固定方法 浸泡固定 注射、灌注固定 微波固定 蒸汽固定
常用的固定剂
单纯性固定剂:甲醛(福尔马林 formalin) 乙醇;乙酸。 混合固定剂:中性甲醛pH 7.0(甲醛、磷酸
缓冲液);A-F液 (甲醛、酒精)
三、脱水(dehydration)
将组织内的水分用某些化学试剂置换出来 的过程
脱水的目的
凡是能作抗原、半抗原的物质,如蛋 白质、多肽、核酸、酶、激素磷脂、 多糖、受体及病原体等都可用相应的 特异性抗体在组织、细胞内将其用免 疫细胞化学手段检出和研究。
乳腺导管癌 ER
细支气管肺泡癌 TTF-1
2 取材部位及切面:纵切或横切往往是显示 组织结构明晰的关键。掌握正确的取材部 位就必须熟悉机体的组织结构和解剖特点, 原则上应在病变与正常组织的交界处取材, 避开坏死出血区。
,甚至卷曲变形,特别是神经肌肉组织,可 将其两端扎在木片或小木棍上进行固定。 3.勿使组织受挤压:取材刀剪应锋利,切 开时取材刀严禁来回挫动,以避免组织结 构变形、细胞破碎。
7. 0.5-1%盐酸酒精分化数秒钟。 8. 充分水洗蓝化30分钟。 9. 0.5-1%伊红1-2分钟。 10. 80%、95%、纯酒精1、2(脱水)各5分钟。 11. 二甲苯1、2中(透明)各5-10分钟。 12. 中性树胶封固。
HE染色中二甲苯、酒精和水洗作用:
1.二甲苯的作用:二甲苯可以洗去石蜡,使染料更
3.水洗: 水洗是为了使苏木精进入细胞核内,使细
胞核着色;染色后的水洗是为洗去未与切片结合 的染液;分化后的水洗是为了除去分化液和脱下 的染料。
HE染色中分化和蓝化的作用:
1.分化作用:苏木素染色后,水洗去未结合在切 片中的染液,但细胞核内结合过多的染液和 细胞浆中吸附过多的染料必须用分化液(1% 盐酸酒精)脱去,以保证核与浆的染色分 明。将此过程称为染色的分化作用。但不 能过度。