人尿微量白蛋白(m-Alb)检测试剂盒(透射比浊法)

尿微白检验方法学
尿微量白蛋白的检测方法主要有：ELISA方法、放射免疫法、化学发光法、免疫透射比浊法以及免疫荧光法。

ELISA方法灵敏性高，但操作步骤多，等待检测结果时间比较长，需要有专门的实验室、专业人员完成，一般用于大批量标本的检测。

放射免疫法灵敏度高、操作简便，测量和数据处理易于实现自动化。

但因其为相对定量及存在放射线辐射、污染等问题，所以应用较少。

化学发光法因其特异性、敏感性高、简便快速、无需外来光源、背景噪音低而应用广泛，但其选择性差、发射强度依赖于各种环境因素，需严格控制外界各种因素。

免疫透射比浊法试剂较稳定，自动化操作减少了人为误差，但其检测需核实的抗原抗体比例，需预先定值，否则会造成误差。

免疫荧光法特异性强、敏感性高、操作简便、检测时间短，即可批量检测也可单份检测，是临床上常用的快速定量检测方法。

白蛋白（ALB）测定试剂（盒）（溴甲酚绿法）
2.性能指标
2.1外观
试剂应为清澈透明的液体，无沉淀、悬浮物和絮状物。

2.2净含量
试剂装量的装量应按表 2，液体装量的最大允许负偏差应为 5%。

表 2 净含量
2.3试剂空白吸光度
试剂（盒）以纯化水为空白在 37 ℃±1℃ 、630 nm 波长、1 cm 光径条件下，试剂空白吸光度应≤0.40。

2.4分析灵敏度
试剂（盒）测试 43.7 g/L 的被测物时，吸光度变化（ΔA）应在 1.00～2.66 的范围内。

2.5线性范围
试剂（盒）在(0～60) g/L范围内的分析性能应符合如下要求：
a)线性相关系数r≥0.990；
b)(0～10) g/L 范围内，线性绝对偏差应在±1 g/L以内；(10～60) g/L 范围内，线性
相对偏差应在±10%以内。

2.6测量精密度
2.6.1重复性
用校准品重复测试所得结果的变异系数CV≤4%。

2.6.2批间差
试剂（盒）批间相对偏差R≤6%。

2.7准确度
校准品的相对偏差 B 在±10%以内。

2.8分析特异性
血红蛋白浓度在 400 mg/dL 内、甘油三酯浓度在 500 mg/dL 内、抗坏血酸浓度在 30 mg/dL 内、胆红素浓度在 40 mg/dL 内，对试剂检测结果的偏差影响应在±10%以内。

尿微量白蛋白定量检测操作程序1.目的规范尿微量白蛋白定量检测试验，确保检测结果准确性和重复性。

2．范围本操作规程适用于生化室工作人员、实习人员、进修人员的操作前培训。

3.术语4．测定原理4．1测定方法：免疫比浊法4．2 测定原理：样品中的微量自蛋白与特异性的抗人白蛋白抗体在液相中相遇，立即形成不溶性抗原-抗体复合物，并产生一定的浊度。

j虫度高低反映样品中MAlb的含量，通过与同样处理的校准品比较，即可计算出样品中MAlb的含量。

5．标本5．1标本种类：随机尿及24h尿，常温下1天，样品中MAlb在2~8°C保存可稳定l个月，-20·C保存可稳定6个月。

5．2标本采集：见生化标本采集程序。

6．试剂6．1试剂来源：新成生物有限公司。

6．2组成规格：R1 90ml*2 R2 45ml*16．3试剂准备本试剂为液体双试剂，可直接使用。

6．4试剂稳定性试剂2~8·C密闭避光贮存可稳定12个月，开瓶上机2~ 8°C避光贮存可稳定90天。

7. 检测程序7. 1试剂的准备：加入生化分析仪试剂盘中。

7. 2检测步骤：7. 2. 1基本参数方法:终点法主波长:340nm 样品/试剂:6/125ul 反应温度37·C 反应时间10min 副波长:700nm7. 2. 2校准：使用试剂盒配套的校准品；当试剂更换批号、质控出现漂移、仪器保养、重要零部件更换后应重新校准。

8.性能指标8.1、分析灵敏度：0mg/L。

8.2、测定范围：0~400mg/L。

8.3、精密度：批内cv.=5.0%、批间相对极差=10.0%。

8.4、准确度：相对偏差=10%。

8.5、空白眼光度：试剂空白在主波长340nm、副波长700nm处，10mm光径下，吸光度值<0.500。

9. 参考范围10. 临床意义10. 1 正常情况下，氨在肝脏转变成尿素。

严重肝脏疾病是，氨不能从循环中清除，引起血氨增高。

尿微量总蛋白测定原理尿微量总蛋白（urine microalbumin）是指尿液中微量存在的白蛋白，通常用于评估肾脏疾病的早期诊断和监测疾病进展情况。

测定尿微量总蛋白的原理主要是利用免疫学方法，通过特定的试剂与蛋白质发生免疫相应，从而定量测定尿液中微量蛋白的浓度。

本文将从测定尿微量总蛋白的原理、常用的测定方法和临床应用等方面进行详细介绍。

一、测定原理尿微量总蛋白的测定原理主要是利用免疫学方法，即抗原与抗体的免疫相应原理。

通常采用免疫层析、免疫电泳、免疫荧光检测、免疫比浊法等方法进行测定。

1.免疫层析法免疫层析法是通过将尿样添加特定的抗体或抗原，使之与待测蛋白进行特异性结合，然后通过一系列步骤来分离和测定目标蛋白。

其原理是将试样通过一定具有特异性的固相支持介质，使之与固定的抗体或抗原结合，并随着尿样中存在的微量总蛋白一起被分离出来。

2.免疫电泳法免疫电泳法是将待测尿样加入到具有孔隙性的凝胶中，然后加上特异性的抗体或抗原，使之与待检蛋白结合，再通过电泳方法分离并测定蛋白的浓度。

3.免疫荧光检测法免疫荧光检测法是利用荧光标记的抗体或抗原与待测样品中的蛋白质特异结合，然后通过使用激光或紫外光源来激发荧光染料的发光信号，最后测定光信号的强度来计算出蛋白质的浓度。

4.免疫比浊法免疫比浊法是将待测尿样与特定的抗体或抗原结合，形成抗原-抗体复合物，然后通过测定溶液的浑浊度来计算蛋白质的浓度。

通过上述免疫学方法，可以快速、准确地测定尿液中微量总蛋白的浓度，具有较高的敏感性和特异性，能够有效的评估肾脏损伤的程度，为临床诊断和治疗提供重要依据。

二、常用的测定方法尿微量总蛋白的测定方法主要包括半定量法和定量法两种，其中定量法的测定结果更为准确。

1.半定量法半定量法通常采用尿液尿蛋白/肌酐比值进行测定，这是一种简便快速的半定量测定方法。

可以通过免疫比浊法或免疫电泳法等进行半定量分析，但由于其测定结果受尿液稀释度的影响较大，准确性较差。

尿微量白蛋白测定试剂盒（免疫比浊法）适用范围：本试剂盒与ABBOTT ARCHITECT c4000/c8000/c16000全自动生化分析仪配套使用，用于体外定量测定人尿液中白蛋白的浓度。

1.1规格液体双剂型试剂1（R1)：60mL×2,试剂2(R2)： 6mL×2,校准品（4个浓度）：1mL×4/套；试剂1（R1)：65mL×2,试剂2(R2)： 10mL×2,校准品（4个浓度）：1mL×4/套。

1.2规格划分说明根据净含量划分规格。

1.3主要组成成分试剂盒由试剂1（R1）液体、试剂2（R2）液体及校准品液体组成。

1.3.1 试剂1（R1）液体主要组分：三羟甲基氨基甲烷（pH 7.5） 200mmol/L1.3.2 试剂2（R2）液体主要组分：羊抗人白蛋白抗体浓度根据效价而定1.3.3 校准品液体主要组分：PBS缓冲液基质（4个浓度）白蛋白①0 mg/L、②30mg/L～50mg/L、③70mg/L～100mg/L、④ 160mg/L～185mg/L。

（每批定值）2.1 外观试剂盒中各组件的外观应满足：a) 试剂1(R1)应为无色透明溶液，无杂质、无絮状物，外包装完整无破损；b) 试剂2(R2)应为浅黄色粘稠溶液，无杂质、无絮状物，外包装完整无破损；c) 校准品应为无色液体，无杂质、无絮状物，外包装完整无破损。

2.2 净含量液体试剂净含量应不少于标示值。

2.3 试剂空白吸光度在波长340nm处（光径1cm），试剂空白吸光度值（A）应≤0.2。

2.4 准确度用中生试剂和已上市同类试剂分别测定40个在测定范围内不同浓度的样本，在[20，180]mg/L检测范围内，比对两组数据的相关系数（r）及测值的偏差，要求r≥0.975，相对偏差应不超过±15％。

2.5 分析灵敏度对应于浓度为50mg/L的MALB所引起的吸光度变化差值（△A）的绝对值应在0.15～0.60的范围内。

尿微量白蛋白检测的标准操作程序【目的】掌握NEPhstar特定蛋白分析仪检测尿微量白蛋白正确方法，保证检查项目的准确性。

【该SOP变动程序】本标准操作程序的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，请专业组长及科主任签字后生效。

【检测原理】用散射比浊法，可溶性抗原与特异性的抗体反应形成不溶性复合物，当光线通过反应悬液时发生散射并由特种蛋白分析仪检测到。

散射光值的多少与测试样本中的蛋白浓度成一定比列。

通过刷卡将磁条中的标准曲线存储入仪器中，仪器会自动计算样品中的特定蛋白浓度。

【试剂组成】以上试剂由深圳国赛生物科技有限公司生产【所需其他材料】1．NEPHSTAR特定蛋白分析仪2．NEPHSTAR检测附件3．电子移液器YB2014．普通移液器【操作步骤】1、打开NEPHSTAR特定蛋白分析仪电源，仪器显示23、输入代码61，刷磁卡按刷磁卡，按ENTER直接进入下一步，默认仪器的序号和稀释度按此时4、将装有搅拌子和20ul尿液样品的测量杯放入测量室。

5移液器YB201将400ul缓冲液和40ul抗血清加入测量杯。

6、NEPHSTAR特定蛋白分析仪自动感应试剂的加入，搅拌子开始搅拌，测试开始。

测试完毕后仪器自动显示打印结果。

【参考区间】mALB<25mg/L【临床意义】1、正常情况下白蛋白在血液中检测出，并由肾脏过滤，当肾脏功能正常时白蛋白不会出现在尿液中，当肾小球基底膜受到损伤至通透性改变时，会有小部分白蛋白漏入尿液，形成微量白蛋白尿，高血压、糖尿病及系统性红斑狼疮等常伴有肾脏病变的缓慢进行性恶化，尿液中可较早发现异常。

2、尿液中白蛋白排泄量变动较大，随机尿标本一次尿微量白蛋白升高可能并无意义，如连续2-3次升高均超过参考区间方有诊断价值。

【注意事项】1、不要将批号的试剂要刷磁卡，磁卡里含有重要的标准曲线信息。

不同批号试剂不能混用。

2、试剂盒未开启前应存于2-8℃冰箱。

缓冲液和样品处理液在使用前放置室温平衡至18-26℃.抗血清和质控可稳定1个月。

Human microalbunminuria(MAU/ALB) ELISA kit Catalog Number. CSB-E08970hFor the quantitative determination of human microalbunminuria(MAU/ALB) concentrations in serum, plasma, urine.This package insert must be read in its entirety before using this product.If You Have ProblemsTechnical Service Contact informationPhone: 86-27-87582341Fax: 86-27-87196150Email:****************Web: In order to obtain higher efficiency service, please ready to supply the lot numberof the kit to us (found on the outside of the box).1PRINCIPLE OF THE ASSAYThis assay employs the competitive inhibition enzyme immunoassay technique. Antibody specific for MAU has been pre-coated onto a microplate. Standards and samples are pipetted into the wells with biotin-conjugated MAU. A competitive inhibition reaction is launched between MAU (Standards or samples) and biotin-conjugated MAU with the pre-coated MAU antibody. After washing, avidin conjugated Horseradish Peroxidase (HRP) is added to the wells. Following a wash to remove any unbound reagent, a substrate solution is added to the wells and color develops in opposite to the amount of MAU bound in the initial step. The color development is stopped and the intensity of the color is measured.DETECTION RANGE0.078 µg/ml-5 µg/ml.SENSITIVITYThe minimum detectable dose of human MAU is typically less than 0.019 µg/ml. The sensitivity of this assay, or Lower Limit of Detection (LLD) was defined as the lowest human MAU concentration that could be differentiated from zero.SPECIFICITYThis assay has high sensitivity and excellent specificity for detection of human MAU. No significant cross-reactivity or interference between human MAU and analogues was observed.Note: Limited by current skills and knowledge, it is impossible for us to complete the cross-reactivity detection between human MAU and all the analogues, therefore, cross reaction may still exist.2PRECISIONIntra-assay Precision (Precision within an assay): CV%<8%Three samples of known concentration were tested twenty times on one plate to assess.Inter-assay Precision (Precision between assays):CV%<10%Three samples of known concentration were tested in twenty assays to assess.LIMITATIONS OF THE PROCEDUREFOR RESEARCH USE ONLY. NOT FOR USE IN DIAGNOSTIC PROCEDURES.The kit should not be used beyond the expiration date on the kit label.Do not mix or substitute reagents with those from other lots or sources.If samples generate values higher than the highest standard, dilute the samples with Sample Diluent and repeat the assay.Any variation in Sample Diluent, operator, pipetting technique, washing technique, incubation time or temperature, and kit age can cause variation in binding.This assay is designed to eliminate interference by soluble receptors, binding proteins, and other factors present in biological samples. Until all factors have been tested in the Immunoassay, the possibility of interference cannot be excluded.3MATERIALS PROVIDEDReagents QuantityAssay plate (12 x 8 coated Microwells) 1(96 wells) Standard (Freeze dried) 2Biotin-conjugate (100 x concentrate) 1 x 60 µlHRP-avidin (100 x concentrate) 1 x 120 µlBiotin-conjugate Diluent 1 x 10 mlHRP-avidin Diluent 1 x 20 ml Sample Diluent 2 x 20 mlWash Buffer (25 x concentrate) 1 x 20 mlTMB Substrate 1 x 10 mlStop Solution 1 x 10 ml Adhesive Strip (For 96 wells) 4Instruction manual 1STORAGEUnopenedkitStore at 2 - 8°C. Do not use the kit beyond the expiration date.Opened kitCoated assayplateMay be stored for up to 1 month at 2 - 8°C.Try to keep it in a sealed aluminum foil bag,and avoid the damp.Standard May be stored for up to 1 month at 2 - 8° C.If don’t make recent use, better keep it storeat -20°C.HRP-avidinBiotin-conjugateBiotin-conjugateDiluentMay be stored for up to 1 month at 2 - 8°C. HRP-avidinDiluentSample DiluentWash BufferTMB SubstrateStop Solution*Provided this is within the expiration date of the kit.4OTHER SUPPLIES REQUIREDMicroplate reader capable of measuring absorbance at 450 nm, with the correction wavelength set at 540 nm or 570 nm.An incubator which can provide stable incubation conditions up to 37°C±0.5°C.Squirt bottle, manifold dispenser, or automated microplate washer.Absorbent paper for blotting the microtiter plate.100ml and 500ml graduated cylinders.Deionized or distilled water.Pipettes and pipette tips.Test tubes for dilution.PRECAUTIONSThe Stop Solution provided with this kit is an acid solution. Wear eye, hand, face, and clothing protection when using this material.5SAMPLE COLLECTION AND STORAGESerum Use a serum separator tube (SST) and allow samples to clot for30 minutes before centrifugation for 15 minutes at 1000 x g, 2 - 8°C.Remove serum and assay immediately or aliquot and store samples at -20°C or -80°C. Avoid repeated freeze-thaw cycles. Centrifuge the sample again after thawing before the assay.Plasma Collect plasma using EDTA, or heparin as an anticoagulant.Centrifuge for 15 minutes at 1000 x g, 2 - 8°C within 30 minutes of collection. Assay immediately or aliquot and store samples at -20°C or -80°C. Avoid repeated freeze-thaw cycles. Centrifuge the sample again after thawing before the assay.Urine Use a sterile container to collect urine samples. Remove any particulates by centrifugation for 15 minutes at 1000xg, 2 - 8°C and assay immediately or aliquot and store samples at -20°C or -80°C. Avoid repeated freeze-thaw cycles. Centrifuge again before assaying to remove any additional precipitates that may appear after storage.SAMPLE PREPARATIONRecommend to dilute the serum or plasma samples 50000-fold before test.The suggested 50000-fold dilution can be achieved by adding 2µl sample to 398µl of normal saline. Complete the 50000-fold dilution by adding 2µl of this solution to 498µl of Sample Diluent. The recommended dilution factor is for reference only. The optimal dilution factor should be determined by users according to their particular experiments.Recommend to dilute the urine samples with Sample Diluent(1:40) before test. The suggested 40-fold dilution can be achieved by adding 6µl sample to 234µl of Sample Diluent. The recommended dilution factor is for reference only. The optimal dilution factor should be determined by users according to their particular experiments6Note:1. CUSABIO is only responsible for the kit itself, but not for the samplesconsumed during the assay. The user should calculate the possible amount of the samples used in the whole test. Please reserve sufficient samples in advance.2. Samples to be used within 5 days may be stored at 2-8°C, otherwisesamples must be stored at -20°C (≤1month) or -80°C (≤2month) to avoid loss of bioactivity and contamination.3. Grossly hemolyzed samples are not suitable for use in this assay.4. If the samples are not indicated in the manual, a preliminary experiment todetermine the validity of the kit is necessary.5. Please predict the concentration before assaying. If values for these arenot within the range of the standard curve, users must determine the optimal sample dilutions for their particular experiments.6. Tissue or cell extraction samples prepared by chemical lysis buffer maycause unexpected ELISA results due to the impacts of certain chemicals.7. Owing to the possibility of mismatching between antigen from otherresource and antibody used in our kits (e.g., antibody targets conformational epitope rather than linear epitope), some native or recombinant proteins from other manufacturers may not be recognized by our products.8. Influenced by the factors including cell viability, cell number and alsosampling time, samples from cell culture supernatant may not be detected by the kit.9. Fresh samples without long time storage are recommended for the test.Otherwise, protein degradation and denaturalization may occur in those samples and finally lead to wrong results.7REAGENT PREPARATIONNote:Kindly use graduated containers to prepare the reagent. Please don't prepare the reagent directly in the Diluent vials provided in the kit. Bring all reagents to room temperature (18-25°C) before use for 30min.Prepare fresh standard for each assay. Use within 4 hours and discard after use.Making serial dilution in the wells directly is not permitted.Please carefully reconstitute Standards according to the instruction, and avoid foaming and mix gently until the crystals have completely dissolved.To minimize imprecision caused by pipetting, use small volumes and ensure that pipettors are calibrated. It is recommended to suck more than 10µl for once pipetting.Distilled water is recommended to be used to make the preparation for reagents. Contaminated water or container for reagent preparation will influence the detection result.1. Biotin-conjugate (1x) - Centrifuge the vial before opening.Biotin-conjugate requires a 100-fold dilution. A suggested 100-fold dilution is 10 µl of Biotin-conjugate + 990 µl of Biotin-conjugate Diluent.2. HRP-avidin (1x) - Centrifuge the vial before opening.HRP-avidin requires a 100-fold dilution. A suggested 100-fold dilution is 10 µl of HRP-avidin + 990 µl of HRP-avidin Diluent.3. Wash Buffer(1x)- If crystals have formed in the concentrate, warm up toroom temperature and mix gently until the crystals have completely dissolved. Dilute 20 ml of Wash Buffer Concentrate (25 x) into deionized or distilled water to prepare 500 ml of Wash Buffer (1 x).894.StandardCentrifuge the standard vial at 6000-10000rpm for 30s.Reconstitute the Standard with 1.0 ml of Sample Diluent . Do not substitute other diluents. This reconstitution produces a stock solution of 5 µg/ml. Mix the standard to ensure complete reconstitution and allow the standard to sit for a minimum of 15 minutes with gentle agitation prior to making dilutions.Pipette 150 µl of Sample Diluent into each tube (S0-S6). Use the stock solution to produce a 2-fold dilution series (below). Mix each tube thoroughly before the next transfer. The undiluted Standard serves as the high standard (5 µg/ml). Sample Diluent serves as the zero standard (0 µg/ml).Tube S7 S6 S5S4 S3 S2 S1 S0 µg/ml52.51.250.6250.3120.1560.078ASSAY PROCEDUREBring all reagents and samples to room temperature before use. Centrifuge the sample again after thawing before the assay.It is recommended that all samples and standards be assayed in duplicate.1. Prepare all reagents, working standards, and samples as directed in theprevious sections.2. Refer to the Assay Layout Sheet to determine the number of wells to beused and put any remaining wells and the desiccant back into the pouch and seal the ziploc, store unused wells at 4°C.3. Set a Blank well without any solution.4. Add 50µl of standard and sample per well.5. Add 50µl of Biotin-conjugate(1x) to each well(not to Blank well). Coverwith a new adhesive strip. Incubate for 60 minutes at 37°C.(Biotin-conjugate(1x) may appear cloudy. Warm up to room temperature and mix gently until solution appears uniform.)6. Aspirate each well and wash, repeating the process two times for a total ofthree washes. Wash by filling each well with Wash Buffer (200µl) using a squirt bottle, multi-channel pipette, manifold dispenser, or autowasher, and let it stand for 2 minutes, complete removal of liquid at each step is essential to good performance. After the last wash, remove any remaining Wash Buffer by aspirating or decanting. Invert the plate and blot it against clean paper towels.7. Add 100µl of HRP-avidin(1x) to each well(not to Blank well). Cover themicrotiter plate with a new adhesive strip. Incubate for 60 minutes at 37°C.8. Repeat the aspiration/wash process for five times as in step 6.9. Add 90µl of TMB Substrate to each well. Incubate for 20 minutes at 37°C.Protect from light.10. Add 50µl of Stop Solution to each well, gently tap the plate to ensurethorough mixing.1011. Determine the optical density of each well within 5 minutes, using amicroplate reader set to 450 nm. If wavelength correction is available, set to 540 nm or 570 nm. Subtract readings at 540 nm or 570 nm from the readings at 450 nm. This subtraction will correct for optical imperfections in the plate. Readings made directly at 450 nm without correction may be higher and less accurate.*Samples may require dilution. Please refer to Sample Preparation section. Note:1. The final experimental results will be closely related to validity of theproducts, operation skills of the end users and the experimental environments.2. Samples or reagents addition: Please use the freshly prepared Standard.Please carefully add samples to wells and mix gently to avoid foaming. Do not touch the well wall as possible. For each step in the procedure, total dispensing time for addition of reagents or samples to the assay plate should not exceed 10 minutes. This will ensure equal elapsed time for each pipetting step, without interruption. Duplication of all standards and specimens, although not required, is recommended. To avoid cross-contamination, change pipette tips between additions of each standard level, between sample additions, and between reagent additions.Also, use separate reservoirs for each reagent.3. Incubation: To ensure accurate results, proper adhesion of plate sealersduring incubation steps is necessary. Do not allow wells to sit uncovered for extended periods between incubation steps. Once reagents have been added to the well strips, DO NOT let the strips DRY at any time during the assay. Incubation time and temperature must be observed.4. Washing: The wash procedure is critical. Complete removal of liquid ateach step is essential to good performance. After the last wash, remove any remaining Wash Solution by aspirating or decanting and remove any drop of water and fingerprint on the bottom of the plate. Insufficient washing will result in poor precision and falsely elevated absorbance reading. When using an automated plate washer, adding a 30 second soak period following the addition of wash buffer, and/or rotating the plate 180 degrees between wash steps may improve assay precision.115. Controlling of reaction time: Observe the change of color after adding TMBSubstrate (e.g. observation once every 10 minutes), TMB Substrate should change from colorless or light blue to gradations of blue. If the color is too deep, add Stop Solution in advance to avoid excessively strong reaction which will result in inaccurate absorbance reading.6. TMB Substrate is easily contaminated. TMB Substrate should remaincolorless or light blue until added to the plate. Please protect it from light.7. Stop Solution should be added to the plate in the same order as the TMBSubstrate. The color developed in the wells will turn from blue to yellow upon addition of the Stop Solution. Wells that are green in color indicate that the Stop Solution has not mixed thoroughly with the TMB Substrate.1213ASSAY PROCEDURE SUMMARY*Samples may require dilution. Please refer to Sample Preparation section.CALCULATION OF RESULTSUsing the professional soft "Curve Expert" to make a standard curve is recommended, which can be downloaded from our web.Average the duplicate readings for each standard and sample and subtract the average optical density of Blank.Create a standard curve by reducing the data using computer software capable of generating a four parameter logistic (4-PL) curve-fit. As an alternative, construct a standard curve by plotting the mean absorbance for each standard on the x-axis against the concentration on the y-axis and draw a best fit curve through the points on the graph. The data may be linearized by plotting the log of the MAU concentrations versus the log of the O.D. and the best fit line can be determined by regression analysis. This procedure will produce an adequate but less precise fit of the data.If samples have been diluted, the concentration read from the standard curve must be multiplied by the dilution factor.14人尿微量白蛋白(MAU/ALB)酶联免疫试剂盒使用说明书【产品编号】CSB-E08970h【预期应用】ELISA法定量测定人血清、血浆、尿液中MAU含量。

微量白蛋白检测方法微量白蛋白（microalbumin）是指在尿液中微量存在的白蛋白，通常被用作评估肾脏损伤的指标。

下面是关于微量白蛋白检测方法的详细描述：1. 尿液微量白蛋白定量试纸法：这是一种常用的快速、便捷的微量白蛋白检测方法。

试纸上有特定抗体，在与尿液中的微量白蛋白结合后，导致特定的颜色反应。

根据试纸颜色的转变，可以定量测量尿液中的微量白蛋白的浓度。

2. 免疫荧光法：这种方法利用特定的抗体与尿液中的微量白蛋白结合，在荧光显微镜下观察和测量荧光强度来评估微量白蛋白的浓度。

3. 酶联免疫吸附测定法：这种方法利用酶与抗体结合，在酶的催化作用下产生颜色变化，从而测量尿液中微量白蛋白的含量。

4. 免疫化学法：这种方法利用特定的抗体与尿液中的微量白蛋白结合，然后使用化学发光、颜色反应等方法来测量微量白蛋白的浓度。

5. 固相放射免疫分析法：这种方法利用放射性同位素标记的特定抗体与尿液中的微量白蛋白结合，然后使用放射测量技术来测量微量白蛋白的含量。

6. 毛细管电泳法：这种方法利用毛细管电泳的原理，通过对尿液样品进行电泳分离，从而分析和测量微量白蛋白的浓度。

7. 质谱法：这种方法使用质谱仪测量尿液中微量白蛋白的质量，并根据峰的强度来计算其浓度。

8. 高效液相色谱法（HPLC）：这种方法利用高效液相色谱仪，结合特定柱和检测器，将尿液样品中的微量白蛋白分离、识别和定量。

9. 生物传感器法：这种方法利用特定的生物传感器，如电极、荧光探针等，与尿液中的微量白蛋白相互作用，从而产生信号，通过检测信号来测量微量白蛋白的浓度。

10. 核磁共振波谱法：这种方法利用核磁共振仪对尿液中的微量白蛋白进行谱学分析，从而获得微量白蛋白的浓度和结构信息。

以上是关于微量白蛋白检测方法的10条详细描述，每种方法都有各自的优势和适用范围，可以根据实际需要选择合适的方法进行微量白蛋白的检测。

自建尿微量白蛋白试剂盒检测系统的评价目的:比较分析浙江伊利康生物技术有限公司生产的尿微量白蛋白(mALb)检测试剂盒在日立7020全自动生化分析仪上建立的检测系统与Roche Modular可溯源的参考检测系统血清mALb检测结果间的可比性及临床可接受性。

方法:依据美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)EP9-A对自建检测系统与标准参考系统检测患者的40份新鲜血清mALb浓度进行线性回归与相关分析。

结果:自建系统与参考系统血清mALb检测结果具有较好的可比性,其相关系数(r)为0.9996,回归方程为Y=1.027X+0.035。

结论:自建系统血清mALb检测结果与与Roche Modular可溯源的参考检测系统具有较好的可比性,可被临床接受。

标签：尿微量白蛋白;检测系统;质量控制检测系统是指完成一个检验项目所涉及的仪器、试剂、校准品、质控品、检验程序、保养计划等的组合[1]。

保证不同检测系统同一检验项目检测结果的一致性及准确性是临床实验室检验质量管理的最终目的,方法学比较是实现此目的的重要手段。

mALb是检测血管损伤的重要指标,是糖尿病、高血压、心血管疾病、肾病血管损伤的指标,对判断疾病发生、发展、预后有重要的参考价值。

在过去的研究中临床上重视糖尿病患者mALb的变化,但是近年的研究发现mALb 对分析血管相关疾病的进展具有十分重要的意义。

因此大大扩大mALb检查的应用范围, 已经作为心血管疾病、高血压等疾病的常规检查项目。

通过这一检查可以发现潜在病变,为疾病的早期诊断,早期治疗提供有用的信息及实验室指标。

测定尿微量白蛋白的方法有多种,包括:放射免疫分析法、时间分辨荧光免疫分析法、免疫透射比浊法、免疫散射比浊法等.其中以免疫透射比浊法较为实用。

本文运用NCCLS EP9-A文件[2]对浙江伊利康生物技术有限公司生产的免疫透射比浊法检测尿微量白蛋白试剂盒在日立7020全自动生化分析仪上进行了评估并建立了检测系统,并用患者新鲜血清与Roche检测系统进行了方法学比较,报道如下。

2性能指标
2.1外观和性状
2.1.1颜色性状
质控品应为液体，无沉淀、悬浮物和絮状物。

2.1.2包装
分装瓶应为白色硬质塑料瓶，盖有塑料外盖；盒贴、瓶贴、标签标识应完整、清晰。

塑料外盖应无明显划痕、崩缺。

2.2装量
液体质控品的含量应不少于标示值。

2.3均一性
2.3.1瓶内均一性
质控品瓶内均一性应不大于表 2 的要求（SD 和CV 值满足其一即可）。

表 2 质控品瓶内均一性要求
2.3.2瓶间均一性
质控品瓶间均一性应不大于表3 的要求（SD 和CV 值满足其一即可）。

表3 质控品瓶间均一性要求
1
2.4参考值及参考范围
每批质控品均应提供本批产品的参考值表。

经迈瑞校准品校准的BS 系列生化分析仪及配套试剂对质控品进行测定，测定结果应在给定的参考范围内。

2。

早期肾脏损伤检测方法及应用肾脏具备强大的代偿功能，许多原因导致肾损伤往往悄然发生和发展，缺乏明显的早期症状和体征，早期不易发现。

如错过早期阶段，肾损伤发展到不可逆状体，终将发展为肾衰竭，其结局将或依靠透析疗法或进行肾移植，肾损伤的早期发现对预后有重要的意义。

早期肾损伤诊断方法的研究在近20年中取得多方面发展，在肾疾病的实验诊断体系中除传统的肾功能检查之外，形成了一个早期肾损伤检查与监测的新领域。

一、尿微量清蛋白尿微量清蛋白（urinary microalbumin，mAlb）指尿中清蛋白排出量在30～300mg/24h范围内，即已超出参考区间上限（30mg/24h），但尚未达经典蛋白尿水平的中间阶段。

mAlb测定方法早期以RIA为主，后来有EIA及免疫浊度法问世。

20世纪80年代以来，免疫透射浊度法和散射浊度法迅速推广。

（一）原理免疫散射比浊法：尿液中的清蛋白会与特异性抗体形成免疫复合物。

这些免疫复合物会使穿过标本的光束发生散射。

散射光的强度与标本中清蛋白的浓度成正比。

与已知的标准浓度对比就可得出结果。

（二）试剂抗人清蛋白抗体，校准品，质控品，反应缓冲液，稀释液。

（三）操作步骤1.抗血清开封便可使用，不需要做其他准备工作。

2.建立参考曲线参考曲线是通过多点定标来建立的。

仪器能使用稀释液自动制备清蛋白标准品的系列稀释液。

3.标本在1∶5稀释的情况下检测。

如果测得的读数超出了测量范围，应使用更高的标本稀释液重新检测。

（四）计算检测结果由仪器的logit-log函数自动评估。

（五）参考区间尿Alb≤30mg/24h尿。

（六）评价1.免疫透射比浊法灵敏度高，操作简便、快速，适用于自动化仪器测定，且有试剂盒供应，在临床上已广泛应用。

2.标本中的混浊和颗粒可能干扰测定结果。

因此，所有尿液标本必须在检测前进行离心沉淀，取上清尿测定。

3.染料（溴酚蓝）结合法直接测定尿中清蛋白，此法虽然简单、快速，但灵敏度低，尿中非蛋白成分会干扰反应，不适宜测定微量清蛋白尿。

尿微量白蛋白的检测方法
尿微量白蛋白的检测方法包括以下几种：
1. 尿常规检测：尿常规检测是最常用的白蛋白检测方法之一。

通过尿液的颜色、透明度、比重、pH值和白细胞、红细胞等
指标来判断尿液中是否有白蛋白的异常。

2. 定量测定法：这是一种比尿常规更准确的白蛋白检测方法，可以测量尿液中白蛋白的具体含量。

常用的定量测定法有比浊法、免疫印迹法和酶联免疫吸附试验（ELISA）等。

3. 尿微量白蛋白/肌酐比值：尿微量白蛋白/肌酐比值是一种常
用的筛查方法。

通过测量尿液中微量白蛋白和肌酐的含量，并计算它们的比值，可以判断尿液中是否存在微量白蛋白的异常。

4. 尿电泳：尿电泳是一种检测尿液中白蛋白异常的方法。

它可以通过电泳分离尿液中的蛋白质，并通过对分离出的蛋白带进行染色或通过蛋白质免疫印迹等方法，来判断尿液中是否存在白蛋白异常。

请注意，这些方法仅供参考，具体选择哪种方法需要根据具体情况和医生的建议来确定。

尿微量白蛋白生化法
尿微量白蛋白生化法是一种利用生物化学分析技术来检测尿液中微量白蛋白的方法。

该方法是目前临床诊断糖尿病肾病和高血压肾病的常用检测方法之一。

操作步骤：
1.采集尿液样本，通常采用早晨空腹尿，首次排尿所得。

2.在样本采集后1小时内进行检测。

如果不能立即进行检测，应将尿液放在4度以下温度保存，最好在24小时内完成检测。

3.将尿液样本倒入标本试管中，并保持干燥。

4.加入包含Microalbumin测定试剂盒中的显色剂，使其充分反应。

注意，显色剂的稀释比例要遵循试剂盒的说明。

5.读取反应结果，可以使用光度计将吸光度值降解为微量白蛋白含量。

通常微量白蛋白正常参考值为10-30 mg/L。

优点：
1. 检测灵敏度高，可以检测到微量白蛋白。

2. 检测速度快，可以在1小时内完成检测。

3. 操作简单方便，适应于临床现场检测。

缺点：
1. 依赖于设备和试剂盒等耗材。

2. 检测结果受尿液采集和储存条件影响。

3. 不支持定量分析，只能提供大致的病情判断。

市編产嘉技术零求#号：
直量白蛋白（MAU）测定试剂
（荧光免疫层析法）
1.1外观检查
外观应平整，材料附着应牢固，各组份应齐全，卡固定紧密。

1. 2物理检查
膜条应不小于2. 5mm；液体移行速度应不低于10mm/min。

1. 3线性范围
取同一批号的试剂分别对浓度为5mg/L、20mg/L、50mg/L、100mg/L、3OOmg/L的尿微量白蛋白参考品进彳丁检测，其回归系数r值NO. 9900。

1.4精密度
1.4.1批内精密度
随机抽取同一批号的试剂10人份，分别对浓度为50mg/L的尿微量白蛋白参考品进行检测，其变异系数CV （%）值W15%。

1.4.2批间精密度
随机抽取连续三个批号的试剂，每个批号取3人份分别对浓度为50mg/L的尿微量白蛋白参考品进行检测，三个批号之间变异系数CV （%）值应W15%。

1. 5准确度
用同一批号的试剂分别对浓度为20mg/L、50mg/L、200mg/L的尿微量白蛋白参考品进行检测，计算样本检测结果的均值和相对偏差，其中相对偏差（Bias%）应在±15%内。

1. 6检测限
取同一批号的试剂10人份，对配制参考品的基质进行检测，计算样本检测结果均值万和标准偏差SD,其中（无+2SD） W2.0mg/L。