两种方法检测乙型肝炎病毒五项指标的结果对比
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不同检测方法学对乙肝五项的检测结果影响【摘要】目的:探讨不同检测方法对乙肝五项检测结果的影响。
方法:选择2019年4月-2020年4月我院的200份血清作为观察样本,分别以CLEIA(化学发光酶免疫法)、ELISA(酶联免疫吸附法)检测乙肝五项相关指标,对比两种检测方法在阳性率方面的差异。
结果:CLEIA法检测血清中的HBcAb、HBeAb、HBeAg、HBsAb、HBsAg的五项指标阳性率同ELISA相比,差异不显著,即P>0.05。
结论:CLEIA、ELISA两种检测方法对乙肝五项的检测效果相当,其中ELISA的优势在于方便快捷、操作简单,适宜推广于基层医院,CLEIA特异性、敏感性突出,更利于明确患者体内乙肝病毒情况。
【关键词】乙肝五项;酶联免疫吸附法;化学发光酶免疫法乙肝五项又被临床称呼为“两对半”,其是对乙肝病毒血清标志物进行检测的常用方法,可用于乙肝诊断、预后判断以及乙肝流行病学调查等诸多方面,正因为其作用显著,所以再对实验室检测方法进行选择时必须具有敏感、稳定、特异的优势[1]。
CLEIA、ELISA作为常用的乙肝五项检测方法,为比较二者的差异性,本文选择我院的200份血清作为观察样本,现作以下报告:1资料与方法1.1.一般资料选择2019年4月-2020年4月我院的200份血清作为观察样本,其中男性患者108例,女性患者92例。
年龄在15-72岁范围内,平均值为(42.8±6.2)岁。
其中78例大三阳,85例小三阳,37例其他模式。
1.1.方法ELISA检测血清标本中的乙肝五项时用的VITROS 3600全自动免疫分析仪及原装配套试剂;CLEIA检测血清标本中的乙肝五项时用的为电光学化学仪器及迈克配套试剂。
全部的仪器、试剂必须通过卫生部批检查,同时贴有防伪标签。
晨起空腹状态下抽取3-5mL静脉血,于干燥试管/促凝分离胶密封试管中放置血液样本,同时置于37℃的环境中待其凝固,离心分离血清,分离后1-2h内必须将检测工作完成。
两种方法检测乙型肝炎病毒五项指标的结果对比作者:龙青文,何建军,马家驹,何秀琳,肖金平【关键词】酶联;血清乳胶;定性分析[关键词]酶联;血清乳胶;定性分析乙型肝炎表面抗原(HBsAg)、乙型肝炎表面抗体(HBsAb)、e 抗原(HBsAg)、e抗体(HBeAb)、核心抗体(HBcAb)的检测在许多方面如诊断乙肝判断愈后、筛选献血员、乙肝的流行病学调查、判断人群对乙型肝炎的免疫水平,对食品、保育及饮水管理行业人员定期进行健康体检等起着重要的作用。
故选择一种特异、敏感、稳定的实验室检测方法检测乙型肝炎病毒的五项指标显得尤为重要。
现将56例检测者血清同时用酶联免疫法和血清乳胶层析法对比检测结果报告如下。
1材料与方法1.1 标本来源56例受检者中,男29例,女27例,最大年龄72岁,最小年龄29岁,平均年龄46岁;来自健康体检人群15例,其中13例检测具有阳性结果,2例各项指标均为阴性、另41例为门诊检查结果有阳性的患者,均系血清标本。
1.2 方法酶联免疫法用乙型肝炎病毒(HBsAg,HBsAb,HBeAg、HBeAb,HBcAb)诊断试剂盒,由上海华泰生物工程实业有限公司生产,48人份,批号20040503,按说明书操作。
乙肝两对半血清/血浆乳胶层析法检测试剂板由ACONLaboratories.Inc.SanDiegoCA92121USA提供,批号200407029,按说明书操作。
1.3 质量控制酶联免疫法每项检测项目均设阴、阳性对照各2孔,每空加入阴性对照(或阳性对照)各1滴,并设有空白对照1孔。
乳胶层析法各项检删项目均设质控区(C)。
1.4 检测结果判定标准:酶联免疫法是根据颜色的变化,作定性分析。
此法HBsAg、HBsAb、HBeAg呈黄色为阳性反应,无色为阴性反应,阳性对照为黄色,阴性对照为无色。
HBeAb、HBcAb无色为阳性,黄色为阴性,阳性对照为无色,阴性对照为黄色。
乳胶层析法HBsAG、HBsAb、HBeAg在测试区内(T)出现一条红色条带则是阳性结果,不出现红色条带则为阴性。
时间分辨荧光免疫分析仪与ELISA法检测乙肝两对半的临床价值比较摘要】目的:比较时间分辨荧光免疫分析仪与ELISA法检测乙肝两对半的临床价值。
方法:选择2014年1月至2015年12月我院收治的35例乙肝患者临床资料分析,应用时间分辨荧光免疫分析仪与ELISA法两种不同的检测方法对乙肝两对半的检测,分析检测结果。
结果:应用时间分辨荧光免疫分析仪检测乙肝五项指标准确率更高,而且具有重复性,对HbsAg和HBeAg这两项指标的检测没有明显差异(P>0.05);应用时间分辨荧光免疫分析仪检测HbsAb、HbeAb、HBcAb等指标与ELISA检测差异显著,具有统计学意义(P<0.05)。
两对半检测结果表明,应用时间分辨荧光免疫分析仪检测率明显比ELISA法检出率高,差异显著(P<0.05)。
结论:应用时间分辨荧光免疫分析仪与ELISA法相比,具有更高的特异性和灵敏度,可以根据乙肝两对半定量检测确诊乙肝,并为乙肝治疗和预后提供有效的监测,值得推广应用。
【关键词】时间分辨荧光免疫分析仪;ELISA;乙肝两对半【中图分类号】R446 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752(2016)22-0215-02乙型肝炎病毒血清及早检测可以对乙型肝炎进行有效的预防和诊治。
现阶段,大多应用酶联免疫吸附试验(ELISA)对乙肝血清检测,这种检测方法十分方便,而且成本低,不过这种检测方法的灵敏度不高,还容易受到环境、检测操作等影响,为临床提供定性结果,并不能提供乙肝标志物含量,影响了乙肝疾病的临床治疗和预后评估[1]。
近些年来,时间分辨免疫荧光技术(TRIFA)是一种定量检测方法,具有较高的灵敏度和稳定性[2]。
本次研究中,应用TRIFA和ELISA这两种方法对乙肝标志物进行检测,探讨TRIFA的临床价值,选择2014年1月至2015年12月我院收治的35例乙肝患者临床资料分析,应用时间分辨荧光免疫分析仪与ELISA法两种不同的检测方法对乙肝两对半的检测,分析检测结果,报道如下。
酶联免疫法和发光免疫法测定乙肝病毒标志物比较目的比较发光免疫、酶联免疫这两种免疫学方法检测乙肝病毒标志物的特点和各自的应用价值。
方法用这两种不同的免疫学方法分别对182例乙肝患者的血清标本进行检测,然后计算结果、分析结果。
结果两种方法对乙肝病毒标志物前四项(HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb)均敏感,灵敏度达到ng/mL,结果的相互符合率也达到96%以上。
而对HbcAb而言,结果的相互符合率仅为89%,因为发光免疫法检测HbcAb时未稀释标本,所以发光免疫法的灵敏度要高于酶免法。
结论两种实验方法各有特点,操作时应根据实验的实际情况来选择。
标签:酶联免疫法; 发光免疫法; 乙肝病毒标志物现在实验室免疫学分析用的最广的方法是酶联免疫法和发光免疫法。
这两种方法哪种的灵敏度高、它们又有什么样的不足之处,现就这两种方法对乙肝病毒表面标志物的检测作比较,结论如下。
1 材料与方法1.1 材料收集182例临床确诊乙肝的病人静脉血样离心,分离出的血清用未加抗凝剂的密闭试管中保存,放置于-20℃环境中备用。
酶免法表面抗原质控品由北京市临检中心提供,浓度为2ng/mL。
1.2 试剂和仪器酶联免疫法试剂采用上海科华生物工程有限公司生产的乙肝两对半诊断试剂盒(HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb);试剂为同批号试剂,批号:20081106,校期:20091105。
仪器有洗板机(BIORAD MODEL 1575),酶标比色仪(Rayto RT-6000)。
化学发光法采用北京源德生物医学工程公司JETLIA-962化学发光免疫测定系统及配套使用的专用试剂盒,试剂批号:200902012290318A,校期:20090917。
1.3 方法酶联免疫法的操作严格按照使用说明书进行,以表面抗原定值血清作为质控,设空白一空,阴阳对照各两孔。
主要步骤是加样,加酶,孵育,洗板,加显色剂,显色,比色。
其中核心抗体检测时用生理盐水作1∶30稀释。
乙肝五项指标定量与定性检测结果的差异和临床意义冉景锐【摘要】目的分析乙肝五项指标定量与定性检测结果的差异和临床意义。
方法选取我院门诊及住院患者200例,空腹采集静脉血,分别应用时间分辨荧光分析法与酶联免疫分析法进行血清样本的乙肝五项指标定量与定性检测,分析其检测结果的差异,评价乙肝五项指标定量与定性的临床意义。
结果定量检测的阳性结果中,HBsAg135例,HBsAb40例,HBeAg51例,HBeAb53例,HBcAb140例;定性检测的阳性结果中,HBsAg131例,HBsAb38例,HBeAg50例,HBeAb59例,HBcAb144例;对比差异均不显著(P>0.05)。
两种检测方法中共有12例检测结果不同,定性检测与定量检测结果对比,乙肝五项指标HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb的阳性符合率依次为96.8%、91.3%、100%、96.2%、95.8%。
结论在乙肝五项指标的检测上,定性检测的影响因素较多,容易出现假阴性与假阳性结果,定量检测的干扰因素较少,灵敏度与稳定性更优,具有一定的临床指导意义。
【期刊名称】《临床检验杂志(电子版)》【年(卷),期】2018(007)001【总页数】2页(P78-79)【关键词】乙肝五项指标;定量检测;定性检测;差异;临床意义【作者】冉景锐【作者单位】[1]德江县人民医院检验科,贵州铜仁565200;【正文语种】中文【中图分类】R512.62乙肝的实验检测对疾病的防治以及疗效判断均具有非常重大的意义[1]。
目前我国检测乙肝五项指标的方法主要分为定量检测和定性检测两种,不同检测方法所得到的结果存在一定的差异性[2]。
基于此,本研究为了进一步分析乙肝五项指标定量与定性检测结果的差异和临床意义,选取我院2016年10月-2017年10月收治的200例门诊及住院患者的临床资料进行分析,汇报结果如下。
1 资料与方法1.1 一般资料选取我院门诊及住院患者200例,其中男性105例,女性95例;年龄16岁-68岁,平均(33.5±6.1)岁。
乙肝五项指标两种常用检测方法的比较分析目的比较分析乙肝五项指标两种检测方法(TRFIA和ELISA)的应用价值。
方法对501份血清分别采用时间分辨荧光免疫分析技术(TRFIA)和酶联免疫吸附试验法(ELISA)检测乙肝五项指标,并统计分析两种方法的检测结果的阳性率和阳性符合率。
结果两种方法检测血清中的乙肝五项的阳性率差异均无统计学意义(P > 0.05),乙肝五项指标的阳性符合率分别是HBsAg 99.6%、HBsAb 85.7%、HBeAg 98.2%、HBeAb 97.6%、HBcAb 97.1%。
结论TRFIA和ELISA两种方法对检测乙肝标志物乙肝五项均有较高的特异性和敏感性,ELISA 法方便快捷,更适合基层医院使用,但易出现假阳性和假阴性,TRFIA法不仅特异性强、敏感性高,并且能够准确定量,与ELISA法相比,能更好地反映患者体内乙肝病毒复制状况、乙肝疫苗接种后免疫效果以及抗病毒药物的疗效。
标签:乙肝五项指标;时间分辨荧光免疫分析技术(TRFIA);酶联免疫吸附试验法(ELISA);阳性率;符合率目前,在各级医院实验室检测乙肝病毒血清标志物开展最为广泛的项目就是乙肝五项指标[1],乙肝五项指标俗称“两对半”,包括乙型肝炎表面抗原(HBsAg)、乙型肝炎表面抗体(HBsAb)、e抗原(HBeAg)、e抗体(HBeAb)、核心抗体(HBcAb),在许多方面如诊断乙肝、乙肝判断愈后、筛选献血员、乙肝的流行病学调查、判断人群对乙型肝炎的免疫水平,对食品、保育及饮水管理行业人员定期进行健康体检等起着重要的作用[2]。
因此,选择一种特异、敏感、稳定的实验室检测方法检测乙型肝炎病毒的五项指标显得尤为重要,为此,本文选取了临床实验室较为常用的ELISA法和TRFIA法对501份肝病患者的血清标本进行了比对分析,现将结果报道如下:1 材料与方法1.1 标本来源501份血清标本来自2009年1月~2011年9月在本院肝病科住院的的肝病患者,男336例,女165例,年龄14~71岁,平均(40.5 ± 9.5)岁,其中TRFIA 为准测出的大三阳165例(HBsAg+,HBeAg+,抗-HBc+),小三阳142例(HBsAg+,抗-HBe+,抗-HBc+),1、4阳性86例(HBsAg+、抗-HBe+),1、5阳性91例(HBsAg+、抗-HBc+组)、其他模式17例(包括抗-HBs+、抗-HBe+、抗-HBc+单项或者多项模式)。
乙肝五项指标两种常用检测方法的比较分析作者:赵治凤贾秋龙来源:《中国当代医药》2012年第08期[摘要] 目的比较分析乙肝五项指标两种检测方法(TRFIA和ELISA)的应用价值。
方法对501份血清分别采用时间分辨荧光免疫分析技术(TRFIA)和酶联免疫吸附试验法(ELISA)检测乙肝五项指标,并统计分析两种方法的检测结果的阳性率和阳性符合率。
结果两种方法检测血清中的乙肝五项的阳性率差异均无统计学意义(P > 0.05),乙肝五项指标的阳性符合率分别是HBsAg 99.6%、HBsAb 85.7%、HBeAg 98.2%、HBeAb 97.6%、HBcAb 97.1%。
结论 TRFIA和ELISA两种方法对检测乙肝标志物乙肝五项均有较高的特异性和敏感性,ELISA法方便快捷,更适合基层医院使用,但易出现假阳性和假阴性,TRFIA法不仅特异性强、敏感性高,并且能够准确定量,与ELISA法相比,能更好地反映患者体内乙肝病毒复制状况、乙肝疫苗接种后免疫效果以及抗病毒药物的疗效。
[关键词] 乙肝五项指标;时间分辨荧光免疫分析技术(TRFIA);酶联免疫吸附试验法(ELISA);阳性率;符合率[中图分类号] R512.6+2[文献标识码] A[文章编号] 1674-4721(2012)03(b)-0078-02目前,在各级医院实验室检测乙肝病毒血清标志物开展最为广泛的项目就是乙肝五项指标[1],乙肝五项指标俗称“两对半”,包括乙型肝炎表面抗原(HBsAg)、乙型肝炎表面抗体(HBsAb)、e抗原(HBeAg)、e抗体(HBeAb)、核心抗体(HBcAb),在许多方面如诊断乙肝、乙肝判断愈后、筛选献血员、乙肝的流行病学调查、判断人群对乙型肝炎的免疫水平,对食品、保育及饮水管理行业人员定期进行健康体检等起着重要的作用[2]。
因此,选择一种特异、敏感、稳定的实验室检测方法检测乙型肝炎病毒的五项指标显得尤为重要,为此,本文选取了临床实验室较为常用的ELISA法和TRFIA法对501份肝病患者的血清标本进行了比对分析,现将结果报道如下:1 材料与方法1.1 标本来源501份血清标本来自2009年1月~2011年9月在本院肝病科住院的的肝病患者,男 336例,女165例,年龄14~71岁,平均(40.5 ± 9.5)岁,其中TRFIA为准测出的大三阳165例(HBsAg+,HBeAg+,抗-HBc+),小三阳142例(HBsAg+,抗-HBe+,抗-HBc+),1、4阳性86例(HBsAg+、抗-HBe+),1、5阳性91例(HBsAg+、抗-HBc+组)、其他模式17例(包括抗-HBs+、抗-HBe+、抗-HBc+单项或者多项模式)。
两种方法检测乙型肝炎病毒五项指标的结果
对比
作者:龙青文,何建军,马家驹,何秀琳,肖金平
【关键词】酶联;血清乳胶;定性分析
[关键词]酶联;血清乳胶;定性分析
乙型肝炎表面抗原(HBsAg)、乙型肝炎表面抗体(HBsAb)、e 抗原(HBsAg)、e抗体(HBeAb)、核心抗体(HBcAb)的检测在许多方面如诊断乙肝判断愈后、筛选献血员、乙肝的流行病学调查、判断人群对乙型肝炎的免疫水平,对食品、保育及饮水管理行业人员定期进行健康体检等起着重要的作用。
故选择一种特异、敏感、稳定的实验室检测方法检测乙型肝炎病毒的五项指标显得尤为重要。
现将56例检测者血清同时用酶联免疫法和血清乳胶层析法对比检测结果报告如下。
1材料与方法
1.1 标本来源56例受检者中,男29例,女27例,最大年龄72岁,最小年龄29岁,平均年龄46岁;来自健康体检人群15例,其中13例检测具有阳性结果,2例各项指标均为阴性、另41例为门诊检查结果有阳性的患者,均系血清标本。
1.2 方法酶联免疫法用乙型肝炎病毒(HBsAg,HBsAb,HBeAg、HBeAb,HBcAb)诊断试剂盒,由上海华泰生物工程实业有限公司生产,48人份,批号20040503,按说明书操作。
乙肝两对半血清/血浆乳胶层析法检测试剂板由ACONLaboratories.Inc.SanDiegoCA92121USA提供,批号200407029,按说明书操作。
1.3 质量控制酶联免疫法每项检测项目均设阴、阳性对照各2孔,每空加入阴性对照(或阳性对照)各1滴,并设有空白对照1孔。
乳胶层析法各项检删项目均设质控区(C)。
1.4 检测结果判定标准:酶联免疫法是根据颜色的变化,作定性分析。
此法HBsAg、HBsAb、HBeAg呈黄色为阳性反应,无色为阴性反应,阳性对照为黄色,阴性对照为无色。
HBeAb、HBcAb无色为阳性,黄色为阴性,阳性对照为无色,阴性对照为黄色。
乳胶层析法HBsAG、HBsAb、HBeAg在测试区内(T)出现一条红色条带则是阳性结果,不出现红色条带则为阴性。
HBeAb、HBcAb结果则相反,强阳性标本测试区内(T)将没有红色条带,弱阳性标本测试区内(T)将有一条非常弱的红色条带,阴性标本测试区(T)将会出现明显的红色条带。
无论相应的待测物质是否存在于标本中,质控区(C)都会出现红色条带。
两种检测方法结果对比分析用卡方检验两两比较进行统计学处理。
2 结果
根据上述的结果判定标准,用两种方法对56例检测者血清对比分析,结果见表1。
表1 两种方法检测乙肝病毒五项指标阳性结果对比(略)
从表1中看出,用两种方法检测的阳性结果HBeAg相同均为7例,HBsAg相差1例,HBsAb相差2例,HBeAB、HBcAb各相差3例,用四格表进行两两对比分析,其结果见表2~表5。
表2 HBsAg 两种方法的结果对比(略)
注:经χ2检验P>0.05。
表3 HBsAb两种方法的结果对比(略)
注:经χ2检验P>0.05。
表4 HBeAb两种方法的结果对比(略)
注:经χ2检验P>0.05。
表5 HBcAb两种方法的结果对比(略)
注:经χ2检验P>0.05。
表2~表5,每一项检测指标用两种方法检测,进行两两对比分析,经统计学处理,差异无显著性(P>0.05)。
3 讨论
3.1 关于检测结果的判定
3.1.1 酶联免疫法试剂盒采用EIA原理,是将抗原抗体的高度特异性与酶对底物的高效催化作用有效结合起来,根据酶作用底物颜色变化,作定性分析。
各项检测项目的阴、阳性对照,空白对照均与实验要求相一致,如出现异常结果,在任何情况下,应重新测试。
3.1.2 乳胶层析法HBAg、HBsAb、HBeAg检测试纸条有用双抗体(抗原)夹心法,试纸条含有被事先固定于膜上测试区(T)的多克隆抗体(抗原)和质控区(C)的相应抗体(抗原),如标本中含有相应的待测
物质,在测试区内(T)出现一条红包条带,则是阳性结果,不出现红条第带则为阴性。
HBeAb、HBcAb采用竞争抑制法,其强阳性标本测试区内(T)将没有红色条带,阴性标本测试区内(T)将会出现明显的红色条带。
而质控区(C)无论相应的抗体是否存在于标本中,都会出现一条红色色带,它是判断是否有足够标本,层析过程是否正常的标准,同时也做为试剂内控的标准,如果未出现红色条带,表明不正确的操作过程,或试纸条已变质损坏,在任何情况下,应重新测试。
3.2 通过本文56例检测者血清对两种方法的结果对比,经统计学处理,检测结果差异无显著性(P>0.05),两种方法均具有特异性强,灵敏度高,稳定性好等特点,但层析法相对操作便捷,15 min 可读取结果,酶联免疫法相对时间较长,需37 ℃水浴放置2次,共计45 min,且洗板较为繁琐,但价格相对较低,故可根据自己实验室条件选择适合自己实验室的检测方法。
3.3 在HbcAb的检测中,我们发现用酶联免疫法在结果弱阳性的情况下,层析法表现出明显的阳性,这可能与酶联免疫法检测HbcAb时血清作1∶30稀释有关,在今后的工作中还需进一步在同等条件下观察比较。
参考文献:
[1]白惠卿,陈育民,安云庆.医学免疫学与微生物学[M].第2版.北京:北京医科大学出版社发行,2002.
[2]刘运德.微生物学检验[M].第2版.北京:人民卫生出版社.
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