各种大肠杆菌菌株特点
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北京华越洋生物提供QQ:1733351176 大肠杆菌菌株,酵母菌菌株,农杆菌菌株-北京现货菌种名称编号类别抗性规格RosettaBlue(DE3)pLac I 12-300大肠杆菌1 mLRosettaBlue(DE3)pLys S 12-321大肠杆菌1 mLSF21 12-318昆虫细胞无 1 mLSF9 12-319昆虫细胞1 mLSG1117 12-251大肠杆菌1 mLSMD 11681 12-270 酵母 1 mL SMD1163 12-272 酵母 1 mL SMD1168 12-114 酵母 1 mL SMD1168H 12-208 酵母 1 mL SMD168H 12-271 酵母 1 mLStbl2 12-252大肠杆菌nalidixicacid1 mLStbl3 12-253大肠杆菌Str 1 mLStbl4 12-254大肠杆菌Tet 1 mLSURE 12-255大肠杆菌Kan;Tet 1 mLT1 12-327大肠杆菌1 mLTB1 12-256大肠杆菌无抗性 1 mLTG1 12-44大肠杆菌无抗性 1 mLTH1 12-257大肠杆菌无抗性 1 mLTKB1 12-310大肠杆菌Tet 1 mL北京华越洋生物提供QQ:1733351176Top10 12-81大肠杆菌Str 1 mLTop10F 12-188大肠杆菌1 mLTop10F’ 12-381大肠杆菌Str,Tet 1 mLTuner 12-306大肠杆菌无抗性 1 mLTuner(DE3) 12-258大肠杆菌无抗性 1 mLTuner(DE3))plysS 12-219大肠杆菌Cam 1 mLTuner(DE3)pLacI 12-307大肠杆菌Cam 1 mLTurbo 12-259大肠杆菌无抗性 1 mLWB600 12-276枯草宿主菌1 mLX33 12-273 农杆菌 1 mLXL blue 12-260大肠杆菌无抗性 1 mLXL-10 gold 12-261大肠杆菌Tet,Cam 1 mLXL1 Blue 12-308大肠杆菌Tet,Nalidixic Acid1 mLXL2 Blue 12-309大肠杆菌Tet,Cam,NalidixicAcid1 mLY1089 12-262大肠杆菌1 mLY1090 12-263大肠杆菌1 mLY187 12-325 酵母 1 mL Y2HGold 12-326 酵母菌种名称编号类别抗性规格1A75 12-274枯草宿主菌1 mL北京华越洋生物提供QQ:1733351176AD494(DE3) 12-221大肠杆菌Kan 1 mLAGL1 12-322 农杆菌 1 mL AH109 12-264 酵母 1 mLAM1 12-222大肠杆菌无抗性 1 mLB834 12-284大肠杆菌无 1 mLB834(DE3) 12-285大肠杆菌无抗性 1 mLB834(DE3) pLysS 12-286大肠杆菌Cam 1 mLB834(DE3) pRARE 12-287大肠杆菌Cam 1 mLBJ5183 12-184大肠杆菌Str 1 mLBL21 12-174大肠杆菌无抗性 1 mLBL21 CodonPlus(DE3) 12-328大肠杆菌1 mLBL21 codonplusRIPL 12-119大肠杆菌Cam 1 mLBL21 RP 12-224大肠杆菌1 mLBL21 SI 12-223大肠杆菌Tet 1 mLBL21 Star(DE3) 12-291大肠杆菌1 mLBL21 Star(DE3)pLySs 12-292大肠杆菌1 mLBL21 trxB(DE3) 12-293大肠杆菌1 mLBL21 trxB(DE3)pLysS 12-294大肠杆菌1 mLBL21(AI) 12-144大肠杆菌Tet 1 mLBL21(DE3) 12-25 大肠杆无抗性 1 mL北京华越洋生物提供QQ:1733351176 菌BL21(DE3)plysS 12-42大肠杆菌Cam 1 mLBL21RIL 12-225大肠杆菌1 mLBLR 12-288大肠杆菌Tet 1 mLBLR(DE3) 12-289大肠杆菌1 mLBLR(DE3)pLysS 12-290大肠杆菌1 mLBS168 12-275枯草宿主菌1 mLC2566 12-226大肠杆菌1 mLC41(DE3) 12-227大肠杆菌1 mLC43(DE3) 12-228大肠杆菌1 mLC600 12-229大肠杆菌1 mLDB3.1 12-230大肠杆菌无抗性 1 mLDH10Bac 12-212大肠杆菌Kan、Tet 1 mLDH5α 12-11大肠杆菌无抗性 1 mLDH5α(pir) 12-231大肠杆菌无抗性 1 mLE2566 12-232大肠杆菌1 mLEBY100 12-265 酵母 1 mL EGY48 12-323 酵母 1 mL EHA103 12-161 农杆菌 1 mL EHA105 12-153 农杆菌 1 mLER2529 12-233大肠杆菌1 mL北京华越洋生物提供QQ:1733351176ER2738 12-234大肠杆菌1 mLGS115 12-266 酵母 1 mL GS190 12-267 酵母 1 mL GS200 12-268 酵母 1 mL GV3101 12-162 农杆菌 1 mLHB101 12-47大肠杆菌Str 1 mLHB2151 12-218大肠杆菌1 mLHigh Five 12-317昆虫细胞1 mLHMS174 12-295大肠杆菌Rif 1 mLHMS174(DE3) 12-112大肠杆菌Rif 1 mLHMS174(DE3)pLysS 12-296大肠杆菌Rif 1 mLINVSc1 12-147 酵母 1 mLJF1125 12-235大肠杆菌1 mLJM101 12-236大肠杆菌1 mLJM103 12-237大肠杆菌Str 1 mLJM105 12-238大肠杆菌Str 1 mLJM107 12-239大肠杆菌NalidixicAcid1 mLJM108 12-297大肠杆菌NalidixicAcid1 mLJM109 12-157大肠杆菌萘啶酮酸 1 mLJM109(DE3) 12-240大肠杆菌NalidixicAcid1 mLJM110 12-217大肠杆菌Str 1 mL北京华越洋生物提供QQ:1733351176JM83 12-145大肠杆菌1 mLK12 12-241大肠杆菌1 mLK802 12-242大肠杆菌1 mLKM 71 12-269 酵母 1 mL KM 71H 12-315 酵母 1 mL LBA4404 12-96 农杆菌 1 mLM15 12-243大肠杆菌1 mLMDS 42recA 12-4大肠杆菌1 mLMDS 42recA trfA 12-7大肠杆菌1 mLMG1655 12-277大肠杆菌1 mLNMY51 12-324 酵母 1 mLNovaBlue 12-304大肠杆菌1 mLNovaBlue T1 12-305大肠杆菌1 mLNovablue(DE3) 12-244大肠杆菌Tet 1 mLOrgami B 12-207大肠杆菌Kan;Tet 1 mLOrgami(DE3) 12-245大肠杆菌Kan,Str,Tet1 mLOrgami(DE3)plysS 12-247大肠杆菌Cam,Kan,Str,Tet1 mLOrgamiB(DE3) 12-246大肠杆菌Kan,Tet 1 mLOrigami(DE3)pLacI 12-298大肠杆菌1 mLOrigamiB(DE3)pLacI 12-299大肠杆菌1 mLPichiaPink Strain1 12-311 酵母 1 mL北京华越洋生物提供QQ:1733351176 PichiaPink Strain2 12-312 酵母 1 mLPichiaPink Strain3 12-313 酵母 1 mLPichiaPink Strain4 12-314 酵母 1 mLRN4220 12-316金黄色葡萄球菌1 mLRosetta 12-248大肠杆菌Cam 1 mLRosetta(DE3) 12-141大肠杆菌Cam 1 mLRosetta(DE3)pLacI 12-301大肠杆菌1 mLRosetta(DE3)plysS 12-130大肠杆菌Cam 1 mLRosetta(DE5) 12-250大肠杆菌1 mLRosetta-gami(DE3) 12-107大肠杆菌Cam,Kan,Str,Tet1 mLRosetta-gami(DE3)pLa cI 12-302大肠杆菌1 mLRosetta-gami(DE3)plys S 12-131大肠杆菌Cam,Kan,Str,Tet1 mLRosetta-gamiB(DE3) 12-206大肠杆菌Cam,Kan,Tet1 mLRosetta-gamiB(DE3)pL acI 12-303大肠杆菌1 mLRosetta-gamiB(DE3)pl ysS 12-278大肠杆菌Cam,Kan,Tet1 mLRosettaBlue 12-320大肠杆菌1 mLRosettaBlue(DE3) 12-249大肠杆菌Cam,Tet 1 mL【冷冻管开封】用浸过75%酒精的脱脂棉严格消毒冷冻管盖。
1、大肠杆菌DH5a菌株DH5a是世界上最常用的基因工程菌株之一。
由于DH5α是DNA酶缺陷型菌株,有利于基因克隆,保存质粒,但该菌株的蛋白酶没有缺陷,表达的蛋白容易被降解,因此通常不作为表达菌株。
E.coli DH5a在使用pUC系列质粒载体转化时,可与载体编码的β-半乳糖苷酶氨基端实现α-互补。
可用于蓝白斑筛选鉴别重组菌株。
基因型:F-,φ80dlacZΔM15,Δ(lacZYA-argF)U169,deoR,recA1,endA1,hsdR17(rk-,mk+),phoA,supE44,λ-,thi-1,gyrA96,relA12、大肠杆菌BL21(DE3) 菌株该菌株用于高效表达克隆于含有噬菌体T7启动子的表达载体(如pET系列)的基因。
T7噬菌体RNA聚合酶位于λ噬菌体DE3区,该区整合于BL21的染色体上。
该菌适合表达非毒性蛋白。
基因型:F-,ompT,hsdS(rBB-mB-),gal,dcm(DE3)3、大肠杆菌BL21(DE3) pLysS菌株该菌株含有质粒pLysS,因此具有氯霉素抗性。
PLysS含有表达T7溶菌酶的基因,能够降低目的基因的背景表达水平,但不干扰目的蛋白的表达。
该菌适合表达毒性蛋白和非毒性蛋白。
基因型:F-,ompT hsdS(rBB-mB-),gal,dcm(DE3,pLysS ,Camr4、大肠杆菌JM109菌株该菌株在使用pUC系列质粒载体进行DNA转化或用M13 phage载体进行转染时,由于载体DNA产生的LacZa多肽和JM09编码的LacZΔM15进行α-互补,从而显示β-半乳糖苷酶活性,由此很容易鉴别重组体菌株。
基因型:recA1,endA1,gyrA96,thi-1,hsdR17,supE44,relA1,Δ(lac-proAB)/F’[traD36,proAB+,lacIq,lacZΔM15]5、大肠杆菌TOP10菌株该菌株适用于高效的DNA克隆和质粒扩增,能保证高拷贝质粒的稳定遗传。
常用大肠杆菌基础信息及使用说明常用大肠杆菌(Escherichia coli)是一种常见的肠道菌群中的细菌,是一种革兰氏阴性菌,属于革兰氏阴性杆菌属中的大肠杆菌(Escherichia)属。
大肠杆菌长约2微米,呈棒状,通常是无运动的。
它是一种兼性厌氧菌,能够以不同的环境条件生存。
大肠杆菌广泛存在于自然界中,特别是动物的肠道中。
在人类肠道中,大肠杆菌具有重要的生理功能,保护肠道免受其他有害菌的侵袭,并参与食物消化和维持肠道的健康。
同时,大肠杆菌还对环境具有重要的指示作用,可作为一种指示性微生物来监测水质和食品的卫生状况。
大肠杆菌常用于实验室中的分子生物学研究和基因工程技术中。
它具有以下特点和优势:1.遗传稳定性:大肠杆菌具有较高的遗传稳定性和可操作性,其基因组较小、结构简单,易于研究和改造。
3.快速生长:大肠杆菌具有较快的生长速度,培养时间相对较短,便于实验操作和快速筛选。
4.易于培养和保存:大肠杆菌在实验室中培养相对简单,可通过液体培养和固体培养来获得足够的菌量。
同时,大肠杆菌具有较强的抗冷冻和抗干燥能力,便于保存和共享。
然而,使用大肠杆菌也存在一些注意事项和使用技巧:1.选择合适的菌株:根据实验需求选择不同的大肠杆菌菌株,如常见的DH5α、BL21等。
不同菌株具有不同的特性和表达系统,需根据实验目的进行选择。
2.处理菌株的遗传背景:大肠杆菌具有多样的遗传背景,可能会影响实验结果。
在进行基因表达、突变和克隆等实验时,需注意背景的一致性和对结果的可能影响。
3.增殖条件的优化:大肠杆菌对培养条件较为敏感。
在进行实验前,需对培养基、温度、pH值等条件进行优化,以获得最佳的菌落增殖情况。
4.严格控制污染:大肠杆菌在实验过程中容易受到其他菌株的污染,需进行严格的无菌操作,避免影响实验结果。
5.安全操作:大肠杆菌是一种被认为是相对安全的微生物,但仍需要注意避免直接暴露和接触,使用时应佩戴手套和实验室级别的防护措施。
大肠杆菌dh5a菌株特征
大肠杆菌DH5α(Escherichia coli DH5α)是一种广泛应用的
实验室菌株,具有许多特殊的特征和优势。
这种菌株最初是由Messing 在1975年从K12菌株中构建而成,并被广泛应用于分子生物学、生物
工程和基因工程领域中。
下面将介绍DH5α菌株的主要特征。
1. 基因型
DH5α菌株基因型为F-Φ80lacZΔM15Δ(lacZYA-argF)U169, recA1, endA1, hsdR17(r_K-, m_K+), supE44, thi-1, gyrA96, relA1。
其中,F-表示此菌株没有细菌质粒F,邻苯二酚酶基因lacZ为突变型,可以
实现蓝白斑点筛选,endA1表示此菌株缺失限制酶endonuclease I的
基因,可以有效防止质粒DNA的降解等等。
2. 生长特性
DH5α菌株可以在常规的LB(Luria-Bertani)平板和液体培养基上正
常生长,并且生长速度较快。
此外,DH5α菌株的细胞形态规则、菌落外观整齐,易于操作,比其他大肠杆菌菌株更加稳定。
3. 转化效率
DH5α菌株的常规转化效率较高,通常可达到10的6到10的8次方CFU/μgDNA,因此非常适合质粒转化、基因克隆以及DNA测序等实验
操作。
4. 可重复性
DH5α菌株经过多次冻存和复苏,仍然能够保持其稳定性和表型特征,并且不会出现不同批次之间表型差异较大的情况。
综上所述,大肠杆菌DH5α菌株具有较好的稳定性和易于操作的
特点,被广泛应用于各种实验室研究中。
然而,在使用DH5α菌株时,也需要严格遵守实验室安全操作规程,确保实验室安全和健康。
大肠杆菌表达纯化蛋白大肠杆菌是一种常见的细菌,广泛应用于生物学研究中。
它具有较高的生长速度、易于培养和操作的特点,被广泛用于表达和纯化蛋白。
本文将从大肠杆菌的选择、蛋白表达、纯化等方面介绍如何利用大肠杆菌表达纯化蛋白。
一、大肠杆菌的选择在大肠杆菌中选择合适的表达宿主菌株至关重要。
一般而言,常用的宿主菌株有BL21(DE3)、Rosetta(DE3)、Origami(DE3)等。
这些菌株具有较高的蛋白表达能力和稳定性,适合用于表达多种蛋白。
根据所需表达的蛋白的特点(例如毒性、折叠状态等),选择合适的宿主菌株是必要的。
二、蛋白表达蛋白表达是指通过转化目标基因到大肠杆菌中,使其表达目标蛋白。
一般采用的方法有原核表达和真核表达两种。
原核表达是将目标基因插入表达质粒,然后转化到大肠杆菌中,利用大肠杆菌的细胞机制进行蛋白表达。
真核表达则是将目标基因转化到真核细胞中,利用真核细胞的转录和翻译系统进行蛋白表达。
在大肠杆菌中进行蛋白表达时,需要选择适当的表达质粒。
常用的表达质粒有pET系列、pGEX系列等。
这些质粒通常含有启动子、多克隆位点、选择标记等功能元件,能够实现高效的蛋白表达。
在构建表达质粒时,需要将目标基因插入适当的位点,确保目标蛋白能够被正常表达。
三、蛋白纯化蛋白表达后,需要对目标蛋白进行纯化。
常用的纯化方法包括亲和层析、离子交换层析、凝胶过滤层析等。
亲和层析是利用蛋白与亲和树脂之间的特异性相互作用进行纯化的方法。
离子交换层析则是利用蛋白与离子交换树脂之间的电荷相互作用进行纯化的方法。
凝胶过滤层析则是利用蛋白在凝胶中的分子大小差异进行纯化的方法。
在进行蛋白纯化时,需要根据目标蛋白的特性选择合适的纯化方法。
不同的纯化方法具有不同的选择条件和操作步骤,需要根据实际情况进行选择。
此外,为了提高纯化效果,还可以采用多步骤的纯化策略,如串联多个纯化方法,以获得更高纯度的蛋白。
四、蛋白质结构分析在蛋白纯化后,可以对目标蛋白进行结构分析。
常用大肠杆菌感受态JM109,DH5a,BL21等的区别1:DH5a菌株DH5a是一种常用于质粒克隆的菌株。
E.coli DH5a在使用pUC系列质粒载体转化时,可与载体编码的β-半乳糖苷酶氨基端实现α-互补。
可用于蓝白斑筛选鉴别重组菌株。
基因型:F-,φ80dla cZΔM15,Δ(lacZYA-argF)U169,deoR,recA1,endA1,hsdR17(rk-,mk+),phoA,supE44,λ-,thi-1,gyrA96,relA12:BL21(DE3) 菌株该菌株用于高效表达克隆于含有噬菌体T7启动子的表达载体(如pET系列)的基因。
T7噬菌体R NA聚合酶位于λ噬菌体DE3区,该区整合于B L21的染色体上。
该菌适合表达非毒性蛋白。
基因型:F-,ompT,hsdS(rBB-mB-),gal,dcm(DE3)3:BL21(DE3) pLysS菌株该菌株含有质粒pLys S,因此具有氯霉素抗性。
PLysS含有表达T7溶菌酶的基因,能够降低目的基因的背景表达水平,但不干扰目的蛋白的表达。
该菌适合表达毒性蛋白和非毒性蛋白。
基因型:F-,ompT hsdS(rBB-mB-),gal,dcm(DE3,pLysS,Camr4:JM109菌株该菌株在使用pUC系列质粒载体进行DNA转化或用M13 phage载体进行转染时,由于载体DN A产生的L acZa多肽和JM09编码的L acZΔM15进行α-互补,从而显示β-半乳糖苷酶活性,由此很容易鉴别重组体菌株基因型:recA1,endA1,gyrA96,thi-1,hsdR17,supE44,relA1,Δ(lac-proAB)/F’[traD36,proAB+,lacIq,lacZΔM15]5:TOP10菌株该菌株适用于高效的DN A克隆和质粒扩增,能保证高拷贝质粒的稳定遗传。
大肠杆菌菌落形态特征大肠杆菌是一种常见的肠道细菌,属于革兰氏阴性菌,可以在自然环境中生存繁殖,也可以在动植物肠道中生长。
大肠杆菌对于人体的生理功能有着重要的作用,同时,也是一种常见的病原体,其中某些菌株可以引起各种不同疾病,如腹泻、肠炎等。
在这些病原菌中,一些菌株可以形成不同的菌落,不同的形态特征提供了我们对于菌株的区分和诊断手段。
一、菌落形态特征不同的大肠杆菌菌株,其在固体培养基上形成的菌落颜色、形态和大小都不相同,通过这些特征可以很好的区分不同的菌株。
通常,菌落的形态特征可以通过肉眼观察和显微镜观察两种方法进行判断。
1. 肉眼观察在固体培养基上,不同菌株形成的菌落在肉眼观察时有不同的大小、形状和颜色。
大肠杆菌的菌落形态特征主要包括以下方面:(1)直径大小:不同的菌株在相同的培养条件下,其生长速度和繁殖能力都不相同,因此,其形成的菌落大小也有所不同。
通常菌落的直径大小在1-2mm之间。
(2)菌落形状:大肠杆菌的菌落形状可以是圆形、不规则形和菊花形等。
在肉眼观察时,通常可以通过观察菌落的边缘形状和颜色来区分不同菌株。
(3)菌落颜色:菌落的颜色是由菌落中不同物质的吸收反射引起的。
不同的菌株形成的菌落颜色有所不同,可以是白色、黄色、橙色、红色和黑色等。
2. 显微镜观察大肠杆菌菌落形态特征可以通过显微镜观察来进一步判断和识别。
显微镜观察通常包括两种方法:高倍显微镜和扫描电镜。
(1)高倍显微镜观察:菌落制备后可以在载玻片上进行染色和固定,然后使用高倍显微镜进行观察。
在高倍显微镜下,可以观察到菌落的特征,如表面形态、细胞形态和染色情况等。
(2)扫描电镜观察:扫描电镜是一种高分辨率的电子显微镜,可以观察到个体的分子甚至原子。
使用扫描电镜观察大肠杆菌菌落,可以观察到菌落表面的结构特征,如菌落顶部的形状、突起和凹陷等。
二、菌落形态特征在菌株鉴定中的作用大肠杆菌菌落形态特征在菌株鉴定和分类上具有重要作用,不同的形态特征可用于区分不同的大肠杆菌菌株,对于临床诊断和治疗有着积极意义。
大肠杆菌克隆菌株TOP10和DH5α的比较大肠杆菌克隆菌株是一种经过基因工程改造的细菌,可以用于转化和扩增外源DNA,如质粒、文库或表达载体。
不同的克隆菌株具有不同的特性,如转化效率、抗性、突变、表达水平等。
本文将比较两种常见的大肠杆菌克隆菌株:TOP10和DH5α,分析它们的优缺点和价格。
TOP10的优缺点TOP10是一种来源于大肠杆菌K12的菌株,具有mcr/mrr突变,可以克隆甲基化的DNA,如真核基因组DNA。
它的基因型如下:•Top10:F- mcrA Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC) φ80lacZΔM15 ΔlacX74 recA1 araD139 Δ(ara-leu)7697 galU galK rpsL (StrR) endA1 nupGTOP10的优点主要有以下几个方面:•高转化效率:TOP10具有高达10^9 cfu/µg DNA的转化效率,这意味着它可以获得更多的重组菌株,提高克隆的成功率。
•低突变率:TOP10具有recA1突变,可以抑制同源重组,保持质粒的序列完整性。
•高稳定性:TOP10具有endA1突变,可以阻断内切核酸酶的表达,减少质粒DNA的降解。
它还可以在不含抗生素的培养基中维持质粒的复制。
•广泛的耐药性:TOP10具有多种抗性基因,如rpsL (StrR)、nupG等,可以使用多种抗生素进行筛选。
•高数据一致性:TOP10具有高度的基因组稳定性和质粒保留性,可以保证实验的可重复性和可靠性。
TOP10的缺点主要有以下几个方面:•高成本:TOP10的价格相对较高,可能超出一些实验室的预算。
•低表达水平:TOP10不适合用于蛋白表达,因为它缺乏一些必要的表达因子,如DE3溶原菌、T7 RNA聚合酶等。
•低兼容性:TOP10不适合用于一些特殊的载体,如含有重复序列的慢病毒载体和其它逆转录病毒载体,因为它可能会发生质粒的重组或缺失。
DH5α的优缺点DH5α是一种由Messing在1975年从大肠杆菌K12菌株中构建而成的菌株,具有mcr/mrr突变,可以克隆甲基化的DNA,如真核基因组DNA。
各种大肠杆菌菌株特点
1:DH5a菌株
DH5a是一种常用于质粒克隆的菌株。
E.coli DH5a在使用pUC系列质粒载体转化时,可与载体编码的β-半乳糖苷酶氨基端实现α-互补。
可用于蓝白斑筛选鉴别重组菌株。
基因型:F-,φ80dlacZΔM15,Δ(lacZYA-argF)U169,deoR,recA1,endA1,hsdR17(rk-,mk+),phoA,supE44,λ-,thi-1,gyrA96,relA1
2:BL21(DE3) 菌株
该菌株用于高效表达克隆于含有噬菌体T7启动子的表达载体(如pET系列)的基因。
T7噬菌体RNA聚合酶位于λ 噬菌体DE3区,该区整合于BL21的染色体上。
该菌适合表达非毒性蛋白。
基因型:F-,ompT,hsdS(rBB-mB-),gal,dcm(DE3)
3:BL21(DE3) pLysS菌株
该菌株含有质粒pLysS,因此具有氯霉素抗性。
PLysS含有表达T7溶菌酶的基因,能够降低目的基因的背景表达水平,但不干扰目的蛋白的表达。
该菌适合表达毒性蛋白和非毒性蛋白。
基因型:F-,ompT hsdS(rBB-mB-),gal,dcm(DE3,pLysS ,Camr
4:JM109菌株
该菌株在使用pUC系列质粒载体进行DNA转化或用M13 phage载体进行转染时,由于载体DNA产生的LacZa多肽和JM09编码的LacZΔM15进行α-互补,从而显示β-半乳糖苷酶活性,由此很容易鉴别重组体菌株
基因型:recA1,endA1,gyrA96,thi-1,hsdR17,supE44,relA1,Δ(lac-proAB)/F’
5:TOP10菌株
该菌株适用于高效的DNA克隆和质粒扩增,能保证高拷贝质粒的稳定遗传。
基因型:F- ,mcrAΔ(mrr-hsd RMS-mcrBC),φ80 ,lacZΔM15,△lacⅩ74,recA1 ,araΔ139Δ(ara-leu)7697,galU ,galK ,rps,(Strr) endA1,nupG
6:HB101菌株
该菌株遗传性能稳定,使用方便,适用于各种基因重组实验
基因型:supE44,hsdS20(rB-mB-),recA13,ara-14,proA2,lacY1,galK2,rpsL20,xyl-5,mtl-1,leuB6,thi-1
7:M110或SCS110
大多数大肠杆菌菌株中含有Dam甲基化酶和Dcm甲基化酶,前者可以在GATC序列中腺嘌呤N-6位上引入甲基,后者在CCA/TGC序列的第一个胞嘧啶 C-5位置上引入甲基。
常用的菌株都会产生dam,dcm,从而受到甲基化的影响.
部分限制性内切酶对甲基化的DNA不能切割,如FbaI和MboI等,一般生物公司提供的内切酶说明中均有说明。
大多数酶切位点的甲基化不影响切割,而有些会影响,如XbaI, BclI等。
而且甲基化只发生在特定序列,以XbaI为例,只有在位点序列旁出现GA或TC,该XbaI位才会被甲基化。
而要解除这种限制修饰作用通常有两种方法:
(1)选用上述酶的同功酶,如Sau3AI,DNA识别切割位点与MboI相同;但不受甲基化影响;
(2)利用甲基化酶缺失的受体细胞进行DNA的制备,如E.coli JM110和链霉菌等,
前者Dam和Dcm甲基化酶已敲出,而后者细胞内本就没有甲基化酶,从这些细胞中抽提的DNA就能被上述酶切割。
8:E.coli JM110
要排除dam,dcm甲基化的影响,需要用特定的dam-,dcm-的菌株,如JM110
如果由JM110或SCS110等甲基化缺失的菌株产生的质粒,则不会被甲基化.。