包裹着的脆弱细胞。

通常由G+细菌形成。

15、原生质球：经溶菌酶或青霉素处理后，还残留了部分细胞壁(尤其是G―细菌的外膜)的原生质体。

通常由G―细菌形成。

16、芽殖：17、菌落：将单个微生物细胞或多个同种细胞接种于固体培养基表面，经适宜条件培养，大量繁殖形成肉眼可见的细胞群落。

18、细胞壁：位于细胞表面，内侧紧贴细胞膜的一层无色透明，质地坚韧，而富有弹性的构造。

19、LPS：20、芽孢：某些细菌在其生长发育后期，细胞质脱水浓缩，在细胞内形成一个圆形或椭圆形,对不良环境条件具有较强抗性的休眠体。

厌氧菌培养操作规程第一部分 标本采集和运送有厌氧菌感染指征时，需进行微生物学诊断。

而标本的采集和运送是否合格，对厌氧菌检验结果影响很大。

要求标本绝对不能被正常菌群所污染。

采集时尽量避免接触空气。

临床在进行厌氧菌培养前还应与实验室联系，做好接种培养的准备，进行床边接种或采用输送培养基。

一、标本采集标本应从正常无菌部位或通过严格无菌技术采集，血液、胸腔液、腹腔液、心包液、关节液、胆汁、脑脊液及通过外科无菌手术抽出的脓液等，与常规方法相同。

用特殊技术或方法采取的标本，采集部位与方法如下：1、肺部 肺部分泌物可经气管在环甲膜平面以下抽取，或用纤维支气管镜。

带有保护取样刷不被正常菌群污染的套管。

将取样刷剪下。

可放入运送培养基或床边直接接种。

2、胸腔 直接胸腔穿刺。

3、尿道 耻骨联合上方经皮肤穿刺膀胱抽尿。

4、脓肿 封闭性脓肿用无菌空针抽取。

如已破溃，用无菌棉拭子擦去表面脓液。

取深部分泌物。

5、女性生殖道 消毒阴道从后穹隆穿刺，取脓液。

若取子宫分泌物则用无菌导管抽取，导管外套以一个保护膜套管，插入子宫后才戳穿保护膜套管，在子宫内取标本。

6、窦道或深部伤口 用空针连着导管，尽可能深入抽取。

伤口底部、边缘和窦道壁上刮下来的组织也是很好的标本，更能反映感染的细菌。

若标本量太少，可适当加少量无菌盐水，冲洗后再吸出。

7、血液标本 毛囊和皮脂腺深部的丙酸杆菌易造成污染。

用碘酊消毒后必须等一定时间，不要立即抽血。

其它注意事项：必须通过用于厌氧菌正常栖居地才能取到的标本，如痰、支气管镜采样（无特殊保护套）、咽拭子、排出的尿及阴道拭子不能做厌氧菌培养，粪便标本厌氧菌培养．只能做难辨梭菌及肉毒杆菌的培养。

在无条件床边采样时，尽快将空针中的气体排尽，用消毒空针抽取厌氧培养标本，将针头插入无菌像皮塞。

必须用棉拭子采集的标本．可立即做床旁接种或插入运送培养基中送细菌室培养二、标本运送1、标本送入厌氧运送装置后，应尽快送到实验室，最迟不超过6小时。

初生代谢途径：一般将微生物从外界吸收的各种营养物质，通过分解代谢和合成代谢，生成维持生命活动的物质和能量的途径，称为初生代谢途径。

微生物代谢的调节：微生物细胞内各种代谢途径错综复杂，各个反应过程之间相互制约，彼此协调可随环境调节的变化，而迅速改变代谢反应的速度，叫做微生物代谢的调节。

细菌生长曲线：以时间为横坐标，以菌数为纵坐标，，根据不同时间内细菌数量的变化，可以做出一条反应细菌在整个培养期间菌数变化规律的曲线，叫做生长曲线。

生长：微生物生长是细胞物质有规律的、不可逆的增加，导致细胞体积扩大的生物学过程。

繁殖：繁殖是微生物生长到一定阶段，由于细胞结构的复制和重建并通过特定方式产生新的生命个体，既引起生命个体数量增加的生物学过程。

比生长率：单位时间单位体积内的产物量。

迟缓期：细菌接种到新鲜培养基而处于一个新的生长环境，因此在一段时间内并不马上分裂，细菌数量维持恒定，或增加很少。

稳定期：由于营养物质的消耗，代谢产物积累和ＰＨ值变化环境条件逐渐不适宜细菌生长，导致细菌生长率降低直至零，对数生长期结束，进入稳定生长期。

衰亡期：营养物质耗尽和有毒代谢产物的大量积累，细菌死亡速率逐步增加或细菌逐步减少，标志细菌的群体进入衰亡期。

代时：在细菌个体生长里，每个细菌分裂繁殖一代所需要的时间。

同步培养：是一种培养方法，它使群体不同步的细胞转变成能同时进行生长或分裂的群体细胞。

连续培养：是在微生物的整个培养期间，通过一定的方式是微生物能以恒定的比生长速率并能维持生长下去的培养方法。

分批培养：是指微生物在封闭系统中进行的培养。

培养过程中不对培养基进行更换。

同步生长：以同步培养方法使群体细胞处于同一生长阶段并同时进行分裂的生长方式。

恒浊器：通过连续培养装置中的供电系统保持培养基中菌体浓度恒定，是细菌生长连续进行的一种培养系统。

恒化器：通过保持培养基中某种营养物质浓度基本恒定的方式，使微生物的生长速度恒定的培养系统。

断裂繁殖：菌丝断裂成断片，这些断片生长成新的菌丝，菌丝在固体培养基或在液体培养基中静止培养时形成菌落。

异养需氧型这类菌是细菌大家族中的主要成员，种类和数量最多，如枯草杆菌（Bacillus subtilis），一般得病原菌等大多数细菌。

从同化作用方面来看，跟据它们的栖息场所和获取养料的方式而分为腐生和寄生两类。

在腐生和寄生之间又存在着既可腐生又可寄生的中间类型，例如食菌蛭弧菌（B. Bacteriouorus）的生活周期中有寄生和腐生两阶段。

从异化作用方面来看，这类菌为好气性细菌，必须在有氧环境中生活，产能代谢过程以分子氧为最终电子受体，进行有氧呼吸。

培养时需进行振荡，搅拌或通气，以供给充足的氧气。

好氧菌，厌氧菌，顾名思义。

兼性厌氧，就是说以好氧为主，厌氧为辅。

即一般以有氧生长为主，有氧时靠呼吸产能；兼具厌氧生长能力，无氧时通过发酵或无氧呼吸产能。

兼性好氧，就是厌氧呼吸为主，好氧为辅，道理一样。

一种细菌类别的两种称呼兼性厌氧菌也称兼性好氧菌（facultative aerobes ）。

这类微生物的适应范围广，在有氧或无氧的环境中均能生长。

一般以有氧生长为主，有氧时靠呼吸产能；兼具厌氧生长能力，无氧时通过发酵或无氧呼吸产能。

如大肠杆菌（ E . coli ）、产气肠杆菌（Enterobacter aerogenes ）等肠杆菌科( Enterobacteriaceae ）的成员，地衣芽孢杆菌（Bacillus lichenifornus ）、酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae ）等LZ可以参考下微生物学。

亦称需氧菌、需氧微生物。

在有氧环境中生长繁殖，氧化有机物或无机物的产能代谢过程，以分子氧为最终电子受体，进行有氧呼吸。

包括大多数细菌、放线菌和真菌。

一个稳定有效的生化过滤系统对于水族箱的作用就是清除水中含有的：NH4、NH3、NO3、NO2，整个儿的清除过程一般称作氮循环。

<br /><br />硝化细菌：<br />第一种解释：是指利用氨或亚硝酸盐作为主要生存能源，以及能利用CO2作为主要碳源的细菌。

AIDS:获得性免疫缺陷综合征,以机会感染、恶性肿瘤和神经系统症状为特点,是一种引起免疫功能低下的致死性传染病.其病原体为HIV. ASO实验:即抗链球菌溶血素O实验，是一种检测患者血液中是否有链球菌O抗体中和实验。

鞭毛:鞭毛是在许多细菌的菌体上附有的细长并呈波状弯曲的丝状物,为细菌的运动器官. 变异:在一定条件下,若子代与亲代之间以及子代与子代之间的生物学性状出现差异称变异. 败血症:败血症是致病菌侵入血流后,在其中大量繁殖并产生毒性产物,引起全身中毒症状. 胞外菌:指寄居在宿主细胞外的细菌.胞外菌主要停留在细胞外的体液中.胞内菌:少数致病菌主要寄生于细胞内,称为胞内菌(又称兼性胞内菌).波浪热:布氏杆菌病,是感染布氏杆菌后所引起的一种人畜共患病,反复形成菌血症,使患者的体温呈现波浪型变化.病毒体:完整成熟的病毒颗粒,是细胞外的结构形式,具有典型的形态结构,并具有感染性.包涵体:某些病毒在感染细胞内增殖后,所形成的光镜下可见的圆形或椭圆形斑块.病毒血症:是病毒在体内的一种播散方式。

病毒由局部侵入机体后通过淋巴液或受损的毛细血管进入血流，并随血液播散到器官中繁殖。

包膜:是包膜病毒在宿主细胞内增殖并以出芽方式释放时，从宿主细胞获得的由类脂构成的囊膜，包裹在核衣壳外。

病原微生物:对人类和动物、植物具有致病性的微生物称病原微生物。

刺突:为某些病毒包膜上的棘状突起结构.持续性感染:持续性感染是指显性或隐性感染后,病毒可在机体内持续数月至数年、甚至数十年,可出现症状也不出现症状而长期带毒,引起慢性进行性疾病,成为重要的传染源.垂直传播:病原体主要通过胎盘或产道从宿主的亲代传到子代的感染称垂直传播.CPE:指病毒在体外细胞培养时引起的细胞损害。

传染性免疫:又称带菌免疫，机体特异性免疫的建立与维持有赖于病原菌在体内的存在，一旦体内病原菌消失，免疫力也随之消失。

虫媒病毒:是指一大类以节肢动物为媒介在人、家畜及野生动物间传播疾病的病毒。