HA放射免疫测定标准操作流程

放射免疫分析实验室规定和操作流程工作人员被放射性同位素污染是放免实验中最大的危害之一，为了在操作过程中确保安全，有许多严格的规定和要求。

虽然在通常实验中所用同位素的量相对地讲是低的，但这些规定必须严格遵守。

遵守规定1)在放免实验室不准吃、喝和抽烟，操作时必须穿上工作服（放免实验室提供，使用者在试验结束后必须清洗干净，凉干后放回衣柜）；2)溶液的放射强度超过0.1μCi/ml，或总放射量超过10μCi时，必须带上手套操作；（所有放射性材料，其浓度大于0.01μCi/ml或总放射强度大于1μCi时，均须标上同位素标签，标明强度、日期和体积；请注意购买的试剂盒上是否有此标签，以确定试剂盒的放射性强度。

）3)操作台面需有保护层覆盖，包括塑料薄膜或纸张等；4)禁止用嘴来吸移液体；5)非消耗性设备（试管架、移液枪、海绵等），使用后必须用布或纸巾擦干，放在放实验免室指定的柜子，严禁拿到别的地方使用；6)放免实验室水浴锅使用完毕后必须把水排干，防止生锈；7)低温离心机使用前必须进行平衡，用完后必须擦干水迹，拔下插头；8)上机测量前，必须擦干试管壁水迹，以保护γ计数器探头。

9)所有放射性废弃物（放免管、枪头和废液等），均须使用袋子或瓶子收集，标上同位素标签（如，125I）、日期和使用人姓名，并存放在指定的隔间，禁止带出放免室；10)被125I 污染时，应尽早去污（可以先用5 %硫代硫酸钠或5 %亚硫酸钠洗涤，再以10 %碘化钾或碘化钠为载体帮助去污；也可以用普通肥皂或洗涤剂多次清洗去污）。

操作流程1)预先准备好覆盖操作台面的保护层（塑料薄膜和纸张等）、手套、口罩和塑料瓶等防护物品；2)进入放免实验室后，操作人员穿戴好工作服、手套和口罩等，将保护层覆盖在操作台面上；3)取出试管架和移液器，用75%酒精绵球擦拭干净；4)根据试剂盒说明书进行加样、水浴和离心（预先平衡）等；5)将上清倒入污物杯，用棉球包纸巾擦干试管壁（也可直接用移液器或负压泵吸出上清）；6)登记，启动γ计数器并预热20min，启动相连的电脑；7)取出上样架，小心放置待测试管，避免倾倒和污染；8)根据试剂盒说明书设置相关参数，按照γ计数器使用规范进行测量和分析；9)实验完毕后，操作台面上的废弃物必须清理干净，上样架、试管架和移液器（调回最大量程）擦拭后放回原位；10)排干水浴锅的水，擦除低温离心机的水迹，并都拔下插头；11)必须将固体废弃物（放免管、枪头等）装入塑料袋，废液收集到塑料瓶（自已准备），并都标上同位素标签（如，125I）、日期和使用人姓名，并存放在指定的隔间；12)实验结束后，必须将放免实验室钥匙归还管理员，经管理员和负责老师审核无误后方可离开。

放射性检测操作规程最新放射性检测操作规程最新（Radiation Testing Operation Procedures - Latest Version）第一节：引言1.1 目的该操作规程的目的是确保放射性检测过程中的安全性、准确性和质量控制，并遵守所有相关法规和标准。

1.2 适用范围该操作规程适用于所有进行放射性检测的实验室和工作人员。

1.3 定义和缩写（在本操作规程中可能存在的定义和缩写，需加以说明）第二节：安全2.1 人员培训所有参与放射性检测的工作人员应接受相应的培训，并持有合适的资格证书。

2.2 个体防护在进行放射性检测的实验室中，工作人员应佩戴适当的个体防护装备，如手套、护目镜和实验室外套。

工作人员应在工作结束后进行适当的清洁和消毒。

2.3 环境安全实验室应具备适当的安全设备，如防护墙、紧急淋浴和紧急停电按钮。

实验室应定期进行安全检查，并制定应急响应计划。

第三节：设备和仪器3.1 硬件设备所有放射性检测设备和仪器应符合相应的标准，并经过定期校准和维护。

3.2 仪器操作使用仪器之前，工作人员应确保其已经过校准和维护，并具备操作资格。

在操作过程中，工作人员应按照仪器的使用说明书进行操作，并记录相关数据。

第四节：样品处理4.1 样品接收样品接收时，应记录样品的数量、来源和重要信息，如样品采集日期等。

4.2 样品标签每个样品都应有唯一的标识符，并按照实验室的指导进行正确标记。

4.3 样品处理在进行放射性检测之前，样品应按照实验室的操作规程进行处理，如取样、分割、混合等。

4.4 样品保存已处理的样品应妥善保存，并记录存放位置和条件，以确保样品的稳定性和完整性。

第五节：放射性测量5.1 测量方法根据不同的放射性测量要求，选择合适的测量方法，并按照相关标准和规程进行操作。

5.2 测量准确性和精度为确保测量结果的准确性和精度，测量设备应定期进行校准和验证，并进行质量控制检验。

5.3 数据记录所有的放射性测量结果应准确记录，并包括样品信息、测量日期、操作人员等相关信息。

甲状腺素（T4）放射免疫测定【目的】1、初步了解放射免疫测定的一般过程；2、进一步了解γ-闪烁测定的一般方法。

【材料准备】1、试剂125I碘-T放射免疫测定药盒4①125I-T4②抗T4血清③T4标准品：6瓶（0、20、40、80、160、320 ng/ml）④分离剂（PR试剂）2、用具①试管（13×78 mm）18只②微量加样0～200μl（可调）、500 μl各1支③塑料吸头若干④水浴箱、离心机各1台⑤γ放免测量仪1套【操作程序】充分单混匀，室温放置15分钟，任取三管测量总放射性计数（T），取其平均值。

然后在3500转/分离心20分钟，立即小心吸去上清液，测定各管学淀放射性计数（B）。

【结果计算】以B/T×100%或B/B。

×%为纵座标，以T4标准浓度为横座标在座标用四参数拟合绘制标准曲线（计算机拟合）。

摇匀37℃温育60分钟室温放置15分钟，离心15分钟，3500 rpm ，弃上清，测量以待测样品的B/T ×100%或B/B 。

×100%的值在标准曲线上查出样品的T 4含量。

C NSB 为非特异管计数；NSB ：非特异性结合； NSB=)()()()(cpm cpm T cpm cpm C NSB 本底本底--B/B 0=)()()()(0cpm C cpm S cpm C cpm NSB NSB --标准或样品B 0=)()()()(0cpm cpm T cpm C cmp S NSB 本底--正常参考值：42～150 ng/ml 。

试剂盒系北京北方生物技术研究所生产。

放射免疫检定法一、引言放射免疫检定法（radioimmunoassay，简称RIA）是一种利用放射性同位素标记物质和抗原抗体相互作用进行定量分析的方法。

它具有高度的灵敏度、特异性和准确性，在生物医学研究和诊断中得到广泛应用。

本文将详细介绍放射免疫检定法的原理、操作步骤及其在临床上的应用。

二、原理放射免疫检定法基于抗原与抗体相互结合的特异性，通过测量标记物质（通常是放射性同位素标记的抗原或抗体）与未标记物质（待测物质）竞争结合的程度，来定量测定待测物质的浓度。

该方法主要包括以下步骤：1.样品准备：待测物质需要提取和纯化，以获得精确的浓度。

2.标记物质制备：将待测物质标记上放射性同位素。

3.抗体制备：获得特异的抗体，可通过动物免疫、体外培养等方法获得。

4.标样制备：准备一系列已知浓度的标准样品。

5.标准曲线绘制：将标准样品与已知浓度相对应的竞争剂量进行测定，得到标准曲线。

6.待测样品测定：将待测样品与抗体、标记物质一起孵育，再与固相支持物接触，随后进行放射计数，得到计数值。

7.计算浓度：根据标准曲线上待测样品的计数值，计算待测物质的浓度。

三、操作步骤放射免疫检定法的操作步骤如下：1.准备所需试剂和设备：包括抗体、放射性同位素、标准样品、试剂盒、储存条件等。

2.标记放射性同位素：将待测物质标记上放射性同位素，使其具有放射性活性。

3.样品准备：通过提取和纯化方法，获得待测物质的准确浓度。

4.孵育：将待测样品与抗体和标记物质搅拌混合，使其充分反应。

5.分离：通过固相支持物将未结合的标记物质与结合物质分离开来。

6.放射计数：将分离后的结合物质放入放射计数器中，进行计数。

7.数据处理：根据标准曲线上待测样品的计数值，计算待测物质的浓度。

四、应用放射免疫检定法在临床医学中有着广泛的应用，主要应用于以下方面：1.肿瘤标志物检测：放射免疫检定法能够对血清或尿液中的肿瘤标志物进行测定，用于肿瘤的早期诊断、疗效评价和复发监测。

放射科检查流程及操作规范随着医疗技术的发展，放射科检查在现代医学诊断中起到了重要的作用。

本文将介绍放射科检查的流程以及相关的操作规范，以帮助医务人员正确进行放射科检查工作。

一、放射科检查流程放射科检查通常包括以下几个步骤：患者准备、设备操作、影像采集、结果评估和报告编写。

下面将对每个步骤进行详细介绍。

1. 患者准备在进行任何放射科检查之前，医务人员应与患者进行充分的沟通和交流，解释检查的目的、流程和可能的风险。

患者应提供详细的病史和相关的医疗影像资料。

此外，还需要检查患者的过敏史和身体状况，确保其符合检查的安全条件。

2. 设备操作放射科检查所使用的设备包括X射线机、CT扫描仪、MRI机和核医学设备等。

医务人员需要熟悉设备的操作方法，并按照使用说明书正确设置参数。

在操作设备之前，还需进行设备的日常检查和维护工作，确保其正常运行。

3. 影像采集影像采集是放射科检查的核心环节，也是决定检查结果准确性的关键。

在进行影像采集之前，医务人员应根据患者的具体情况选择合适的检查方法，并采取必要的准备措施，如患者体位调整、麻醉等。

在采集影像时，要确保患者的舒适度和安全性，并严格按照操作规程进行。

4. 结果评估采集到的影像需要由专业的放射科医师进行评估和分析。

医师应对影像进行仔细观察，发现和解读潜在的异常情况，并结合患者的临床资料进行综合诊断。

在评估结果时，医师需要保持客观、科学的态度，并及时与其他医务人员进行协商和讨论，以确保诊断的准确性。

5. 报告编写根据影像评估的结果，医师需要撰写详细的报告，包括检查的目的、方法、结果和诊断意见等。

报告应准确、清晰地描述患者的病情和检查结果，为临床医生提供有价值的参考。

此外，报告还应符合医疗记录的规范和要求，包括相关的隐私保护和数据存储要求。

二、操作规范为确保放射科检查的质量和安全，医务人员需遵守以下操作规范：1. 密封辐射防护室在进行放射性核素检查时，应将患者置于密封辐射防护室内，并采取必要的辐射防护措施，如佩戴防护服、戴好手套等，以减少辐射对医务人员和患者的危害。

放射免疫测定法放射免疫测定法(radiation immune assay, RIA)的技术类型很多，如再结合免疫技术，可用它作标本的定性、定量及定位分析等。

另外，由于它是以最敏感的同位素作标记，所以本法的高敏感性是最重要的特点，测定结果可达ng～pg水平，这是现用一切检测微量抗原和抗体法所不可比拟的。

(一) 放射免疫超微量分析法用其检测血清抗体时，用同位素如3H、14C、32P、131I或125I标记的病毒抗原与被检血清在37℃条件下一起孵育2小时，使二者相遇结合后，再加入抗γ球蛋白时，便与上述的抗原抗体复合物联结在一起，离心后，形成大的复合物沉淀下来，此时可用闪烁探测仪分别测量上清液和沉淀物的脉冲数，并计算出沉淀物放射性占总放射性的百分率，以此为指标，判定被检血清中有无相应抗体及其含量。

另外，也可用本法测抗原，依据的原理与上述测抗体的方法大致相同。

区别是将已知抗血清和可能含有相应病毒抗原的被检标本一起孵育，如被检标本中含有相应的病毒抗原，则二者充分结合，再引入标记的已知病毒抗原时，由于已知抗体已与标本中的抗原结合，则不能再与引入的标记病毒结合，只能呈游离状态存在于上清液中，加入抗γ球蛋白时，则与已知抗体和被检病毒抗原的复合物相结合，离心后，这种大分子的结合物即被沉淀下来，应用闪烁探测仪分别测定上清液和沉淀物的放射性时，结果沉淀物的放射性明显低于上清液的放射性，如果被检标本中不含相应的病毒抗原时，则沉淀物的放射性明显高于上清液的放射性。

(二) 放射火箭电泳测定法这种方法实际上是放射自显影与单向定量免疫电泳(即火箭电泳)相结合的一种测定技术。

它的分辨力很高，有的能精确地测出细胞内分子水平的放射性物质的分布。

检测时，可先将被检抗原用3H、131I标记，滴加于含一定量的抗血清琼脂凝胶板孔中，电泳时，抗原在移动过程中，与琼脂板中的抗体在比例适当处，即形成抗原-抗体复合物，未结合的抗原继续向阳极移动，直至全部抗原与抗体结合完为止，这样就形成一个形似火箭的锥形沉淀峰。

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放射免疫分析测定方法用放射免疫分析进行测定时分三个步骤，即抗原抗体的竞争抑制反应、B和F的分离及放射性的测量。

（一）抗原抗体反应将抗原（标准品和受检标本）、标记抗原和抗血清按顺序定量加入小试管中，在一定的温度下进行反应一定时间，使竞争抑制反应达到平衡。

不同质量的抗体和不同含量的抗原对温育的温度和时间有不同的要求。

如受检标本抗原含量较高，抗血清的亲和常数较大，可选择较高的温度（15～37℃）进行较短时间的温育，反之应在低温（4℃）作较长时间的温育，形成的抗原抗体复合物较为牢固。

（二）B、F分离技术在RIA反应中，标记抗原和特异性抗体的含量极微，形成的标记抗原抗体复合物（B）不能自行沉淀，因此需用一种合适的沉淀剂使它彻底沉淀，以完成与游离标记抗原（F）的分离。

另外对小分子量的抗原也可采取吸附法使B与F分离。

1．第二抗体沉淀法这是RIA中最常用的一种沉淀方法。

将产生特异性抗体（第一抗体）的动物（例如兔）的IgG免疫另一种动物（例如羊），制得羊抗兔IgG血清（第二抗体）。

由于在本反应系统中采用第一、第二两种抗体，故称为双抗体法。

在抗原与特异性抗体反应后加入第二抗体，形成由抗原－第一抗体－第二抗体组成的双抗体复合物。

但因第一抗体浓度甚低，其复合物亦极少，无法进行离心分离，为此在分离时加入一定量的与一抗同种动物的血清或IgG，使之与第二抗体形成可见的沉淀物，与上述抗原的双抗体复合物形成共沉淀。

经离心即可使含有结合态抗原（B）的沉淀物沉淀，与上清液中的游离标记抗原（F）分离。

将第二抗体结合在颗粒状的固相载体之上即成为固相第二抗体。

利用固相第二抗体分离B、F，操作简便、快速。

2．聚乙二醇（PEG）沉淀法最近各种RIA反应系统逐渐采用了PEG 溶液代替第二抗体作沉淀剂。

PEG沉淀剂的主要优点是制备方便，沉淀完全。

缺点是非常特异性结合率比用第二抗体为高，且温度高于30℃时沉淀物容易复溶。

3．PR试剂法是一种将双抗体与PEG二法相结合的方法。