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果蝇唾腺染色体标本的制备与观察实验报告果蝇唾腺染色体标本的制备与观察实验报告一、实验原理双翅目昆虫(摇蚊、果蝇等)幼虫期的唾腺细胞很大，其中的染色体称为唾腺染色体。
这种染色体比普通染色体大得多，宽约5um，长约400um，相当于普通染色体的100—150倍，因而又称为巨大染色体。
唾腺染色体处于体细胞染色体联会配对状态。
并且唾腺染色体经过多次复制而并不分开，每条染色体大约有1000—4000根染色体丝的拷贝，所以又称多线染色体。
多线染色体经染色后，出现深浅不同、密疏各别的横纹，这些横纹的数目和位置往往是恒定的，代表着果蝇等昆虫的种的特征；如染色体有缺失、重复、倒位．易位等，很容易在唾腺染色体上识别出来。
各染色体的异染色质的着丝粒部分互相靠拢形成染色中心；横纹有深浅、疏密的不同，各自对应排列，这意味着基因的排列。
唾腺染色体广泛应用于细胞遗传学、发生遗传学、进化遗传学及分子遗传学的研究中。
二、实验材料果蝇的三龄幼虫三、实验器材双目解剖镜，生物显微镜，解剖针，载玻片，盖玻片，滤纸条，废物缸，托盘等。
四、实验试剂生理盐水，盐酸，蒸馏水，改良苯酚品红染色液等。
五、实验步骤1.剥离唾腺：在一干净的载玻片上滴一滴生理盐水，选择行动迟缓、肥大、爬在瓶壁上即将化蛹的三龄幼虫，或者选择经低温处理的果蝇三龄幼虫置于载玻片上。
每只手各持一个解剖针，在解剖镜下进行操作。
由于果蝇的唾腺位于幼虫体前1/3-1/4处，所以左手持解剖针按压住虫体前端三分之一的部位，固定幼虫，右手持解剖针扎住幼虫头部口器部位，适当用力向右拉唾腺腺体随之而出。
剔除脂肪体并弃除无关物质。
2.解离：加一滴45%乙酸溶液于腺体上，作用5-7s。
用滤纸吸干溶液。
在唾腺组织上滴一滴1mol/lLHCl，解离30-40s，以松软组织，利于染色体的分散。
3.吸去 HCl，用水冲洗2-3次.4.染色：滴加改良苯酚品红染液染色30min,染色时间不可过长，否则背景也着色。
果蝇幼虫唾腺染色体标本的制备与观察摘要果蝇幼虫唾腺细胞染色体是一种特化的巨大染色体，由于其外形具横纹与胀泡等结构，可作为物种区别标志与基因定位标志。
实验采用普通果蝇的三龄幼虫，剥离出其唾腺，通过固定、染色与压片等步骤制成果蝇幼虫唾腺染色体标本，在显微镜下观察，最终对果蝇幼虫唾腺染色体的外形、结构、特征做出简要描述。
引言果蝇三龄幼虫的唾腺细胞处于永久早期，染色体解旋呈伸展状态．在幼虫发育过程中细胞核中的DNA多次复制，但细胞、细胞核不分裂。
复制后的染色单体DNA不分开，这种现象叫做核内有丝分裂，从而形成了多线染色体。
加之唾腺细胞中同源染色体互相靠拢在一起呈现一种联会状态，而使其比一般分裂中期体细胞中的染色体长100~150倍。
由于在唾腺细胞中8条染色体之间以着丝粒互相连结在一起形成染色盘或异染中心，以及同源染色体之间的假联会，经碱性染料染色后，可以观察到一个染色较深的染色盘和以染色盘为中心向外辐射出的5条染色体臂。
在这些染色体臂上可以看到染色深浅不同，被称作明带、暗带的横纹，这些横纹的位置，宽窄、数目都具有物种的特异性。
不同物种，不同染色体的不同部位形态位置是固定的。
因此根据染色体各条臂带纹特征和各条臂端部带纹特征能准确识别各条染色体。
另外某染色体上出现的变异，在唾腺染色体相应的臂上就能反映出来，这样这些横纹就成了精确基因定位的“坐标”。
将野生型果蝇的带纹与缺失、重复、倒位等突变体的带纹进行比较，就可以将一些基因定位在染色体上。
[1]在染色体臂上还可看到某些带纹通过染色体的解旋、膨大形成的疏松区胀泡，其中最大的一个胀泡叫做巴尔比尼氏环。
胀泡富含转录出来的RNA，因此不着色，是基因活动的区域。
在个体发育的不同阶段，胀泡或巴尔比尼氏环在染色体上出现的部位不同，据此研究基因的表达，开展各种染色体变异的研究等等。
本次实验将通过对果蝇幼虫唾腺染色体标本的制备与观察，了解并掌握果蝇三龄幼虫唾腺的剖离技术，掌握唾腺染色体标本的制备方法，了解唾腺染色体的形态结构特点。
果蝇唾液腺染色体标本的制备与观察一.实验目的通过实验掌握果蝇唾腺染色体的制片方法，了解果蝇唾腺染色体的形态结构特点并练习解剖果蝇幼虫的技术。
二.实验原理唾腺染色体是一类存在于双翅目昆虫的幼虫唾液腺内的巨大染色体。
果蝇的唾腺染色体是典型的巨大染色体，它的巨大性的成因是核内有丝分裂造成的。
由于其染色体DNA经过多次复制（可达210～215次），但并未发生细胞核分裂，同时唾腺细胞中的染色体总是处在配对状态即体细胞联会，重复复制后的染色体聚集在一起，所以在显微镜下看到唾腺染色体要比一般的染色体大得多，又称多线染色体。
三.实验用品1.实验材料：普通果蝇的三龄幼虫、生理盐水2.实验器材和试剂：双筒解剖镜、显微镜、解剖针、改良苯酚品红溶液、HCI四.实验方法和步骤1. 幼虫的培养为了在解剖镜下便于操作，使用的幼虫应发育充分而且个体较大。
在实验中，人们通常采用两个措施控制幼虫的生长。
A.良好的培养基提供了果蝇生长发育的必需营养，因此在培养瓶内放置的亲本不易过多，否则将产生过多的卵而造成养分不足。
B.培养果蝇的环境温度应比正常培养时略低一些，一般可控制在16～20℃范围内，低温下生长的果蝇个体较大。
果蝇属于完全变态的昆虫，成虫交尾后将卵产在培养基内。
在适宜的温度下，卵发育为幼虫并经过一、二龄幼虫的发育后，三龄幼虫要爬到瓶壁上化蛹，为了能够在实验时获得较多的幼虫，可以分批将亲本放入培养瓶。
实验时从培养瓶的瓶壁上挑选那些发育良好的、个体较大的幼虫。
2. 剖取唾腺用解剖针从培养瓶内挑取1只三龄幼虫置于载片上，并滴加1滴生理盐水。
将载片放在载物台上，用解剖镜进行观察。
首先将幼虫的头尾分清，果蝇的头部有一黑点（口器），头部不断作伸缩状。
解剖时，双手各持一个解剖针，一支针先压在幼虫身体的前1/3处，另一支针压住果蝇头部并向前轻轻移动，即可将头部与身体拉开，仔细观察可看见一对透明做白的囊状体即为唾腺。
在唾腺前端各伸出一条细管在前面汇合成一总管。
果蝇唾腺染色体标本的制备与观察摘要本次实验以果蝇三龄幼虫唾腺为实验材料，为掌握果蝇三龄幼虫唾腺的剖离技术、掌握唾腺染色体标本的制备方法，并且为对唾腺染色体的形态结构特征进行了观察研究。
实验过程中取果蝇三龄幼虫唾腺进行装片制作，并且于显微镜下观察。
由于在幼虫消化道或消化腺中存在大体积的多线染色体，并且腺体易剥离，故为实验材料。
理想状况下应为唾腺染色体从染色体中心向四周放射状地伸出5长1短的6条臂，但是在实际操作中很难实现分散均匀。
所以实验最终得到的染色体多为臂与臂相互纠缠重叠或未伸展完全，除染色中心，可较容易观察到横纹结构。
1.引言染色体（Chromosome）由脱氧核糖核酸、蛋白质和少量核糖核酸组成的线状或棒状物，是生物主要遗传物质的载体。
因是细胞中可被碱性染料着色的物质，故名。
其形态和数目具有种系的特性，在细胞间期核中，以染色质丝形式存在，在细胞分裂时，染色质丝经过螺旋化、折叠、包装成为染色体，为显微镜下可见的具有不同形状的小体。
染色体的发现历程：早在1883年，鲁克斯（W·Roux）就观察到细胞核内能被染色的丝状体。
1888年，德国人沃尔德耶（W·Waldeyer）称这种丝状体为“染色体”（英语：chromosome；希腊语：chroma=颜色，soma=体），意即可染色的小体，并猜测染色体与遗传有关。
1902年，博韦里（T·Boveri）和萨顿（W·S·Sutton）指出，染色体在细胞分裂中的行为与孟德尔的遗传因子平行：两者在体细胞中都成对存在，而在生殖细胞中则是成单的；成对的染色体或遗传因子在细胞减数分裂时彼此分离，进入不同的子细胞中，不同对的染色体或遗传因子可以自由组合。
因而，博韦里和萨顿认为，染色体很可能是遗传因子的载体。
染色体研究通常面临两个困难：一是染色体很小，二是除极少数动植物，如玉米粗线期的染色体上具有染色粒这样的结构可以作为识别或定位的标志外，大多数生物的染色体都没有标志，由此提出了多线染色体的概念。
果蝇唾腺染色体标本的制备和观察摘要本实验通过用黑腹果蝇的三龄幼虫的唾腺，来观察果蝇的唾腺染色体。
目的在于学会辨认果蝇的唾腺的特征和识别各条不同的染色体以及掌握其基本的特征。
了解唾腺染色体的作用和意义。
１．引言果绳唾睬染色休为多线染色休,形成原因是由于染色休不断复制,但细胞不分裂从而形成了多线染色休,其上每一横纹相当于一个顺反子,横纹的形态特征有着种的特异性和稳定性。
因此果蝇唾睬染色休成为了研究染色休结构、基因定位、基因功能的重要实验材料。
1881年Ba}biani首次在摇蚊幼虫的唾腺细胞中发现多线染色体.20世纪30年代Painter首先用果蝇唾腺体作为遗传学数据在细胞学上的验证材料,他研究了多线染色体上的横纹跟基因的关联性以及染色体的物种特异性。
Bridges也对果蝇唾腺体进行了广泛详细的研究,制成一系列与已有的基因连锁图相对应的果蝇细胞学图。
２．实验材料和方法２．１实验材料受精的雌果蝇、盖玻片和载玻片、镊子、解剖针解剖镜和显微镜、醋酸地衣红染液、指甲油生理盐水、香柏油、镜头纸。
２．２实验方法２．２．１实验材料的获取和处理（1）三龄幼虫的培养：取20-30只受精的雌果蝇于培养基中，在22摄氏度的恒温冰箱中饲养7天得到肥大的果蝇三龄幼虫。
（2）唾腺的剥取和制片：取果蝇三龄幼虫于一滴加了生理盐水的载玻片上，用两根解剖针，一根扎住口器，一根扎住体前1/3处像两端拉唾腺腺体随之而出。
唾腺是一对透明的茄子状腺体，外有白色的脂肪组织（不透明）在腺体的前端各延伸出一细管汇合在一起与口器相连，相对于其他组织唾腺最为透明因此在黑色背景下其他组织呈白色,而唾腺是半透明的,辨别时应在明亮的光源下进行，果蝇的唾腺细胞很大，在解剖镜下可以看见其轮廓。
幼虫被拉断时唾腺也可能随之被拉出,也可能仍连在口器上,这时可用解剖针轻轻将其挤压出来。
拉出的腺体有可能仍为完整的左右对称的长茄状囊体,也可能分开、断裂。
去除幼虫其它组织部分，并把唾腺周围的白色脂肪剥离干净。
果蝇唾腺染色体的制片与观察果蝇唾腺染色体的制片与观察一、实验目的1、练习果蝇幼虫唾腺分离技术及唾腺染色体的制片方法；2、观察果蝇的唾腺染色体。
二、实验原理1、唾腺染色体：唾腺染色体是双翅类昆虫唾腺细胞的间期核中所看到的巨型染色体。
唾腺染色体的显著特征是：（1）形状为带状，宽达5微米，长达2000微米它相当于普通染色体的100～200倍；（2）核不分裂，由于染色体不断复制，形成了多线性染色体，宽度增加，同时长度也增加，成为巨型染色体；（3）带的全长几乎都有明显的嗜碱性的横纹，横纹的宽度有大有小，密度有疏有密，但是它的数目，位置等等对于同源染色体来说却都是同样的。
唾腺染色体的DNA含量达4，000—8，000c。
横纹被认为是染色小粒横向排列而成的。
横纹是详细研究染色体的部分缺失、倒位、重复、反复、易位等现象的标记；（4）由于2条同源体细胞染色体联会，在黑腹果蝇（2n= 8）中，V形的第二染色体和第三染色体各有两条臂，又各条染色体在异染色质多的着丝粒附近互相靠拢，与核仁一起在核的中央形成一个染色中心。
唾腺染色体的一条或几条横纹常显著膨起，这部分称为Bal- biani 环。
一般把多线性的巨大染色体中的这种膨大起称为疏松结构。
许多双翅类以及二、三种脉翅类昆虫的食道、肠、马氏管和神经细胞中，以及在植物界的Rhinanthus（胡麻科）的胚盘细胞、虞美人草的反足细胞等都能看到具有这样特征的染色体（巨大染色体或多线染色体）。
果蝇唾液腺：2、果蝇三龄幼虫的唾腺发育到一定阶段后，细胞的有丝分裂停留在间期，构成一个永久间期系统。
唾腺细胞数目不增加，但体积增大，其中每条染色体的常染色质区的核蛋白纤维（染色质纤维）不断复制，多则可达2的10次方至15次方次复制，其复制产物不分开，成千上万条染色质纤维平行而精巧地排列形成一大束宽而长的带状物，称为多线染色体。
由于细胞分裂停止在间期，核物质螺旋化程度低而充分伸展，这种染色体比普通染色体大得多，宽约5um，长约2000um，是其体细胞中期染色体长度的100—200倍。
实验六果蝇唾液腺染⾊体的观察及制备实验五果蝇唾液腺染⾊体的观察及制备⼀．⽬的1．了解果蝇唾液腺染⾊体的形态学及遗传学特征。
2．习分离果蝇幼⾍唾液腺的技术。
3．掌握唾液腺染⾊体制⽚⽅法。
⼆、原理蝇、摇蚊幼⾍唾液腺细胞中的巨⼤染⾊体。
双翅⽬昆⾍的唾液腺细胞发育到⼀定阶段之后就不再进⾏有丝分裂，⽽永久停留在分裂间期。
但随着幼⾍的⽣长，唾液腺染⾊体仍不断地进⾏⾃我复制⽽且不分开，经过许多次的复制形成约1 000—4 000拷贝的染⾊体丝，合起来直径达5µm，长度达400µm，⽐普通细胞中期染⾊体约⼤100～150倍，所以⼜称为多线染⾊体（polytene chromosome）或巨⼤染⾊体（giant chromosome）。
唾液腺染⾊体的另⼀特点是体细胞中同源染⾊体处于紧密配对状态，这种状态称为“体细胞联会”。
在以后不断的复制中仍不分开，由此成千上万条核蛋⽩纤维丝唾液腺染⾊体（salivary gland chromosome）是⼀类存在于双翅⽬昆⾍，如果结合在⼀起，紧密盘绕。
所以细胞中染⾊体只呈单倍数。
⿊腹果蝇的染⾊体数⽬2n=8其中第Ⅱ、第Ⅲ染⾊体为中部着丝粒染⾊体，第Ⅳ染⾊体和第IX染⾊体为端着丝粒染⾊体。
唾液腺染⾊体形成时，染⾊体着丝粒和近着丝粒的异染⾊质区聚于⼀起形成⼀个染⾊中⼼（chromo-center），所以在光学显微镜下可见从染⾊中⼼处伸出6条配对的染⾊体臂，其中5条为长臂，l条为紧靠染⾊中⼼的很短的臂。
唾液腺染⾊体经染⾊后，呈现深浅不同，疏密各异的横纹（band）。
这些横纹的数⽬，位置，宽窄及排列顺序都具有物种的特异性。
研究认为这些横纹与染⾊体的基因是有⼀定关系的。
通过⼀定的实验⽅法使果蝇唾液腺染⾊体各臂分散开，并且使带纹、膨突等特征不受杂质影响清晰地显⽰出来，是进⾏果蝇遗传学研究的很重要的⼀个环节．果蝇唾液腺染⾊体在不同种间的共同点是染⾊体的着丝点位于⼀个染⾊区域，但不同的种类往往其染⾊体臂数⽬不同．每条染⾊体臂上分布着染⾊深浅不同、粗细各异的磺纹(band)，这些横纹的宽窄疏密程度以及排列顺序和数⽬⼜都有种的特异性和种内的差异．由此，果蝇唾液腺染⾊体近⼏⼗年来，已⼴泛⽤于种内系统发⽣和种间亲缘关系的研究中，因为种间及种内不同品系和近缘种中的遗传差异经常反映在唾液腺染⾊体的不联会、形成泡(puff)、缢虞(constriction)和间带区的伸缩性以及顶体(telomere)的形态等多⽅⾯的差异，⽽特别重要的是研究它的基因序列的差异(观察是否产⽣了例位以及染⾊体的断裂、融合和重排)．因此，⽆论从细胞遗传学的⾓度研究基因与突变性状之间的联系，还是从进化遗传遗传学⽅⾯研究染⾊体的系统发⽣，探讨种间以及近缘种间的遗传差异和⽣殖隔离的机制等，唾液腺染⾊体的分析研究都是⼗分重要的．从其横纹分布特征可对物种的进化特征进⾏⽐较分析，⽽⼀旦染⾊体上发⽣了缺失，重复，倒位。
实验八果蝇唾液腺染色体制备和观察
一、实验目的
1．学习剖取果蝇三龄幼虫唾液腺并制作果蝇唾液腺染色体玻片标本；
2．观察唾液腺染色体结构特征并绘制染色体图；
3．分析果蝇唾液腺染色体结构变化动态。
二、实验准备
（按每实验小组2人准备）
1．仪器
显微镜1台、解剖镜1台、培养箱1台（通用）、消毒锅1台（通用）、冰箱1（通用）、干燥箱1（通用）
2．器械均放在小磁盘内）
镊子2、解剖针2、玻片架1、广口瓶2、玻璃板（10×10cm）2、
3．药品（2人一套）
醋酸洋红、1mol HCl、生理盐水、二甲苯（通用）[均分装在60ml滴瓶]、蒸馏水10L（通用）
4．耗材
载玻片4、盖玻片6、滤纸2、擦镜纸1本（通用）、棉花、纱布、果蝇培养基
5．材料
大果蝇（常年培养）
三、实验原理
果蝇唾液腺染色体特征：
1．同源染色体在体细胞联会配对，
2．染色体只复制，不分裂，导致染色体非常大。
3．染色体上有许多带纹（螺旋紧密区）
4．所有的染色体着丝粒都聚集在一起。
四、实验步骤
大果蝇低温高糖饲养→三龄幼虫→生理盐水洗涤→在玻片上滴半滴水放果蝇幼虫→拉唾液腺→在解剖镜下辨认唾液腺→清除杂质→洋红染色30min（搅拌）→盖盖片→覆盖滤纸→带液速压→吸余液→低倍观察→高倍绘图
五、作业
1．绘果蝇唾液腺染色体图。
实验五果蝇唾液腺染色体的观察及制备一.目的1.了解果蝇唾液腺染色体的形态学及遗传学特征。
2.习分离果蝇幼虫唾液腺的技术。
3.掌握唾液腺染色体制片方法。
二、原理蝇、摇蚊幼虫唾液腺细胞中的巨大染色体。
双翅目昆虫的唾液腺细胞发育到一定阶段之后就不再进行有丝分裂,而永久停留在分裂间期。
但随着幼虫的生长,唾液腺染色体仍不断地进行自我复制而且不分开,经过许多次的复制形成约 1 000— 4 000拷贝的染色体丝,合起来直径达5μm ,长度达400μm ,比普通细胞中期染色体约大 100~150倍,所以又称为多线染色体(polytene chromosome或巨大染色体 (giant chromosome。
唾液腺染色体的另一特点是体细胞中同源染色体处于紧密配对状态,这种状态称为“体细胞联会”。
在以后不断的复制中仍不分开,由此成千上万条核蛋白纤维丝唾液腺染色体(salivary gland chromosome是一类存在于双翅目昆虫,如果结合在一起,紧密盘绕。
所以细胞中染色体只呈单倍数。
黑腹果蝇的染色体数目 2n=8其中第Ⅱ、第Ⅲ染色体为中部着丝粒染色体,第Ⅳ染色体和第 IX 染色体为端着丝粒染色体。
唾液腺染色体形成时,染色体着丝粒和近着丝粒的异染色质区聚于一起形成一个染色中心(chromo-center ,所以在光学显微镜下可见从染色中心处伸出 6条配对的染色体臂,其中 5条为长臂, l 条为紧靠染色中心的很短的臂。
唾液腺染色体经染色后,呈现深浅不同,疏密各异的横纹 (band 。
这些横纹的数目,位置,宽窄及排列顺序都具有物种的特异性。
研究认为这些横纹与染色体的基因是有一定关系的。
通过一定的实验方法使果蝇唾液腺染色体各臂分散开, 并且使带纹、膨突等特征不受杂质影响清晰地显示出来, 是进行果蝇遗传学研究的很重要的一个环节.果蝇唾液腺染色体在不同种间的共同点是染色体的着丝点位于一个染色区域,但不同的种类往往其染色体臂数目不同.每条染色体臂上分布着染色深浅不同、粗细各异的磺纹 (band, 这些横纹的宽窄疏密程度以及排列顺序和数目又都有种的特异性和种内的差异. 由此, 果蝇唾液腺染色体近几十年来, 已广泛用于种内系统发生和种间亲缘关系的研究中, 因为种间及种内不同品系和近缘种中的遗传差异经常反映在唾液腺染色体的不联会、形成泡 (puff、缢虞 (constriction和间带区的伸缩性以及顶体 (telomere的形态等多方面的差异,而特别重要的是研究它的基因序列的差异 (观察是否产生了例位以及染色体的断裂、融合和重排 . 因此,无论从细胞遗传学的角度研究基因与突变性状之间的联系,还是从进化遗传遗传学方面研究染色体的系统发生,探讨种间以及近缘种间的遗传差异和生殖隔离的机制等,唾液腺染色体的分析研究都是十分重要的.从其横纹分布特征可对物种的进化特征进行比较分析,而一旦染色体上发生了缺失,重复, 倒位。
果蝇唾液腺染色体的观察一．实验目的1.学会果蝇幼虫解剖技术，唾液腺分离的方法，学习唾腺染色体的制片步骤2.观察果蝇唾腺巨大染色体的结构，了解染色体横纹的特点3.了解果蝇唾腺染色体在遗传学研究中的意义二．实验原理本世纪初，D. Kastoffs用压片法首先在D. melanogaster 果蝇幼虫的唾液腺细胞核中发现了特别巨大的染色体——唾液腺染色体（salivary gland chromosome）。
事实上，双翅目昆虫（如摇蚊、果蝇等）的幼虫期都具有很大的唾腺细胞，其中的染色体就是巨大的唾液腺染色体。
这些巨大的唾液腺染色体具有许多重要特征，为遗传学研究的许多方面，如染色体结构、化学组成、基因差别表达等提供了独特的研究材料。
双翅目昆虫的整个消化道细胞发育到一定阶段之后就不再进行有丝分裂，而停止在分裂间期。
但随着幼虫整体器官以及这些细胞本身体积的增大，细胞核中的染色体，尤其是唾液腺染色体仍不断地进行自我复制而不分开，经过许多次的复制形成约1000～4000拷贝的染色体丝，合起来达5m宽，400m长，比普通中期相染色体大得多（约100～150倍），所以又称为多线染色体（polytene chromosome）和巨大染色体（giant chromosome）。
唾液腺染色体形成的最初，其同源染色体即处于紧密配对状态，这种状态称为“体细胞联会”。
在以后不断的复制中仍不分开，由此成千上万条核蛋白纤维丝合在一起，紧密盘绕。
所以配对的染色体只呈现单倍数。
黑腹果蝇的染色体数为2n=2×4，其中第II、第III染色体为中部着丝粒染色体，第IV和第I（X染色体）染色体为端着丝粒染色体（图1）。
而唾液腺染色体形成时，染色体着丝粒和近着丝粒的异染色质区聚于一起表成一染色中心（chromocenter），所以在光学显微镜下可见从染色体中心处伸出6条配对的染色体臂，其5条为长臂，1条为紧靠染色中心的很短的臂（图2,图3）。
果蝇唾腺染色体的标本制备和观察果蝇(Drosophila melanogaster)是生物学研究中常见的模式生物之一，其唾腺染色体是生物学中经常使用的标本之一。
本文将介绍如何制备果蝇唾腺染色体标本，并展示如何观察这些标本。
制备标本材料制备果蝇唾腺染色体标本需要的材料如下：•果蝇成虫•酒精•醋酸•乙醇•0.5% 的乙酸-洋红溶液•1% 的氧化铬酸钾溶液•100% 的甘油•盖片•显微镜步骤1.将成虫放入酒精中，浸泡5分钟至失去活性。
2.用镊子将成虫头部部分取下，然后将其剪开，将唾液腺取出。
3.将唾液腺置于醋酸中浸泡2分钟，然后转移到乙醇中浸泡2分钟，最后放入1%的氧化铬酸钾溶液中浸泡1-2分钟。
4.从氧化铬酸钾溶液中将唾液腺转移到100%的甘油中浸泡1-2分钟，以使其变色，然后将其取出，并放入盖片上。
5.加入0.5%的乙酸-洋红溶液，然后用另一个盖片覆盖，压扁唾液腺。
6.将盖片放入显微镜，用40倍或100倍放大倍数观察。
观察标本染色体结构果蝇唾腺染色体呈现为极细线状，可根据其结构分为两类：•染色体较长的一端为钩状，称为钩端。
•另一端较短，称为非钩端。
染色体数量成虫染色体数目为8条，如下：•一对#1染色体•一对#2染色体•一对#3染色体•两对#4染色体染色体组成果蝇唾腺染色体由DNA和蛋白质组成，其中蛋白质主要为组蛋白和非组蛋白。
通过以上步骤，我们可以轻松制备果蝇唾腺染色体标本，并通过显微镜观察其结构和数量。
这对于生物学研究和遗传学研究具有重要意义。
果蝇唾液腺染色体标本的制备与观察
一.实验目的
通过实验掌握果蝇唾腺染色体的制片方法，了解果蝇唾腺染色体的形态结构特点并练习解剖果蝇幼虫的技术。
二.实验原理
唾腺染色体是一类存在于双翅目昆虫的幼虫唾液腺内的巨大染色体。
果蝇的唾腺染色体是典型的巨大染色体，它的巨大性的成因是核内有丝分裂造成的。
由于其染色体DNA经过多次复制（可达210～215次），但并未发生细胞核分裂，同时唾腺细胞中的染色体总是处在配对状态即体细胞联会，重复复制后的染色体聚集在一起，所以在显微镜下看到唾腺染色体要比一般的染色体大得多，又称多线染色体。
三.实验用品
1.实验材料：普通果蝇的三龄幼虫、生理盐水
2.实验器材和试剂：双筒解剖镜、显微镜、解剖针、改良苯酚品红溶液、HCI
四.实验方法和步骤
1. 幼虫的培养
为了在解剖镜下便于操作，使用的幼虫应发育充分而且个体较大。
在实验中，人们通常采用两个措施控制幼虫的生长。
A.良好的培养基提供了果蝇生长发育的必需营养，因此在培养瓶内放置
的亲本不易过多，否则将产生过多的卵而造成养分不足。
B.培养果蝇的环境温度应比正常培养时略低一些，一般可控制在16～
20℃范围内，低温下生长的果蝇个体较大。
果蝇属于完全变态的昆虫，成虫交尾后将卵产在培养基内。
在适宜的温度下，卵发育为幼虫并经过一、二龄幼虫的发育后，三龄幼虫要爬到瓶壁上化蛹，为了能够在实验时获得较多的幼虫，可以分批将亲本放入培养瓶。
实验时从培养瓶的瓶壁上挑选那些发育良好的、个体较大的幼虫。
2. 剖取唾腺
用解剖针从培养瓶内挑取1只三龄幼虫置于载片上，并滴加1滴生理盐水。
将载片放在载物台上，用解剖镜进行观察。
首先将幼虫的头尾分清，果蝇的头部有一黑点（口器），头部不断作伸缩状。
解剖时，双手各持一个解剖针，一支针先压在幼虫身体的前1/3处，另一支针压住果蝇头部并向前轻轻移动，即可将头部与身体拉开，仔细观察可看见一对透明做白的囊状体即为唾腺。
在唾腺前端各伸出一条细管在前面汇合成一总管。
果蝇的唾腺是单层细胞构成的，因此在解剖镜下可以看出其细胞界限。
如果唾腺没有被拉出来，可用解剖针轻压虫体的断开处，把唾腺挤压出来。
操作时解剖针一定要轻轻拨动，切不可将肠管、神经管等全部截断从而影响视线。
由于果蝇唾腺几乎透明，但是其上连带的脂肪体为乳白色，因此还是容易辨认出来的。
3. 去除脂肪体
果蝇的唾腺上附有乳白色的脂肪体，如不去除，在制片时会在载片上形成大
量脂肪滴，从而影响制片的质量。
在去除脂肪体时，用解剖针的针尖轻轻操作，尽量保持唾腺的完整性。
如果在剥离脂肪时将唾腺碰断，仍然可以继续进行染色操作，因为在唾腺内有大量的细胞。
4. 酸解
用解剖针将载片上的杂物全部去除，只留下唾腺。
如果唾腺周围还有许多水分，应用吸水纸小心将水分洗净，注意要在解剖镜下操作，并要避免将剥离好的唾腺用纸吸走。
用HCI酸解10min，再用蒸馏水洗2次。
5. 染色及压片
加一滴改良苯酚品红染液染色10～15min。
盖上盖玻片并覆盖一层吸水纸，用左手稳住载玻片，防止载玻片与盖玻片滑动，右手持解剖针，用针柄敲击盖片。
用力要合适，将唾腺细胞压破，使染色体伸展开但又没造成染色体的断裂或重叠为最好。
6. 镜检观察
五.实验结果
见下图
六.注意事项
1.一定加生理盐水，否则唾腺易干。
2.将脂肪组织清除干净。
3.染色时间不可过长，否则背景也着色。
4.压片时要揉。
5.染色完以后，将旧的染色液吸去，加新的染色液，再压片。
8.吸水时勿将唾腺一起吸走。
