实验七_霉菌的形态观察

霉菌的形态观察一、实验目的1、掌握观察霉菌形态的基本方法，观察常见几种霉菌的菌丝形态2、学会霉菌浸片的制作方法二、实验原理霉菌菌丝观察不能用水作介质制片，因为菌丝会因渗透作用而膨胀，目前，霉菌制片时最理想的介质是乳酸苯酚油。

制片时常用乳酸石炭酸棉蓝作染色液。

此染色液制成的霉菌浸片除有一定染色效果外，细胞不变形，还具有杀菌防腐作用，且不易干燥，能保持较长时间。

霉菌和放线菌相似，由于其菌丝较粗，形成的菌落较疏松，呈绒毛状、絮状或蜘蛛网状，一般比细菌菌落大几倍到几十倍。

菌落的表面和培养基背面往往呈现不同的颜色。

霉菌菌落中，处于菌落中心的菌丝菌龄较大，位于边缘的则年幼。

三、实验器材曲霉（Aspergillus sp．）、青霉（Penicillium sp．）、根霉（Rhizopus sp．）和毛霉（Mucor sp．）的马铃薯培养基斜面乳酸石炭酸棉蓝染色液、20％甘油、马铃薯培养基、无菌吸管、显微镜、载玻片、盖玻片、U形棒、、滤纸、接种钩、酒精灯、、大头针、玻璃纸、镊子、刀片四、方法与步骤1、制作霉菌浸片观察于清洁载玻片上，滴一滴乳酸石炭酸棉蓝染色液，。

取生长好的霉菌平板，用两根大头针小心挑取含少量孢子的菌丝少许，并在乳酚棉蓝液上摊开，小心盖上盖玻片，注意不要产生气泡。

用低、高倍镜观察。

对于根霉和毛霉的培养物，可轻轻打开培养皿，将皿盖（有菌的一面朝上）置于显微镜低倍镜下直接观察，或将皿底（有菌的一面朝上）置于显微镜低倍镜下，观察皿边缘的菌丝。

2、载玻片观察法(1)将略小于培养皿底内径的滤纸放入皿内，再放上U形玻棒，其上放一洁净的载玻片，然后将二个盖玻片分别斜立在载玻片的两端，盖上皿盖，把数套（根据需要而定）如此装置的培养皿叠起，包扎好，灭菌后备用。

图14-1 载玻片培养示意图1 平皿2 U型玻璃棒3 载玻片4 培养物5 盖玻片6 滤纸(2)在上述载玻片的一边滴加融化的马铃薯培养基，点种孢子，并将盖玻片盖与其上，要求中央的培养基直径不大于0.5cm，盖、载玻片间距离不高于0.1mm。

霉菌的形态观察实验原理和操作步骤一、实验目的1、学习自制水浸片观察微生物的形态；2、学习并掌握观察霉菌形态的基本方法，了解四类常见霉菌的基本形态特征。

二、基本原理霉菌可产生复什分枝的菌丝体，分基内菌丝和气生菌丝，气生菌丝生长到一定阶段分化产生繁殖菌丝，由繁殖菌丝产生孢子。

霉菌菌丝体(尤其是繁殖菌丝)及孢子的形态特征是识别不同种类霉菌的重要依据。

霉菌菌丝和孢子的宽度通常比细菌和放线菌粗得多(约为3～10微米)，常是细菌菌体宽度的几倍至几十倍，因此，用低倍显微镜即可观察。

三、实验器材1、菌种青霉(Penicillium sp.)、曲霉(Aspergillus sp.)、根霉（Rhizopus sp.）、毛霉（Mucor sp.）培养约2～5d的马铃薯琼脂培养物。

2、溶液或试剂乳酸石炭酸棉蓝染色液、蒸馏水、50%乙醇、碘液。

3、器材剪刀、镊子、载玻片、盖玻片、解剖针、显微镜等。

四、实验方法及步骤1.水浸制片观察法在载玻片上滴加一滴乳酸石炭酸棉蓝染色液或蒸馏水，用解剖针从生长有霉菌的平板中挑取少量带有孢子的霉菌菌丝，用50%的乙醇浸润，再用蒸馏水将浸过的菌丝洗一下，然后放入载玻片上的液滴中，仔细地用解剖针将菌丝分散开来。

盖上盖玻片（勿使产生气泡，且不要再移动盖玻片），先用低倍镜，必要时转换高倍镜镜检并记录观察结果。

2.玻璃纸透析培养观察法（1）玻璃纸的选择与处理要选择能够允许营养物质透过的玻璃纸。

也可收集商品包装用的玻璃纸，加水煮沸，然后用冷水冲洗。

经此处理后的玻璃纸若变硬，必定是不可用的，只有那些软的可用。

将那些可用的玻璃纸剪成适当大小，用水浸湿后，夹于旧报纸中，然后一起放入平皿内121℃灭菌30min备用。

（2）菌种的培养按无菌操作法，倒平板，冷凝后用灭菌的镊子夹取无菌玻璃纸贴附于平板上，再用接种环沾取少许霉菌孢子，在玻璃纸上方轻轻抖落于纸上。

然后将平板置28—30℃下培养3—5天，曲霉菌和青霉菌即可在玻璃纸上长出单个菌落（根霉菌的气生性强，形成的菌落铺满整个平板）。

实验八霉菌的形态观察一、实验原理霉菌的营养体是分枝的菌丝体。

霉菌在潮湿条件下生长繁殖长出丝状、绒毛状或蜘蛛网状的菌丝体。

菌丝分为营养菌丝与气生菌丝，营养菌丝匍匐于培养基的表面或生于培养基内吸收养料，从营养菌丝上长出伸于空中的菌丝为气生菌丝系，可分化出产生孢子的结构。

菌丝的直径一般比细菌和放线菌大得多。

菌丝在显微镜下观察呈管状，有的有横隔膜将菌丝分割为多个细胞，有的菌丝无横隔膜整个菌丝体为1个单细胞。

霉菌的菌落形态较大，质地较疏松，颜色各不相同。

霉菌无性繁殖或有性繁殖可形成不同类型的孢子。

菌丝、孢子及菌落等特征，因霉菌的种类而异，因而为种类鉴定非常重要的依据。

由于霉菌的菌丝体较粗，而且孢子容易飞散，若在水中溶易变形，显微测量时与实际值存在人为偏差，故观察时将其置于棉蓝乳酚油中，既有保持其正常的形态、使细胞不易干燥及杀菌防腐作用，还因棉蓝染料的存在而对菌丝与孢子具有染色作用，真菌的显微观察时常用棉蓝乳酚油作为浮载剂。

二、主要仪器及设备曲霉(Aspergillus sp．)，青霉(Penicillium sp．)，根霉(Rhizopus sp．)；棉蓝乳酸油染色液，载玻片，盖玻片，解剖针，滤纸，显微镜等。

三、操作步骤1、取95%酒精浸泡的载玻片1块，火焰烧去酒精；2、冷却后在载玻片中央滴棉蓝乳酚油1滴；3、以解剖针从霉菌菌落上挑少许菌丝体置于染液中；4、以解剖针使菌丝体在染液中充分展开；5、将1洁净的盖玻片盖于染液上，以滤纸吸去盖玻片边缘过剩的染液；6、显微镜下20X、40X物镜观察绘图。

四、注意事项1、菌丝体在浮载剂中必须充分展开；2、盖盖玻片时必须斜着缓慢放下，否则在盖上异形成气泡。

五、实验报告1、绘制有隔菌丝与无隔菌丝图2、绘制青霉菌及曲霉菌的分生孢子梗图。

3、霉菌显微观察制片与细菌有何不同？II 四大类细胞型微生物的菌落特征比较观察一、实验原理菌落形态是指某种微生物在一定的培养基上由单个菌体形成的群体形态。

实验七、霉菌的形态观察09级生科一班安明玉（200900140001）同组者：陈汶灿、陈肖然、程彬、高琳璐、秦瑶一、实验原理1.学习并掌握霉菌形态观察法；2.了解四类霉菌的基本形态。

二、实验原理霉菌可产生复杂分枝的菌丝体，分基生菌丝和气生菌丝，气生菌丝生长到一定阶段后分化产生繁殖菌丝，由繁殖菌丝产生孢子。

霉菌菌丝比较粗大（菌丝和孢子的直径达到3~10μm），通常是细菌菌体宽度的几倍至几十倍，因而可用低倍、高倍镜观察。

霉菌菌丝细胞容易收缩变形，孢子容易飞扬，在制备霉菌标本时，常用乳酸石炭酸溶液作为介质，具有不使细胞变形，可杀菌防腐，不易干燥，能保持较长时间等优点。

若加入棉蓝，又具有一定的染色效果。

霉菌的有些结构在制片过程中易被破坏，影响观察，可采用载片培养法。

此法便于直接在显微镜下观察，尤其适用于根霉的假根、曲霉的足细胞及分生孢子链等结构的着生和生长情况的观察。

并且还可以在同一标本上观察到微生物发育的不同阶段的形态。

霉菌菌丝体（尤其是繁殖菌丝）其孢子的形态特征是分类的重要依据。

例如：青霉的繁殖菌丝无顶囊，经多次分枝，产生几轮对称或不对称的小梗，小梗上着生成串的青色分生孢子，的孢子囊形如“扫帚”。

而曲霉的分生孢子梗顶端膨大成顶囊，成球形。

可以直接挑取生长在平板中的霉菌菌体制成水封片观察。

三、实验材料1.菌种根霉（Rhizopus）的斜面培养物，毛霉（Mucor）的斜面培养物，曲霉（Aspergillus）的斜面培养物，青霉（Penicillium）的斜面培养物；2.实验试剂马铃薯培养基（PDA）（200mL），甘油，二甲苯，香柏油，95%乙醇，蒸馏水；3.实验器材烧杯，玻璃棒，电磁炉，电子天平，称量纸，接种针，三角瓶，U型管，滴管（1mL），解剖刀，滤纸，培养皿，盖玻片，镊子，酒精灯，显微镜，擦镜纸，双层瓶，载玻片。

小室培养法1.灭菌a）如附录所示配制PDA培养基及甘油溶液；b）将培养基、甘油溶液及所需实验器材高温灭菌约30min。

实验七酵母菌、霉菌的形态观察一、基础知识酵母是不运动的单细胞真核微生物，其大小通常比常见细菌大几倍甚至十几倍．大多数酵母以出芽方式进行无性繁殖，有的分裂繁殖；有性繁殖是通过接合产生子囊孢子．本实验通过美蓝染液水浸片和水一碘液水浸片来观察酵母的形态和出芽生殖方式。

美蓝是一种无毒性的染料，它的氧化型呈蓝色，还原型无色。

用美蓝对酵母的活细胞进行染色时，由于细胞的新陈代谢作用，细胞内具有较强的还原能力，能使美蓝由蓝色的氧化型变为无色的还原型。

因此，具有还原能力的酵母活细胞是无色的、而死细胞或代谢作用微弱的衰老细胞则呈蓝色或淡蓝色，借此即可对酵母菌的死细胞和活细胞进行鉴别。

霉菌可产生复什分枝的菌丝体，分基内菌丝和气生菌丝，气生菌丝生长到一定阶段分化产生繁殖菌丝，由繁殖菌丝产生孢子。

霉菌菌丝体(尤其是繁殖菌丝)及孢子的形态特征是识别不同种类霉菌的重要依据。

霉菌菌丝和孢子的宽度通常比细菌和放线菌粗得多(约为3-10 m)，常是细菌菌体宽度的几倍至几十倍，因此，用低倍显微镜即可观察。

观察霉菌的形态有多种方法，常用的有下列二种：直接制片观察法：是将培养物置于乳酸石炭酸棉蓝染色液中，制成霉菌制片镜检。

用此染液制成的霉菌制片的特点是：细胞不变形；具有防腐作用，不易干燥，能保持较长时间；能防止孢子飞散；染液的蓝色能增强反差。

必要时，还可用树胶封固，制成永久标本长期保存。

载玻片培养观察法：用无菌操作将培养基琼脂薄层置于载玻片上，接种后盖上盖玻片培养，霉菌即在载玻片和盖玻片之间的有限空间内沿盖玻片横向生长，培养一定时间后，将载玻片上的盖玻片直接在显微镜下观察即可。

二、实验目的1．学习并掌握观察酵母菌和霉菌形态的基本方法及酵母菌、霉菌的形态特征。

2．观察酵母菌的形态及出芽生殖方式，学习区分酵母菌死活细胞的实验方法。

3．掌握酵母菌的一般形态特征及其与细菌的区别。

三、实验材料酿酒酵母（Saccharomyles cerevisiae）培养的2d的麦芽汁（或豆芽汁）斜面培养物，曲霉（Aspergillus.sp）青霉、根霉（Rhizopus.sp）和毛霉（Mucor.sp）培养2-5d的马铃薯琼脂平板培养物。

实验七霉菌的培养和观察摘要通过在一定固定环境下培养根霉，毛霉，曲霉，青霉四种霉菌，先通过菌种的外形对其有一个“宏观”的认识，然后再在显微镜低倍或高倍镜下分别观察四种菌的形态，孢子囊及孢子形态，菌丝形态等方面。

发现根霉，曲霉和青霉菌丝均有横隔；青霉的分生孢子小梗呈扫帚状等现象。

关键词土豆培养基（PDA）分生孢子梗（Conidiophore）载片培养一、实验目的（1）学习并掌握观察霉菌形态的基本方法。

（2）了解四类霉菌（根霉、毛霉、黑曲霉、青霉）的基本形态。

二、实验原理霉菌菌丝体由基内菌丝、气生菌丝和繁殖菌丝组成，其菌丝比细菌及放线菌粗几倍到几十倍。

可以采取直接制片和透明胶带法观察，也可以采取载玻片培养观察法，通过无菌操作将薄层培养基琼脂置于载玻片上，接种后盖上盖玻片培养，使菌丝体在盖玻片和载玻片之间的培养基中生长，将培养物直接置于显微镜下可观察到霉菌自然生长状态并可连续观察不同发育期的菌体结构特征变化。

对霉菌可利用乳酸石炭酸棉蓝染液进行染色，盖上盖玻片后制成霉菌制片镜检。

石炭酸可以杀死菌体及孢子并可防腐，乳酸可保持菌体不变形，棉蓝使菌体着色。

同时，这种霉菌制片不易干燥，能防止孢子飞散，用树胶封固后可制成永久标本长期保存。

三、实验器材1、菌种根霉（Rhizopus），毛霉（Mucor），黑曲霉（Aspergillus niger），青霉（Penicillium）2、试剂马铃薯20g，蔗糖2g，琼脂2g，水100mL，20%甘油等。

3、仪器分析天平，玻璃棒，三角瓶，小烧杯，加热器，漏斗，纱布，培养皿，载玻片，盖玻片，U 型玻棒，解剖刀，镊子，接种环，移液管，酒精灯，显微镜等。

四、实验内容（1）配制马铃薯培养基配制200ml马铃薯培养基（PDA），其成分配比及配制方法见附录。

灭菌后无菌操作，取培养基分别倒少量于灭菌培养皿中，使之凝固成薄层。

再将这一层培养基用解剖刀切割为若干1cm²左右的琼脂块。

霉菌的形态观察作者：喻曙光学号：班级：生院2010级生命基地生北周五第四组同组者：。

【实验目的】1、学习并掌握观察霉菌形态的基本方法2、了解四类常见霉菌（曲霉、毛霉、青霉、根霉）的基本形态特征【实验原理】霉菌霉菌可产生复什分枝的菌丝体，分基内菌丝和气生菌丝，气生菌丝生长到一定阶段分化产生繁殖菌丝，由繁殖菌丝产生孢子。

霉菌菌丝体（尤其是繁殖菌丝）及孢子的形态特征是识别不同种类霉菌的重要依据。

霉菌菌丝和孢子的宽度通常比细菌和放线菌粗得多（约 3～10μm ），常是细菌菌体宽度的几倍至几十倍，因此，用低倍显微镜即可观察。

观察方法观察霉菌的形态有多种方法，常用的有直接制片观察法、载玻片培养观察法和玻璃培养观察法三种方法，本次实验采用载玻片培养观察法（小室培养法）。

载玻片培养观察法（小室培养法）用无菌操作将培养基琼脂薄层置于载玻片上，接种后盖上盖玻片培养，霉菌即在载玻片和盖玻片之间的有限空间内沿盖玻片横向生长。

培养一定时间后，将载玻片上的培养物置于显微镜下观察。

这种方法既可以保持霉菌自然生长状态，还便于观察不同发育期的培养物。

【实验器材】1.菌种：曲霉 (Aspergillus sp.) ，青霉，根霉 (Rhizopus sp.) ，毛霉（Mucor sp.），培养 7d 的马铃薯琼脂平板培养物2.培养基：马铃薯培养基（简称PDA）（配方见附表）3.仪器或其他用具：平皿，载玻片，盖玻片，无菌吸管，U 型玻棒，解剖刀，镊子，50%乙醇，20%甘油，显微镜，接种环，酒精灯等【实验步骤】1.载玻片培养观察法（小室培养法）（1）.培养小室的灭菌：在平皿底铺一张略小于皿底的圆滤纸片，再放一Ｕ形玻棒，其上放一洁净载玻片和两块盖玻片，盖上皿盖，包扎后于110℃灭菌20～30分钟，烘干备用。

（2）.琼脂薄片的制作：取已灭菌的马铃薯琼脂培养基各6～7ml 注入另两个灭菌平皿中，使之凝固成薄层。

通过无菌操作，用解剖刀将其切成 1cm x 1cm的琼脂块，并将其移至上述培养室中的载玻片上（每片放两块 )。