小麦染色体制片

Vol 132,N o 112pp 11920-1923　Dec 1,2006作　物　学　报ACT A AG RONOMIC A SI NIC A第32卷第12期2006年12月　1920～1923页研究简报以小麦根尖分生组织细胞核及染色体制备高分子量DNA 郭东伟1,2　佘茂云2,3　李连城2　陈耀峰1　陈　明2　徐兆师2　马有志2,3Ξ(1西北农林科技大学农学院,陕西杨凌712100;2中国农业科学院作物科学研究所Π农业部遗传育种重点开放实验室,北京100081;3新疆农业大学农学院,新疆乌鲁木齐830052)摘　要:为了克服以叶片为材提取H MW DN A 的局限性,优化了一套简便、实用的提取方法。

该法以细胞周期同步化处理的根尖分生组织为材料,利用机械匀浆释放细胞核或中期染色体制备悬浮液,再以蔗糖密度梯度离心和流式分选技术分别分离细胞核和染色体,经去蛋白、酶切、透析,获得H MW DN A 。

经检测,来自200条根尖(10个胶块)的H M W D N A 的浓度约为4～20ng ΠμL ,而连接、转化后的BAC 克隆平均插入片段超过100kb 。

证明该法适用于提取H M W D N A 以构建BAC 文库。

关键词:高分子量DN A ;蔗糖密度梯度离心;细胞周期同步化;染色体流式分选;BAC 中图分类号:S 512;Q781High Molecular Weight DN A Pr epar ation fr om N uclei or Chr omosomes o f Root Mer istem o f WheatG UO Dong 2Wei 1,2,SHE M ao 2Yun 2,3,L I Lian 2Cheng 2,CHEN Y a o 2F eng 1,CHEN M ing 2,XU Zhao 2S hi 2and MA Y ou 2Zhi 2,3(1A gronom y C ollege ,N orthw es t S ci 2T ech Univers ity of Agriculture and F orestry ,Y angling 712100,Shaanx i ;2K ey Laboratory of C rop G enetics and Breeding ,M ini s try ofAgriculture ΠI ns titute of C rop S ciences ,C hines e A cadem y of Agricult ural S ciences ,B eijing 100081;3A gron om y C ollege ,X injiang A gricultural Univers ity ,Urum qi 810012,X i njiang ,C hina)Abstract :A s imple and practical meth od was o ptimized t o overcome the lim itati ons o f current meth od by wh ich H M W D NA w as preparedfrom leaf powd er.Ro ot tips o f synchron ized meris tem were h om ogen ized to mak e preparing suspensi on containing intact metaph ase chromos omes and nu clei ,wh ich w ere f u rther is olated b y sucros e grad ien t cen trifug ation an d flow s ortin g ,res pectively.Finally ,H MW DN A was prepared w ith deprotein ization ,digestion and dialys is o f nu clei and chrom os omes.T he results sh ow ed th at concentrati on of th e H M WDN A from 200ro ot tips (10plugs )w as ab out 4-20ng ΠμL (4ng ΠμL in chrom os omes DN A and 20ng ΠμL in nu clei D NA ).Th e av erage insert frag ment size was more th an 100kb after linage ,trans form ation and insert frag men t examination by pu lse field gel electroph oresis for H MW DN A from nuclei.Th e similar results w ere obtained b y H M W DN A prepared from chr om os omes.It is con firm ed that the meth od isapplicable t o prepare H MW DN A for cons truction of BAC library.K ey w or ds :H igh molecular weight D NA;Sucros e gradient centri f u gati on;Synchron ization o f cell cycle ;Chrom os ome flow s orting;BA C 大片段DN A 插入文库(如BAC 文库)对于基因组物理作图、大规模基因组测序和基因发掘具有重要意义。

小麦族染色体组命名的报告，600字
本报告主要介绍了小麦族染色体组的命名规则和原理。

小麦（Triticum）是一种广泛分布于全球的禾本科植物，是大
型农作物种中最重要的组成部分之一。

小麦族染色体组由7个染色体构成，包括3对携带34号染色体和1对携带14号染色体。

因此，小麦族染色体组称为“AABB-CCDD”型染色体组织。

小麦族染色体的命名主要遵循一般的国际公认的命名系统，即“A”、“B”、“C”和“D”开头的染色体称为“homoeologous”染色体；而其他染色体统称为“paleotetraploids”染色体，用“Pt”加数字表示。

染色体组的染色体数量以及各个染色体以及所携带的DNA段
的大小和排列，是小麦族细胞的特征性的基础。

小麦族染色体的命名主要根据这些特征及其种间差异来命名，比如采用字母和数字对其染色体的大小、个数以及染色体的形态进行描述。

具体而言，小麦族染色体的命名包括因子名称、主要物种、染色体号、染色体长度和染色体组织图框架等。

比如，小麦中常见的34号染色体“A”型染色体可以称为Triticum aestivum A-chromosome。

此外，还有14号染色体“D”型染色体，可以称
为T. aestivum D-chromosome。

总之，小麦族染色体组由7个染色体构成，采用国际公认的命名系统来命名不同的染色体，例如以字母和数字的形式表述染色体的大小、个数以及染色体的形态等。

这些类型的染色体提
供了小麦家族生物质的信息，从而为小麦的种质改良提供了可能性。

小麦族染色体组命名本文旨在详细探讨小麦族染色体组的命名方式。

小麦族一共包含7个染色体，他们的命名方式是由来自不同物种的A、B、D三组染色体组成的。

A组染色体由23条染色体组成，其中21条染色体来自物种Triticum monococcum（小麦），2条染色体分别来自Aegilops speltoides（斯芬塔尔小麦）和Aegilops tauschii（穗小麦）。

B组染色体由14条染色体组成，它们都来自于物种Triticum dicoccoides（双花小麦）. D组染色体由6条染色体组成，它们来自物种Aegilops tauschii（穗小麦）。

此外，还有一个特殊的染色体，称为U要素，它来自3种物种：Triticum aestivum（小麦）、Triticum durum（小麦）和Triticum turgidum（杂粮小麦）。

小麦族染色体组命名采用国际上普遍采用的“染色体-原物种-编号”格式，A，B和D组染色体分别用“A，B，D”表示，然后是一个括号内的原物种简写名称和编号，例如A1和B2。

U要素中的染色体用“U”表示，然后是一个括号内的3个物种简写名称，按字典序排列，代表这个特殊染色体来自3种物种，例如U(tse tsita)。

因此，为了简洁有效地命名小麦族染色体组，我们采用“染色体-原物种-编号”格式，详细地记录小麦族染色体来自哪些物种，以及哪些物种组成U要素，使得小麦族染色体组的命名变得清晰明了。

除了物种名称，染色体组还有其他常见命名方式。

在一些研究中，小麦族染色体组也可以简单地用字母“T”，“P”和“R”表示。

其中“T”代表Triticum sp.染色体，“P”代表Aegilops speltoides 染色体，“R”代表Aegilops tauschii 染色体。

此外，还有一种常见的拼写法“7A-7B-7D”，以表示小麦族染色体组的完整性和复杂性，其中“7A-7B-7D”分别表示A组、B组和D组染色体的数量。

不同因素对小麦根尖染色体制片的影响邹景伟;郭振清;张志雯;任学军;林小虎【摘要】以小麦根尖为材料,探讨了低温、秋水仙素、8-羟基喹啉和对二氯苯4种预处理对小麦根尖细胞有丝分裂积累中期分裂相的效果.结果表明,这4种预处理方法积累有丝分裂中期分裂相效果的明显程度由大到小依次为秋水仙素、低温、对二氯苯和8-羟基喹啉,前2种方法效果明显且差异不大,后2种方法效果略差.在此基础上,对低温预处理后的根尖在制片过程中的一些因素进行了摸索,发现影响制片效果的主要因素是低温预处理时间和HCl解离时间.最终得到以小麦根尖为取样对象的体细胞染色体制片的最适方法.为小麦族物种的染色体加倍、异染色体系的鉴定、细胞遗传学研究等领域提供方法依据.【期刊名称】《种子》【年(卷),期】2016(035)012【总页数】4页(P8-11)【关键词】小麦;根尖体细胞;染色体制片;影响因素【作者】邹景伟;郭振清;张志雯;任学军;林小虎【作者单位】河北科技师范学院生命科技学院,河北秦皇岛066004;河北科技师范学院生命科技学院,河北秦皇岛066004;河北科技师范学院生命科技学院,河北秦皇岛066004;河北科技师范学院生命科技学院,河北秦皇岛066004;河北科技师范学院生命科技学院,河北秦皇岛066004【正文语种】中文【中图分类】S512.1小麦(Triticum aestivum L.)是我国重要的粮食作物。

随着时间的推移和气候条件的变化，对小麦的种质资源创新与品种的改良提出了越来越多的要求[1-3]。

利用小麦近缘属种的优良基因是改良普通小麦性状的重要手段，其主要方法有染色体倍性化、异染色体系和远缘杂交等。

其中，倍性鉴定和异染色体系鉴定是染色体工程育种及其应用的重要鉴定手段[4]。

准确、有效地鉴定出倍性水平及异染色体数目的方法，对控制育种工作的盲目性、显著降低工作量、降低成本、加速育种进程具有重要意义[5]。

在众多鉴定方法中，细胞学鉴定是检验外源染色体的基本手段，染色体制片则是细胞学鉴定的基本技术手段[6-7]。

小麦核型分析实验
实验原理：一个二倍体植物的配子的全套染色体，称为一个染色体组。

各种动植物的体细胞，都有其特定的染色体组型。

染色体组型或称为核型是指染色体组在有丝分裂中期的表型，包括这一组染色体的数目、大小、形态、着丝点位置以及副溢痕、随体的有无等。

染色体组型分析就是对染色体组中的染色体作上述各种形态特征的描述。

实验材料：小麦
实验药品：α-溴代；2%Hcl；卡宝品红；蒸馏水
实验仪器：三角瓶或者其他容器；载玻片；盖玻片；酒精灯；铅笔
实验步骤：
1.种子萌发和取材：小麦种子置于培养皿内湿滤纸上，25℃恒温箱中，根长2-3cm切取。

2.固定：α-溴代固定幼根1-2d。

3.解离：取根尖2个（每个大约0.1-0.2mm）于载玻片上，滴加2%Hcl 2-3滴3min(主要是
进行破壁)，3 min后吸干Hcl，再滴几滴蒸馏水保持3min，3min后用吸水纸吸干。

4.染色：在载玻片上滴加卡宝品红染液染色2min，2min后盖上盖玻片，用大拇指垂直往
下压，压好后，用铅笔头进行敲片，边敲边在在酒精灯下烘干。

5.观察：在显微镜下观察，并拍照。

植物显微技术名词解释1.细胞周期：是处于母细胞分裂后形成的细胞到下一次再分裂形成两个子细胞之间的时期。

2.分带技术：可以显示染色体内部结构分化的技术。

3.核型：体细胞染色体在光学显微镜下所有可测定的表型特征的总称。

4.混倍体：不同个体和不同细胞的染色体数目变异幅度较大，出现整倍和非整倍细胞的一系列变异，此为混倍体。

5.B－染色体：细胞中多出的一个或几个小染色体，称为B－染色体，或称超数染色体。

6.NOR：核仁组成区，细胞中某一对或几对染色体上负责组织核仁的区域。

7.SAT：随体，次缢痕区至染色体的末端，称之为随体。

8.带型：借助细胞学手段，使染色体显现出深浅不同的染色带。

染色带的数目、部位、宽窄和着色深浅均具有相对稳定性，所以每一条染色体都有固定的分带模式，即称带型9.植物染色体常规制片方法:目前国内外常用的制片技术可分为两种，即压片法和去壁低渗法。

优缺点比较: 压片法和趋避低渗法各有优缺点，前者操作快速简便，节省材料，后者操作稍繁且需酶制剂，但染色体易于展开而不易于导致染色体变形，尤其对一些含有较多成熟细胞的组织，如芽、愈伤组织等，其制片效果明显优于压片法。

10.压片法的流程：1 取材根尖、茎尖、幼叶及愈伤组织等。

在植物染色体的研究中，根尖分生组织为最主要的材料。

2 预处理用化学的或物理的方法对材料进行预先处理，阻止或破坏纺锤体形成，另一个作用是导致染色体高度浓缩，利于分散。

3固定用卡诺氏固定液固定2到24小时。

4解离将固定后的材料置于在预热60摄氏度的1N盐酸中。

5染色染色剂有洋红，卡宝品红等。

6压片第一章植物染色体的分带方法1.分带的类型：1 Giemsa带①c带，显示组成型异染色质，一般不改变其性质，通常存在于NOR、着丝粒、端粒等。

②G带，反映的遗传信息比较多。

2 荧光分带，Q 带、H带、D带、R带。

2.显带机制：c带：①结构以染色质变性迟而复性快，早复性的异染色质便为Giemsa深染而显色。

硬粒小麦染色体的FISH核型分析陈星灼;彭红;王亚;杨婷;彭泽;耿广东;张庆勤;张素勤【摘要】采用FISH(荧光原位杂交)技术,分析硬粒小麦(Sauwne 20)染色体的FISH 核型特点,为该种质在小麦新品种选育上的应用提供参考.结果表明,Sauwne 20包括14对染色体,Oligo-pTa 535-2红色探针信号主要分布在A组染色体上,而B组染色体上主要分布着明亮丰富Oligo-pSc 119.2-1绿色探针信号;根据这2种探针在Sauwne 20染色体上的分布特点,可以将其不同染色体进行准确地一一鉴别.Sauwne 20与中国春普通小麦的A组和B组染色体的FISH核型基本相似,但又有一定的差别,不同小麦材料间DNA重复序列表现出遗传多样性.%In this experiment,FISH (Fluorescence in situ hybridization) technique was applied to analyze FISH patterns characteristics of chromosomes in durum wheat (Sauwne 20),which would provide reference for the application of the germplasm in the breeding of new wheat varieties in the present study.The results showed that Sauwne 20 included 14 pairs of chromosomes,Oligo-pTa 535-2 red signals were mainly distributed on chromosomes of A genome,and the group B genome was mainly distributed with bright and rich oligo-psc119.2-1 green probe signals.According to the distribution characteristics of these two probes on Sauwne 20 chromosomes,different chromosomes can be accurately identified.Generally,Sauwne 20 is basically similar to the FISH karyotype of the chromosome A and B of Chinese spring wheat,but there is a certain difference,and the DNA replication sequence of different wheat materials shows genetic diversity.【期刊名称】《种子》【年(卷),期】2018(037)003【总页数】4页(P12-14,18)【关键词】硬粒小麦;FISH;核型【作者】陈星灼;彭红;王亚;杨婷;彭泽;耿广东;张庆勤;张素勤【作者单位】贵州大学农学院, 贵阳550025;贵州大学农学院, 贵阳550025;贵州大学农学院, 贵阳550025;贵州大学农学院, 贵阳550025;贵州大学农学院, 贵阳550025;贵州大学农学院, 贵阳550025;贵州大学农学院, 贵阳550025;国家小麦改良中心贵州分中心, 贵州贵阳550025;贵州大学农学院, 贵阳550025;国家小麦改良中心贵州分中心, 贵州贵阳550025【正文语种】中文【中图分类】S512.1硬粒小麦(Triticum Durum，AABB，2 n=28)是世界重要的粮食作物之一,最早在美国和意大利种植较多，后来传播到北非、中东、欧洲等地并逐步扩散到世界各地。

普通小麦的染色体组成
普通小麦是一种重要的粮食作物，其染色体组成是指普通小麦细胞核中的染色体数量和结构。

普通小麦的染色体组成对于其遗传特征和育种改良具有重要意义。

普通小麦的染色体组成可以简单概括为42条染色体。

这42条染色体分为两组，即21对。

每对染色体都包含一条来自父本的染色体和一条来自母本的染色体。

普通小麦的染色体结构是由DNA和蛋白质组成的复杂结构。

DNA是染色体的主要组成部分，它携带着遗传信息，决定了普通小麦的遗传特征。

蛋白质则起到支持和保护DNA的作用，使染色体能够稳定存在并参与细胞的生物学过程。

普通小麦的染色体组成对于育种改良具有重要意义。

通过研究普通小麦的染色体组成，科学家可以了解不同基因的分布和表达规律，从而揭示普通小麦的遗传机制和性状形成的规律。

同时，染色体组成也为普通小麦的育种改良提供了依据。

通过选取特定的染色体片段或染色体上的遗传标记，育种者可以实现对某种特定性状的选择和提高。

普通小麦的染色体组成还与其适应能力和抗逆性密切相关。

不同染色体上携带的基因决定了普通小麦对各种环境因素的适应能力。

通过研究普通小麦染色体组成的变异和基因的分布情况，可以揭示普
通小麦的适应机制，并为培育抗逆性强的新品种提供理论依据。

总结起来，普通小麦的染色体组成是由42条染色体组成的。

研究普通小麦的染色体组成可以揭示其遗传特征、育种改良的规律，同时也为普通小麦的适应性和抗逆性提供了理论基础。

对普通小麦染色体组成的深入研究有助于进一步了解和利用这一重要的粮食作物。