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三种梅毒螺旋体抗体检测方法的比较分析魏从芳;汤巧【期刊名称】《国际检验医学杂志》【年(卷),期】2014(035)004【摘要】目的比较化学发光法(TP-CLIA)、酶联免疫吸附试验(TP-ELISA)和梅毒螺旋体明胶颗粒凝聚试验(TPPA)对梅毒螺旋体特异性抗体(TP-Ab)检测的意义.方法分别用CLIA、ELISA和TPPA检测患者的1 797份血清样本,收集CLIA/ELISA/TPPA/法检测均阳性但临床未明确诊断的标本及结果不一致标本以重组免疫印迹法(RIBA)最终确认.结果三种方法共筛选69例阳性及可疑血清标本.CLIA/ELISA/TPPA法均阳性标本63例,其中52例有临床明确诊断.另11例3种方法检测均阳性但未明确诊断标本和6例检测结果不一致标本用RIBA确证.CLIA法确认阳性66例,阳性率3.67;ELISA法确认阳性65例,阳性率3.62;TPPA 法法确认阳性61例,阳性率3.39;CLIA、ELISA及TPPA法敏感性分别为98.51％、97.02％和91.05％;特异性均为99.88;诊断效率分别99.83％、99.78和99.66％.结论 CLIA法和ELISA法敏感性均高于TPPA法,不管用何种方法检测对于临床诊断不符的标本均应慎重,必要时用RIBA法补充确认,以排除假阳性.【总页数】3页(P458-459,462)【作者】魏从芳;汤巧【作者单位】南京医科大学附属南京医院检验科,江苏南京210006;南京市建邺区江心洲社区卫生服务中心检验科,江苏南京210019;南京医科大学附属南京医院检验科,江苏南京210006【正文语种】中文【相关文献】1.三种方法检测梅毒螺旋体抗体低值标本的比较分析 [J], 覃涛;杨昌伟;宋芳2.梅毒螺旋体抗体检测方法的比较分析 [J], 刘莹;王苏;张桂华3.三种梅毒螺旋体抗体检测方法的应用分析 [J], 刘长秀; 李静; 赵辰娜4.ELISA、TPPA和CLIA三种检测方法在血清梅毒螺旋体特异性抗体检测中的应用观察 [J], 朱纯刚5.三种梅毒螺旋体特异性抗体检测方法性能评价 [J], 王娟梅;方孝美;宋冰因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
皮肤病与性病 2021年2月第43卷第1期 Dermatology and Venereology ,Feb 2021,V ol. 43,No ,142·性病、艾滋病防治·2 讨论梅毒是由苍白螺旋体引起的一种慢性、系统性的性传播疾病[1]。
梅毒也被称为“万能的模仿者”，二期梅毒皮疹表现呈现多样化且缺乏特异性，不典型的皮损在临床上表现增多，甚至出现多种形态合并出现，导致在临床上容易出现漏诊、误诊的情况[2、3]。
二期梅毒的特征是临床皮疹多样化，部分患者可表现出系统性体征，如乏力、发热、腹股沟淋巴结肿大等。
可出现全身性皮损，表现为无瘙痒感斑疹，呈针尖至粟粒大小红斑表现，易误诊为湿疹、药疹[4]；也可表现为鳞屑性丘疹，浅褐色痂皮外观呈牡蛎状，基底部明显浸润，可见铜红色皮损，易误诊为玫瑰糠疹、副银屑病、银屑病、体癣等皮肤病[5、6]；面部环状斑疹，浸润性发红，易误诊为脂溢性皮炎、面癣类皮肤病；手掌和脚掌掌面对称性斑丘疹，表面可有Biett 圈，呈领圈状鳞屑，此皮疹较为典型的临床皮损；肛周多发苍白色或浅褐色扁平丘疹，基底部略宽而无蒂，表面湿润，有黏稠分泌物，也可发生在外阴、腋窝、腹股沟等处，易误诊为股癣、外痔、尖锐湿疣等疾病[7]；黏膜部位的皮肤表现可出现口角炎、咽喉部黏膜斑；还可表现为皮脂腺丰富区可出现额发缘梅毒疹，虫蛀状局限性斑秃。
由于二期梅毒的临床表现与多种皮肤病及性病相似，临床上不易辨认，尤其是不典型的皮疹更容易造成误诊。
因此，临床医务工作者应加强对二期梅毒皮疹的认识；遇到该类可疑皮疹表现的病人应该提高警惕。
① 注意询问病史，尤其是性接触史和冶游史，比如本病例中患者为未成年女性，最初刻意隐瞒情况，差点漏掉临床线索；② 完善皮肤科专科检查，如对黏膜、腋下、外阴等部位进行仔细全面的体查；③ 对于可疑的患者尽量根据实验室结果来判断病情，梅毒血清学检查是一种科学的诊断手段，血清学检查阳性结合临床症状，可判定现症感染。
输血前8项感染性指标的检测以及临床意义输血是一项常见且必要的医疗措施，能够解决一些严重的，伴随着贫血、出血性休克等疾病的问题。
然而，由于血液是一个高度复杂的组织，输血也带来了一定的风险，其中最大的风险之一就是输血后的感染。
因此，检测输血前8项感染性指标，能够帮助医务人员及时发现血液中存在的感染源，防止输血后发生感染，并保证受血者的生命安全。
1. 乙肝病毒表面抗原（HBsAg）：HBsAg阳性意味着受血者感染了乙肝病毒，存在肝功能受损、肝硬化、肝癌等严重危害。
输血时，必须使用HBsAg阴性血液，避免感染的发生。
2. 丙肝病毒抗体（HCV-Ab）：HCV-Ab阳性表示受血者被感染了丙肝病毒，丙肝是一种慢性病毒性肝炎，可导致肝硬化、肝癌等疾病。
输血时，如果受血者HCV-Ab阳性，则必须确认病毒负载情况，并从HCV-Ab阴性的献血者中选取血液输注。
3. 艾滋病毒抗体（HIV-Ab）：HIV-Ab阳性意味着受血者感染了艾滋病毒，艾滋病毒是一种致命的病毒，对免疫系统造成破坏，严重危及身体健康。
输血时，必须使用HIV-Ab阴性血液，避免病毒的传播。
4. 梅毒螺旋体抗体（TP-Ab）：TP-Ab阳性说明受血者感染了梅毒螺旋体，梅毒是一种病原微生物性疾病，可影响全身器官，甚至危及生命。
输血前必须进行TP-Ab检测，如果TP-Ab阳性，则不能进行输血。
5. 狂犬病毒抗体（RV-Ab）：RV-Ab检测对于多次输血的受血者非常重要，如果RV-Ab 阳性，意味着受血者被感染了狂犬病毒，狂犬病毒是一种致命的病毒性疾病，传染性强，严重威胁人类健康。
输血前必须进行RV-Ab检测，确保受血者的生命安全。
6. 西尼罗河病毒抗体（WNV-Ab）：WNV-Ab阳性表示受血者感染了西尼罗河病毒，这是由蚊子传播的一种病毒，可导致人类、马、鸟等动物感染，而且有时会导致严重的神经系统疾病。
输血前必须进行WNV-Ab检测，以避免病毒的传播。
8. 常规细菌培养：常规细菌培养是一种常用的检测方法，能够检测细菌的存在并进行进一步的鉴定。
TPPA、TP—AbELISA、TRUST三种方法检测血清梅毒结果分析目的分析TPPA、TP-Ab（ELISA）、TRUST三种方法检测血清梅毒的结果。
方法采用梅毒螺旋体明胶凝集试验（TPPA）、酶联免疫吸附试验（TP-Ab）、甲苯胺红不加热血清试验（TRUST）来对比检测150例临床确诊的梅毒阳性血清标本和70例正常血清标本。
结果TP-Ab、TPPA检测方面的灵敏性、特异性显著高于TRUST检测方法，P＜0.05。
结论TPPA具有较高的特异性，可以将其作为梅毒确证实验；TP-Ab（ELISA）法的灵敏度、特异性与TPPA法比较接近，是现阶段对梅毒抗体进行检测的首选方法；TRUST法的特异性较差，可以将其当成TP-Ab（ELISA）法的补充。
标签：TPPA；TP-Ab（ELISA）；TRUST；检测；血清梅毒梅毒作为慢性全身性性传播疾病，主要是因为梅毒螺旋体感染导致的，梅毒的病程较长，临床表现复杂，表现为多样性，会对患者的全身各个器官造成损害；疾病早期主要对黏膜和皮肤造成侵犯，疾病后期则会对中枢神经系统、心血管系统等器官造成侵犯。
现阶段因为人们滥用抗生素药物，导致部分梅毒患者表现为隐性感染，缺乏临床表现，因此在临床诊断中容易出现误诊和漏诊的情况[1]。
世界卫生组织认为，全球输血不安全是导致没有有效筛选传染性因子的主要原因。
所以采用高灵敏度、强特异性的筛选方式，对安全输血非常重要。
本研究主要分析了TPPA、TP-Ab（ELISA）、TRUST三种方法检测血清梅毒的结果，现将情况做如下分析。
1 资料与方法1.1一般资料1.1.1标本选择选择2014年1月～2016年1月经我院临床确诊的梅毒感染输血患者输血前的标本150例，并选择同期非梅毒感染输血患者的血清标本70例，对血清进行分离后再进行检测。
1.1.2试剂和方法TPPA试剂盒选择富士瑞必欧株式会社所提供的；TP-Ab 试剂盒则是由珠海丽珠试剂有限公司提供；TRUST试剂盒则是由上海荣盛生物技术有限公司所提供；选择SUNRISE酶标仪、新康医疗器械有限公司提供的XK-96型梅毒旋转振荡器和HydroFLex洗板机。
梅毒的血清学试验参考范围：性病研究实验室试验（VDRL）阴性不加热血清反应素试验（USR）阴性快速血浆反应素试验（RPR）阴性荧光密螺旋体抗体吸收试验（FTA-ABS）阴性梅毒螺旋体血凝试验（TPHA）1：25以下为阴性梅毒螺旋体制动试验试验标本活动螺旋体数为对照标本的40%为阴性梅毒螺旋体抗体试验（TP-Ab）阴性临床评价：1．梅毒螺旋体也称苍白密螺旋体，是性传播疾病梅毒的病原体。
机体对梅毒螺旋体感染可产生体液和细胞免疫反应，梅毒螺旋体血清学试验是诊断梅毒的依据之一。
血清学试验主要有两个类型，一类是VDR L，USR和RPR．属非螺旋体抗原试验，是用正常牛心类脂质作为抗原，测定血清中的反应素，为筛查试验。
另一类是FTA-ABS，TPHA和TPl，属螺旋体抗原试验，是用梅毒螺旋体作为抗原，检测血清中的特异性抗体，为确证试验。
2．非螺旋体抗原试验(VDRL，USR，RPR)敏感性高，其反应素效价与病变活动性有关。
第一期梅毒病灶出现后1～2周即可测出反应素，第二期梅毒病人血清中反应素效价最高，阳性率可达99％，经药物治疗后可转阴。
先天性梅毒80％～100％阳性。
但此类试验特异性不高，常有假阳性反应，在分析结果时应注意结合病史、临床症状及特异性试验作出正确判断。
FTA-ABS的敏感性和特异性均高，在早期梅毒首先出现阳性，病人经药物治疗后反应仍不转阴，故不能用作疗效的评价，常用于梅毒的确定诊断。
TPI是一种经典的特异性较高的梅毒血清学反应，假阳性不到1％，主要用于晚期梅毒及疑难病人的诊断。
TPHA具有敏感、快速、简便等特点，但特异性不及FTA-ABS和TPI。
采取脑脊液标本进行特异性抗体检测，对中枢神经系统的梅毒具有诊断价值。
3．暗视野检查法对梅毒的诊断有重要意义。
此法系采取病灶组织渗出液、淋巴穿刺液或组织悬液制成涂片，在暗视野显微镜下直接检查梅毒螺旋体，主要适用于初期梅毒的检查，有一定局限性。
暗视野检查法一次阴性结果不能否定梅毒的存在，一般连续检查3天阴性才能予以排除。
RPR、TRUST、TPPA、ELISA、TPAb五项联合在检测梅毒早期患者中的临床应用摘要目的对应用梅毒快速血浆反应素试验（RPR）、甲苯胺红不加热血清试验（TRUST）、梅毒螺旋体特异性抗体明胶凝集试验（TPPA）、酶联免疫吸附试验（ELISA）、胶体金法（TPAb）五项方法联合对梅毒患者的病情实施早期诊断的临床价值进行研究。
方法180例确诊为梅毒早期患者，分别采用RPR、TRUST、TPPA、ELISA、TPAb五种方法对其血清标本进行测定，分别作为对照1组、对照2组、对照3组、对照4组、对照5组。
再用五种方法联合对标本进行测定，定义为研究组。
对比研究组与各对照组的梅毒检测阳性率水平。
结果研究组梅毒检测阳性率明显高于各对照组，对应组间比较差异均有统计学意义（P＜0.05）；各对照组间比较差异无统计学意义（P>0.05）。
结论应用RPR、TRUST、TPPA、ELISA、TPAb五项方法联合对梅毒患者的病情实施早期诊断具有较高的临床价值。
关键词梅毒快速血浆反应素试验；甲苯胺红不加热血清试验；梅毒螺旋体特异性抗体明胶凝集试验；酶联免疫吸附试验；胶体金法；梅毒梅毒是由梅毒螺旋体感染所导致的一种通过性途径传播的疾病[1]。
本病在发病后几乎会侵害到全身所有的器官，主要通过血液和性接触两种途径进行传播。
梅毒患者是梅毒的唯一传染源，该类患者的皮损、血液、精液、乳汁和唾液等均存在梅毒螺旋体[2]。
本次对应用RPR、TRUST、TPPA、ELISA、TPAb 五项方法联合对梅毒患者的病情实施早期诊断的临床价值进行研究。
现报告如下。
1 资料与方法1. 1 一般资料在2011年9月～2015年9月选择本院收治的确诊为梅毒早期患者180例，男103例，女77例；研究对象年龄31～78岁，平均年龄（56.9±9.4）岁；梅毒患病时间1～16个月，平均患病时间（5.3±3.8）个月。
1. 2 方法采用RPR对标本进行测定，作为对照1组：在23～29 ℃的室温条件下，将1滴梅毒快速血浆反应素抗原悬液，加入到50 μl的待测血清标本中，采用梅毒快速血浆反应素旋转仪水平转动纸卡8 min左右，之后的3 min 内在光线充足的条件下对检测结果进行判定。
TRFIA法检测阳性梅毒螺旋体抗体结果分析摘要】目的：用时间分辨荧光分析法检测梅毒螺旋体抗体(TP-Ab)是否会产生钩状效应，能否为临床提供正确的检验结果。
方法：对2017年699例阳性病人的梅毒螺旋体抗体血清利用EASYCUTA?全自动时间分辨荧光分析仪进行2倍稀释检测,结果有显著再进行倍比稀释检测。
结果：发现2例病人TP-Ab血清原倍检测结果明显低于2倍稀释后的检测结果，倍比稀释后的结果先增高后降低，呈明显的钩状效应。
结论：用梅毒螺旋体抗体检测试剂盒(免疫荧光法)检测梅毒螺旋抗体时会产生明显的钩状效应。
【关键词】时间分辨荧光分析法；梅毒螺旋体抗体；检测；钩状效应【中图分类号】R446 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2019）19-0052-01现阶段，最灵敏的微量分析技术是时间分辨荧光分析法（Time resolved fluoroisnmunoassay,TRFIA），该技术的特点包括无放射性污染、标准曲线范围宽、不会受样品自然荧光干扰、自动化、操作简单、多标记以及标记物制备简单且稳定等[1]，已广泛运用于蛋白质、多肽、激素、抗体、核酸探针和生物活性细胞的定量分析。
梅毒传播途径以性接触为主，近些年来，在我国社会经济飞速发展和生活水平显著提高的背景下，梅毒患病人数逐渐增多[2]。
在检测TP-Ab时，如果采用一步法进行检测，当血清中TP-Ab浓度过高时可能会产生钩状效应（HOOK效应）[3]，高浓度标本易误测为低值标本，甚至出现正常结果。
在临床工作中，钩状效应很难被发现，如果出现钩状效应，易发生漏诊或误诊。
本文对患者血清经倍比稀释用TRFIA检测，确认其TP-Ab稀释结果高于原倍血清结果，现报告如下。
1.资料与方法1.1 标本来源检测标本均为2017年梅毒螺旋体抗体阳性患者血清。
1.2 仪器苏州新波生物技术有限公司生产的EasyCuta?全自动时间分辨荧光分析仪。
1.3 试剂苏州新波生物技术有限公司生产的配套梅毒螺旋体抗体检测试剂盒(免疫荧光法)。
梅毒抗体检测（TP-Ab）
1.方法：胶体金法
2.原理：本品采用胶体金免疫检测技术和层析原理，定性检测血清（浆）样本中的梅毒螺旋体抗体。
检测时，样本中梅毒抗体可与胶体金标记抗原结合形成抗原抗体复合物，由于层析作用复合物沿纸条向前移动，经过检测线时与预包被的抗原结合形成“Au-TPAg-TPAb-TPAg”夹心物而凝聚显色，游离胶体金标记梅毒抗原则在对照线处与预包被的兔抗TP抗体结合而富集显色。
阴性标本则仅在对照线处显色。
3.样本要求
3.1无菌条件下采集静脉的血清、血浆样本，并避免溶血。
3.2血清和血浆样品在收集后七天内检测，样品须放在2-8°C保存；如果大于七天须冷冻保存
4.3临床常用抗凝剂化口丁人，肝素、枸檬酸钠）等血浆样本不影响检测结果。
4.检测方法
再进行测试前必须先完整的阅读使用说明书，使用前将试剂盒和待测样本恢复至室温（18-25o C）
4.1从原包装中取出试剂，在1小时内应尽快的使用
5.2将试剂置于干净平坦的台面上，在加样区使用微量加样器加入100Ul样本。
6.320±2分钟内观察并记录试验结果
5.结果判断
阳性：试剂盒在检测线和对照线位置出现两条紫红色条带。
如果检测线的紫红色条带隐约可见，建议对该样本重复试验，并使用其他方法确认。
阴性：试剂盒只在对照线位置出现一条紫红色条带
失效：对照线未出现紫红色条带，表明不正确的操作过程或试剂盒已变质损坏。
在此情况下，应再次仔细阅读说明书，并用新的试剂重新测试。
如果问题仍然存在，应立即停止使用此批号产品，并与当地供应商联系。
注意：检测线内的紫红色条带可呈现颜色深浅的现象。
但是，在规定的观察时间内，
不论该色带颜色深浅，即使只有非常弱的色带也应判定为阳性结果。
6产品性能指标
6.1阴性参考品符合率、阳性参考品符合率、最低检出限、重复性、精密性、
稳定性性均应符合要求。
6.2.本试剂盒与乙肝、甲肝、丙肝、人类免疫缺陷病毒(HlV)、类风湿因子(RF)阳性血清均不产生交叉反应
6.3、胆红素(342.0μmol∕L)∖胆固醇(20.7mmol/L)、血红蛋白(5.0g∕L)>甘油三酯(28.2mmol∕L)不影响检测结果。
7.注意事项
7.1本试剂盒仅用于体外诊断试验。
仅用于人血清或血浆，其他体液和样品可能得不到准确的结果。
7.2样本的加样建议使用微量加样器准确加入。
7.3实验环境应保持一定湿度，避风。
避免在过高温度下进行实验。
7.4试剂可在室温下保存，谨防受潮。
低温下保存的试剂应平衡至室温方可使用。
8.5对于那些含有感染源和怀疑含有感染源的物质应有合适的生物安全保证程序，下列为有关注意事项；
1.戴手套处理样品和试剂
2.不要用嘴吸氧
3.不可在处理这些物品时吸烟、进食、喝饮料、美容和处理隐形眼镜
4.用消毒剂对溅出的样品或试剂进行消毒
5.按当地的有关条例来消毒和处理所有标本、试剂和潜在的污染物
6.试剂盒各组分在正当处理和保存的情况下直至有效期都保持稳定，不能使用过效期的试剂盒
7.6检测线颜色的深浅程度与样品中抗体的滴度没有一定的必然联系。
22分钟后判读，结果无效。
7.7任何一种试剂都不能绝对保证样品中没有低浓度的抗体存在，所以阴性结果任何时候不能排除含有HCV暴露和感染的可能。
本品检测阳性标本，需用其他方法做进一步的确认。
