药典生物样品定量分析方法验证指导原则

中国药典2015年版9012生物样品定置分析方法验证指导原则一、范围准确测定生物基质（如全血、血清、血浆、尿）中的药物浓度，对于药物和制剂研发非常重要。

这些数据可被用于支持药品的安全性和有效性，或根据毒动学、药动学和生物等效性试验的结果做出关键性决定。

因此，必须完整地验证和记录应用的生物分析方法，以获得可靠的结果。

本指导原则提供生物分析方法验证的要求，也涉及非临床或临床试验样品实际分析的基本要求，以及何时可以使用部分验证或交叉验证，来替代完整验证。

本指导原则二和三主要针对色谱分析方法，四针对配体结合分析方法。

生物样品定量分析方法验证和试验样品分析应符合本指导原则的技术要求。

应该在相应的生物样品分析中遵守G L P原则或GC P原则。

二、生物分析方法验证(一）分析方法的完整验证分析方法验证的主要目的是，证明特定方法对于测定在某种生物基质中分析物浓度的可靠性。

此外，方法验证应采用与试验样品相同的抗凝剂。

一般应对每个新分析方法和新分析物进行完整验证。

当难于获得相同的基质时，可以采用适当基质替代，但要说明理由。

一个生物分析方法的主要特征包括：选择性、定量下限、响应函数和校正范围（标准曲线性能）、准确度、精密度、基质效应、分析物在生物基质以及溶液中储存和处理全过程中的稳定性。

有时可能需要测定多个分析物。

这可能涉及两种不同的药物，也可能涉及一个母体药物及其代谢物，或一个药物的对映体或异构体。

在这些情况下，验证和分析的原则适用于所有涉及的分析物。

对照标准物质在方法验证中，含有分析物对照标准物质的溶液将被加人到空白生物基质中。

此外，色谱方法通常使用适当的内标。

应该从可追溯的来源获得对照标准物质。

应该科学论证对照标准物质的适用性。

分析证书应该确认对照标准物质的纯度，并提供储存条件、失效日期和批号。

对于内标，只要能证明其适用性即可，例如显示该物质本身或其相关的任何杂质不产生干扰。

当在生物分析方法中使用质谱检测时，推荐尽可能使用稳定同位素标记的内标。

9012生物样品定量分析方法验证指导原则9012生物样品定量分析方法验证指导原则是为了确保生物样品定量分析方法的准确性和可靠性而制定的一系列原则和指导。

生物样品定量分析方法验证是指通过实验和数据分析，验证该方法能够准确、可靠地定量分析生物样品中目标物质的含量。

以下是关于9012生物样品定量分析方法验证指导原则的详细介绍。

1.验证目标：明确验证的目标，即要验证的生物样品定量分析方法和目标物质的含量范围。

验证的目标应明确具体，包括检测的目标物质、所用的定量方法和样品类型等。

2.实验设计：合理设计验证实验方案。

验证实验应采用相关的生物样品，并根据目标物质的特性选择合适的样品处理方法。

实验设计应包括重复次数的确定、正负对照样品的设置和实验步骤的详细描述。

3.准确性：验证方法的准确性是指分析结果与真实值之间的一致性。

通过对一定数量的已知浓度样品进行分析，评估方法的准确性。

评估指标可包括回收率、偏差等指标。

4.精密度：验证方法的精密度是指同一样品在重复测量条件下，方法重复性的可靠性。

通过测量同一样品的重复测量值，评估方法的精密度。

评估指标可包括相对标准偏差(RSD)、变异系数等指标。

5.灵敏度：验证方法的灵敏度是指方法对目标物质浓度变化的敏感程度。

通过测量不同浓度样品的分析信号，评估方法的灵敏度。

评估指标可包括最低检测限、定量限等指标。

6.选择性：验证方法的选择性是指方法对其他干扰物质的响应能力。

通过测量其他相关物质的干扰试验，评估方法的选择性。

评估指标可包括干扰物质的峰检出率、峰分离度等指标。

7.稳定性：验证方法的稳定性是指方法在规定条件下的变化范围。

通过存储试样的时效试验、方法的变更试验等，评估方法的稳定性。

评估指标可包括试样的峰面积或峰高百分含量的变化程度。

8.结果分析：根据验证实验的结果，进行数据统计和分析。

根据评估指标的要求，判断方法是否满足准确性、精密度、灵敏度、选择性和稳定性等要求。

结果分析应包括合理的统计方法和结果显示方式。

生物样品定量分析方法验证指导原则1.设计验证计划：验证计划应明确验证的目的、范围和任务，并确定所需资源和时间。

验证计划还应包括验证参数、验证样品数量和测试条件等详细信息。

2.确定验证参数：验证参数是指确定方法准确性、精密度、线性范围、检测限和选择性等方面的参数。

根据具体的分析方法，选择适当的验证参数进行验证。

3.准确性验证：准确性验证包括回收率、加标回收率和对照品比较等方法。

在准确性验证中，使用已知浓度的标准品或对照品进行分析，并比较结果与标准值或真实值之间的差异。

4.精密度验证：精密度验证是通过重复测定同一样品，评估方法的精密度。

重复测定应在相同条件下进行，采用适当的统计方法计算结果的精密度。

5.线性范围验证：线性范围验证涉及不同浓度下的响应与浓度之间的线性关系。

通过分析一系列不同浓度的标准品或对照品，并绘制浓度与响应之间的曲线，确定方法的线性范围。

6.检测限验证：检测限是方法能够可靠检测到的最低浓度。

通过分析一系列浓度低于检测限的样品，并确定能够可靠检测到的最低浓度。

7.选择性验证：选择性验证是评估方法对目标物和干扰物的选择性。

通过分析不同的样品矩阵或添加干扰物，并验证分析结果是否受到干扰。

8.数据分析：在验证完成后，应进行数据分析和评估。

使用适当的统计方法，计算准确度、精密度和线性范围等参数，并评估分析方法的可行性和可靠性。

9.结果报告和文件管理：验证的结果应记录并报告。

应编写验证报告，包括验证计划、实验结果、数据分析和结论等。

还应制定相应的文件管理措施，以确保验证结果的追溯性。

综上所述，生物样品定量分析方法验证是确保分析结果准确性和可靠性的重要步骤。

实施验证需要设计验证计划、确定验证参数、进行准确性、精密度、线性范围、检测限和选择性等方面的验证，并进行数据分析和结果报告。

通过遵循上述指导原则，可以有效验证生物样品定量分析方法的可行性和可靠性。

生物样品定量分析方法验证指导原则（草案）11. 范围2准确测定生物基质（如全血、血清、血浆、尿）中的药物浓度，对于药物和3制剂研发非常重要。

这些数据可被用于支持药品的安全性和有效性，或根据毒动4学、药动学和生物等效性试验的结果做出关键性决定。

因此，必须完整地验证和5记录应用的生物分析方法，以获得可靠的结果。

6本指导原则提供生物分析方法验证的要求，也涉及非临床或临床试验样品实7际分析的基本要求，以及何时可以使用部分验证或交叉验证，来替代完整验证。

8生物样品定量分析方法验证和试验样品分析应符合本指导原则的技术要求。

9应该在相应的生物样品分析中遵守GLP原则或GCP原则。

102.生物分析方法验证112.1 分析方法的完整验证12分析方法验证的主要目的是，证明特定方法对于测定在某种生物基质中分析13物浓度的可靠性。

此外，方法验证应采用与试验样品相同的抗凝剂。

一般应对每14个物种和每种基质进行完整验证。

当难于获得相同的基质时，可以采用适当基质15替代，但要说明理由。

16一个生物分析方法的主要特征包括：选择性、定量下限、响应函数和校正范17围（标准曲线性能）、准确度、精密度、基质效应、分析物在生物基质以及溶液18中储存和处理全过程中的稳定性。

19有时可能需要测定多个分析物。

这可能涉及两种不同的药物，也可能涉及一20个母体药物及其代谢物，或一个药物的对映体或异构体。

在这些情况下，验证和21分析的原则适用于所有涉及的分析物。

22对照标准物质23在方法验证中，含有分析物对照标准物质的溶液将被加入到空白生物基质24中。

此外，色谱方法通常使用适当的内标。

25应该从可追溯的来源获得对照标准物质。

应该科学论证对照标准物质的适用26性。

分析证书应该确认对照标准物质的纯度，并提供储存条件、失效日期和批号。

27对于内标，只要能证明其适用性即可，例如显示该物质本身或其相关的任何杂质28不产生干扰。

29当在生物分析方法中使用质谱检测时，推荐尽可能使用稳定同位素标记的内30标。

一、验证目标和范围生物样品定量分析方法的验证目标是评估方法的适用性、准确性、精密度、灵敏度、线性范围、选择性、稳定性和测定限等指标。

验证的范围应包括常规样品、稳定样品和特殊样品等方面。

二、验证计划和报告验证计划应包括验证的目的、范围、方法、样品、检测设备和仪器的选择、验证标准和指标的确定、样品的制备与处理、实验设计和统计分析等内容。

验证报告应包括验证计划的执行情况，具体的验证结果和分析，以及结论和建议等内容。

三、适用性验证方法要考虑分析方法的适用性，包括样品的特性和要求、方法的灵敏度和特异性、样品制备和处理的方法、测定限和线性范围等因素。

四、准确性和精密度准确性和精密度是衡量定量分析方法的重要指标。

准确性的评估包括系统误差的测定和修正，常用方法有标准样品、对比法和加标回收法等。

精密度的评估要考虑到实验操作的稳定性和方法的重复性等因素。

五、选择性和特异性选择性和特异性是评估定量分析方法对目标物质的识别和测定能力的指标。

选择性的评估要考虑方法的干扰物质的影响和实际样品的复杂性。

特异性的评估要考虑到方法对其他物质的干扰以及交叉反应的影响。

六、线性范围和灵敏度线性范围是评估定量分析方法测定结果与目标物质浓度之间的关系的指标。

灵敏度是评估定量分析方法对目标物质低浓度范围内变化的敏感性的指标。

线性范围的评估要包括线性相关系数、回归方程和相关系数的确定。

灵敏度的评估要考虑到检测限和测定限等因素。

七、稳定性稳定性是评估定量分析方法在时间、温度、湿度、光照等条件下的稳定性和耐受性的指标。

稳定性的评估要包括样品的稳定性、试剂的稳定性和仪器的稳定性等方面。

八、测定限测定限是评估定量分析方法可以测定的最低浓度的指标。

测定限的评估要考虑方法的灵敏度和噪声的干扰等因素。

综上所述，中国药典2024年版生物样品定量分析方法验证指导原则（草案）主要涵盖了验证目标和范围、验证计划和报告、适用性、准确性和精密度、选择性和特异性、线性范围和灵敏度、稳定性和测定限等方面的内容。

9101分析方法验证指导原则分析方法验证（analytical method validation）的目的是证明建立的方法适合于相应检测要求。

在建立药品质量标准、变更药品生产工艺和制剂组分、修订原分析方法时，需对分析方法进行验证。

生物制品质量控制中采用的方法包括理化分析方法和生物学测定方法，其中理化分析方法的验证原则与化学药品基本相同，所以可参照本指导原则进行，但在进行具体验证时还需要结合生物制品的特点考虑；相对于理化分析方法而言，生物学测定方法存在更多的影响因素，因此本指导原则不涉及生物学测定方法验证的内容。

验证的分析项目：鉴别试验、杂质检查（限度或定量分析）、含量测定（包括特性参数和含量/效价测定，其中特性参数如：药物溶出度、释放度等）。

验证的指标有：专属性、准确度、精密度（包括重复性、中间精密度和重现性）、检测限、定量限、线性、范围、耐用性。

在分析方法中，须用标准物质进行试验。

由于分析方法具有各自的特点中，并随分析对象而变化，因此需要视具体情况拟订验证的指标。

表1列出的分析项目和相应的验证指标可供参考。

表1检验项目和验证指标项目内容鉴别杂质测定含量测定-特性参数-含量或效价测定定量限度专属性②++++准确度-+-+精密度重复性-+-+中间精密度-+①-+①检测限（LOD）--③+-定量限(LOQ)-+--线性-+-+范围-+-+耐用性++++ 1已有重现性验证，不需要验证中间精密度；2如一种方法不够专属，可用其他分析方法予以补充；3视具体情况予以验证。

方法学验证内容如下：一、专属性专属性系指在其他成分（如杂质、降解产物、辅料等）可能存在下，采用的分析方法能正确测定出被测物的能力。

鉴别反应、杂质检査和含量测定方法，均应考察其专属性。

如方法专属性不强，应采用一种或多种不同原理的方法予以补充。

1.鉴别反应应能区分可能共存的物质或结构相似的化合物。

不含被测成分的供试品，以及结构相似或组分中的有关化合物，应均呈阴性反应。

9012生物样品定量分析方法验证指导原则生物样品定量分析方法验证是确保所采用的分析方法能够准确、可靠地定量生物样品中目标分析物的含量的过程。

验证验证是科学研究中非常重要的步骤，能够确保分析方法的可靠性和有效性。

本文将就生物样品定量分析方法验证的指导原则进行详细介绍。

一、准备工作：1.要明确分析方法的目的和要求，明确分析的目标物质、相关物质和可能影响分析结果的有害物质。

2.正确选择参考标准物质，确保其纯度、稳定性和可获得性。

二、验证方案的制定：1.根据样品的特点和目标物质的性质，制定验证方案。

验证方案应包括验证对象（样品类型、目标物质），验证方法（样品前处理、分析流程），验证指标（准确度、精密度、线性等）等内容。

2.确定验证方案的验证参数，包括样品容量、配制方案、浓度范围等。

三、验证准确度：1.准确度是指分析结果与真实值的接近程度。

验证准确度可以使用加标回收率和对照样品法进行验证。

2.加标回收率验证是在不同浓度水平下，加入一定量的目标物质，并对其进行分析，计算加标回收率。

3.对照样品法是用已知浓度的标准物质进行测定，计算其测定值与已知浓度之间的偏差。

四、验证精密度：1.精密度是指同一样品在同一实验室下，通过多次测定得到的结果的一致性。

验证精密度可以使用重复测定法进行验证。

2.重复测定法是在相同条件下，对同一样品进行多次独立测定，计算测定结果的方差或相对标准偏差。

五、验证线性范围：1.线性范围是指分析方法能够在一定范围内随着目标物质浓度的变化而呈现线性关系。

验证线性范围可以使用系列标准品浓度进行测定，绘制标准曲线。

2.根据标准曲线，分析样品中目标物质的浓度，在线性范围内，测定值与实际浓度之间的误差应在一定范围内。

六、其他验证指标：除了上述的准确度、精密度和线性范围，根据实际需要，还可以对选择性、稳定性、重复性、指标回收率等指标进行验证。

七、结果分析和报告：1.对验证结果进行评价和分析，判断分析方法是否满足要求。

方法验证指导原则-《中国药典》2015年版第四部9101药品质量标准分析方法验证指导原则量。

③应注意固体制剂的晶型原料药含量应在标准曲线的线性范围内。

④应使用外标标准物质ai2o3对仪器及数据进行校正。

方法3差示扫描量热法（DSC)定置分析方法，获得供试品晶型含量数据。

采用DSC定量分析的晶型物质一般应具有不同的熔融吸热峰值，且晶型样品质量与吸热量呈正比关系。

(a)晶型原料药分析：精密称量不同质量晶型样品，建立质量与热量的热焓值的线性关系，绘制标准曲线，定量测定样品的晶型含量。

(b)混晶原料药分析：当不同晶型含量与热焓呈正比关系，采用精密称量配制不同晶型含量的混晶样品，建立晶型含量与热焓值的线性关系，绘制标准曲线，定量测定混晶样品中的晶型含量。

(c)方法说明：①仅适用于晶型原料药定量分析。

②对熔融吸热峰值相差大的混晶原料供试品，建立标准曲线时线性范围较宽；熔融吸热峰值相差小的混晶样品，建立标准曲线时线性范围较窄。

③有时DSC法仅能作为限量检测方法。

方法4红外光谱（IR)定量分析方法，获得供试品晶型含量数据。

采用IR法可以对晶型原料药或固体制剂进行定量分析，常用的方法为相对峰强度法。

晶型特征峰选取原则：①分别选取2种晶型特有的红外光谱吸收峰作为特征峰。

②2种晶型的特征峰应独立而不受对方干扰。

③特征峰强度应与晶型成分含量呈对应线性关系。

对压力可致晶型状态发生转变的晶型原料供试品，制样时应避免压片法。

(a)晶型原料药分析：采用相对峰强度法时分别选择2 种晶型成分的特征吸收峰位置匕与b2,在同一红外光谱图上读取2种晶型成分的特征吸收峰的吸光度值V1与42，计算二者特征吸收峰的吸光度比值r。

通过配制一系列不同晶型比例的混晶样品，建立特征吸收峰的吸光度比值的对数值与晶型含量间的线性关系，绘制标准曲线，实现对混晶样品的晶型含量进行定量分析。

(b)制剂中晶型原料药成分分析：采用相对峰强度法时分别选择晶型原料药特征吸收峰位置h与空白辅料的特征吸收峰位置b2，在同一红外光谱图上读取2种晶型成分的特征吸收峰的吸光度值八1与A2，计算二者特征吸收峰的吸光度比值~通过配制一系列含有不同质量晶型原料与空白辅料比例混合样品，建立特征吸收峰的吸光度比值的对数值与晶型原料药含量间的线性关系，绘制标准曲线，实现对固体制剂中晶型原料药含量进行定量分析。

2024药典生物样品定量分析方法验证指导原则2024药典生物样品定量分析方法验证指导原则是指对于药物及其原料药以及相关的生物样品进行定量分析方法验证的准则和指导性原则。

这些原则是为了确保药物和生物样品的准确性、可靠性和重复性，从而保证药物的质量和安全性。

以下是关于2024药典生物样品定量分析方法验证指导原则的详细介绍。

首先，2024药典生物样品定量分析方法验证指导原则要求验证人员具有相应的专业知识和经验，能够进行准确、可靠和重复的测试。

验证人员应具备合适的教育背景、培训经历和实践经验，能够正确操作和解释测试结果。

其次，验证步骤应按照规定的程序和要求进行。

验证步骤包括方法准确性验证、方法精密度验证、方法线性范围验证、方法选择度验证和方法稳定性验证等。

这些步骤能够评估方法的准确性、精密度、线性范围、选择度和稳定性等重要指标。

方法准确性验证是评估方法测量结果与真实值之间差异的步骤。

验证人员可以通过比较方法测得的样品浓度与已知浓度的样品进行对照，以评估方法的准确性。

方法精密度验证是评估方法测量结果的一致性和重复性的步骤。

验证人员应根据规定的程序使用不同的检测设备、分析仪器和操作员对同一样品进行多次测试，以评估方法的精密度。

方法线性范围验证是评估方法在一定浓度范围内能否提供可靠测量结果的步骤。

验证人员应根据规定的程序和要求，测试一系列浓度不同的样品，以评估方法的线性范围。

方法选择度验证是评估方法在存在多种干扰物或类似物质的情况下是否准确测量目标物质的步骤。

验证人员可以通过加入干扰物或其他相关物质来评估方法的选择度。

方法稳定性验证是评估方法在不同条件下是否产生相似结果的步骤。

验证人员应根据规定的程序和要求，测试样品在不同条件下的稳定性，以评估方法的稳定性。

最后，验证人员应根据验证结果制定合适的验证报告，包括验证方案、方法验证结果、数据分析和结论等内容。

验证报告应清晰、准确地描述验证过程和结果，并提供可验证性的依据。

2020版药典分析方法验证指导原则分析方法验证（analytical method validation）的目的是证明建立的方法适合于相应检测要求。

在建立药品质量标准、变更药品生产工艺或制剂组分、修订原分析方法时，需对分析方法进行验证。

生物制品质量控制中采用的方法包括理化分析方法和生物学测左方法，其中理化分析方法的验证原则与化学药品基本相同，所以可参照本指导原则进行,但在进行具体验证时还需要结合生物制品的特点考虑: 相对于理化分析方法而言，生物学测左方法存在更多的影响因素，因此本指导原则不涉及生物学测圧方法验证的内容。

验证的分析项目有：鉴别试验、杂质测立（限度或泄量分析）、含量测左（包括特性参数和含量/效价测立，苴中特性参数如：药物溶出度、释放度等）。

验证的指标有：准确度、精密度（包括重复性、中间精密度和重现性）、专属性、检测限、龙量限、线性、范围和耐用性。

在分析方法验证中，须用标准物质进行试验。

由于分析方法具有各自的特点，并随分析对象而变化，因此需要视具体情况拟订验证的指标。

表1中列岀的分析项目和相应的验证指标可供参考。

表1检验项目和验证指标越表1检验项目和验证指标① 已有重现性验证，不需验证中间精密度。

②如一种方法不够专属，可用其他分析方法予以补充。

③ 视具体情况予以验证。

方法验证内容如下。

一、专属性专属性系指在其他成分（如杂质、降解产物、辅料等）可能存在下,采用的分析方法能正确测定出被测物的能力。

鉴別反应、杂质检查和含量测泄方法，均应考察其专属性。

如方法专属性不强，应采用一种或多种不同原理的方法予以补充。

1.鉴别反应应能区分可能共存的物质或结构相似的化合物。

不含被测成分的供试品，以及结构相似或组分中的有关化合物，应均呈阴性反应。

2.含量测泄和杂质测圮采用的色谱法和英他分离方法，应附代表性图谱，以说明方法的专属性，并应标明诸成分在图中的位置，色谱法中的分离度应符合要求。

任杂质对照品可获得的情况下，对于含量测怎，试样中可加入杂质或辅料，考察测左结果是否受干扰，并可与未加杂质或辅料的试样比较测圧结果。

一、验证目的：
生物样品定量分析方法验证旨在评价一种分析方法在特定条件下，确
定适用对象范围，确定方法的准确性，检测灵敏度和其他相关性能指标的
有效性。

验证的结果可以为方法的合理性提供数据支持，并为方法适用性
评价提供依据。

二、验证的步骤：
三、验证的内容：
生物样品定量分析方法验证的主要内容包括精密度、选定性、准确度、线性范围和检测限等指标的验证。

精密度是指在一定条件下，同一样品的
多次测定结果之间的变异程度，它可以衡量方法的稳定性和重复性；选定
性是指方法能够正确识别和定量分析目标物质，并能排除其他干扰成分的
能力；准确度是指方法能够恢复目标物质真实含量的能力；线性范围是指
方法能够在一定浓度范围内，准确地测定目标物质的含量；检测限是指方
法可以可靠地识别和量化目标物质的最低浓度。

这些指标的验证可以全面
评价生物样品定量分析方法的可靠性和适用性。

四、验证的评价：
对于生物样品定量分析方法验证的评价，应根据验证的目的和内容来
进行判断。

一般来说，验证结果应该符合国际和国家药品标准规定的要求，并能够在实际应用中稳定的使用。

验证结果应该包括实验数据、统计分析
和验证报告等多个方面，并且要进行全面系统的评价，最终确定方法的适
用性。

综上所述，中国药典2024年版生物样品定量分析方法验证指导原则（草案）对于药品质量控制起到了重要的指导作用。

正确的应用和执行该
指导原则，可以有效保证药品的质量和治疗效果，并为药物研发和生产提供科学可靠的方法支持。

生物样品定量分析方法验证指导原则1.方法准确性验证：方法准确性验证是指确定方法的测量结果与真实值之间的偏差程度。

方法准确性可以通过检测已知浓度的标准品进行验证，例如添加已知浓度的化合物到样品中，然后使用待验证的方法测量其浓度。

对于生物样品的定量分析方法，可以使用已知浓度的纯化合物或参考物质进行准确性验证。

2.方法精密度验证：方法精密度验证是指对于同一样品反复进行多次测试，并评估结果的变异程度。

在方法精密度验证的过程中，应采用同一样品的多个并行测试进行比较。

可以计算相对标准偏差（RSD）来评估方法的精密度。

较低的RSD值表明方法具有更好的精密度。

3.方法线性验证：方法线性验证是指在一定范围内检测物质浓度与测量信号之间的线性关系。

为了验证方法的线性，可以制备一系列已知浓度的标准品，并使用待验证的方法进行测量。

然后，可以绘制标准品的浓度与测量信号之间的线性回归曲线，评估曲线拟合程度。

4.方法灵敏度验证：方法灵敏度验证是指确定方法能够检测的最低浓度限制。

可以制备一系列不同浓度的标准品，并使用待验证的方法进行测试。

然后，确定样品最低浓度，使其信号与噪声之间具有足够的信噪比。

5.方法选择性验证：方法选择性验证是指方法能够准确识别和测量目标物质而无需受到其他化合物的干扰程度。

在方法选择性验证的过程中，应添加其他可能存在的干扰物质，并评估它们对目标物质测量的影响。

选择性验证可以通过使用纯化合物或混合物样品进行。

6.方法稳定性验证：方法稳定性验证是指方法在一定时间范围和条件下的测量结果的变化程度。

可以通过在不同时间点和环境条件下进行样品测量，并比较结果来评估方法的稳定性。

稳定性验证可包括样品存储稳定性、制备和处理稳定性、环境因素（如温度、湿度）稳定性等方面的考虑。

总之，生物样品定量分析方法验证是确保方法的可靠性和准确性的重要步骤。

验证过程应包括准确性验证、精密度验证、线性验证、灵敏度验证、选择性验证和稳定性验证。

2020生物样品定量分析方法验证指导原则—、范围准确测定生物基质（如全血、血清、血浆、尿）中的药物浓度，对于药物和制剂研发非常重要。

这些数据可被用于支持药品的安全性和有效性，或根据毒动学、药动学和生物等效性试验的结果做出关键性决定。

因此，必须完整地验证和记录应用的生物分析方法，以获得可靠的结果。

本指导原则提供生物分析方法验证的要求，也涉及非临床或临床试验样品实际分析的基本要求，以及何时可以使用部分验证或交叉验证，来替代完整验证。

本指导原则二和三主要针对色谱分析方法，四针对配体结合分析方法。

生物样品定量分析方法验证和试验样品分析应符合本指导原则的技术要求。

应该在相应的生物样品分析中遵守GLP原则或GCP原则。

二、生物分析方法验证（一）分析方法的完整验证分析方法验证的主要目的是，证明特定方法对于测定在某种生物基质中分析物浓度的可靠性。

此外，方法验证应采用与试验样品相同的抗凝剂。

一般应对每个新分析方法和新分析物进行完整验证。

当难于获得相同的基质时，可以采用适当基质替代，但要说明理由。

一个生物分析方法的主要特征包括：选择性、定量下限、响应函数和校正范围（标准曲线性能）、准确度、精密度、基质效应、分析物在生物基质以及溶液中储存和处理全过程中的稳定性。

有时可能需要测定多个分析物。

这可能涉及两种不同的药物，也可能涉及一个母体药物及其代谢物，或一个药物的对映体或异构体。

在这些情况下，验证和分析的原则适用于所有涉及的分析物。

对照标准物质在方法验证中，含有分析物对照标准物质的溶液将被加入到空白生物基质中。

此外，色谱方法通常使用适当的内标。

应该从可追溯的来源获得对照标准物质。

应该科学论证对照标准物质的适用性。

分析证书应该确认对照标准物质的纯度，并提供储存条件、失效日期和批号。

对于内标，只要能证明其适用性即可，例如显示该物质本身或其相关的任何杂质不产生干扰。

当在生物分析方法中使用质谱检测时，推荐尽可能使用稳定同位素标记的内标。

药品质量标准分析方法验证指导原则《中国药典》2015年版药品质量标准分析方法验证的目的是证明采用的方法适合于相应检测要求。

在建立药品质量标准时，分析方法需经验证；在药品生产工艺变更、制剂的组分变更、原分析方法进行修订时，则质量标准分析方法也需进行验证.方法验证理由、过程和结果均应记载在药品质量标准起草说明或修订说明中。

生物制品质量控制中采用的方法包括理化分析方法和生物学测定方法，其中理化分析方法的验证原则与化学药品基本相同，所以可参照本指导原则进行，但在进行具体验证时还需要结合生物制品的特点考虑；相对于理化分析方法而言，生物学测定方法存在更多的影响因素,因此本指导原则不涉及生物学测定方法验证的内容。

验证的分析项目有：鉴别试验、限量或定量检查、原料药或制剂中有效成分含量测定，以及制剂中其他成分（如防腐剂等,中药中其他残留物、添加剂等）的测定。

药品溶出度、释放度等检查中，其溶出量等的测定方法也应进行必要验证.验证指标有：准确度、精密度(包括重复性、中间精密度和重现性)、专属性、检测限、定量限、线性、范围和耐用性。

在分析方法验证中，须采用标准物质进行试验。

由于分析方法具有各自的特点，并随分析对象而变化，因此需要视具体方法拟订验证的指标.表1中列出的分析项目和相应的验证指标可供参考。

一、准确度准确度系指采用该方法测定的结果与真实值或参考值接近的程度，一般用回收率(％)表示。

准确度应在规定的范围内测定。

1.化学药含量测定方法的准确度原料药采用对照品进行测定，或用本法所得结果与已知准确度的另一个方法测定的结果进行比较.制剂可在处方量空白辅料中，加入已知量被测物对照品进行测定。

如不能得到制剂辅料的全部组分，可向待测制剂中加入已知量的被测物对照品进行测定，或用所建立方法的测定结果与已知准确度的另一种方法测定结果进行比较。

准确度也可由所测定的精密度、线性和专属性推算出来。

2.化学药杂质定量测定的准确度可向原料药或制剂处方量空白辅料中加入已知量杂质进行测定。