植物细胞有丝分裂染色体制片及观察 PPT精品课程课件讲义
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实验一植物有丝分裂染色体标本制备与观察一、实验目的通过对植物组织的取材、预处理、解离、染色、压片等制片步骤的学习,掌握植物染色体制片技术,奠定细胞遗传学的研究技术;通过对植物根尖细胞的观察,掌握有丝分裂过程中染色体的形态特征和动态变化。
二、实验原理有丝分裂是植物细胞分裂的主要方式,细胞分裂过程中,核内染色体准确地复制,并有规律地、均匀地分配到两个子细胞中去,使子细胞和母细胞的遗传组成一样,保证了植物细胞的遗传性状的一致。
各种生长旺盛的植物组织中,如根尖组织、茎尖组织、居间分生组织、愈伤组织等,常进行着剧烈的细胞有丝分裂。
在细胞分裂的适当(分裂旺盛期)时候取材,进行预处理,固定、解离、染色和涂抹压片等方法,使细胞、染色体分散,便于在显微镜下观察染色体的形态特征和变化特点及进行染色体计数。
三、实验材料蚕豆(Vicia faba, 2n=12)干种子四、实验仪器及用具多媒体显微演示系统、显微镜、培养箱、分析天平、水浴锅、酒精灯、剪刀(或刀片)、镊子、解剖针、载玻片、盖玻片、滤纸、铅笔、标签纸、胶水、棕色瓶等。
五、药品和试剂秋水仙碱、8-羟基喹啉、苏木精、水合三氯乙醛、铁矾[铁钾矾KFe(SO4)2•12H2O 或铁铵矾NH4Fe(SO4)2·12H2O]、无水酒精、冰醋酸、1N盐酸、50%丙酸。
六、实验步骤1.材料准备选取新鲜无病斑的蚕豆干种子,经日晒后,放在烧杯内,室温下清水浸泡一昼夜。
种子吸水膨胀后,放在搪瓷盘上20℃左右保湿培养(双层纱布覆盖),待根长1~2cm 时,于上午9:00~10:30或下午14:00~16:00进剪下根尖备用。
2. 预处理为了获得较多中期分裂相的细胞,同时使染色体缩短和分散,可对根尖进行预处理,处理方法有:(1)0.05%~0.2%的秋水仙碱水溶液处理2~4小时。
(2)0.002M的8~羟基喹啉溶液处理3~4小时。
(3)根尖浸在蒸馏水中于在1~4℃低温下处理24小时。