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手性高效液相色谱法测定恩替卡韦中对映异构体杂质欧阳婷;杨小玲;麦曦;马惠玲;程帆;罗恒真;刘阳;刘斌【期刊名称】《药品评价》【年(卷),期】2015(012)024【摘要】目的:建立测定恩替卡韦对映异构体杂质的手性高效液相色谱法.方法:采用CHIRALPAK AD-H手性柱(5μm,4.6mm ×250mm),以正己烷-乙醇(55:45)为流动相的等度洗脱方法,流速为1.0mL/min,检测波长为254nm.结果:在上述色谱条件下,恩替卡韦与对映异构体杂质能分离度符合要求,检测限为1ng,精密度良好(RSD 为0.69%),恩替卡韦主成份和对映异构体在流动相溶液中放置8小时稳定性良好.结论:本方法操作简便,专属性强,灵敏度高,可用于恩替卡韦对映异构体杂质的限量控制方法.%Objective: To establish an enantio-specific HPLC method for enantiomer impurity determination in Entecavir.Method: The CHIRALPAK AD-H(5μm,4.6mm×250mm) column was used. Isocratic elution method was used with a mobile phase consisting of hexane- ethanol(55:45) at a flow rate of 1.0mL/min. The detection wavelength was 254 nm.Results: The resolution of Entecavir and enantiomer impurity was good. The limit of detection was 1 ng and the precision was good with RSD of 0.69%. The stability was good by keeping 8 h in mobile phase solution.Conclusion: The method is convenient, highly specific, sensitive and suitable for determining the limit of enantiomer impurity in Entecavir.【总页数】3页(P46-48)【作者】欧阳婷;杨小玲;麦曦;马惠玲;程帆;罗恒真;刘阳;刘斌【作者单位】南昌大学药学院,南昌 330006;江西青峰药业有限公司,赣州 341000;江西青峰药业有限公司,赣州 341000;南昌大学药学院,南昌 330006;南昌大学药学院,南昌 330006;江西青峰药业有限公司,赣州 341000;江西青峰药业有限公司,赣州341000;南昌大学药学院,南昌 330006;南昌大学药学院,南昌 330006【正文语种】中文【中图分类】R96【相关文献】1.手性固定相高效液相色谱法同时测定琥珀酸索利那新原料药中对映异构体和非对映异构体 [J], 王东武;王西宁;丰梅君;宋莹雪2.手性高效液相色谱法检测恩替卡韦中光学异构体杂质的含量 [J], 王文娜;邓桂凤;张玲娣;姚彤炜3.手性高效液相色谱法测定虫酰肼原药中的异构体杂质 [J], 魏泱;蔡玉梅;秦虓4.正相高效液相色谱法法测定恩替卡韦原料的对映异构体 [J], 赵海桥;吴双俊;付建;苏贵勇5.反相-高效液相色谱手性流动相添加剂法测定酸奶及含乳饮料中乳酸对映异构体[J], 潘瑞花;陈建华;胡小钟;崔海容;林雁飞;王帆因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
手性胺类药物对映体的HPLC拆分
余品香
【期刊名称】《中山大学研究生学刊：自然科学与医学版》
【年(卷),期】1997(000)001
【摘要】本文综述了用HPLC拆分手性胺类药物对映体的三种方法,即手性衍生化法、手性流动相添加剂法和手性固定相法。
【总页数】9页(P43-51)
【作者】余品香
【作者单位】中山大学化学系95研广州 510275
【正文语种】中文
【中图分类】R91
【相关文献】
1.几种苯甲酰胺类抗精神病药物的手性色谱拆分及其对映体含量的测定 [J], 王李平;范华均;巫坤宏;彭晓升;江子滔;臧林泉
2.HPLC手性流动相添加剂及其用于药物对映体拆分中的影响因素 [J], 徐雄;宁卫红;瞿志荣;杨瑞卿;谢永荣
3.HPLC手性流动相添加剂及其用于药物对映体拆分中的影响因素 [J], 徐雄; 宁卫红; 瞿志荣; 杨瑞卿; 谢永荣
4.HPLC手性流动相拆分法在分离药物对映体中的应用 [J], 黄艳艳;刘道杰
5.使用手性冠醚及手性柱的HPCE和HPLC法拆分伯胺类药物对映体的对比研究[J], 夏小庆;方骏;吴勇勇
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高效液相色谱法分离和测定药物对映体的研究进展
薛承斌;徐静
【期刊名称】《医药导报》
【年(卷),期】2003(000)0S1
【摘要】以近年来国内外有代表性的论文为依据 ,对高效液相色谱法 (HPLC)在药物对映体分离和测定中的常用方法 ,包括手性衍生化试剂法、手性流动相及手性固定相等方法进行分析 ,整理 ,归纳综述。
HPLC可进行药物对映体的纯度测定 ,制备 ,分离 ,提高药物疗效 ,减少药物的不良反应。
HPLC为药物对映体的快速灵敏地分离和测定提供了更多的手段和可能。
其在药物对映体中的应用 ,特别是与其他仪器的联用具有广阔的前景。
【总页数】3页(P)
【作者】薛承斌;徐静
【作者单位】华中科技大学医院;华中科技大学图像公司;武汉
【正文语种】中文
【中图分类】O657.72
【相关文献】
1.高效液相色谱法分离药物对映体中手性流动相添加剂的应用 [J], 祝艳琳;章靖;田丹碧
2.高效液相色谱法直接测定几种非甾体类解热镇痛药物中的对映体含量 [J], 梁彦明;宋航;付超;郑文丽
3.高效液相色谱法分离测定 DL-天冬氨酸对映体 [J], 郭佳莉
4.GITC手性试剂衍生化高效液相色谱法分离测定血浆中普罗帕酮对映体 [J], 张宜;陈鹰;裘军;李高;田世雄
5.手性高效液相色谱法分离和测定R-氟比洛芬对映体 [J], 黄海伟;冯玉飞;何兰因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
手性固定相在高效液相色谱中的应用研究进展谷焕鹏;胡升芳;高明堂【期刊名称】《中国药房》【年(卷),期】2005(16)18【摘要】对映体的拆分曾被认为是相当困难及复杂的实验技术，随着20世纪70年代手性色谱的兴起和迅速发展，该难题得以逐步解决，尤其是近几年，药物对映体的分析已成为药学领域的研究热点。
将手性化合物键合到固定相表面后，由于样品中的对映体与键合的子性分子形成非对映异构体络合物的结合能力的差异而达到拆分目的，该固定相即被称为手性固定相（Chiral stationary phase，CSP）。
由手性固定相液相色谱分离测定对映体已成为对映体分离发展最为迅速的领域。
目前，采用高效液相色谱法（HPLC）分离手性化合物取得了显著进展，已广泛应用于众多领域，并已制备出大量用于HPLC的CSP。
本文拟就目前应用较广泛的几类CSP作一简要介绍。
【总页数】3页(P1421-1423)【作者】谷焕鹏;胡升芳;高明堂【作者单位】浙江中医学院中医临床基础研究所,杭州市,310053;上海龙华医院中医外科,上海市,200032;兰州大学药学院,兰州市,730000【正文语种】中文【中图分类】R917【相关文献】1.手性固定相毛细管电色谱在手性药物分离中的应用研究进展 [J], 曾玉香;王超;王炳强2.高效液相色谱中的手性配体交换型手性固定相 [J], 秦传勇3.手性固定相高效液相色谱法同时测定琥珀酸索利那新原料药中对映异构体和非对映异构体 [J], 王东武;王西宁;丰梅君;宋莹雪4.寡糖对甲基苯甲酸酯手性固定相在高效液相色谱中的应用 [J], 赵峰;迟绍明;袁黎明5.基于手性固定相的超高效液相色谱-串联质谱法检测小麦及其加工制品中的腈菌唑对映体 [J], 齐艳丽;高婧;王伟荣;金静;吕莹;秦曙因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
液质对非对映异构体的色谱分离
液质对非对映异构体的色谱分离可以通过手性液相色谱
（Chiral Liquid Chromatography）实现。
在液相色谱中，通常使用手性固定相来实现对非对映异构体的分离。
手性固定相是指具有手性结构的固体材料，例如手性多酰胺、手性硅胶等。
这些手性固定相的分子结构具有对映异构体结构和空间排列的特征，因此可以与目标化合物的非对映异构体发生不同的相互作用，从而实现分离。
在手性液相色谱中，常用的溶剂系统包括酒精和水，需要添加手性试剂作为强制手性的物质。
手性试剂可以是手性酸、手性碱或手性衍生剂。
通过调整溶剂体系的选择和手性试剂的添加量，可以调控手性识别作用，从而实现对非对映异构体的分离。
液相色谱分离的原理是，当目标化合物与手性固定相发生相互作用时，非对映异构体与固定相的相互作用力不同，导致在流动相中移动速率不同，从而实现分离。
分离的结果可以通过检测器（如紫外检测器、荧光检测器等）进行在线监测。
总体而言，手性液相色谱是一种有效的技术，适用于对非对映异构体的分离和纯化。
其广泛应用于制药、化学和食品等领域的分析和研究工作中。
XX大学继续教育学院《体内药物分析》习题集一、名词解释1.反相HPLC答：即流动相极性大于固定相极性的HPLC。
2.ODS答：即十八烷基硅烷键合硅胶，为常用反相HPLC的固定相。
3.荧光光谱答：以发射波长为横坐标，荧光强度为纵坐标所作的图。
4.激发光谱答：以激发波长为横坐标，荧光强度为纵坐标所作的图。
5.RSD答：相对标准偏差，即精密度的一种表示方法。
6.一相代谢答：指药物在体内发生的氧化反应、还原反应、水解反应。
7.二相代谢答：指药物在体内的结合反应，包括：葡萄糖醛酸结合、硫酸酯化、甲基化、乙酰基化、氨基酸缀合、谷胱甘肽缀合等。
8.检测限答：表示药物的最低可测度，不必定量，通常以S/N=2~3倍时被测药物的绝对量表示。
9.定量限答：表示药物可定量测定的最低量，须符合一定精密度和准确度要求，常以标准曲线最低浓度点来确定，或以S/N=5～10确定。
10.血清答：全血经离心后的上清液。
11.血浆答：全血加抗凝剂（肝素等），经离心后的上清液。
12.酶免疫分析答：酶免疫分析是在放射免疫分析基础上发展起来的一种免疫分析方法，以酶代替同位素来标记药物，酶与底物、辅酶等反应后引起吸收光谱变化而被检测。
13.手性药物答：分子结构中含有不对称碳原子（即手性中心）的药物称为手性药物。
14.TDM答：治疗药物监测，为英文“therapeutic drug monitoring”的缩写。
15.冷冻答：指－20℃及以下温度。
16.人工抗原答：全称为人工完全抗原，将药物等小分子半抗原与蛋白质、多肽等大分子物质经人工合成而得，具有免疫原性。
17.生物转化答：主要指体内代谢反应。
18.提取回收率答：指药物加入到生物样本中经前处理后测得的量与理论加入量的比值。
19.CYP1A2答：细胞色素P450 1族A亚族第2个酶基因。
20.毛细管电泳答：即高效毛细管电泳(HPCE),是以高压电场为驱动力，以毛细管为分离通道，依据各组分之间的迁移速度和分配行为上的差异而实现分离的一类液相分离技术。
药物研究中手性分离分析方法及技巧药物研究中手性分离分析是指将手性药物中的手性异构体（也称为对映体）分离出来，并进行定量分析。
由于手性异构体具有不对称的结构，其物理化学性质和药理活性可能差异巨大，因此手性分离分析对于药物研究具有重要意义。
以下将介绍几种常用的手性分离分析方法及技巧。
1.气相色谱法（GC法）：GC法是通过在手性固定相柱上进行气相色谱分析，分离手性异构体。
该方法基于手性碳氢化合物在手性固定相上的不同吸附能力来实现手性分离。
同时，通过合适的手性底物和手性固定相的选择，还可以更好地提高手性分离的选择性和灵敏度。
2.液相色谱法（HPLC法）：HPLC法是手性分离分析中最常用的方法之一、常见的手性固定相有手性液相、手性离子对和手性硅胶等。
通过在手性固定相上进行液相色谱分析，利用手性化合物在固定相上的差异相互作用，实现手性分离。
此外，还可以结合负载式手性液相色谱法、手性离子对液相色谱法等技术，提高手性分离效果。
3.毛细管电泳法（CE法）：CE法是一种高效、快速的分离技术，特别适用于分析手性药物。
通过在毛细管中施加电场，利用手性化合物在毛细管中的迁移速率差异实现分离。
此外，还可以通过改变运行缓冲液的组成、pH值等条件，调节手性分离的选择性和分离效果。
除了上述主要的手性分离分析方法外，还存在一些辅助技巧和方法，可以进一步提高手性分离的效果：1.共处理：将两个手性化合物混合在一起进行共处理，通过比较混合物中手性峰的相对峰度等信息，来判断手性分离的效果。
2.离子对调整：通过调整分析液中离子对的浓度和种类，来改变手性分离的效果。
一般来说，手性离子对可以提高手性分离的分辨率和选择性。
3.pH调控：通过改变液相色谱系统中溶液的pH值，可以影响毛细管电泳法和液相色谱法中手性分离效果。
pH值的改变可以调节化合物分子的电荷状态，从而影响手性分离的选择性。
总之，手性分离分析方法及技巧在药物研究中起着重要的作用。
通过合理选择合适的手性分离方法，并结合辅助技巧和方法，可以实现对手性异构体的高效、准确的分离和定量分析，从而为药物研究提供有价值的数据。
对于市场上越来越多对目标物准确定性的要求，而手性产物是其中较为重要的一部分，因此对于手性目标物的检测就显得尤为重要。
一、什么是手性导构和对映异构体？当药物分子中碳原子上连接有4个不相同的基团时，该碳原子被称为不对称碳或手性碳（中心），会导致药物分子存在异构体，如果两个异构体之间的关系如同一个物体的立体结构在照镜子，这个立体结构和它在镜子中的像互为对映异构体（对映体）。
图1是手性对映异构体的图示。
图1 手性对映异构体图示对映体具有相同的物理性质（如熔点，沸点，溶解度，折射率，酸性，密度等），热力学性质（如自由能，焓、熵等）和化学性质。
除非在手性环境（如手性试剂，手性溶剂）中才表现出差异。
对映体对偏振光的作用不同，它们的比旋光度数值相同，但方向相反。
对映体的生物活性不相同，化学反应中表现出等速率。
等量的左旋体与右旋体的混合物构成外消旋体。
从对映体中分离出单纯一个光学异构体的方法称手性拆分。
最普通的手性拆分方法是消旋旋体与光学活性相反的离子（称拆分剂）作用生成非对映体。
手性药物对映体拆分的方法主要有非色谱法和色谱法。
非色谱法（主要包括结晶法、微生物消化法等）耗时长，过程繁琐不能制备高纯度对映体，色谱法是基于把对映体的混合物转换成非对映异构体，然后利用它们在化学或物理性质上的差异进行分离。
主要包括气相色谱(GC)、超临界流体色谱(SFC)、毛细管电泳(CE)和毛细管电色谱(CEC)等。
表1罗列了色谱手性拆分的发展史。
其中高效液相色谱(HPLC)因其独特的优势成为手性分析领域最常用的一种技术。
表1 色谱手性拆分发展史二、HPLC手性拆分方法手性药物拆分法通常分为直接法和间接法两大类。
间接法和直接法的共同特点是均以现代技术为基础并引人不对称中心或光活性分子；不同的是间接法是将其引入分子溶质内，而直接法则是引人分子间。
引人手性环境使对映异构体间呈现物理特征的差异是手性进行光学异构体拆分的基础。
1、间接法药物对映体在分离前，先与具有高光学纯度的手性衍生剂反应，在药物对映体中引入第二个手性中心，形成非对映异构体，溶质分子与流动相和固定相之间的作用力不同，发生差速迁移以常规或手性固定相进行分离称为间接法，也称手性衍生化试剂法（CDR）。
项目研究意义目的：以高效液相色谱手性固定相法建立6种手性农药对映异构体的拆分及在动物组织中的残留分析方法，手性农药分别包括两种杀虫剂马拉硫磷和水胺硫磷、两种除草剂乳氟禾草灵和乙氧呋草黄及两种杀菌剂甲霜灵和己唑醇。
通过口服和注射两种途径对大鼠和家兔进行手性农药对映体的选择性代谢行为研究。
测定排泄物包括尿液和粪便、血样中对映体的含量及相对比值（ER值）随时间的变化情况，最终检测肝脏、心脏、肌肉、脂肪、脑等组织中农药对映体的含量及ER值并确定对映体的选择性代谢及残留行为，代谢产物通过质谱进行确证，探讨代谢机理。
研究手性农药对映体在动物体内的选择性代谢行为能更加真实的反映相关农药污染对人类健康的影响，为其污染治理、指导合理用药、制定相关的分析方法及残留限量等标准提供依据，将农药污染等副作用对人类的影响减至最小。
关键词手性农药；代谢；选择性；动物（一）立项依据与研究内容（4000-8000字）：1. 项目的立项依据（研究意义、国内外研究现状及分析，附主要参考文献目录。
）农药是防治病、虫、草、鼠害不可缺少的重要手段，为农业的增收作出巨大贡献，但是由于农药的大量使用，对环境造成了严重的污染，直接或间接地威胁了人类的健康。
绝大多数农药是有机化合物，普遍存在着手性现象。
在以往的研究中，通常不区分手性农药的对映异构体，正因如此，对农药的风险评估所依据的数据是不完全真实的。
由于立体化学的发展,手性现象已引起了人们的广泛关注，手性是指呈镜像而不重合的关系，如同人的左右手互为镜像但又不能重合。
手性化合物中存在两种或以上不同构象的分子，这些分子以镜像关系成对的存在，互称为对映异构体。
医药、农药等研究已深入到分子立体异构领域，尤其是在医药方面，主要表现在大量手性药物单一异构体的研究和使用上，很多手性药物对映体的性质已研究的比较清楚。
在农药领域相关方面的研究相对滞后，手性农药的各种性质通常是以外消旋体的形式加以研究的，缺乏单一对映体的详细数据。
