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实验4放线菌、酵母菌、霉菌形态观察.实验四放线菌、酵母菌、霉菌形态观察（一）放线菌的形态观察1 目的观察放线菌的基本形态特征掌握培养放线菌的几种方法2 原理放线菌一般由分枝状菌丝组成，它的菌丝可分为基内菌丝(营养菌丝)、气生菌丝或有孢子丝三种。
放线菌生长到一定阶段，大部分气生菌丝分化成孢子丝，通过横割分列的方式产生成串的分生孢子。
孢子丝形态多样，有直、波曲、钩状、螺旋状、轮生等多种形态。
孢子也有球形、椭圆形、杆状和瓜子状等等。
它们的形态构造都是放线菌分类鉴定的重要依据。
放线菌的菌落早期绒状同细菌菌落月牙状相似，后期形成孢子菌落呈粉状、干燥，有各种颜色呈同心圆放射状。
3 材料3.1 菌种灰色链霉菌(Str. griseus),天蓝色链霉菌(Str. coelicolor),细黄链霉菌（Str.microflavus）。
3.2 培养基高氏1号培养基。
3.3 器皿培养皿，载玻片、盖玻片、无菌滴管、镊子、接种环、小刀(或刀片)、水浴锅，显微镜，超净工作台，恒温培养箱。
4 流程4.1插片法: 倒平板→插片→接种→培养→镜检→记录绘图4.2压印法: 倒平板→划线接种→挑取菌落→加盖玻片→镜检→记录绘图4.3埋片法: 倒琼脂→切槽→接种→培养→镜检→记录绘图5 步骤5.1插片法5.1.1倒平板将高氏1号培养基熔化后，倒10~12毫升左右于灭菌培养皿内，凝固后使用.5.1.2插片将灭菌的盖玻片以45度角插入培养皿内的培养基中，插入深约为1/2或1/3(图5-1)。
5.1.3接种与培养用接种环将菌种接种在盖玻片与琼脂相接的沿线，放置28℃培养3～7天。
5.1.4观察培养后菌丝体生长在培养基及盖玻片上，小心用镊子将盖玻片抽出，轻轻擦去生长较差的一面的菌丝体，将生长良好的菌丝体面向的载玻片，压放于载玻片上。
直接在显微镜下观察。
5.2压印法5.2.1制备放线菌平板同5.1.1。
在凝固的高氏1号培养基平板上用划线分离法得到单一的放线菌菌落。
实验名称：酵母菌、霉菌形态观察姓名：学号：系别：实验日期：同组同学名单：【摘要】本实验通过观察酵母菌、霉菌临时装片，进一步了解酵母菌、霉菌的形态结构。
【实验目的】1.学习酵母菌形态结构2.学习霉菌形态结构3.学习酵母菌和霉菌观察方法4.了解酵母菌和霉菌在实际中的意义【实验材料】1.菌株：酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）假丝酵母（Candida tropicalis）曲霉（Aspergillus niger）根霉（Rhizopus nigricans）青霉（Penicillium chrysogenum）总状毛霉（Mucor racemosus）2. 试剂美蓝染色液、乳酸苯酚油固定液3.其他显微镜、载玻片、盖玻片等【实验方法】1.酵母菌活体观察：菌体形态、出芽2.酵母菌死亡率测定3.子囊孢子观察（p29）4.假菌丝观察（假丝酵母）5.假根观察（黑根霉）6.孢囊孢子观察（总状毛霉、黑根霉）7.孢子头结构（产黄青霉、黑曲霉）8.足细胞观察（黑曲霉）【实验结果】酵母菌观察记录表酿酒酵母的死亡率统计（染色后，蓝色的为死细胞，无色的为活细胞）酿酒酵母的死亡率统计表平均死亡率为31%。
【注意事项】1.用于活化酵母菌的培养基要新鲜、表面湿润2.在产孢培养基上加大接种量，可提高子囊形成率3.通过微加热增加酵母死亡率，易于观察死细胞4.霉菌制片时要薄，便于观察【讨论】题目：为什么酿酒酵母用美蓝染色时，死细胞被染成蓝色，活细胞不着色？答：美蓝是一种无毒性物质，其氧化态是蓝色，还原态是无色，由于新陈代谢，细胞保持很强的还原性，使美蓝呈还原态。
微生物实验报告几种常见酵母菌、霉菌的形态结构观察姓名：学号：系别：班级：日期：同组成员：一、摘要通过对酵母菌、霉菌形态结构观察，了解酵母菌、霉菌形态结构的形态结构知识。
实验结果为：1、酵母菌一般呈卵圆形、圆形、圆柱形或柠檬性。
菌落形态与细菌相似，但较大较厚，呈乳白色或红色，表面湿润、粘稠，易被挑起。
2二、实验目的1、学习酵母菌、霉菌形态结构。
2、学习酵母菌、霉菌观察方法。
3、了解酵母菌、霉菌在实际中的意义。
三、实验原理酵母菌：酵母菌多呈圆形、卵圆形，有的呈分支的菌丝状。
无性繁殖以出芽生殖为主，少数以分裂方式繁殖；有性生殖是通过不同遗传性的细胞接合产生子囊孢子的方式进行。
子囊孢子可用孔雀绿进行染色观察。
观察细胞形态和内部结构可采用染色的方法。
美蓝是无毒性的染料，新陈代谢旺盛的细胞具有较强的还原能力，使美蓝从蓝色的氧化型变成无色的还原型；而死亡细胞无此还原力，故被染成蓝色。
霉菌：霉菌可产生复合分枝的菌丝体，分基内菌丝、气生菌丝，气生菌丝生长到一定阶段分化产生繁殖菌丝，由繁殖菌丝产生孢子。
霉菌菌丝体(尤其是繁殖菌丝)及孢子的形态特征是识别不同种类霉菌的重要依据。
霉菌菌丝和孢子的宽度通常比细菌和放线菌粗得多，常是细菌菌体宽度的几倍至几十倍，因此，用低倍/高倍显微镜即可观察。
四、实验材料与仪器1、菌种：产黄青霉、黑曲霉、黑根霉、总状毛霉、酿酒酵母、热带假丝酵母斜面菌种。
2、培养基：PDA培养基、0.05%美蓝染液、5%孔雀绿染液、半固体PDA培养基、乳酸苯酚固定液等。
3、仪器及用具：显微镜、载玻片、盖玻片、接种环、酒精灯、镊子、滴管、吸水纸等。
五、实验内容和步骤酵母菌形态观察1、酵母菌活体观察及死亡率的鉴定（1）取酿酒酵母PDA斜面，以无菌水洗下菌苔制成菌悬液。
（2）取洁净载玻片一张，滴加0.05%美蓝染液1滴于载玻片中央，用接种环取酵母菌悬液与染色液混匀，染色2-3min，加盖玻片，在高倍镜下观察酵母菌个体形态。
【细菌菌落特征】常见细菌特征性菌落细菌,酵母,霉菌的形态与菌落特征观察实验四、细菌，酵母，霉菌的形态与菌落特征观察一、实验目的细菌：观察食品中常见细菌的平板菌落特征，了解细菌的菌落在细菌形态学检定上的重要性酵母菌：1.学习并掌握观察酵母菌的形态及出芽繁殖的基本方式2.学习区分酵母的死活细胞的实验方法3.观察酵母的平板菌落特征，了解酵母菌的菌落在真菌形态学检定上的重要性霉菌：1.学习并掌握观察四类常见霉菌形态特征的基本方法2.掌握青霉，曲霉的小室栽片培养法，以便更好地观察其个体形态3.观察霉菌的平板菌落特征，了解霉菌的菌落特征在丝状真菌形态学检定上的重要性二、实验原理1．细菌：将单个微生物细胞或多个同种细胞接种于固体培养基表面，经适宜条件培养，以母细胞为中心，在有限空间中大量繁殖，扩展成一堆肉眼可见的有一定形态构造的子细胞群落，成为菌落。
若将某一纯种细胞大量密集接种于固体培养基表面，菌体生长的各菌落连接成片，称为菌苔。
各种细菌在平板上生成的菌落均具有一定特征，对细菌的分类，鉴定有重要意义，菌落主要用于微生物的分离，纯化，鉴定，计数等研究和选种，育种等实际工作中。
2．酵母菌：以出芽繁殖为主要特征的不运动的单细胞真核微生物，其细胞核与细胞质有明显分化，个体大小比常见细菌大几倍甚至几十倍，酵母菌的形态通常有球状，卵圆状，椭圆状，柱状，或香肠状等多种。
酵母菌的无性繁殖主要有芽殖，裂殖与产生掷孢子和厚垣孢子。
有性繁殖通过结合产生子囊孢子。
酵母菌的母细胞在一系列的芽殖后若长大的子细胞与母细胞不分离，就会形成藕节状的假菌丝，称假丝酵母。
美蓝是一种无毒的弱氧化剂染料，其氧化型呈蓝色，还原型呈无色。
用美蓝对酵母的活细胞进行染色时，由于细胞的新陈代谢作用，细胞内具有较强的还原能力，能使美蓝由蓝色的氧化型变为无色的还原型。
因此，具有还原能力的酵母活细胞为无色，而死细胞或代谢作用微弱的衰老细胞则呈蓝色或淡蓝色，故可用美蓝鉴别细胞的死活。
04 实验四放线菌、酵母和霉菌形态的观察实验目的：1. 了解微生物的形态特征。
2. 熟悉显微镜的使用方法，学习普通染色技术。
3. 学习鉴别放线菌、酵母和霉菌的形态特征。
实验材料：1. 盐酸裂解液、甲醛定型液、碘酒、甲基橙、溴酚蓝等。
2. 放线菌、酵母和霉菌的培养物。
实验步骤：1. 取一小块培养物放在玻片上，滴上一滴生理盐水并用小棒子将其研磨均匀。
2. 放线菌培养物制片：将研磨好的放线菌制成薄片，滴上盐酸裂解液使其变成透明，定型液使其固定，并在空气中晾干。
然后，在火上加热定邦，再用碘酒染色，过后清水洗净，醋酸洗净并晾干或用吹风机吹干。
3. 酵母培养物制片：将研磨好的酵母制成薄片，滴上碘酒染色剂染色，过后清水洗净，醋酸洗净，晾干或用吹风机吹干。
4. 霉菌培养物制片：将研磨好的霉菌制成薄片，滴上甲基橙染色剂染色，过后清水洗净，醋酸洗净，晾干或用吹风机吹干。
5. 用显微镜观察制片。
实验结果：放线菌：放线菌为革兰阳性菌，细胞形状呈弯曲的短小棍形，光学显微镜下看到的细胞较长，一般在1-20微米之间，可以分枝，分枝形成的菌丝从外形上呈现出类似于蜘蛛网的形状。
勃林美细胞内有许多成熟的孢子，呈现为典型的链状。
常常在不规则的小菌落或黏液内生长。
酵母菌：酵母细胞直径一般在2-5微米之间，为单细胞生物，在将染好色的玻片放在光学显微镜下很容易看到直径3微米以上的球形，卵圆形等细胞结构，表面光滑。
细胞质软，柔软而透明。
霉菌：霉菌属真菌，具有多种形态，种类繁多，细胞直径1-5微米，长1-10微米，细胞呈现不规则形状，通常形成的是在菌丝基础上聚合并且扩展而成的菌落。
通过本次实验观察和比较放线菌、酵母和霉菌的形态特征，可以得出以下结论：1. 放线菌为分枝杆菌，细胞型态呈弯曲状，外观类似于蜘蛛网。
2. 酵母为单细胞生物，呈圆球形或卵圆形，表面光滑、整齐。
3. 霉菌属于真菌，细胞形态呈现不规则形状。
实验四酵母菌和霉菌的形态观察
一、目的要求
1、观察酵母菌、老菌的个全形态以及它们之间的区别。
2、学会用水浸法观察酵母菌和霉菌的技术。
3、了解酵母菌和霉菌细胞的构造和繁殖方式的特点。
二、实验材料
1、接种针、接种杯、酒精杯、载玻片、盖玻片、吸管。
2、0.1%美蓝液、乳酸-石炭酸液（配方见附录）。
3、菌种啤酒酵母、假丝酵母、黑根霉、毛霉、青霉、木霉、曲霉。
三、方法步骤
（一）酵母菌的形态观察
酵终菌是单细胞真核核微生物，细胞核和细胞质有明显分化，个体比细菌大得多，有的能形成假菌丝。
繁殖方式较复杂，无性繁殖以出芽生殖为主，有性繁殖是通过接合产生子囊孢子。
1、酵母菌的形态与出芽生殖的观察在载片上滴一滴蒸馏水，以无菌操作，用接种环挑取少许啤酒酵母置于载片上蒸馏水中，取一块盖片，小心地将盖玻片一端与菌液接触，然后缓慢地将盖玻片放下；这样可避免产生气泡。
先用低倍镜观察，再用高倍镜观察酵母细胞的形状、大小、构造、内含物及出芽方式。
2、子囊孢子的观察将啤酒酵母接种于麦芽汁液体培养中，于28-30℃培养24小时，连续传代3-4次，最后转接到培养子囊孢子的培养基上（也可用肉法蛋白胨培养基）。
25-28℃培养3天左右，涂片
染色（按芽孢染色法）观察子囊孢子开关和特点，并注意每一个子囊内的孢子数等。
3、假丝酵母观察用划线法将假丝酵母接种在麦芽汁平板上。
在划线部分加盖玻于25-30℃培养3天先观察菌落边缘，再取下盖玻片，在显微镜下观察呈树枝状分枝的假菌丝细胞的形状，或将皿盖打开，直接将培养皿放在载物台上，在低倍镜下观察。
4、酵母菌菌落观察取啤酒酵母、假丝酵母、园酵母以三点点植法接种于麦芽汁平板上，于28-30℃坟3天。
观察菌落表面、高度、边缘、质地和颜色等。
5、酵母菌死活的检查在载片上加一滴0.1%美蓝，把酵母培养液滴加在美蓝液上，加盖玻片观察，死细胞为兰色，活细胞无色。
（二）霉菌形态观察
霉菌形态比细菌、酵母菌复杂，个体比较大，具有分枝的菌丝体和分化的繁殖器官。
在观察时要注意细胞的大小，菌丝构造和繁殖方式。
菌丝体有无隔膜，营养菌丝有无假根，无性孢子是怎样着生在孢子梗上及有性孢子如何生成。
由于霉菌菌丝较粗大，孢子很容易飞出，如果放在水中观察时容易收缩变形，所以在制标本时不用水，而用乳酸-石炭酸溶液，使细胞不致变形，并有杀菌作用。
1、取培养有青老、木霉、毛霉、曲霉的平皿，挑取一团菌丝，置于滴有一滴乳酸-石炭酸液的载片上，加盖玻片，由于霉菌是由菌丝组成的，许多菌丝交错在一起形成菌丝体。
在高倍镜下观察菌丝分隔情况，分成孢子着生情况（要求辨认分生孢子子梗、顶囊、小梗及
分生孢子）。
2、取一培养有根霉的平皿观察假根、匍匐枝、孢子囊柄及孢子囊。
注意假根着生情况。
挑取少量菌丝，置于滴有一滴乳酸-石炭酸液的载玻上，加盖片。
在高倍镜下观察孢子囊柄，孢子囊及子囊孢子。
3、取一培养好的各种老菌菌落的平皿，注意观察菌落形态，表面质地，颜色及背面的特征。
注意霉菌菌落与细菌、酵母菌落有何区别？
4、观察红曲霉的子囊果、子囊及子囊孢子（示范）。
5、观察犁头霉的结合孢子、保护丝（示范）。
6、观察白地霉的裂生孢子（示范）。
四、实验作业
1、把观察到的各种酵母、根霉、毛霉、曲霉、青霉绘图，并注明各部分名称。
2、列表比较各类霉菌在形态结构上有何异同？。
