实验五-霉菌的形态观察

实验五霉菌的形态观察一、实验目的1、掌握观察霉菌形态的基本方法，观察常见几种霉菌的菌丝形态2、观察霉菌个体形态及各种无性孢子的形态二、实验原理霉菌是由许多较之在一起的菌丝体构成。

在超市的条件下，霉菌可以生长出丝状，绒毛状或蜘蛛网状的菌丝体。

单个菌丝在显微镜下观察呈管状，有的霉菌其菌丝有横隔膜，将菌丝分割为多细胞，成为有隔菌丝。

有点霉菌，其菌丝没有横隔膜，称为无隔菌丝。

菌丝的直径比一般细菌和放线菌菌丝大几倍到几十倍。

菌落形态较大，质地较疏松，其疏松程度不等，颜色各异。

菌丝体经制片后可用低倍或高倍显微镜观察。

在观察时，要注意菌丝直径大小，菌丝体有无横隔膜，营养菌丝有无假根，无性繁殖或有性繁殖时形成的孢子种类及着生方式。

三、实验仪器及试剂（1）菌种：曲霉、青霉、根霉和毛霉（2）仪器：显微镜、擦镜纸等。

四、实验步骤根据需要可以取出各种霉菌载玻片置低倍镜下观察，必要时换高倍镜，绘制霉菌的形态，记录各种霉菌的形态特征。

五、数据记录和处理表格：四种霉菌的形态特征六、实验心得1•观察根霉时，注意观察其菌丝有无横隔、假根、孢子囊柄、孢子囊、囊轴、囊托、孢子囊孢子及厚垣孢子。

2•观察毛霉时，注意观察其菌丝无横隔、孢子囊柄、囊轴、孢子囊孢子及后垣孢子。

3•观察曲霉时，注意观察其菌丝有横隔、足细胞、分生孢子梗、顶囊、小梗（形状、层数及着生情况）、分生孢子。

4•观察青霉时，注意观察其菌丝有横隔、分生孢子梗、帚状枝（小梗的轮数及对称性）、分生孢子七、实验考核表2实验成绩自评及组评成绩表八、实验纪实青霉4*10 青霉10*10青霉40*10 毛霉4*10毛霉10*10 毛霉40*10曲霉4*10 曲霉10*10曲霉40*10 根霉4*10根霉10*10 根霉40*10。

实验五霉菌的形态观察、微生物的测微与计数一．实验目的1.学习并掌握观察霉菌形态的基本方法，初步了解霉菌的形态特征及鉴别依据。

2.学习使用目镜测微尺和镜台测微尺在显微镜下测定微生物大小的方法。

3.了解血球计数板的构造和使用方法。

学习使用血球记数板测定微生物数量的方法。

4.总结并掌握细菌、放线菌和霉菌的鉴别方法。

二、实验原理1. 霉菌定义及用途⏹霉菌不是真菌分类中的名词，而是丝状真菌的统称。

⏹霉菌在自然界中广泛分布，与食品的关系密切，是人类在实践活动中最早利用的一种微生物，如早期进行的酱和酱油的制作等。

⏹霉菌也可以使食品发生腐败变质或产生毒素，影响人体健康甚至危及生命。

2.霉菌特征⏹霉菌可产生分支的菌丝体，分基内菌丝和气生菌丝，气生菌丝生长到一定阶段分化产生繁殖菌丝，由繁殖菌丝产生孢子。

⏹菌丝体（尤其是繁殖菌丝）及孢子的形态特征是识别不同种类霉菌的重要依据。

⏹霉菌菌丝和孢子的宽度通常比细菌和放线菌粗的多（约3-10um)，常是细菌菌体宽度的几倍至几十倍。

因此，用低倍镜即可观察。

3.霉菌的菌落⏹松：由于霉菌的菌丝较粗较长，菌丝体疏松，因而形成的菌落也比较疏松，呈绒毛状、棉絮状或蜘蛛网状；⏹大：菌落形态较大，一般比细菌和放线菌的菌落大几倍到几十倍，有时会长满整个培养皿；⏹干：外观干燥，不透明；⏹挑：菌落与培养基间的连接紧密，不易挑取；⏹颜色：由于基内菌丝、气生菌丝、孢子颜色不同，不同的霉菌菌落表面呈现不同的颜色，菌落正反面、边缘与中心颜色常不一致。

同一种霉菌在不同的培养基上或不同的培养条件下所形成的菌落特征可能有所不同。

但同一种霉菌在相同的培养条件下和培养基上所形成的菌落特征相对稳定。

菌落特征是霉菌鉴定的重要依据之一。

4、霉菌的菌丝形态⏹构成霉菌营养体的基本单位是菌丝。

菌丝的宽度一般为3-10μm，比放线菌菌丝宽很多倍，其菌可伸长并产生分枝。

许多分枝的菌丝相互交织在一起，称为菌丝体。

⏹一部分菌丝存在于培养基质中吸收营养，称为基内菌线或营养菌丝。

实验五霉菌的形态观察一、目的要求学习并掌握观察霉菌形态的基本方法。

了解四类常见霉菌的基本形态特征。

二、基本原理霉菌具有分枝的菌丝体，分基内菌丝和气生菌丝，气生菌丝生长到一定阶段分化产生繁殖菌丝，由繁殖菌丝产生孢子。

霉菌菌丝和孢子的宽度通常比细菌和放线菌粗得多，常是细菌菌体宽度的几倍至几十倍，因此，用低倍显微镜即可观察。

直接制片观察法:将培养物置于乳酸石炭酸棉蓝染色液中，制成霉菌制片镜检。

用此法制成的霉菌制片的特点是:细胞不变形;具有防腐作用，不易干燥，能保持较长时间;能防止孢子飞散;染液的蓝色能增强反差。

载玻片培养观察法:用无菌操作将淀粉琼脂培养基薄层置于载玻片上，接种后盖上盖玻片培养，霉菌即在载玻片和盖玻片之间的有限空间内沿盖玻片横向生长。

这种方法既可以保持霉菌自然生长状态，还便于观察不同发育期的培养物。

三、材料及器材1. 菌种：毛霉、根霉、青霉、曲霉的培养物。

2. 培养基：马铃薯琼脂或察氏琼脂培养基。

3. 溶液和试剂：乳酸石炭酸棉蓝染色液。

4. 仪器或其他用具：无菌吸管，平皿，载玻片，盖玻片，解剖针，镊子，50%乙醇，20%的甘油以及显微镜等。

四、实验方法1. 直接制片观察法在载玻片上加一滴乳酸石炭酸棉蓝染色液，用解剖针从霉菌菌落边缘处挑取少量已产孢子的霉菌菌丝，先置于50%乙醇中浸一下以洗去脱落的孢子，再放在载玻片上的染液中，用解剖针小心地将菌丝分散开。

盖上盖玻片，置低倍镜下观察，必要时换高倍镜观察。

2. 载玻片培养观察法（1）琼脂块的制作。

取已灭菌的马铃薯琼脂培养基6mL～7mL注入另一灭菌平皿中，使之凝固成薄层。

用解剖刀切成0.5 cm2～1cm2的琼脂块，并将其移至培养室中的载玻片上。

（2）接种。

用尖细的接种针挑取很少量的孢子接种于琼脂块的边缘上，用无菌镊子将盖玻片覆盖在琼脂块上。

接种量要少，尽可能将分散的孢子接种在琼脂块边缘上，否则培养后菌丝过于稠密影响观察。

（3）培养。

先在平皿的滤纸上加3mL～5mL灭菌的20%甘油，盖上皿盖，28℃培养。

一、实验目的1. 学习并掌握观察霉菌形态的基本方法；2. 了解常见霉菌（青霉、曲霉、根霉、毛霉）的基本形态特征；3. 熟练运用显微镜操作技术及无菌操作技术。

二、实验原理霉菌属于真菌的一种，其菌丝体由多个菌丝组成，分为基内菌丝和气生菌丝。

气生菌丝生长到一定阶段，分化产生繁殖菌丝，由繁殖菌丝产生孢子。

霉菌菌丝体（尤其是繁殖菌丝）及孢子的形态特征是识别不同种类霉菌的重要依据。

霉菌菌丝和孢子的宽度通常比细菌和放线菌粗得多，约为3-10μm，常是细菌菌体宽度的几倍至几十倍。

本实验采用载玻片培养观察法（小室培养法）观察霉菌的形态。

三、实验器材1. 菌种：青霉、曲霉、根霉、毛霉培养2-5d的马铃薯琼脂平板培养物；2. 培养基：土豆琼脂培养基；3. 溶液或试剂：乳酸石炭酸棉蓝染色液；4. 其他：无菌吸管、平皿、载玻片、盖玻片、接种针、显微镜等。

四、实验步骤1. 观察菌落特征：观察青霉、曲霉、根霉、毛霉平板中的菌落，描述其菌落特征，注意菌落形态的大小、菌丝的高矮、生长密度、孢子等。

2. 制片：取少量霉菌菌落，用无菌接种针挑取菌丝，滴加乳酸石炭酸棉蓝染色液，盖上盖玻片，制成临时玻片。

3. 显微镜观察：a. 低倍镜观察：观察菌丝的形态、颜色、排列等特征；b. 高倍镜观察：观察菌丝的横切面、孢子等特征。

4. 记录并分析结果：将观察到的菌丝形态、颜色、排列等特征与教材中常见霉菌的形态特征进行对比，分析所观察到的霉菌种类。

五、实验结果与分析1. 青霉：菌丝呈灰绿色，分生孢子梗直立，顶端产生大量分生孢子，分生孢子呈蓝绿色。

2. 曲霉：菌丝呈黄色或绿色，分生孢子梗呈放射状排列，顶端产生大量分生孢子，分生孢子呈绿色。

3. 根霉：菌丝呈白色，有明显的假根，分生孢子梗呈直角分叉，顶端产生大量分生孢子，分生孢子呈绿色。

4. 毛霉：菌丝呈白色或灰白色，分生孢子梗呈螺旋状排列，顶端产生大量分生孢子，分生孢子呈绿色。

通过本次实验，我们成功观察了青霉、曲霉、根霉、毛霉的形态特征，并学会了观察霉菌形态的基本方法。

姓名系年级学号组别科目题目霉菌的形态观察同组者：霉菌的形态观察一. 实验目的1．掌握配制马铃薯培养基（PDA）的一般方法。

2．学习并掌握观察霉菌形态的基本方法。

3．了解并掌握四类霉菌（根霉、毛霉、曲霉、青霉）的基本形态。

二.实验原理1.霉菌霉菌是可产生复杂分枝的菌丝体，其菌丝分基内菌丝和气生菌丝，气生菌丝生长到一定阶段分化产生繁殖菌丝，由繁殖菌丝产生孢子。

霉菌菌丝体（尤其是繁殖菌丝）及孢子的形态特征是识别不同种类霉菌的重要依据。

霉菌菌丝和孢子的宽度通常比细菌和放线菌粗得多（约 3～10μm ），常是细菌菌体宽度的几倍至几十倍，因此，用低倍显微镜即可观察。

本实验采用毛霉、青霉，曲霉，根霉四种常见的霉菌作为菌种进行观察。

2.小室培养法观察霉菌的形态有多种方法，常用的有直接制片观察法、载玻片培养观察法和玻璃培养观察法三种方法，本次实验采用载玻片培养观察法（小室培养法）。

用无菌操作将培养基琼脂薄层置于载玻片上，沿琼脂边缘接种后盖上盖玻片培养，霉菌即在载玻片和盖玻片之间的有限空间内沿盖玻片横向生长。

培养一定时间后，将载玻片上的培养物置于显微镜下观察。

这种方法既可以保持霉菌自然生长状态，还便于观察不同发育期的培养物。

三．实验器材1.菌种曲霉（Aspergillus sp.），青霉（Penicillium sp.），毛霉（ Mucor sp. ）和根霉（Rhizopus sp.）培养48h的马铃薯琼脂（PDA）斜面培养物。

2.培养基及试剂马铃薯琼脂（PDA），20%甘油（无菌），乙醇。

3.仪器及其它用品无菌操作台，解剖刀，镊子，无菌吸管，U型玻璃棒，普通光学显微镜，擦镜纸，绸布，酒精灯，载玻片，接种针，培养皿等。

四．操作步骤1. 培养基的配制按附录所示配方称取PDA各组分，先将马铃薯去皮，切成小块称取20g煮沸姓名系年级学号组别科目题目霉菌的形态观察同组者：20min，然后先用1层纱布滤去未溶解的固体，再用6层纱布过滤，将滤液体积用无菌水调至100mL，然后再加入糖及琼脂，加塞后用牛皮纸包好，准备灭菌。

山东大学实验报告2017年11月6日________________________________________ _________________________ 科目：微生物学实验题目：霉菌的培养及形态观察姓名：丁志康一、目的要求1.学习并掌握观察霉菌形态的基本方法。

2.了解四类常见霉菌的基本形态特征。

二、基本原理霉菌可产生复什分枝的菌丝体，分基内菌丝和气生菌丝，气生菌丝生长到一定阶段分化产生繁殖菌丝，由繁殖菌丝产生孢子。

霉菌菌丝体（尤其是繁殖菌丝）及孢子的形态特征是识别不同种类霉菌的重要依据。

霉菌菌丝和孢子的宽度通常比细菌和放线菌粗的多（约为3-10μm），常是细菌菌体宽度的几倍至几十倍，因此，用低倍镜即可观察。

观察霉菌的形态有多种方法，常用的有下列三种：1. 直接制片观察法：是将培养物置于乳酸石碳酸棉蓝染色液中，制成霉菌制片镜检。

用此染色制成的霉菌制片的特点是：细胞不变形；具有防腐作用，不易干燥，能保持较长时间；能防止孢子飞散；染色的蓝色能增强反差。

必要时，还可用树胶封固，制成永久标本长期保存。

2．载玻片培养观察法：用无菌操作将培养基琼脂薄层置于载玻片上，接种后盖上盖玻片培养，霉菌就在载玻片和盖玻片之间的有限空间内沿盖玻片横向生长。

培养一定时间后，将载玻片上的培养物置显微镜下观察。

这种方法既可以保持霉菌自然生长状态，还便于观察不同发育期培养物。

3．玻璃纸培养观察法：玻璃纸是一种透明的半透膜，将灭菌的玻璃纸覆盖在琼脂平板表面，然后将霉菌接种于玻璃纸上，经培养，霉菌在玻璃纸上生长形成菌苔。

观察时，揭下玻璃纸，固定在载玻片上直接镜检。

这种方法既能保持霉菌的自然生长状态，也便于观察不同生长期的形态特征。

本次试验使用的是第二种方法，即载玻片培养观察法。

三、器材1、菌种：曲霉，青霉，根霉和毛霉培养2-5d的马铃薯斜面培养物。

2、培养基：土豆琼脂培养基。

3、溶液或试剂：蒸馏水。

4、仪器或其他用具：无菌吸管，平皿，载玻片，盖玻片，U形玻棒，解剖针，解剖刀，镊子，95%乙醇以及显微镜等。

一、实验目的1. 学习并掌握观察霉菌形态的基本方法；2. 了解霉菌的形态特征及鉴别依据；3. 探究温度和湿度对霉菌生长的影响。

二、实验原理霉菌是一种广泛分布于自然界中的真菌，它们能够在各种环境中生长繁殖。

霉菌的生长受多种因素影响，其中温度和湿度是两个重要的非生物因素。

本实验通过观察霉菌的形态，探究温度和湿度对霉菌生长的影响。

三、实验材料与仪器1. 实验材料：- 霉菌样品（曲霉、青霉、根霉等）- 馒头（或面包）- 洁净的食品袋- 温度计- 湿度计- 显微镜- 玻璃培养皿- 纱布2. 实验仪器：- 温度计- 湿度计- 显微镜- 玻璃培养皿- 纱布四、实验方法与步骤1. 观察霉菌形态（1）将霉菌样品置于显微镜下观察，观察霉菌的菌丝、孢子等形态特征；（2）记录不同种类霉菌的形态特征。

2. 探究温度对霉菌生长的影响（1）将馒头分别放入温度为5℃、15℃、25℃、35℃的玻璃培养皿中，每个温度下放置两个馒头；（2）每天观察馒头上的霉菌生长情况，记录霉菌生长速度、菌丝长度、孢子数量等；（3）对比不同温度下霉菌的生长情况。

3. 探究湿度对霉菌生长的影响（1）将馒头分别放入湿度为30%、50%、70%、90%的玻璃培养皿中，每个湿度下放置两个馒头；（2）每天观察馒头上的霉菌生长情况，记录霉菌生长速度、菌丝长度、孢子数量等；（3）对比不同湿度下霉菌的生长情况。

五、实验结果与分析1. 霉菌形态观察结果（1）曲霉：菌丝白色，有分支，产生黑色孢子；（2）青霉：菌丝蓝色，有分支，产生蓝色孢子；（3）根霉：菌丝白色，有分支，产生白色孢子。

2. 温度对霉菌生长的影响（1）在低温条件下（5℃），霉菌生长速度较慢，菌丝长度较短，孢子数量较少；（2）在适宜温度条件下（25℃），霉菌生长速度较快，菌丝长度较长，孢子数量较多；（3）在高温条件下（35℃），霉菌生长速度较快，但菌丝长度较短，孢子数量较少。

3. 湿度对霉菌生长的影响（1）在低湿度条件下（30%），霉菌生长速度较慢，菌丝长度较短，孢子数量较少；（2）在适宜湿度条件下（70%），霉菌生长速度较快，菌丝长度较长，孢子数量较多；（3）在高湿度条件下（90%），霉菌生长速度较快，但菌丝长度较短，孢子数量较少。

实验五霉菌形态及菌落特征的观察一、目的要求1.掌握观察霉菌形态的基本方法，并观察其形态特征。

2.掌握常用的霉菌制片方法二、基本原理霉菌菌丝较粗大，细胞易收缩变形，而且孢子很容易飞散，所以制标本时常用乳酸石炭酸棉蓝染色液。

此染色液制成的霉菌标本片其特点是：(a)细胞不变形；(b)具有杀菌防腐作用，且不易干燥，能保持较长时间；(c)溶液本身呈蓝色，有一定染色效果。

霉菌自然生长状态下的形态，常用载玻片观察，此法是接种霉菌孢子于载玻片上的适宜培养基上，培养后用显微镜观察。

此外，为了得到清晰、完整、保持自然状态的霉菌形态还可利用玻璃纸透析培养法进行观察。

此法是利用玻璃纸的半透膜特性及透光性，将霉菌生长在覆盖于琼脂培养基表面的玻璃纸上，然后将长菌的玻璃纸剪取一小片，贴放在载玻片上用显微镜观察。

三、器材曲霉（Aspergillussp．），青霉（Penicillium sp．），根霉（Rhizopus sp．），毛霉（Mucor sp．）；乳酸石炭酸棉蓝染色液，20％甘油，查氏培养基平板，马铃薯培养基；无菌吸管，载玻片，盖玻片，U形棒，解剖刀，玻璃纸，滤纸等。

四、操作步骤1．一般观察法于洁净载玻片上，滴一滴乳酸石炭酸棉蓝染色液，用解剖针从霉菌菌落的边缘处取小量带有孢子的菌丝置染色液中，再细心地将菌丝挑散开，然后小心地盖上盖玻片，注意不要产生气泡。

置显微镜下先用低倍镜观察，必要时再换高倍镜。

2．载玻片观察法(1)将略小于培养皿底内径的滤纸放入皿内，再放上U形玻棒，其上放一洁净的载玻片，然后将二个盖玻片分别斜立在载玻片的两端，盖上皿盖，把数套（根据需要而定）如此装置的培养皿叠起，包扎好，用1．05kg/cm2，121．3℃灭菌20分钟或干热灭菌，备用。

(2)将6—7ml灭菌的马铃薯葡萄糖培养基倒入直径为9cm的灭菌平皿中，待凝固后，用无菌解剖刀切成0．5—1cm2的琼脂块，用刀尖铲起琼脂块放在已灭菌的培养皿内的载玻片上，每片上放置2块。

实验三、霉菌的形态观察一、实验目的：（1）观察霉菌的群落特征（2）观察霉菌个体形态及各种无性孢子的形态（3）掌握霉菌的制片方法二、实验原理：霉菌是由许多较之在一起的菌丝体构成。

在超市的条件下，霉菌可以生长出丝状，绒毛状或蜘蛛网状的菌丝体。

单个菌丝在显微镜下观察呈管状，有的霉菌其菌丝有横隔膜，将菌丝分割为多细胞，成为有隔菌丝。

有点霉菌，其菌丝没有横隔膜，称为无隔菌丝。

菌丝的直径比一般细菌和放线菌菌丝大几倍到几十倍。

菌落形态较大，质地较疏松，其疏松程度不等，颜色各异。

菌丝体经制片后可用低倍或高倍显微镜观察。

在观察时，要注意菌丝直径大小，菌丝体有无横隔膜，营养菌丝有无假根，无性繁殖或有性繁殖时形成的孢子种类及着生方式。

由于霉菌的菌丝较大，而且孢子容易飞散，如将菌丝体制与水中易变形，故观察时用浸片法将其置于乳酸石碳酸棉溶液中、菌丝和孢子染成蓝色，保持菌丝体圆形，使细胞不易干燥，并有杀菌作用。

三、实验材料：（1）菌种：产黄青霉、黄曲霉、黑根霉（2）时间和溶液：乳酸石炭酸棉溶液（3）仪器和其他物品：显微镜、接种环、载片、擦镜纸等四、实验内容：产黄青霉：顶囊分生孢子梗分生孢子小梗分生孢子有横隔膜黄曲霉：分生孢子梗分生孢子小梗分生孢子有横隔膜黑根霉：假根匍匐枝孢子顶囊孢子囊舟孢子囊孢子囊孢子五、实验结果：六、讨论（1）霉菌的无性繁殖和有性繁殖的孢子各有几种？无性繁殖——无形孢子：游动孢子、包囊孢子、分生孢子、节孢子、厚垣孢子、芽孢子掷孢子有性繁殖——有性孢子：卵孢子、接合孢子、子囊孢子、担孢子（2）细菌、放线菌、霉菌菌落特征如何识别？。

实验五、霉菌的形态观察实验目的：1. 观察不同霉菌的形态特征，了解霉菌的分类及特点。

2. 掌握霉菌的常规培养方法，培养出真菌菌株。

实验材料：1. 感染性霉菌（如：麦角菌、白色念珠菌、鼠李糠霉等）。

2. 培养基（如：琼脂、马铃薯葡萄糖琼脂、配制糖酵母汤等）。

3. 恒温培养箱（28℃）。

4. 显微镜。

5. 盖玻片、载玻片、恒温水浴槽、升级滴管等。

实验步骤：1. 每个菌种需要分别制取接种物，用无菌棉签在菌落上插取的接种物涂于琼脂平板上。

2. 放到恒温箱中，在28℃的环境下孵育。

3. 观察培养基上菌落的生长形态、菌落颜色及其他特征，如球状、点状、菌丝状等。

4. 取一个干净的载玻片，使用无菌镊子将菌落切取一小块放置在载玻片上。

5. 在玻片上滴入少量的100%甘油，用盖玻片覆盖住，观察微镜下菌落的形态，如直链菌丝、弯曲链菌丝、无菌膜等。

6. 将制做好的预备液取出一滴，放置于玻片上，用显微镜观察。

液体涂片法需要先将菌落取出来悬浮在液体中，然后将悬浮液放在载玻片上。

在玻片上先滴上液体悬浮物，再盖上盖玻片，用显微镜观察。

7. 通过对霉菌形态学的观察，结合培养基上的生长情况，明确不同霉菌菌株的分类。

实验结果：霉菌是一类微生物，主要生长在植物、动物有机物上，具有不同的形态特征。

在实验中，我们通过对不同菌株的观察，发现它们各具特色，有些是球状的，有些是菌丝状的，有些则是点状的。

当我们加入甘油后，可以看到更加清晰细致的形态特征。

观察下来发现，同一种霉菌在不同的培养基上，生长形态也会有所不同。

因此人们通过对霉菌分子生物学、生理生化功能等方面的研究，初步对霉菌进行了分类，取得了一些重要的研究成果。

本实验主要通过观察不同菌株的形态特征，结合生长情况，对不同霉菌菌株进行了初步分类。

同时本实验也使我们更加了解了霉菌的基本特征，如生长环境，形态变化等，如今霉菌被广泛应用于很多领域的研究中，如食品工业、制药工业、生物技术等行业，为我们所知的现代科技发展带来更好的发展机遇。