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定量分析与分析方法验证

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第四章 药物定量分析与分析方法验证

第四章 药物定量分析与分析方法验证

1、含卤素有机药物
含卤素有机药物是指分子结构中所含卤素直接与芳环
如果测得理论板数低于规定的最小理论板数， 应改变色谱柱的某些条件（如柱长、载体性能、色 谱柱填充的优劣等），使理论板数达到要求。
(2)分离度(R)
在定量分析时，要求定量峰与其他峰 或内标峰之间有较好的分离度。除另有规定 外，分离度应大于1.5。
分离度（R）的计算公式见下式：
R 2 t R2 t R1
含量（CX）= f
AX AS / CS

式中，AX为供试品峰面积或峰高；CX为供
试品的浓度 。
丙酸睾酮含量测定采用高效液相法：取本品 对照品适量，精密称定，加甲醇定量稀释成 每lmL中约含1mg的溶液。精密量取该溶液 和内标溶液（1．6mg/ml苯丙酸诺龙甲醇溶 液）各5ml，置25ml量瓶中，加甲醇稀释至 刻度，摇匀，取10μl注入液相色谱仪，记录
例
取盐酸麻黄碱0.1532g，精密称定， 加冰醋酸10ml溶解后，加醋酸汞试液 2ml与结晶紫指示液1滴，用HClO4滴 定至绿色，用去0.1022mol/L的高氯 酸滴定液7.50m1，空白试验消耗高氯 酸滴定液0.08ml。已知每1ml高氯酸 滴定液（0.1mol/L）当于20.17mg的 C10H15ON·HCl。试计算盐酸麻黄碱 的百分含量？（99.80％）
1.分离原理
吸附色谱 分配色谱 离子交换色谱 排阻色谱
吸附色谱
根据填充剂吸附活性 对样品的吸收系数不 同而分离
充填剂：硅胶
分配色谱
根据固定相与流动相的极性不同而分为 正相分配色谱和反相分配色谱 两者的区别如下图所示：
固定相
流动相
正相分配
极性

药物定量分析与分析方法验证-综合

药物定量分析与分析方法验证-综合
测定供试品中主成分含量外标法是以供试品的对照品或标准品作对照物质，相对比较以求得供试品的含量。
外标法可分为标准曲线法和外标一点法。
①标准曲线法
配制一系列已知浓度的标准液，在同一操作条件下，按同量注入色谱仪，测量其峰面积(或峰高)，作出峰面积(或峰高)与浓度的标准曲线。然后在相同的
条件下，注入同量供试品，测得待测组分的峰面积(或峰高)，根据标准曲线或它的回归方程，计算供试品中待测组分的浓度。
药物定量分析与分析方法验证-综合
D
则，滴定度：
3、含量的计算
用容量分析法测定药物的含量时，滴定方式有两种，即直接滴定法和间接滴定法。其测定结果的计算方法分述如下。
(1)直接滴定法:
此法是用滴定液直接滴定，以求得被测药物的含量。
式中，V：消耗滴定液的体积；
W：供试品取用量；
T：滴定度。
滴定度在药典中是直接给出的，但在实际工作中，所配制的滴定液的摩尔浓度与药典中规定的摩尔浓度不一定恰好符合，此时就不能直接应用药典上所给出的滴定度(T)，但只要乘以滴定液浓度校正因数(F)即可换算成实际的滴定度( )，即
二、光谱分析法
紫外-可见分光光度法特点：
1、灵敏度高，可达10-4～10-7g/ml。
2、准确度高，相对误差为2％～5％。
3、仪器价格较低廉，操作简单，易于普及。
4、应用广泛。许多化合物均可采用本法进行测定，同时还可以应用计算分光光
度法不经分离直接测定混合物中各组分的含量。
备注：
比色皿校正：通常实验中用校正方法应对比色皿的误差。
(2)间接滴定法：间接滴定法包括生成物滴定法和剩余量滴定法。
剩余量滴定法亦称回滴定法，本法是先加入定量过量的滴定液A，使其与被测药物定量反应，待反应完全后，再用另一滴定液B来回滴定反应后剩余的滴定液A。

定量分析方法的方法学验证

定量分析方法的方法学验证

定量分析方‎法的方法学‎验证定量分析方‎法的方法学‎验证定量分析方‎法验证的目‎的是证明采‎用的含量测‎定方法适合‎于相应分析‎要求，在进行定量‎分析方法学‎研究或起草‎药品质量标‎准时，分析方法需‎经验证。

验证内容有‎：线性、范围、准确度、精密度（包括重复性‎和重现性）、检测限、定量限和耐‎用性等。

一，线性线性是指在‎设计的范围‎内，测试结果与‎试样中被测‎物质浓度直‎接呈正比关‎系的程度。

应在规定的‎范围内测定‎线性关系。

可用一贮备‎液经精密稀‎释，制备一系列‎供试品的方‎法进行测定‎，至少制备五‎份供试样品‎；以测得的响‎应信号对被‎测物浓度作‎图，观察是否呈‎线性，再用最小二‎乘法进行线‎性回归。

必要时，响应信号可‎经数学转换‎，再进行线性‎回归计算。

回归方程的‎相关系数( r ) 越接近于1 ，表明线性关‎系越好。

用UV 法测定时，以对照品配‎制一定浓度‎范围的对照‎品系列溶液‎，吸光度A一般在0.3 ～0.7 ，浓度点n ＝5 ，用浓度C 对A作线性回归‎，得一直线方‎程，方程的截距‎应接近于零‎，相关系数r 应大于0.9999 。

用HPLC 法测定时，以对照品配‎制一定浓度‎范围的对照‎品系列溶液‎，浓度点n ＝5 ～7 ，用浓度 C 对峰高h 或峰面积A或被测物与‎内标物的响‎应值之比进‎行线性回归‎或非线性拟‎合（如HPLC-ELSD ），建立方程，方程的截距‎应趋于零，相关系数r 应大于0.999 。

线性关系的‎数据包括相‎关系数、回归方程和‎线性图。

二，范围范围系指能‎达到一定精‎密度、准确度和线‎性，测试方法适‎用的高低限‎浓度或量的‎区间。

范围应根据‎分析方法的‎具体应用和‎线性、准确度、精密度结果‎及要求确定‎。

对于有毒的‎、具特殊功效‎或药理作用‎的成分，其范围应大‎于被限定含‎量的区间。

三，精确度准确度系指‎用该方法测‎定的结果与‎真实值或参‎考值接近的‎程度，一般用回收‎率( ％) 表示。

定量分析方法的方法学验证

定量分析方法的方法学验证

定量分析方法的方法学验证定量分析方法验证的目的是证明采用的含量测定方法适合于相应分析要求，在进行定量分析方法学研究或起草药品质量标准时，分析方法需经验证。

验证内容有：线性、范围、准确度、精密度(包括重复性和重现性)、检测限、定量限和耐用性等。

一，线性线性是指在设计的范围内，测试结果与试样中被测物质浓度直接呈正比关系的程度。

应在规定的范围内测定线性关系。

可用一贮备液经精密稀释，制备一系列供试品的方法进行测定，至少制备五份供试样品；以测得的响应信号对被测物浓度作图，观察是否呈线性，再用最小二乘法进行线性回归。

必要时，响应信号可经数学转换，再进行线性回归计算。

回归方程的相关系数(r )越接近于1，表明线性关系越好。

用UV法测定时，以对照品配制一定浓度范围的对照品系列溶液，吸光度 A 一般在0.3〜0.7，浓度点n = 5，用浓度C对A作线性回归，得一直线方程，方程的截距应接近于零，相关系数r应大于0.9999。

用HPLC法测定时，以对照品配制一定浓度范围的对照品系列溶液，浓度点n = 5〜7，用浓度C对峰高h或峰面积A或被测物与内标物的响应值之比进行线性回归或非线性拟合(如HPLC-ELSD )，建立方程，方程的截距应趋于零，相关系数r应大于0.999。

线性关系的数据包括相关系数、回归方程和线性图。

二，范围范围系指能达到一定精密度、准确度和线性，测试方法适用的高低限浓度或量的区间。

范围应根据分析方法的具体应用和线性、准确度、精密度结果及要求确定。

对于有毒的、具特殊功效或药理作用的成分，其范围应大于被限定含量的区间。

三，精确度准确度系指用该方法测定的结果与真实值或参考值接近的程度，一般用回收率(% )表示。

准确度应在规定的范围内测试。

用于定量测定的分析方法均需做准确度验证。

1.测定方法的准确度可用已知纯度的对照品做加样回收率测定，即于已知被测成分含量的供试品中再精密加入一定量的已知纯度的被测成分对照品，依法测定。

药物分析-药物定量分析与方法验证

药物分析-药物定量分析与方法验证
44
特点：
仪器简单－滴定管、锥形瓶等玻璃仪器。 操作方便－通过观察溶液颜色变化确定滴
9
测 定 方 法 ： 取 本 品 约 0.1g ， 精 密 称 定 ， 加 乙 醇 5ml溶解后，加20%氢氧化钠溶液5ml，加热回流 15min，放冷至室温，加水20ml与硝酸5ml，精 密加硝酸银滴定液(0.1mol/L) 30ml，再加邻苯二 甲酸二丁酯5ml，密塞，强力振摇后，加硫酸铁 胺指示液2ml，用硫氰酸胺滴定液(0.1mol/L)滴定， 并将滴定的结果用空白试验校正。每1ml硝酸银 滴 定 液 (0.1mol/L) 相 当 于 6.216mg 的 三 氯 叔 丁 醇 （C4H7Cl3O·1/2H2O）。
13
（1） 碱性还原后测定
例 泛影酸的测定 ChP (2000)
取本品约0.4g，精密称定，加氢氧化钠溶 液30ml与锌粉1.0g，加热回流30min，放冷，冷 凝管用少量水洗涤，滤过，烧瓶与滤器用水洗 涤3次，每次15ml，洗液与滤液合并，加冰醋 酸 5ml 与 曙 红 钠 指 示 液 5 滴 ， 用 硝 酸 银 滴 定 液 (0.1mol/L)滴定。每1ml硝酸银滴定液(0.1mol/L) 相当于20.46mg的C11H9 I 3N2O4。
富马酸亚铁 C4H2FeO4的含量测定
原理
d H2SO4
O
HC C O
C CH Oˉ
+
Fe2+
富马酸亚铁
Oˉ
富马酸
Fe2+ + Ce4+
滴定 Ce3+ + Fe3+
邻二氮菲指示剂
N
N
红色
Fe2+ + Ce4+

药物分析第四章 药物定量分析与分析方法验证

药物分析第四章 药物定量分析与分析方法验证
• Pharmaceutical Analysis
2019/11/5
1
第四章 药物定论量分析与分析方法验证
主 要 内 容
2019/11/5
一、 定量分析样品的前处理方法 二、 定量分析方法特点 三、药品质量标准分析方法验证 四、 生物样品分析方法的基本要求
2
第一节 定量分析样品前处理方法
一、概述
含金属与卤素药物须处理后方可进行测定。
处理方法视结合牢固程度而异。
卤素与芳环相环相连牢固；与脂肪族碳相连 结合不牢固。
含金属药物：金属不直接与碳相连为含金属 的有机药物，不牢固，一般直接测定；金属与碳 原子以共价键相连，结合比较牢固---为有机金 属药物，须适当处理。
2019/11/5
3
含卤素有机药物的分析
T 0.1 1 134.14 3.429(mg/ml) 4
2019/11/5
含量% (VI2 FI 2 -VNa2S2O3 FNa2S2O3 ) T 100 W
40
T M b B(mg/ ml) a
直接滴定法： 含量% V T 100%
W
含量% V T F 100% W
20203241药物分析?pharmaceuticalanalysis20203242一定量分析样品的前处理方法二定量分析方法特点三药品质量标准分析方法验证四生物样品分析方法的基本要求主要内容主要内容论第四章药物定量分析与分析方法验证20203243一概述含金属与卤素药物须处理后方可进行测定
药物分析
I
I
COOH
I
I
NH C (CH2)4 C NH
I
O
O
I
胆影酸

中国药典版生物样品定量分析方法验证指导原则


二、生物分析方法验证
为了验证批内准确度，应 取一个分析批的定量下限及低、中、高浓度质控样品，每个浓 度至少用5个样品 浓度水平覆盖标准曲线范围：定量下限，在不高于定量下限浓度3倍的低浓度质控样品， 标准曲线范围中部附近的中浓度质控样品，以及标准曲线范围上限约75 %处的高浓度质控 样品
准确度均值一般应在质控样品标示值的±15%之内，定量下限准确度应在标示值的±20%范围 内
除正常基质外，还应关 注其他样品的基质效应， 例如溶血的或髙血脂的 血浆样品等
二、生物分析方法验证
9.稳定性
必须在分析方法的每一步骤确保稳定性，用于检查稳定性的条件，例如样品基质、抗凝剂 、容器材料、储存和分析条件，都应该与实际试验样品的条件相似 用文献报道的数据证明稳定性是不够的 采用低和髙浓度质控样品(空白基质加人分析物至定量下限浓度3倍以内以及接近定量上限 )，在预处理后以及在所评价的条件储存后立即分析 由新鲜制备的校正标样获得标准曲线，根据标准曲线分析质控样品，将测得浓度与标示浓 度相比较，每一浓度的均值与标示浓度的偏差应在±15%范围内 应通过适当稀释，考虑到检测器的线性和测定范围，检验储备液和工作溶液的稳定性
中国药典（2020版）9012 生物样品定量分析方法验
证指导原则
中国药典（2020版）9012生物样品定量分析方法验证指导原则
二、生物分析方法验证 三、试验样品分析
目录
中国药典（2020版）9012生物样品定量分析方法验证指导原则
9012生物样品定量分析方法验证指导原则 —、范围 准确测定生物基质(如全血、血清、血浆、尿)中的药物浓度，对于药物和制剂研发非常重 要 这些数据可被用于支持药品的安全性和有效性，或根据毒动学、药动学和生物等效性试验 的结果做出关键性决定 因此，必须完整地验证和记录应用的生物分析方法，以获得可靠的结果 本指导原则提供生物分析方法验证的要求，也涉及非临床或临床试验样品实际分析的基本 要求，以及何时可以使用部分验证或交叉验证，来替代完整验证 本指导原则二和三主要针对色谱分析方法，四针对配体结合分析方法 生物样品定量分析方法验证和试验样品分析应符合本指导原则的技术要求

药物分析第四章定量分析与分析方法验证


标准偏差
三、专属性 系指在其它成份（如杂质、降解产物、辅料等） 系指在其它成份（如杂质、降解产物、辅料等）可能存在 采用的方法能准确测定出被物的特性。 下，采用的方法能准确测定出被物的特性。 四、检测限（LOD） 检测限（ ） 指试样中被测物能被检出的最低浓度或量。 指试样中被测物能被检出的最低浓度或量。 五、定量限（LOQ） 定量限（ ） 指样品中被测物能被定量测定的最低量， 指样品中被测物能被定量测定的最低量，其测定结果具有 一定的准确度和精密度。 一定的准确度和精密度。 六、线性 系指在设计的范围内， 系指在设计的范围内，测试结果与试样中被测物浓度直接 呈正比关系的程度，相关系数R-->1 ,用软件可得回归方程 用软件可得回归方程. 呈正比关系的程度，相关系数 用软件可得回归方程
VT 含量% = × 100% W
T—滴定度 滴定度;V—消耗滴定液体积 消耗滴定液体积;W—供试品取量 滴定度 消耗滴定液体积 供试品取量 校正因子F: 校正因子 当滴定液浓度与药典中规定浓度不相同时,要校正 要校正: 当滴定液浓度与药典中规定浓度不相同时 要校正 实际摩尔浓度 F= 规定摩尔浓度 在药检部门实验里的试剂瓶子一般不标浓度,而是 值 在药检部门实验里的试剂瓶子一般不标浓度 而是F值. 而是 实际滴定度:T’=TF 实际滴定度
二、光谱分析法 光照在物质上，物质内部发生能级跃迁而产生辐射， 光照在物质上，物质内部发生能级跃迁而产生辐射，利用 光谱进行定性或定量的结构分析称为光谱分析法。 光谱进行定性或定量的结构分析称为光谱分析法。 1、紫外-可见分光光度法（200nm—760nm) 、紫外 可见分光光度法 可见分光光度法（ (1)朗伯 比耳定律 朗伯-比耳定律 朗伯 A=ELC A-吸光度；L-液层厚度；C-溶液浓度；E-吸收系数 吸光度； 液层厚度 液层厚度； 溶液浓度 溶液浓度； 吸收系数 吸光度 （2）百分吸收系数 ）百分吸收系数E 1% 溶液浓度为1%（ 溶液浓度为 （W/V）厚度为 ）厚度为1cm的吸收度 E1cm 的吸收度 A （3）吸收系数法测含量 ） ×D 1% E1cm 含量%= ×100% W × l ×100 A-供试品吸光度；D-供试品稀释倍数； 供试品吸光度； 供试品稀释倍数 供试品稀释倍数； 供试品吸光度 W-供试品取量（标示量）（ ）； 液层厚度（cm） 供试品取量（ ）（g）； 液层厚度（ ） 供试品取量 标示量）（ ）；L-液层厚度

药物定量分析与分析方法验证 (2)

透光率(%)
＜ 0.8 ＜ 0.8
杂散光检查：
4. 对溶剂的要求:
220～240nm 241～250nm 251～300nm 300nm以上 溶剂+吸收池A ＜0.41 ＜0.20 ＜0.10 ＜0.05
5. 测定方法
要求供试品溶液的A应在0.3 ～0.7 对照品比较法：Cx=(Ax/Ar)Cr; 含量%=Cx×D/W×100 % 常用方法 吸收系数法： 计算分光光度法：
标准曲线法 外标一点法
应用示例： RP-HPLC法测定盐酸黄酮哌酯片含量，用标准曲线法 如头孢拉丁；头孢羟氨苄；头孢唑啉钠用外标一点法
（二）GC法
1. 对GC仪器一般要求 载气为氮气；色谱柱为填充或毛细管柱 色谱柱的理论板数：n 2. 系统性试验 分离度：R
拖尾因子：T
（二）容量分析法的计算问题
1. 滴定度（T）的概念 每1ml规定浓度的滴定液相当于被测物 质的量(mg)
2. 滴定度的计算
aA + bB
cC + dD
T（mg/ml） = m ×a/b × M
3. 百分含量的计算 （1）直接滴定法 D% = V ×F × T/W ×100%
F = 实际标定的浓度/规定的浓度
基本要求
一、掌握定量分析方法验证的效能指标。 二、熟悉定量分析样品的前处理方法。 三、了解定量分析样品的前处理方法的进展 及在药物分中的应用。
主要内容
第一节定量分析样品的前处理方法 第二节 生物样品分析的前处理技术 第三节 分析方法的效能指标
定量分析方法特点 一、容量分析法
（一）容量分析法的特点 方法简便易行 方法耐用性高 测定结果准确（RSD＜0.2%）
（二）荧光分光光度法

分析方法验证 - 检测限与定量限

分析方法验证-检测限与定量限
分析方法验证-检测限与定量限
一、检测限（LOD)
是指试样中被测物能被检测出的最低浓 度或量，是限度检验指标。它无需准确定量， 只要指出高于或低于该规定的浓度或量即可。
常用方法有：目视法和信噪比法Βιβλιοθήκη 分析方法验证-检测限与定量限
1.目视法：用含已知浓度被测物的试样进行分析， 目视确定能被可靠地检测出的被测物的最低浓度 或量，常用于显色鉴别法，如TLC
1、0.1μg 2、0.2 μg 3、0.4 μg 4、0.6 μg 5、0.8 μg 6、1.0 μg
654321
分析方法验证-检测限与定量限
2、信噪比法：当用GC和HPLC法时，一般以S/N ＝2或3时的相应浓度来确定检测限。
GC和HPLC法，一般以S/N＝2或3 为LOD
分析方法验证-检测限与定量限
二、定量限（LOQ)
是指样品中被测物能被定量测定的最低量，其 测定结果应具一定准确度和精密度。
杂质和降解产物进行定量测定时，要求LOQ。
常用信噪比法确定定量限，一般以S/N=10时相应的 浓度进行测定。
分析方法验证-检测限与定量限
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（2）酸性还原后测定法 ）
例 碘番酸的测定 JP (14)
取本品的干燥品约0.4g，精密称定， ，精密称定， 取本品的干燥品约 加锌粉1g及冰醋酸 加锌粉 及冰醋酸10ml，加热回流 ， 及冰醋酸 30min，放冷，冷凝管用水 洗涤， ，放冷，冷凝管用水30ml洗涤， 洗涤 用脱脂棉过滤，烧瓶与脱脂棉用水洗涤2 用脱脂棉过滤，烧瓶与脱脂棉用水洗涤 每次20ml，洗液与滤液合并，加四 次，每次 ，洗液与滤液合并， 溴酚酞乙酯指示液1ml ，用硝酸银滴定 溴酚酞乙酯指示液 液(0.1mol/L)滴定。终点时黄色沉淀变为 滴定。 滴定 绿色。 硝酸银滴定液(0.1mol/L)相 绿色。每1ml硝酸银滴定液 硝酸银滴定液 相 当于19.031mg的C11H12 I 3NO2。 当于 的
3. 卤素的种类 I＞Br＞Cl＞F ＞ ＞ ＞ 常见的含卤素有机药物： 常见的含卤素有机药物：
CH3
CH3 C CCl3 OH
三氯叔丁醇
Cl3C
CCl3
六氯对二甲苯
COOH I CH3CONH I I NHCOCH3
泛影酸
COOH I I I
COOH I
I
NH C (CH2)4 C NH O O
取本品约0.1g，精密称定，加 测定方法 取本品约 ，精密称定， 乙醇5ml，溶解后，加20%氢氧化钠溶液 乙醇 ，溶解后， 氢氧化钠溶液 5ml，加热回流 15分钟，放冷，加水 分钟， ， 分钟 放冷，加水20ml 与硝酸5ml，精密加硝酸银滴定液 与硝酸 ，精密加硝酸银滴定液(0.1mol/L) 30ml，再加邻苯二甲酸二丁酯 邻苯二甲酸二丁酯5ml，密塞， ，再加邻苯二甲酸二丁酯 ，密塞， 强力振摇后，加硫酸铁胺指示液2ml，用硫 强力振摇后，加硫酸铁胺指示液 ， 氰酸胺滴定液(0.1mol/L)滴定，并将滴定的 滴定， 氰酸胺滴定液 滴定 结果用空白试验校正。 结果用空白试验校正。每1ml硝酸银滴定液 硝酸银滴定液 (0.1mol/L)相当于 相当于6.216mg的 相当于 的 C4H7Cl3O·1/2H2O。 。
2. 碱性或酸性还原后测定法
本法是将含卤素有机药物在碱性或 酸性下，加还原剂（如锌粉）加热回 酸性下，加还原剂（如锌粉） 流，药物产生还原裂解反应，使有机 药物产生还原裂解反应， 结合的卤素转变为无机的卤素离子， 结合的卤素转变为无机的卤素离子， 然后采用银量法（Fajans法）测定。 然后采用银量法（ 法 测定。
CCl3−C(CH3)2−OH + 4NaOH
回流 (CH3)2−CO + 3NaCl + HCOONa + 2H2O △
NaCl + AgNO3
AgCl↓ + NaNO3 (Ksp=1.56×10–10 ) ×
AgNO3 + NH4SCN
AgSCN ↓ + NH4NO3
(Ksp=1.0×10−12 ) × Fe3+ + SCN¯ Fe (SCN) 2+ 淡棕红色） （淡棕红色）
含卤素有机药物系指药物分子 结构中所含卤素直接与芳环或脂肪 链相连者， 链相连者，而不包括某些有机药物 的卤酸盐或氢卤酸盐
结构特点：C—X 结构特点：
（一）卤原子的活泼性 1. 卤原子与碳原子直接相 连，卤原子的活泼性和它直 接相连的烃基的结构有很大 关系
（1）乙烯型卤和芳卤 ）
不活泼
CH2 CH X
结构 性质（物理、化学性质） 性质（物理、化学性质）
分析方法 鉴别、检查、含量测定） （鉴别、检查、含量测定）
R OH
OH
OH
醇 酚 酚羟基
C C
烯醇羟基
R NH2
NH2
胺
芳胺 芳伯氨基
R COOH
COOH
羧酸
芳酸
第三章
药物定量
分析与分析方法验证
第一节
定量分析样品
的前处理方法
一、含卤素有机药物的分析
X
（2）烯丙型卤和苄卤 ）
CH2 CH CH2 X
活泼
CH2X
（3）卤代烷型 ）
介于两者之间
n≥2
CH2 CH (CH2)n X
2. 分子中所含卤原子的个数 分子中所含卤原子的个数越 多，活泼性越强，特别是同一碳 活泼性越强， 上含多个卤原子或一个苯环上含 多个卤原子时， 多个卤原子时，活泼性增强更加 明显
②样品的准备 取样品适量， 取样品适量，精密称定后按规 定方法包裹，固定于铂丝下端的 定方法包裹， 网内或螺旋处。 网内或螺旋处。
③样品的燃烧 点燃包有供试品的滤纸尾部， 点燃包有供试品的滤纸尾部，迅速放 入燃烧瓶中，按紧瓶塞， 入燃烧瓶中，按紧瓶塞，加水少量封闭瓶 口，俟燃烧完毕（应无黑色碎片），充分 俟燃烧完毕（应无黑色碎片），充分 ）， 振摇，使生成的烟雾完全吸入吸收液中， 振摇，使生成的烟雾完全吸入吸收液中， 放置15min，用水少量冲洗瓶塞及铂丝， 放置15min，用水少量冲洗瓶塞及铂丝， 15min 合并洗液及吸收液，同法另做空白试验。 合并洗液及吸收液，同法另做空白试验。 然后按各药品项下规定的方法进行检查或 测定。 测定。
O2 燃烧分解 HBr + S2- + SO4 + …
HBr +
S2-
NaOH, H2O2
②测定含氟有机药物时，用石 测定含氟有机药物时， 英制燃烧瓶 ③铂丝燃烧时起催化作用 ④应同时做空白试验
⑤燃烧时要注意防爆 ⑥燃烧要完全 ⑦燃烧产生的烟雾完全被吸收
（5）应用
例 磺溴酞钠的含量测定 Ch.P (2005)
Br Br Br
Br C O
C O
HO SO3Na
OH SO3Na
Br Br O O Br NaO S HO Br O O ONa S O O OH
COOH I I
+ 11NaOH + Zn
H 3COCHN I NHCOCH3
COO Na
回流
△
H2 N N H2
+ 3NaI + 2CH3COONa
+ 2Na2ZnO2 + H2O
Ch.P （ 2005 ） 收 载 的 胆 影 碘番酸、 胆影葡胺、 酸 、 碘番酸 、 胆影葡胺 、 泛影 葡胺、 碘他拉酸等均采用同法 葡胺 、 测定。 测定。 USP（28）、 （2004） （ ）、 ）、BP（ ）
I
胆影酸
COOH I CH3CONH I I CONHCH3
碘他拉酸
I I H2N I CH2CHCOOH C2H5
碘番酸
I
CH 3 CH (CH 2) 8
COOCH 2CH 3
碘苯酯
I CO O OCH2 CH2N(C 2H5 )2 HCl
I CH2CH 2CH2CH3
盐酸胺碘酮
O F N HN N C2H5 COOH
C − Cl + O2 H ↑ → Cl →NaCl
适用于含卤素、硫、氮、 适用于含卤素、 硒等有机药物的分析
NaOH溶 液
点 燃
本法特点是简便、快速、 本法特点是简便、快速、破 坏完全， 坏完全，尤其适用于微量样品 的分析
（ 2） 仪器与材料 ）
①仪器装置 燃烧瓶为500、1000或 、 燃烧瓶为 或 2000ml无色、磨口、厚壁、 无色、磨口、厚壁、 无色 硬质玻璃锥型瓶；瓶塞空 硬质玻璃锥型瓶；瓶塞空 底部熔封铂丝一根， 心，底部熔封铂丝一根， 下端呈螺旋状或网状
（4）注意事项
① 根据被燃烧分解的样品量选用 适宜大小的燃烧瓶。 适宜大小的燃烧瓶。 Ch.P （ 2005 ） 规定的燃烧瓶 Ch. 2005） 体积为500 、 1000或 2000ml 三种 体积为 500、 1000 或 2000ml三种 ， 三种， 采用常量或半微量分析
待分解样品量
燃烧瓶的体积
反应摩尔比为1∶3 被测物的摩尔质量， 被测物的摩尔质量，g/mol
滴定液浓度， 滴定液浓度，mol/L
CM 0.1m L×186.47g m ol ol T= = n 3 = 6.216g L = 6.216m m g l
1 mol样品消耗滴定液的摩尔数， 样品消耗滴定液的摩尔数， 样品消耗滴定液的摩尔数 滴定度，每1 ml滴定液相当于被测 常体现为反应摩尔比，即1∶n。 常体现为反应摩尔比， ∶ 。 组分的mg数，mg/ml
诺氟沙星
HO CH3 F O F H
CH2OCOCH3 C O CH3 CH3 O C CH3 O H
醋酸氟轻松
Br Br Br
Br C O
C O
HO SO3Na
OH SO3Na
磺溴酞钠
（二）含卤素有机药物的分析
C − X →X
直接回流后测定法 碱性或酸性还原后测定法 氧瓶燃烧分解后测定法
本法适用于含卤素有机药 物结构中卤素原子结合不牢固 的药物。 的药物。
例三氯叔丁醇的测定 原理
Ch.P（2005） （ ）
三氯叔丁醇在氢氧化钠溶液中
加热回流水解， 加热回流水解 ， 氯元素全部转变成氯 化钠，然后用剩余滴定法， 化钠 ， 然后用剩余滴定法 ， 即于水解 液中加硝酸酸化， 液中加硝酸酸化 ， 再加入定量过量的 硝酸银滴定液， 生成AgCl沉淀 ， 沉淀， 硝酸银滴定液 ， 使 Cl- 生成 沉淀 过量的硝酸银， 以 Fe3+ 为指示剂， 用 过量的硝酸银 ， 为指示剂 ， 硫氰酸铵液回滴定。 硫氰酸铵液回滴定。
②称样用材料及称样 A. 固体样品 无灰滤纸 B. 液体样品 纸袋 C. 软膏类样品：将适量样品置 软膏类样品： 不含被测成分的蜡油纸中包裹严密， 不含被测成分的蜡油纸中包裹严密， 外层再用无灰滤纸包裹
③氧气 ④吸收液
A. 作用：吸收液的作用是将样 作用： 品经燃烧分解所产生的各种价态的 卤素、 卤素、硫、氮、硒等，定量地吸收 硒等， 并转变为一定的便于测定的价态